試論低離子聚凝胺檢驗(yàn)法在交叉配血試驗(yàn)中的應(yīng)用價(jià)值

賴增新

(吉林省人民醫(yī)院 輸血科 吉林 長(zhǎng)春 130021)

在臨床上，輸血療法是對(duì)患者進(jìn)行救治的常用方法[1]。在對(duì)患者進(jìn)行輸血前，對(duì)其血樣標(biāo)本進(jìn)行交叉配血試驗(yàn)，可有效地降低其輸血不良反應(yīng)的發(fā)生率，進(jìn)而確保其進(jìn)行輸血治療的安全性[2]。目前，臨床上多用低離子聚凝胺檢驗(yàn)法和鹽水法對(duì)需要接受輸血治療患者的血樣標(biāo)本進(jìn)行交叉配血試驗(yàn)。為了進(jìn)一步探討低離子聚凝胺檢驗(yàn)法在交叉配血試驗(yàn)中的應(yīng)用效果，筆者對(duì)2013年2月～2013年7月期間在我科進(jìn)行交叉配血試驗(yàn)的150例患者及其血樣標(biāo)本的相關(guān)資料進(jìn)行回顧性研究?，F(xiàn)將研究結(jié)果報(bào)告如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

本次研究的對(duì)象是2013年2月～2013年7月期間在我科進(jìn)行交叉配血試驗(yàn)的150例患者及其血樣標(biāo)本。在這150例患者中，有男性患者97例，女性患者53例。他們的年齡在3～72歲之間，平均年齡為(27.4±2.8)歲。

1.2 檢驗(yàn)方法

將每例患者的血樣標(biāo)本均分成兩份，分別使用低離子聚凝胺檢驗(yàn)法和鹽水法對(duì)其血樣標(biāo)本進(jìn)行交叉配血試驗(yàn)。

1.2.1 用鹽水法對(duì)這150例受血者的血樣標(biāo)本進(jìn)行交叉配血試驗(yàn)的方法 取2支試管，將受血者和供血者的血樣標(biāo)本分別放到這兩支試管中。另取2支裝有少量生理鹽水的試管，分別滴入受血者和供血者的血清，將其制成濃度為5%的紅細(xì)胞生理鹽水懸液。另取2支潔凈試管，在試管的表面標(biāo)注上主測(cè)管（裝有受血者血樣標(biāo)本的試管）和次測(cè)管（裝有供血者血樣標(biāo)本的試管）。在主測(cè)管和次測(cè)管中分別加入1滴受血者的紅細(xì)胞生理鹽水懸液，將其搖勻，靜置15分鐘后觀察結(jié)果。

1.2.2 用低離子聚凝胺檢驗(yàn)法對(duì)這150例受血者的血樣標(biāo)本進(jìn)行交叉配血試驗(yàn)的方法 使用貝索生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的低離子聚凝胺試劑盒進(jìn)行本次試驗(yàn)。取2支玻璃試管，在其表面分別標(biāo)注上主測(cè)管（裝有受血者血樣標(biāo)本的試管）與次測(cè)管（裝有供血者血樣標(biāo)本的試管）。在主測(cè)管中加入1滴受血者的血清和濃度為3%～5%供血者的紅細(xì)胞懸液，在次測(cè)管中加入1滴供血者的血清，并加入濃度為3%～5%受血者的紅細(xì)胞懸液。然后，在主測(cè)管和次測(cè)管中分別加入0.7 ml的低離子介質(zhì)，將其搖勻后，在室溫下放置30s，然后在兩支試管中各加入2滴polybrene試劑，將其搖勻后再放置15s。將這兩支試管放到離心機(jī)中進(jìn)行離心處理（離心機(jī)的轉(zhuǎn)速為3400 r/min）后，倒去上面的清液，保留管底的液體（約0.1 ml）。當(dāng)試管中的液體出現(xiàn)明顯凝聚的表現(xiàn)后，在試管中分別滴入2滴解聚液，并輕輕地?fù)u晃試管。試管內(nèi)液體凝聚的現(xiàn)象如果在1分鐘之內(nèi)消失，說明試驗(yàn)的結(jié)果為陰性，反之為陽性。

1.3 觀察指標(biāo)

觀察用低離子聚凝胺檢驗(yàn)法和鹽水法對(duì)這150例受血者的血樣標(biāo)本進(jìn)行交叉配血試驗(yàn)的陽性率及時(shí)間，并觀察在這些受血者的血樣標(biāo)本中特異性紅細(xì)胞的數(shù)量。

1.4 評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)

觀察主測(cè)管與次測(cè)管中血紅細(xì)胞凝集的情況。如果主測(cè)管與次測(cè)管中的血樣標(biāo)本均沒有出現(xiàn)紅細(xì)胞凝聚的現(xiàn)象，說明配血成功（陰性），可以為受血者輸入供血者的血液。如果主側(cè)管中的血樣標(biāo)本出現(xiàn)紅細(xì)胞凝聚的現(xiàn)象，說明配血不成功（陽性），不能為受血者輸入供血者的血液。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

