3種中草藥對(duì)羅非魚(yú)無(wú)乳鏈球菌抑菌效果的Meta分析

牛志偉，范華龍，龍 蘇，黃 鈞，朱厚發(fā)，黃國(guó)成，梁靜真*

(1.廣西大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，廣西高校水生生物健康養(yǎng)殖與營(yíng)養(yǎng)調(diào)控重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣西 南寧 530005；2.廣西水生動(dòng)物病害診斷實(shí)驗(yàn)室，廣西 南寧 530005)

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3種中草藥對(duì)羅非魚(yú)無(wú)乳鏈球菌抑菌效果的Meta分析

牛志偉1，2，范華龍1，2，龍 蘇1，2，黃 鈞1，2，朱厚發(fā)1，2，黃國(guó)成1，2，梁靜真1，2*

(1.廣西大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，廣西高校水生生物健康養(yǎng)殖與營(yíng)養(yǎng)調(diào)控重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣西 南寧 530005；2.廣西水生動(dòng)物病害診斷實(shí)驗(yàn)室，廣西 南寧 530005)

通過(guò)在知網(wǎng)、維普、萬(wàn)方、讀秀等數(shù)據(jù)庫(kù)搜索有關(guān)中藥對(duì)無(wú)乳鏈球菌抑菌效果的相關(guān)文章，采集數(shù)據(jù)，使用RenMan 5.3進(jìn)行Meta統(tǒng)計(jì)分析，評(píng)價(jià)大黃(Rheum)、五倍子(Rhuschinensis)、黃連(Coptischinensis)3種中草藥對(duì)無(wú)乳鏈球菌(Streptococcusagalactiae)的體外抑菌效果，為中藥防治無(wú)乳鏈球菌的篩選和復(fù)方的配制提供科學(xué)的參考。研究共納入相關(guān)文獻(xiàn)2篇，經(jīng)過(guò)Meta統(tǒng)計(jì)分析，3種中藥的體外抑菌效果為：黃連>大黃、黃連>五倍子、五倍子>大黃，均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，敏感分析結(jié)果穩(wěn)健。研究結(jié)果表明3種中草藥對(duì)無(wú)乳鏈球菌的體外抑菌效果大小為：黃連>五倍子>大黃，這一結(jié)果需要在養(yǎng)殖過(guò)程中進(jìn)一步驗(yàn)證。

中藥；無(wú)乳鏈球菌；抑菌效果；Meta分析

羅非魚(yú)是我國(guó)重要的水產(chǎn)養(yǎng)殖品種，無(wú)論在產(chǎn)量、產(chǎn)值還是出口額上，我國(guó)均居世界第一[1]。但近年來(lái)，因鏈球菌病的暴發(fā)流行，給羅非魚(yú)養(yǎng)殖業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失，其主要病原為無(wú)乳鏈球菌(Streptococcusagalactiae)和海豚鏈球菌(Streptococcusiniae)[2]。目前，防治羅非魚(yú)鏈球菌病多采用抗生素和免疫注射的方法，但抗生素效果欠佳且易產(chǎn)生耐藥性并引發(fā)食品安全問(wèn)題，而使用疫苗存在實(shí)際應(yīng)用操作困難、容易對(duì)魚(yú)體造成損傷、免疫效果不穩(wěn)定等問(wèn)題[3-4]，因此，積極尋找安全、高效的新藥物治療鏈球菌病迫在眉睫。中草藥具有副作用小、污染低等特點(diǎn)，已被許多學(xué)者納入研究。但關(guān)于中草藥對(duì)羅非魚(yú)鏈球菌病的防治效果研究主要是針對(duì)病原無(wú)乳鏈球菌進(jìn)行，并且研究結(jié)果各不相同[5-7]。本文利用Meta分析法將大黃、黃連、五倍子3種中藥對(duì)無(wú)乳鏈球菌體外抑菌效果的相關(guān)文獻(xiàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，以期對(duì)中藥抑制該菌的效果做出科學(xué)評(píng)價(jià)，為中藥防治無(wú)乳鏈球菌病提供參考。

