• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    補腦軟膠囊對血管性癡呆小鼠學習、記憶能力和海馬組織的影響*

    2016-12-12 05:24:32李喜香潘從澤王建良李季文畢映燕張亞會錢夢茹
    中醫(yī)研究 2016年11期
    關(guān)鍵詞:補腦軟膠囊尼莫地平

    李喜香,潘從澤,王建良,李季文,畢映燕,張亞會,錢夢茹

    (1.蘭州大學藥學院,甘肅 蘭州 730020; 2.甘肅省中醫(yī)院,甘肅 蘭州 730050)

    ?

    ·實驗研究·

    補腦軟膠囊對血管性癡呆小鼠學習、記憶能力和海馬組織的影響*

    李喜香1,潘從澤2,王建良2,李季文2,畢映燕2,張亞會2,錢夢茹2

    (1.蘭州大學藥學院,甘肅 蘭州 730020; 2.甘肅省中醫(yī)院,甘肅 蘭州 730050)

    目的:觀察補腦軟膠囊對血管性癡呆小鼠模型的學習、記憶能力和海馬組織的影響。方法:采用反復加閉雙側(cè)頸總動脈方法制備血管性癡呆小鼠模型。將造模成功的小鼠隨機分為假手術(shù)組,模型對照組,補腦軟膠囊高、中、低劑量組和尼莫地平組6組。給藥第20天進行用跳臺實驗檢測小鼠學習和記憶能力;給藥第28天取小鼠海馬組織進行HE染色,觀測CA1區(qū)的組織病理學改變。結(jié)果:學習成績方面,各給藥組與模型對照組對比,學習反應時間均縮短,錯誤次數(shù)均減少,差別有統(tǒng)計學意義(P<0.01);補腦軟膠囊高劑量組與尼莫地平組對比,反應時間縮短,錯誤次數(shù)減少,差別有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。記憶成績方面,各給藥組與模型對照組對比,潛伏期時間均延長,錯誤次數(shù)均減少,差別有統(tǒng)計學意義(P<0.05);補腦軟膠囊高劑量組與尼莫地平組對比,潛伏時間延長,錯誤次數(shù)減少,但差別無統(tǒng)計學意義(P>0.05);補腦軟膠囊高劑量組與低劑量組對比,錯誤次數(shù)減少,差別有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。各給藥組均可減輕海馬組織CA1錐體細胞的損傷,補腦軟膠囊高劑量組優(yōu)于尼莫地平組。結(jié)論:補腦軟膠囊能夠改善血管性癡呆小鼠的學習、記憶能力,減輕海馬組織損傷,對血管性癡呆小鼠有一定的治療作用。

    補腦軟膠囊/藥效學;跳臺實驗;學習記憶;海馬病理;動物;小鼠

    血管性癡呆(vasculardementia,VD) 是各種腦血管病變引起的獲得性智能損害和認知障礙的綜合征,是一種慢性進行性疾病,表現(xiàn)為記憶、計算、定向、判斷能力下降,可伴有情感障礙、行為異常、認知功能障礙和相關(guān)腦血管病的神經(jīng)功能障礙[1]。如何改善和提高VD患者的學習、記憶能力,已成為醫(yī)藥領(lǐng)域的研究熱點之一。補腦膏(批準文號甘藥制字Z04000828)是甘肅省中醫(yī)院院內(nèi)制劑。近30a的臨床實踐證實,其對腦外傷性神經(jīng)損傷及后遺癥,腦炎、腦膜炎后遺癥,脊髓變性等腦部疾病療效確切,同時對血管性癡呆的治療和預防有明顯的臨床效果[3-4]。補腦軟膠囊是在補腦膏原處方基礎上,運用現(xiàn)代技術(shù)研制而成。本實驗將補腦軟膠囊內(nèi)容物作用于血管性癡呆小鼠模型,探討其療效及部分作用機制,從而為補腦軟膠囊的臨床用藥提供一定的理論依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 動 物

