液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定法測(cè)定火鍋調(diào)料中5種生物堿成分

黃　鑫　哈密地區(qū)食品藥品檢驗(yàn)所

液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定法測(cè)定火鍋調(diào)料中5種生物堿成分

黃鑫哈密地區(qū)食品藥品檢驗(yàn)所

隨著我國(guó)社會(huì)經(jīng)濟(jì)的不斷發(fā)展，人們對(duì)于食品安全問(wèn)題逐漸重視，也提出了一系列的快速檢測(cè)方法以保證食品的安全。近年來(lái)很多商家為了經(jīng)濟(jì)利益，會(huì)在火鍋調(diào)料添加多種生物堿成分，尤其是添加微量的罌粟類生物堿成分，會(huì)引起消費(fèi)者出現(xiàn)精神失常等問(wèn)題，對(duì)此采取了液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜方法，對(duì)火鍋調(diào)料中的嗎啡、可待因、嬰粟堿、那可丁、蒂巴因生物堿成分進(jìn)行檢測(cè)。

本文采用Q uECHERS樣品前處理技術(shù)，提取火鍋調(diào)料中的5種生物堿成分，利用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜對(duì)其含量進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果顯示生物堿成分的線性關(guān)系、精密度良好，回收率在73.1%～95.7%，檢測(cè)限都在0.01 m g/ kg范圍內(nèi)。表明采取該檢測(cè)方法，不僅檢測(cè)效率高同時(shí)也十分精準(zhǔn)，值得推廣和研究。

材料方法

儀器與試劑

質(zhì)譜儀、液相色譜儀、離心機(jī)與超純水機(jī)；試劑嗎啡、磷酸可待因、鹽酸嬰粟堿、那可丁、標(biāo)準(zhǔn)品蒂巴因；乙睛、甲酸、甲酸銨均為色譜純。

色譜條件

將含0.1%甲酸的乙腈作為流動(dòng)相A相，將100 m m ol/L甲酸氨水溶液與乙腈（1+1）調(diào)制成pH=3的溶液為流動(dòng)相B相，按照0 m in，90%A相、10%B相；0.30 m in，90%A相、10%B相；0.31 m in，80%A相、20%B相；0.25 m in，80%A相、20%B相；2.50 m in，80%A相、20%B相；2.51 m in，90%A相、10%B相；5 m in，90%A相、10%B相的流動(dòng)相條件進(jìn)行洗脫，流速控制在0.3 m L/m in。

質(zhì)譜條件

表1　樣品回收率的試驗(yàn)

以上五種生物堿成分的去簇電壓分別為97、90、92、95、52；碰撞能量為50、34、38、30、38；其次還包括定量離子、定性離子參數(shù)等。標(biāo)準(zhǔn)曲線制備

標(biāo)準(zhǔn)溶液分別稱取嗎啡、可待因、嬰粟堿、那可丁、蒂巴因標(biāo)準(zhǔn)品適量，然后利用0.5%的甲酸溶液，配制成0.1m g/m L的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液，將標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液用含0.5%甲酸的甲醇溶液稀釋成0.1μ g/m L的標(biāo)準(zhǔn)溶液。

樣品處理

稱取2g試樣置于50 m L離心管中，分別加入5 m L水、15 m L乙腈、6 g無(wú)水硫酸鎂、1.5 g的無(wú)水醋酸鈉，以4 000 r/m in離心1 m in，將上層清夜移至另一只離心管中，加入50 m gPSA、150 m g無(wú)水硫酸鎂，再以5 000 r/m in離心1 m in，最后由C18小柱進(jìn)行上層液脫洗，制備合成洗脫液。

結(jié)果

5種生物堿成分在指定線性范圍內(nèi)進(jìn)行回歸分析，相關(guān)系數(shù)都超過(guò)0.999 9，表明線性關(guān)系良好，見(jiàn)表1。

在3∶1信噪比條件下，五種生物堿成分的檢測(cè)限均為10 μ g/kg?；|(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液（5 ng/m L）持續(xù)進(jìn)行6次進(jìn)樣，峰值面積在0.5%～2.5%范圍內(nèi)的精密度良好；且樣品溶液經(jīng)過(guò)穩(wěn)定性試驗(yàn)較為穩(wěn)定。

最后通過(guò)抽檢96批市場(chǎng)火鍋調(diào)料，一共有6批樣品檢測(cè)出一種或多種嗎啡、罌粟類等生物堿成分，對(duì)此加強(qiáng)生物堿成分的執(zhí)法檢測(cè)非常必要。

3 討論

針對(duì)于火鍋底料中生物堿成分的檢測(cè)，TLC、HPLC等受到方法自身性質(zhì)的影響，最終檢測(cè)的靈敏度、準(zhǔn)確性等也不同。采取C18小柱凈化法，顯示5種生物堿成分干擾嚴(yán)重，影響測(cè)定效果，最終采取調(diào)整A相中的乙腈比例，繼而實(shí)現(xiàn)色譜條件的優(yōu)化。

通過(guò)對(duì)于液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定法測(cè)定火鍋調(diào)料中5種生物堿成分的分析，發(fā)現(xiàn)采取Q uECHERS樣品前處理技術(shù)對(duì)于生物堿成分的提取，要比以往的氯仿萃取法要優(yōu)化的多，結(jié)合PSA凈化法可更有效的去除脂肪酸、色素和甾醇等，也大大地降低基質(zhì)對(duì)樣品溶液的干擾。