1 資料與方法

1.1 文獻(xiàn)的檢索

在知網(wǎng)、萬(wàn)方、維普、讀秀等數(shù)據(jù)庫(kù)，以檢索詞為無(wú)乳鏈球菌、中藥、中草藥、大黃、黃連、五倍子、抑菌效果、抑制、防治等進(jìn)行檢索，以知網(wǎng)檢索方法為例，檢索方法見(jiàn)圖1，檢索時(shí)間為建庫(kù)至2016年6月。

圖1 檢索方法

Fig.1 Search strategy

1.2 納入和排除標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1 納入標(biāo)準(zhǔn)

1)研究對(duì)象為單味中藥對(duì)羅非魚(yú)無(wú)乳鏈球菌的體外抑菌效果；2)研究方法是紙片擴(kuò)散法、打孔法；3)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)結(jié)果用平均數(shù)和標(biāo)準(zhǔn)差表示；4)藥敏所用的最終菌液濃度為1×107cfu/mL或1×108cfu/mL，藥液最終濃度為1 g/mL；5)中藥成分的提取方法為水提法；6)試驗(yàn)為平行試驗(yàn)；7)五倍子的取藥部位是蟲(chóng)癭，黃連和大黃的取藥部位是根莖。

1.2.2 排除標(biāo)準(zhǔn)

1)重復(fù)發(fā)表或者同一作者，同一實(shí)驗(yàn)室在同一年度發(fā)表的相似研究；2)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)方法只用平均數(shù)或直接讀數(shù)表示，未用平均數(shù)和標(biāo)準(zhǔn)差表示的研究；3)菌液、藥液濃度和納入標(biāo)準(zhǔn)不一致；4)未標(biāo)明取藥部位；5)排除數(shù)據(jù)不詳?shù)臅?huì)議文獻(xiàn)和帶有商業(yè)評(píng)價(jià)性質(zhì)的文獻(xiàn)。

1.3 文獻(xiàn)的篩選和提取資料

由2名人員根據(jù)1.2描述的納入和排除標(biāo)準(zhǔn)，獨(dú)立進(jìn)行篩選和提取，在提取過(guò)程中遇到爭(zhēng)議，則采用討論的方法決定是否提取數(shù)據(jù)。提取的主要數(shù)據(jù)包括作者、題目、中藥提取方法、藥液濃度、最終菌液濃度、抑菌圈等數(shù)據(jù)。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析

使用RevMan 5.3軟件進(jìn)行Meta分析。采用I2進(jìn)行異質(zhì)性檢驗(yàn)，若I2>75%，研究之間存在異質(zhì)性，則用隨機(jī)效應(yīng)模型分析；若I2≤75，無(wú)異質(zhì)性，則用固定效應(yīng)模型進(jìn)行分析。以P<0.05，作為判斷結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 納入的文獻(xiàn)

共檢索到13篇文獻(xiàn)，排除重復(fù)發(fā)表的文獻(xiàn)4篇，閱讀全文排除文獻(xiàn)7篇(過(guò)程見(jiàn)圖2)，最終納入2篇文獻(xiàn)(表1)。

表1 納入的文獻(xiàn)

2.2 中藥效果的Meta分析

2.2.1 黃連VS大黃

納入2篇文獻(xiàn)[6，8]，異質(zhì)性分析結(jié)果為Not applicable(N a)，采用隨機(jī)效應(yīng)模型分析，結(jié)果表明黃連的抑菌效果大于大黃[MD=7.37,95% CI(6.07,8.67),P<0.000 01]，且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(圖3)。采用固定模型進(jìn)行敏感性分析，結(jié)果也是黃連的抑菌效果大于大黃[MD=7.37,95% CI(6.07,8.67),P<0.000 01]，且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(圖4)，表明此次的分析結(jié)果比較穩(wěn)健。