    健康SPF級KM小鼠,雄性,體質(zhì)量22~25g,由甘肅中醫(yī)藥大學動物實驗中心提供,許可證號:SCXK(甘)2011-0001。

    1.2 藥品、試劑與儀器

    補腦軟膠囊由川芎、當歸、黃芪、枸杞子、黃精、仙茅、淫羊藿等藥物組成,將浸膏粉加入大豆油基質(zhì)、潤濕劑司盤-80、助懸劑蜂蠟、助流劑微粉硅膠,1g內(nèi)容物含浸膏粉0.48g;尼莫地平片,四川科倫藥業(yè)股份有限公司產(chǎn)品,批號B140901015;注射用硝普鈉,湖南科倫制藥有限公司產(chǎn)品,批號B14050503。水合氯醛,天津市大茂化學試劑廠產(chǎn)品,批號20141013;40g/L多聚甲醛,北京索萊寶科技有限公司產(chǎn)品,批號20141223。DT200小鼠跳臺測試儀,成都泰盟科技有限公司產(chǎn)品;TEC-VEMJ2 全自動組織包埋機、VIP-5Jr-J2自動組織脫水機、IVS-410石蠟切片機,均為日本SakuraFinetekJapanCo.Ltd產(chǎn)品;Bio-Rad680多功能酶標儀,美國伯樂公司產(chǎn)品;OlympusCKS41倒置顯微鏡,日本奧林巴斯公司產(chǎn)品;SIGMA3-18K低溫高速離心機,德國希格瑪公司產(chǎn)品。

    1.3 模型的建立與動物分組

    60只小鼠按體質(zhì)量隨機分為假手術(shù)組(生理鹽水10μL/g)、模型對照組(生理鹽水10μL/g)、補腦軟膠囊高劑量(800μg/g)組、補腦軟膠囊中劑量(400μg/g)組、補腦軟膠囊低劑量(200μg/g)組和尼莫地平組(尼莫地平14μg/g)6組,每組10只。術(shù)前12h禁食、不禁水;以水合氯醛(500μg/g)腹腔注射麻醉小鼠,仰臥固定于手術(shù)臺上,常規(guī)消毒,頸部正中切口;分離雙側(cè)頸總動脈(CCA);在夾閉雙側(cè)CCA之前,腹腔注射硝普鈉(2.5μg/g),隨即用無創(chuàng)動脈夾夾閉雙側(cè)CCA10min;再通10min;再夾閉10min;再通后縫合切口,放回籠中保溫飼養(yǎng)。假手術(shù)組僅分離雙側(cè)CCA,不夾閉雙側(cè)CCA,不注射硝普鈉[5-6]。術(shù)中小鼠肛溫保持在36.5~37.5 ℃之間。術(shù)后連續(xù)3d肌肉注射青霉素以預防感染。各組手術(shù)后第1天均以灌胃方式給藥(按體質(zhì)量10μL/g),連續(xù)給藥28d,1d1次。藥物均精密稱定,以滅菌后的生理鹽水配置為混懸液。

    1.4 檢測指標

    1.4.1 跳臺實驗

    灌胃第20天進行跳臺實驗,將小鼠置于反射箱內(nèi)適應5min后輕放于平臺上,小鼠在平臺的停留時間為潛伏期。小鼠從平臺跳下、接觸銅柵視為錯誤,將受到電刺激后跳回平臺以躲避傷害性刺激視為正常反應。記錄小鼠首次受到電刺激跳回平臺所需時間(即反應時間)、跳下安全臺次數(shù)(即錯誤次數(shù))作為學習成績。于訓練后24h進行測驗,記錄第1次跳下平臺的潛伏期、5min內(nèi)的錯誤次數(shù)作為記憶成績[7]。

    1.4.2 組織病理學

    灌胃第28天進行小鼠海馬部位取材。用冰的生理鹽水進行心臟灌注后,分離兩側(cè)小鼠海馬組織,一側(cè)海馬組織以40g/L多聚甲醛進行固定,洗滌,脫水,透明,浸蠟,包埋,切片,貼片,烤片,二甲苯脫蠟及水化,HE染色,封片等,采用光學顯微鏡(200倍)觀察海馬組織的變化。每個標本連續(xù)切片5張,切片厚度4μm。正常海馬組織形態(tài)為CA1區(qū)錐體細胞分4層排列,排列整齊,形態(tài)完整,層次分明;胞質(zhì)均質(zhì)染色,核大而圓,胞核無固縮;纖維結(jié)構(gòu)清晰可辨,未有淋巴細胞浸潤[8~9]。

