黃柏風(fēng)濕膠囊的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)探討

梁志培　羅小軍（廣東省清遠(yuǎn)市連州市中醫(yī)院藥劑科　清遠(yuǎn) 513400）

黃柏風(fēng)濕膠囊的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)探討

梁志培羅小軍（廣東省清遠(yuǎn)市連州市中醫(yī)院藥劑科清遠(yuǎn) 513400）

關(guān)節(jié)疼痛由于關(guān)節(jié)炎、各類關(guān)節(jié)疾病等引起，涉及范圍較廣，類型繁多。其中，以起病急緩程度分為急性關(guān)節(jié)疼痛和慢性關(guān)節(jié)疼痛，風(fēng)濕病、皮肌炎等疾病均可以引起關(guān)節(jié)疼痛。黃柏風(fēng)濕膠囊是臨床上使用較多的治療藥物，該藥物在《醫(yī)學(xué)正傳》中的三妙丸以及《金匱要略》中防己黃芪湯基礎(chǔ)上加減化瘀制作而成，能夠充分體現(xiàn)兩種不同方中的精髓之處。本文采用反相高效色譜法測(cè)定黃柏中黃柏堿的含量，對(duì)8批金銀花進(jìn)行分析，利用t方法進(jìn)行檢驗(yàn)，結(jié)果顯示：黃柏堿平均回收率101.43%，RSD=1.56%，線性范圍0.436～2.184μg/μL，r=0.9998。由此看出：該方法準(zhǔn)確，操作比較簡(jiǎn)單，精密度及重復(fù)性良好。

關(guān)節(jié)疼痛 顯微鑒別 黃柏風(fēng)濕膠囊 TCL方法 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

黃柏風(fēng)濕膠囊是臨床上使用較多的治療藥物，主要由黃柏、黃芪、忍冬藤、防己、威靈仙、雞血藤、地龍、蜈蚣等藥物組成，在風(fēng)濕、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等疾病引起的關(guān)節(jié)疼痛治療中得到應(yīng)用［1］。制作工藝主要是將黃柏、黃芪作為君藥，忍冬藤、防己、威靈仙、雞血藤、地龍、蜈蚣等藥物作為臣藥，研磨粉碎，結(jié)合現(xiàn)代制藥方法，具有祛風(fēng)止痛、舒筋活絡(luò)、活血化瘀等功效。常規(guī)鑒別方法以多指標(biāo)含量測(cè)定等為主，但是測(cè)定方法相對(duì)復(fù)雜，價(jià)格昂貴［2］。近年來(lái)，反相高效色譜法在黃柏風(fēng)濕膠囊質(zhì)量指標(biāo)控制中得到應(yīng)用，為中藥材質(zhì)量控制提供新的方法。

1材料與方法

1.1材料：樣品：2014～2015年計(jì)劃抽驗(yàn)的樣品。

1.2儀器與試劑：電子分析天平BT25S（產(chǎn)地：日本島津），LC-2010A高效液相色譜儀（產(chǎn)地：日本島津），KQ-250DE型數(shù)控超聲波清洗器。黃柏風(fēng)濕膠囊主要由我院自制，生產(chǎn)批號(hào)：20091028。

2方法與結(jié)果

2.1樣品的制備

2.1.1樣品的提取。取0.5g黃柏藥材，精密稱量，加入濃度為1%的醋酸混合80mL甲醇溶液，水浴回流1h，加入少量溶劑洗滌藥材殘?jiān)盀V器，合并濾液及洗液，加入10g重型氧化鋁、濃度1%醋酸-甲醇溶液，殘?jiān)屑尤?0mL甲醇至溶解，通過(guò)0.45μm的微孔濾膜進(jìn)行過(guò)濾，作為供試品溶液。

2.1.2對(duì)照品溶液的制備。精密稱取適量的黃柏堿，加入濃度為1%醋酸-甲醇溶液，制作成0.1456mg/mL溶液，作為對(duì)照品溶液。

2.2含量測(cè)定方法考察：線性關(guān)系考察。精密稱取對(duì)照品溶液3、6、9、12、15μL，注入高效液相色譜儀，采用乙腈作為流動(dòng)相，根據(jù)測(cè)定的色譜條件測(cè)定峰面積，黃柏堿濃度作為橫坐標(biāo)（X）軸；峰面積作為縱坐標(biāo)（Y），進(jìn)行回歸處理?；貧w方程：Y=7.1780+ 918.1776X，r=0.9998，由此看出：線性關(guān)系良好，線性范圍為0.436～2.184μg/μL。