2.2.2 黃連VS五倍子

納入2篇文獻(xiàn)[6，8]，異質(zhì)性分析結(jié)果為I2=97%，存在異質(zhì)性，采用隨機(jī)效應(yīng)模型分析，結(jié)果表明黃連的抑菌效果大于五倍子[MD=3.81,95% CI(0.30,7.32),P=0.03]，且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(圖5)。采用固定模型進(jìn)行敏感性分析，結(jié)果也是黃連的抑菌效果大于五倍子[MD=4.99,95% CI(4.58,5.40),P<0.000 01]，且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(圖6)，表明此次的分析結(jié)果比較穩(wěn)健。

2.2.3 大黃 VS 五倍子

納入2篇文獻(xiàn)[6，8]，異質(zhì)性分析結(jié)果為I2=0%，不存在異質(zhì)性，采用固定效應(yīng)模型分析，結(jié)果表明五倍子的抑菌效果大于大黃[MD=-5.36,95% CI(-5.75，-4.98)，P<0.000 01]，且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(圖7)。采用固定模型進(jìn)行敏感性分析，結(jié)果也是五倍子的抑菌效果大于大黃[MD=-5.36,95% CI(-5.75,-4.98)，P<0.000 01]，且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(圖8)，表明此次的分析結(jié)果比較穩(wěn)健。

3 討論

鏈球菌(Streptococcusspp.)是一種廣泛分布于自然界中的革蘭氏陽(yáng)性菌，其引發(fā)的疾病具有傳染性強(qiáng)、死亡率高、治療困難的特點(diǎn)[4]，對(duì)羅非魚(yú)的健康養(yǎng)殖危害嚴(yán)重。目前，對(duì)羅非魚(yú)鏈球菌病的防治主要使用抗生素，但是由于抗生素的大量使用會(huì)造成食品安全問(wèn)題和細(xì)菌耐藥性提高等不良后果，所以有關(guān)學(xué)者為了克服抗生素的這些缺點(diǎn)進(jìn)行了新的探索。中草藥有抑制或殺滅病原微生物的特性[9]，且副作用小，對(duì)環(huán)境污染少，是抗生素的理想替代品。目前已證實(shí)黃連、大黃、五倍子對(duì)無(wú)乳鏈球菌具有一定的抑制作用，但不同學(xué)者的研究結(jié)果不一致，劉亮[6]、華亞楠[8]等認(rèn)為黃連、五倍子、大黃3種中藥對(duì)羅非魚(yú)無(wú)乳鏈球菌的抑制效果大小為：黃連>五倍子>大黃，而吳穎瑞[5]等認(rèn)為五倍子對(duì)羅非魚(yú)無(wú)乳鏈球菌有一定的抑制效果，而黃連、大黃對(duì)無(wú)乳鏈球菌沒(méi)有抑菌效果。鑒此，對(duì)研究結(jié)果不一致的數(shù)據(jù)應(yīng)進(jìn)行科學(xué)統(tǒng)計(jì)分析，以期得到相對(duì)科學(xué)的試驗(yàn)數(shù)據(jù)結(jié)果，然而迄今未見(jiàn)有相關(guān)分析的文獻(xiàn)發(fā)表。

本文采用Meta分析法對(duì)相關(guān)研究進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，以求擴(kuò)大試驗(yàn)樣本含量，科學(xué)地分析出3味中藥的抑菌效果大小，分析結(jié)果表明抑菌效果為：黃連>五倍子、黃連>大黃、五倍子>大黃，經(jīng)敏感分析得到的結(jié)果一致，表明本次分析結(jié)果比較穩(wěn)健。但是由于受文獻(xiàn)數(shù)量的限制，本文未做發(fā)表偏倚檢測(cè)，納入的文獻(xiàn)存在一定的偏倚，可能對(duì)結(jié)果造成一定的影響。

4 結(jié)論

3種中藥對(duì)羅非魚(yú)無(wú)乳鏈球菌體外抑菌效果大小為：黃連>五倍子>大黃，這一結(jié)果需要在養(yǎng)殖過(guò)程中進(jìn)一步驗(yàn)證。

[1]肖俊，甘西，羅永巨.羅非魚(yú)育種研究進(jìn)展[J].湖南科技大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)，2014，(1)：106-112.