    1.5 統(tǒng)計學方法

    2 結(jié) 果

    2.1 各組小鼠學習成績和記憶成績對比

    學習成績:與假手術(shù)組對比,模型對照組小鼠的反應時間延長,錯誤次數(shù)增加,差別有統(tǒng)計學意義(P<0.01),表明小鼠的學習成績下降。與模型對照組對比,各治療組反應時間均縮短,錯誤次數(shù)均減少,差別有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。補腦軟膠囊高劑量組與尼莫地平組對比,反應時間縮短,錯誤次數(shù)減少,差別有統(tǒng)計學意義(P<0.05);與中、低劑量組對比,反應時間均明顯縮短,差別有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。結(jié)果表明:各治療組均能提高血管性癡呆小鼠跳臺實驗學習能力,且在改善反應時間方面補腦軟膠囊呈量效關(guān)系。

    記憶成績:與假手術(shù)組對比,模型對照組小鼠的潛伏時間縮短,錯誤次數(shù)增加,差別有統(tǒng)計學意義(P<0.01),表明記憶成績下降。與模型對照組對比,各治療組潛伏時間均延長,錯誤次數(shù)均減少,差別有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。補腦軟膠囊高劑量組與尼莫地平對照組對比,潛伏時間延長,錯誤次數(shù)減少,但差別無統(tǒng)計學意義(P>0.05);與低劑量組對比,錯誤次數(shù)減少,差別有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。結(jié)果表明:各治療組均可提高血管性癡呆小鼠跳臺記憶成績,且在增加潛伏時間方面有量效關(guān)系的趨勢。見表1。

    組 別劑量/(μg·g-1)學習成績(灌胃第20天)反應時間/s錯誤次數(shù)/次記憶成績(灌胃第21天)反應時間/s錯誤次數(shù)/次假手術(shù)組15.06±5.04**2.50±1.20**165.88±18.06**2.70±1.44模型對照組53.94±11.577.60±2.5280.14±21.407.80±2.40補腦軟膠囊高劑量組80024.42±5.40**##△**4.30±1.56**#△150.95±20.49**△△4.10±1.32*補腦軟膠囊中劑量組40030.36±5.04**5.20±1.60*135.77±30.09**5.60±2.28補腦軟膠囊低劑量組20035.21±7.97**6.30±1.36139.49±38.63**5.90±1.88尼莫地平組1433.11±8.77**5.70±1.50123.92±21.68**5.10±1.54*

    注:與模型對照組對比,*P<0.05,**P<0.01;與補腦軟膠囊低劑量組對比,#P<0.05,##P<0.01;與尼莫地平組對比,△P<0.05,△△P<0.01;與補腦軟膠囊中劑量對比,**P<0.01。

    2.2 各組小鼠海馬組織CA1區(qū)組織病理學改變

    光鏡下,假手術(shù)組海馬CA1區(qū)錐體細胞分4層排列,排列整齊,形態(tài)完整,層次分明;胞質(zhì)均質(zhì)染色,核大而圓,胞核無固縮;纖維結(jié)構(gòu)清晰可辨,未見淋巴細胞浸潤。模型對照組海馬CA1區(qū)錐體細胞數(shù)量明顯減少,排列散亂,層次不清;局部可見淋巴細胞浸潤;部分錐體細胞明顯受損,胞漿內(nèi)可見空泡形成,細胞核固縮,纖維結(jié)構(gòu)零亂不清。各治療組海馬CA1區(qū)錐體細胞輕度損傷或者損傷不明顯,未見錐體細胞數(shù)量明顯減少;局部細胞排列紊亂,纖維結(jié)構(gòu)略零亂、不清晰;局部錐體細胞可見胞漿空泡形成。其中補腦軟膠囊高劑量組小鼠海馬 CA1區(qū)有少量脫失的錐體細胞,少數(shù)細胞核固縮,錐體細胞纖維排列較為整齊;中、低劑量組小鼠海馬 CA1區(qū)錐體細胞部分脫失,部分細胞核固縮為三角形或多角形;尼莫地平組海馬CA1區(qū)錐體細胞損傷不明顯,未見錐體細胞數(shù)量明顯減少,局部細胞排列紊亂、纖維結(jié)構(gòu)零亂、不清晰,局部少量錐體細胞可見胞漿空泡形成。結(jié)果表明:藥物對海馬組織細胞起到了保護作用,補腦軟膠囊高劑量作用優(yōu)于尼莫地平。見圖1。