2.3精密度實(shí)驗(yàn)：精密稱取黃柏堿對(duì)照品溶液，重復(fù)進(jìn)行5次實(shí)驗(yàn)，每次取8μL，測(cè)得黃柏堿峰面積峰的RSD=1.2%，由此看出：該方法精密度好。

2.4穩(wěn)定性試驗(yàn)：在常溫下，對(duì)黃柏堿供試品溶液在0、2、4、8、16、24h進(jìn)行檢查，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：黃柏堿結(jié)果穩(wěn)定性RSD= 0.85%以下，由此說(shuō)明：24h內(nèi)成分在溶液中穩(wěn)定良好。

2.5回收率：根據(jù)加樣回收法，精密稱取1g已知含量黃柏堿6份，分別加入5mg對(duì)照提取物，在上文色譜條件下測(cè)定回收率，結(jié)果顯示：黃柏堿回收率分別為99.81%，表明該方法回收率良好。

2.6藥材樣品中黃柏堿的含量測(cè)定：結(jié)果可見：黃柏中黃柏堿的含量平均能達(dá)到0.353%。

3討　論

黃柏風(fēng)濕膠囊是臨床上使用較多的治療藥物，該藥物主要在三妙丸以及防己黃芪湯基礎(chǔ)上加減而成，方藥中以黃柏和黃芪作為君藥，黃柏屬于清熱解毒類藥物，清熱燥濕、滋陰降火，燥濕而不上陰；黃芪屬于補(bǔ)氣類藥物，具有祛風(fēng)止痛、舒筋活絡(luò)等功效［5］。同時(shí)，藥物中以忍冬藤、防己、威靈仙、雞血藤、地龍、蜈蚣等藥物作為臣藥，達(dá)到祛風(fēng)止痛、舒筋活絡(luò)、活血化瘀等功效，諸藥共奏，能夠發(fā)揮清熱化濕、補(bǔ)氣通絡(luò)止痛等功效，從而能改善機(jī)體癥狀，促進(jìn)患者早期恢復(fù)［6］。研究中，主要根據(jù)藥物的組成建立薄層色譜鑒別方法。取10g黃柏風(fēng)濕膠囊，加入10mL氨試液，充分混合均勻后放置1h，并加入40mL三氯甲烷，在超聲下進(jìn)行30min處理，濾過(guò)、采用4～100mL鹽酸溶液，分次震搖均勻，采用氨試液調(diào)整整體溶液的pH到10，再采用三氯甲烷進(jìn)行分次提取，合并三氯甲烷液，濃縮到0.5mL，作為供試品溶液，進(jìn)行測(cè)定比較［7］。同時(shí)，取3g對(duì)照藥材進(jìn)行測(cè)定，采用相同的方法獲得對(duì)照藥物的溶液，并取10μL兩種溶液，將其放置在含有濃度為2%的氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，采用苯-無(wú)水乙醇（9∶2），醋酸乙酯-甲酸-水（5∶1∶1.5）的上層溶液為展開劑，再采用濃度為5%的亞硝酸鈉的70%乙醇溶液，放置片刻后進(jìn)行檢查。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示［8］：反相高效色譜法鑒別分離度好，專屬性強(qiáng)，重現(xiàn)性較好，可以用于黃柏風(fēng)濕膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)控制，由此建立了黃柏風(fēng)濕膠囊的反相高效色譜法鑒別方法。

［1］徐多多，姜翔之，高陽(yáng)，等.金銀花抑制大腸埃希菌生物膜活性部位的化學(xué)成分研究［J］.中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2012，18（20）：122.

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［5］丁紅濤，顏瑜.中藥黃柏粉配合紅霉素治療72例子宮頸炎患者的臨床療效分析［J］.中外醫(yī)療，2013，12：28-29.

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