我們采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件包對(duì)本研究中的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析處理，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用百分比（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

試驗(yàn)結(jié)束后，在這150例受血者中，用低離子聚凝胺檢驗(yàn)法對(duì)其血樣標(biāo)本進(jìn)行交叉配血試驗(yàn)的結(jié)果為陽性的受血者有14例，其陽性檢出率為9.3%，對(duì)其血樣標(biāo)本進(jìn)行交叉配血試驗(yàn)的平均時(shí)間為4.6 min。用顯微鏡觀察這些受血者的血樣標(biāo)本，共發(fā)現(xiàn)有9個(gè)特異性紅細(xì)胞。用鹽水法對(duì)這些受血者的血樣標(biāo)本進(jìn)行交叉配血試驗(yàn)的結(jié)果為陽性的受血者有8例，其陽性檢出率為5.3%，對(duì)其血樣標(biāo)本進(jìn)行交叉配血試驗(yàn)的平均時(shí)間為16min。用顯微鏡觀察這些受血者的血樣標(biāo)本，共發(fā)現(xiàn)有4個(gè)特異性紅細(xì)胞。用低離子聚凝胺檢驗(yàn)法對(duì)這150例受血者的血樣標(biāo)本進(jìn)行交叉配血試驗(yàn)的陽性檢出率高于用鹽水法對(duì)這些受血者的血樣標(biāo)本進(jìn)行交叉配血試驗(yàn)的陽性檢出率；用低離子聚凝胺檢驗(yàn)法對(duì)這150例受血者的血樣標(biāo)本進(jìn)行交叉配血試驗(yàn)的平均時(shí)間短于用鹽水法對(duì)這些受血者的血樣標(biāo)本進(jìn)行交叉配血試驗(yàn)的平均時(shí)間；通過低離子聚凝胺檢驗(yàn)法進(jìn)行檢測(cè)發(fā)現(xiàn)的特異性紅細(xì)胞的數(shù)量明顯多于通過鹽水法進(jìn)行檢測(cè)發(fā)現(xiàn)的特異性紅細(xì)胞的數(shù)量，差異顯著，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。詳情見表1：

表1 用低離子聚凝胺檢驗(yàn)法和鹽水法對(duì)這150例受血者的血樣標(biāo)本進(jìn)行交叉配血試驗(yàn)的陽性檢出率及時(shí)間的比較（）

表1 用低離子聚凝胺檢驗(yàn)法和鹽水法對(duì)這150例受血者的血樣標(biāo)本進(jìn)行交叉配血試驗(yàn)的陽性檢出率及時(shí)間的比較（）

分組 試驗(yàn)結(jié)果為陽性受血者的人數(shù)（n） 陽性檢出率(%) 試驗(yàn)所用的平均時(shí)間(min)低離子聚凝胺檢驗(yàn)法 14 9.3 4.6鹽水法 8 5.3 16

3 討論

在臨床上，在為患者進(jìn)行輸血治療前，對(duì)其血樣標(biāo)本進(jìn)行交叉配血試驗(yàn)，可以了解在受血者的血液中是否存在能破壞供血者血紅細(xì)胞的抗體及在供血者的血液中是否存在能破壞受血者血紅細(xì)胞的抗體[3-4]。在供血者的血樣標(biāo)本中如果沒有檢驗(yàn)到能破壞受血者血紅細(xì)胞的抗體，說明配血成功，即可以為受血者輸入供血者的血液。

研究發(fā)現(xiàn)[5]，在受血者的血液中存在不規(guī)則抗體是導(dǎo)致其出現(xiàn)遲發(fā)性免疫反應(yīng)和溶血性輸血反應(yīng)的重要原因。在通常情況下，不規(guī)則抗體是指IgG抗體[6]。過去，臨床上常用鹽水法對(duì)受血者的血樣標(biāo)本進(jìn)行交叉配血試驗(yàn)。該試驗(yàn)方法雖然具有成本低、操作簡(jiǎn)便的優(yōu)點(diǎn)，但其只能檢出IgM抗體，而不能檢出不完全抗體IgM，這使其檢驗(yàn)結(jié)果存在一定的局限性[7-8]。與之相比，低離子聚凝胺檢驗(yàn)法彌補(bǔ)了鹽水法的不足，且能有效地加快IgG抗體及完全抗體與血紅細(xì)胞的反應(yīng)。原因在于：聚凝胺是一種帶有正電荷的離子，其所帶的正電荷能夠中和血紅細(xì)胞表面的負(fù)電荷，從而達(dá)到凝聚血紅細(xì)胞的效果[7]。

總之，將低離子聚凝胺檢驗(yàn)法應(yīng)用在交叉配血試驗(yàn)中的效果顯著。此檢驗(yàn)方法具有較高的臨床應(yīng)用價(jià)值。