    A.假手術(shù)組;B.模型對照組;C.補腦軟膠囊高劑量組;D.補腦軟膠囊中劑量組;E.補腦軟膠囊低劑量組;F.尼莫地平組

    3 討 論

    跳臺實驗通過記錄實驗小鼠到安全平臺的時間和受到電擊的次數(shù)來反映實驗動物尋找安全平臺的空間認知能力和學習記憶能力[8]。本研究結(jié)果表明:補腦軟膠囊對VD小鼠的學習記憶有一定的改善作用,與模型對照組對比,高劑量組反應時間、潛伏時間、錯誤次數(shù)均有顯著性差別,中、低劑量改善作用相對較弱,有明顯的量效關(guān)系趨勢,呈劑量依賴性。海馬是與認知功能密切相關(guān)的重要腦區(qū),是學習、記憶的高級中樞之一,直接參與信息的整合與貯存;是空間學習記憶能力的關(guān)鍵結(jié)構(gòu),損害海馬則影響空間學習記憶;因此,選擇海馬作為研究學習、記憶能力的主要部位,有著極其重要的意義。腦組織中海馬區(qū)對缺血、缺氧最為敏感,其中海馬CA1區(qū)是海馬中最易受損的區(qū)域。急、慢性腦血管病變后海馬CA1區(qū)細胞明顯受損,伴隨記憶力明顯下降。海馬組織中神經(jīng)元的存活數(shù)量直接影響神經(jīng)元突觸的可塑性效應,影響信息的整合、儲存和傳遞。因此,急、慢性腦血管病變后腦組織缺血、缺氧導致海馬CA1區(qū)錐體細胞遲發(fā)性壞死,神經(jīng)元的大量凋亡丟失,可能是患者腦卒中后發(fā)生 VD 的病理學基礎[9-11]。本實驗結(jié)果顯示:補腦軟膠囊高、中、低劑量組和尼莫地平組海馬CA1區(qū)錐體細胞輕度損傷或者損傷不明顯,未見錐體細胞數(shù)量明顯減少。結(jié)果表明:補腦軟膠囊對VD有一定的改善作用。

    [1]石苗茜,劉衛(wèi)平.血管性癡呆發(fā)病機制研究進展[J].第四軍醫(yī)大學學報,2007,28(9):860-863.

    [2]李喜香,畢映燕,李季文,等.正交試驗優(yōu)選補腦軟膠囊水提乙醇沉降制備工藝[J].中成藥,2014,36(12):2625-2628.

    [3]李妍怡,劉志軍,楊瑞龍,等.補腦膏治療血管性癡呆70例[J].中醫(yī)研究,2010, 23(1):41-43.

    [4]李妍怡.補腦膏治療腦外傷性癱瘓的臨床觀察[J].中國中醫(yī)藥科技,1996,3(2):38-39.

    [5]王天俊,呂佩源,王賀波,等.反復腦缺血-再灌注導致血管性癡呆小鼠行為學變化的動態(tài)觀察[J].腦與神經(jīng)疾病雜志,2008,16(4):498-499.

    [6]鄭攀,封銀曼,鄭宏,等.補腎醒腦方對實驗性血管性癡呆大鼠腦神經(jīng)細胞凋亡的影響[J].中國中醫(yī)藥信息雜志,2007,14(12):19-20.