[2]徐洋，沈錦玉，茹紅順，等.羅非魚(yú)鏈球菌病及其疫苗研究進(jìn)展[J].農(nóng)業(yè)災(zāi)害研究，2012，(5)：48-52.

[3]吳南，郭佳，熊麗，等.羅非魚(yú)鏈球菌病疫苗的研究進(jìn)展[J].南方水產(chǎn)科學(xué)，2013，9(6)：90-96.

[4]盧邁新.羅非魚(yú)鏈球菌病研究進(jìn)展[J].南方水產(chǎn)，2010，6(1)：75-79.

[5]吳穎瑞，龔慶芳，方宏，等.153種中草藥對(duì)羅非魚(yú)無(wú)乳鏈球菌和海豚鏈球菌的抑制活性研究[J].西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)，2013，41(1)：25-32.

[6]劉亮.羅非魚(yú)無(wú)乳鏈球菌病DNA疫苗的研究及有效中草藥的篩選[D].廣州：中山大學(xué)，2013.

[7]鄧恒為.海南羅非魚(yú)鏈球菌病病原分離鑒定及防治中草藥篩選[D].?？冢汉Ｄ洗髮W(xué)，2013.

[8]華亞南，陳輝，張其中.100種中草藥水提物體外抑殺無(wú)乳鏈球菌的藥效研究[J].生態(tài)科學(xué)，2015，34(3)：26-30.

[9]祖國(guó)掌，李槿年，許建新，等．五倍子對(duì)池水細(xì)菌和藻類的影響[J].應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào)，2007，18(8)：1837-1842.

A Meta-analysis：the effect of three kinds of Chinese herbal medicines for tilapia Streptococcus agalactiae

NIU Zhiwei1，2，F(xiàn)AN Hualong1，2，LONG Su1，2，HUANG Jun1，2，ZHU Houfa1，2，HUANG Guocheng1，2，LIANG Jingzhen1，2*

(1.Guangxi Colleges and Universities Key Laboratory of Aquatic Healthy Breeding and Nutrition Regulation，College of Animal Science and Technology，Guangxi University，Nanning 530005，China；2.Guangxi Aquatic Animal Disease Diagnostic Laboratory，Nanning 530005，China)

Through searching literatures about the effect of Chinese herbal medicine to tilapiaStreptococcusagalactiaefrom CNKI，VIP，DUXIU，WANFANG databases，the paper used RenMan 5.3 to conduct Meta-analysis.The effect ofRheum，RhuschinensisandCoptischinensis(three kinds of Chinese herbal medicines)on tilapiaStreptococcusagalactiaewere statistical evaluated. The study would provide scientific

for screening Chinese herbal and formulating Chinese medicine compound to prevent and control tilapiaStreptococcusagalactiae. Bring into two literatures for Meta-analysis，the effect of three kinds of Chinese herbal was：Coptischinensis>Rheum，Coptischinensis>Rhuschinensi，Rhuschinensis>Rheum.Both differences were statistically significant，result was solid.The effect of three Chinese herbals for tilapiaStreptococcusagalactiaewasCoptischinensis>Rhuschinensi>Rheum.The results need further validation in the process of cultivation.

Chinese herbal medicine；Streptococcusagalactiae；antibacterial effect；Meta-analysis

2016-07-04 作者簡(jiǎn)介：牛志偉(1990-)，男，河北省邢臺(tái)人，碩士研究生，研究方向：水生動(dòng)物病害防控及健康養(yǎng)殖.E-mail：905478661 @qq.com

梁靜真(1986-)，講師，研究方向：水產(chǎn)養(yǎng)殖與病害防控.E-mail：liangjz@gxu.edu.cn

S941.42+9

A

1006-5601(2016)05-0409-06

牛志偉，范華龍，龍 蘇，等.3種中草藥對(duì)羅非魚(yú)無(wú)乳鏈球菌抑菌效果的Meta分析[J].漁業(yè)研究，2016，38(5)：409-414.