    [7]WANG H. Establishment of an animal model of vascular dementia[J].Exp Ther Med, 2014,8(5):1599-1603.

    [8]JIWA NS, GARRARD P, HAINSWORTH AH.Experimental models of vascular dementia and vascular cognitive impairment:a systematic review[J]. Journal of Neurochemistry,2010,115(4):814-828.

    [9]岳仁宋,陳忠義.腦力蘇膠囊對血管性癡呆大鼠海馬CA1 區(qū)NOS、AchE活性的影響[J].中國中醫(yī)藥信息雜志,2005,12(5):20-22.

    [10]藺心敬,李呂力.血管性癡呆大鼠海馬神經(jīng)元凋亡和蛋白表達實驗研究[J].中國現(xiàn)代醫(yī)學雜志,2007,17(19):2326-2329.

    [11]朱燕珍,林凌. P53、Noxa在血管性癡呆大鼠海馬 CA1 區(qū)中表達及意義[J].山西醫(yī)科大學學報,2008,39(10):865-869.

    (編輯 陶 珠)

    1001-6910(2016)11-0067-04

    R749.1+

    B

    10.3969/j.issn.1001-6910.2016.11.28

    李喜香(1968-),女(漢族),甘肅秦安人,主任中藥師,碩士研究生導師,主要從事中藥制劑工藝研究。

    蘭州市科技計劃(2012-2-78)

    2016-05-16;

    2016-09-06

    猜你喜歡
    補腦軟膠囊尼莫地平
    國家藥監(jiān)局關(guān)于修訂安神補腦制劑說明書的公告
    愛 自 己
    中外文摘(2018年18期)2018-11-21 18:26:54
    尼莫地平對高血壓腦出血治療的研究
    補腦
    核桃適合男人嗎?
    飲食科學(2016年10期)2016-11-19 09:07:56
    芪黃通秘軟膠囊治療功能性便秘的臨床研究
    中成藥(2016年8期)2016-05-17 06:08:16
    尼莫地平對高血壓腦出血治療的研究
    微波消解-ICP-MS法同時測定軟膠囊中10種痕量元素
    中風活心軟膠囊的薄層鑒別研究
    尼莫地平靜脈泵入治療高血壓性腦出血20例
    一级毛片aaaaaa免费看小| 最近中文字幕2019免费版| 天天操日日干夜夜撸| 黄色一级大片看看| 久久久午夜欧美精品| 精品久久久久久电影网| 男男h啪啪无遮挡| 99热全是精品| 国产成人一区二区在线| 亚洲精品,欧美精品| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 91在线精品国自产拍蜜月| 亚洲精品成人av观看孕妇| 欧美一级a爱片免费观看看| 欧美激情国产日韩精品一区| 欧美精品一区二区大全| 午夜激情久久久久久久| 五月天丁香电影| 纯流量卡能插随身wifi吗| 尾随美女入室| 如日韩欧美国产精品一区二区三区 | 男人狂女人下面高潮的视频| 中文资源天堂在线| 男女啪啪激烈高潮av片| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 人妻人人澡人人爽人人| 观看免费一级毛片| 免费观看在线日韩| 国产成人免费观看mmmm| 能在线免费看毛片的网站| 国产爽快片一区二区三区| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 国产亚洲5aaaaa淫片| 男女边吃奶边做爰视频| 久久精品夜色国产| kizo精华| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| 国产精品三级大全| 热99国产精品久久久久久7| 国产在线一区二区三区精| 国产成人精品福利久久| 极品人妻少妇av视频| 91在线精品国自产拍蜜月| 欧美3d第一页| 在线播放无遮挡| 美女大奶头黄色视频| 亚洲国产欧美在线一区| 久久久久精品性色| 午夜免费观看性视频| 寂寞人妻少妇视频99o| 女人精品久久久久毛片| 99久久精品国产国产毛片| av黄色大香蕉| 久久人妻熟女aⅴ| 色婷婷av一区二区三区视频| 最近手机中文字幕大全| av在线观看视频网站免费| 亚洲欧洲日产国产| 韩国av在线不卡| 两个人免费观看高清视频 | 乱系列少妇在线播放| 亚洲av成人精品一区久久| 老司机影院毛片| 亚洲欧洲国产日韩| 插阴视频在线观看视频| 日日啪夜夜爽| 99视频精品全部免费 在线| 亚洲av成人精品一二三区| 免费观看无遮挡的男女| 免费黄网站久久成人精品| 成年人免费黄色播放视频 | 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 国产精品久久久久久久久免| 色94色欧美一区二区| 成人国产麻豆网| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 三上悠亚av全集在线观看 | 亚洲精品国产av成人精品| 91成人精品电影| 黑丝袜美女国产一区| 亚洲美女视频黄频| 99久久精品国产国产毛片| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 日韩精品有码人妻一区| 亚洲综合精品二区| 一级毛片aaaaaa免费看小| 美女大奶头黄色视频| 有码 亚洲区| 下体分泌物呈黄色| 亚洲欧美成人精品一区二区| 哪个播放器可以免费观看大片| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 99热这里只有精品一区| 人体艺术视频欧美日本| 国产男女内射视频| 99热这里只有是精品在线观看| 国产精品人妻久久久久久| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 多毛熟女@视频| 国产美女午夜福利| 国产精品人妻久久久久久| 免费高清在线观看视频在线观看| 久久综合国产亚洲精品| 男人狂女人下面高潮的视频| 色网站视频免费| 一级毛片 在线播放| 精品久久久精品久久久| 久久久久久久亚洲中文字幕| 日韩av不卡免费在线播放| 夫妻午夜视频| 韩国高清视频一区二区三区| 黄色一级大片看看| av又黄又爽大尺度在线免费看| 国内精品宾馆在线| 亚洲精品一二三| 亚洲精品日韩av片在线观看| 亚洲精品国产av成人精品| 欧美一级a爱片免费观看看| 成人毛片60女人毛片免费| 2018国产大陆天天弄谢| 性色av一级| 一个人看视频在线观看www免费| 成人黄色视频免费在线看| 久久精品久久精品一区二区三区| 国产高清三级在线| 亚洲av欧美aⅴ国产| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 高清不卡的av网站| 极品教师在线视频| 国产成人一区二区在线| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 日本与韩国留学比较| 欧美bdsm另类| 国产精品免费大片| 国产日韩一区二区三区精品不卡 | 亚洲精品国产成人久久av| 国产在视频线精品| 国产一级毛片在线| 99久久精品一区二区三区| av福利片在线观看| 亚洲精品,欧美精品| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 国产精品久久久久久av不卡| 国产精品一二三区在线看| 免费黄频网站在线观看国产| 女性生殖器流出的白浆| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 国国产精品蜜臀av免费| 美女cb高潮喷水在线观看| 韩国高清视频一区二区三区| 熟妇人妻不卡中文字幕| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 又爽又黄a免费视频| 久久鲁丝午夜福利片| 亚洲av中文av极速乱| 免费av中文字幕在线| 国产黄片视频在线免费观看| a 毛片基地| 纯流量卡能插随身wifi吗| 精品一品国产午夜福利视频| 老司机影院毛片| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 一本色道久久久久久精品综合| 在线观看美女被高潮喷水网站| 国内精品宾馆在线| 亚洲av成人精品一区久久| 亚洲成人av在线免费| 国产伦精品一区二区三区视频9| 在线观看免费高清a一片| 在线亚洲精品国产二区图片欧美 | 99热这里只有是精品在线观看| av在线app专区| 国产片特级美女逼逼视频| 亚洲国产精品成人久久小说| 99热这里只有精品一区| 亚洲成人av在线免费| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 精品一区在线观看国产| 色婷婷久久久亚洲欧美| 国产精品一区www在线观看| 丝瓜视频免费看黄片| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 成年美女黄网站色视频大全免费 | 99热网站在线观看| 校园人妻丝袜中文字幕| 日韩一区二区三区影片| 青春草视频在线免费观看| 国产精品久久久久久久电影| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 国产欧美日韩一区二区三区在线 | www.av在线官网国产| 少妇人妻一区二区三区视频| 免费av中文字幕在线| 国产精品国产三级国产专区5o| 熟女av电影| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 国产在线视频一区二区| 在线观看免费日韩欧美大片 | 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 97精品久久久久久久久久精品| 国产在线男女| 亚洲欧美精品专区久久| 男男h啪啪无遮挡| 乱码一卡2卡4卡精品| 日韩欧美 国产精品| 亚洲一区二区三区欧美精品| 一级a做视频免费观看| 国产片特级美女逼逼视频| 亚洲美女搞黄在线观看| 性高湖久久久久久久久免费观看| 日韩人妻高清精品专区| 国产亚洲91精品色在线| av卡一久久| 啦啦啦啦在线视频资源| 日本91视频免费播放| 亚洲成色77777| 在线观看免费日韩欧美大片 | 亚洲精品乱久久久久久| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 午夜精品国产一区二区电影| 色5月婷婷丁香| 中文欧美无线码| 久久ye,这里只有精品| 秋霞在线观看毛片| 久久久久久久久久成人| 美女主播在线视频| 亚洲国产精品一区三区| 国产 精品1| 韩国高清视频一区二区三区| 午夜免费男女啪啪视频观看| 制服丝袜香蕉在线| 国产一区亚洲一区在线观看| 日本欧美国产在线视频| 久久久国产欧美日韩av| 成年人免费黄色播放视频 | 男男h啪啪无遮挡| 高清毛片免费看| 成人免费观看视频高清| 美女主播在线视频| 亚洲高清免费不卡视频| 乱人伦中国视频| 日本黄色日本黄色录像| 精品国产乱码久久久久久小说| 精品少妇久久久久久888优播| 国产精品久久久久久久久免| 内射极品少妇av片p| 日本色播在线视频| av一本久久久久| 性色av一级| 高清视频免费观看一区二区| 国产真实伦视频高清在线观看| 偷拍熟女少妇极品色| 天堂俺去俺来也www色官网| 一级av片app| 最后的刺客免费高清国语| 丝瓜视频免费看黄片| 成人亚洲精品一区在线观看| 久久精品国产自在天天线| av在线播放精品| 国产91av在线免费观看| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 青春草视频在线免费观看| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 伦理电影免费视频| 秋霞在线观看毛片| 赤兔流量卡办理| 三级国产精品片| 新久久久久国产一级毛片| 五月开心婷婷网| 3wmmmm亚洲av在线观看| 综合色丁香网| 妹子高潮喷水视频| 免费黄频网站在线观看国产| 欧美三级亚洲精品| 久久久久视频综合| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 亚洲人成网站在线观看播放| 免费人妻精品一区二区三区视频| 青青草视频在线视频观看| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 日本黄色日本黄色录像| 自线自在国产av| av视频免费观看在线观看| 黄片无遮挡物在线观看| 久久国产亚洲av麻豆专区| 十八禁高潮呻吟视频 | 久久ye,这里只有精品| 亚洲av不卡在线观看| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 精品久久国产蜜桃| 天堂俺去俺来也www色官网| 黄色一级大片看看| 色婷婷av一区二区三区视频| 成年人午夜在线观看视频| 国产欧美亚洲国产| 各种免费的搞黄视频| 国产亚洲一区二区精品| av天堂中文字幕网| 久久免费观看电影| 99久久中文字幕三级久久日本| 国产高清有码在线观看视频| 亚洲精品中文字幕在线视频 | 少妇被粗大猛烈的视频| 人妻人人澡人人爽人人| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频 | 国产淫片久久久久久久久| 精品人妻一区二区三区麻豆| 永久网站在线| 免费大片18禁| 亚洲av综合色区一区| 女性生殖器流出的白浆| 久久ye,这里只有精品| 亚洲精品一区蜜桃| 男女边摸边吃奶| 91精品伊人久久大香线蕉| 男人添女人高潮全过程视频| 国产亚洲5aaaaa淫片| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 精品亚洲成a人片在线观看| freevideosex欧美| 午夜福利影视在线免费观看| 国产伦精品一区二区三区四那| 草草在线视频免费看| 下体分泌物呈黄色| h日本视频在线播放| 亚洲精品国产成人久久av| 极品少妇高潮喷水抽搐| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 一本大道久久a久久精品| 国产毛片在线视频| 日日撸夜夜添| 超碰97精品在线观看| 国产av精品麻豆| 国产视频首页在线观看| 高清毛片免费看| freevideosex欧美| av国产久精品久网站免费入址| 精品亚洲成a人片在线观看| 三级国产精品欧美在线观看| 搡老乐熟女国产| 天堂俺去俺来也www色官网| a级片在线免费高清观看视频| 69精品国产乱码久久久| 好男人视频免费观看在线| 少妇的逼水好多| 亚洲国产av新网站| 亚洲精品成人av观看孕妇| 免费av不卡在线播放| 一级a做视频免费观看| 亚洲国产欧美日韩在线播放 | av在线播放精品| tube8黄色片| 久久久午夜欧美精品| av卡一久久| 人妻 亚洲 视频| 欧美bdsm另类| 国产精品一区www在线观看| 久久鲁丝午夜福利片| 久久久国产一区二区| 丝袜在线中文字幕| 久久人妻熟女aⅴ| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 国产高清三级在线| 中文欧美无线码| 色婷婷久久久亚洲欧美| 内射极品少妇av片p| 亚洲av福利一区| 一级av片app| 亚洲精品aⅴ在线观看| 久久精品久久精品一区二区三区| 国产日韩欧美在线精品| 亚洲天堂av无毛| 99久国产av精品国产电影| 午夜福利,免费看| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 久久99热6这里只有精品| freevideosex欧美| 国产69精品久久久久777片| 街头女战士在线观看网站| 少妇熟女欧美另类| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 丰满饥渴人妻一区二区三| 日日啪夜夜撸| 欧美3d第一页| 26uuu在线亚洲综合色| 久久久久久久大尺度免费视频| 国产一区二区三区av在线| 亚洲精品456在线播放app| 免费观看a级毛片全部| 亚洲国产欧美日韩在线播放 | av在线老鸭窝| 国产亚洲91精品色在线| 午夜视频国产福利| 青春草亚洲视频在线观看| 国产成人午夜福利电影在线观看| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 亚洲在久久综合| 人人澡人人妻人| 国产成人一区二区在线| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 国产在线免费精品| 能在线免费看毛片的网站| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 精品一区二区三区视频在线| 男人舔奶头视频| 少妇 在线观看| 蜜臀久久99精品久久宅男| 嫩草影院入口| 国产毛片在线视频| 国产极品粉嫩免费观看在线 | 在现免费观看毛片| 久热这里只有精品99| 最黄视频免费看| 三级国产精品片| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 人妻人人澡人人爽人人| 亚洲欧美日韩东京热| 国产高清国产精品国产三级| 久久精品国产亚洲av天美| 伊人亚洲综合成人网| 美女内射精品一级片tv| 少妇的逼水好多| 爱豆传媒免费全集在线观看| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃 | 在线观看人妻少妇| 成人国产麻豆网| 国产一级毛片在线| 男女啪啪激烈高潮av片| 一本大道久久a久久精品| 久久鲁丝午夜福利片| 久久ye,这里只有精品| 亚洲第一av免费看| 国产伦精品一区二区三区视频9| 热re99久久精品国产66热6| 亚洲真实伦在线观看| 一级,二级,三级黄色视频| 精品久久久精品久久久| 午夜视频国产福利| 国产亚洲5aaaaa淫片| 亚洲精品久久午夜乱码| 国产中年淑女户外野战色| 国产精品一区二区性色av| 日韩欧美精品免费久久| 午夜视频国产福利| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 国产色爽女视频免费观看| 日韩中字成人| 久久精品国产亚洲网站| 国产av码专区亚洲av| 好男人视频免费观看在线| av天堂中文字幕网| 高清黄色对白视频在线免费看 | 少妇熟女欧美另类| 国产免费福利视频在线观看| 午夜91福利影院| 另类亚洲欧美激情| 国产精品人妻久久久影院| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 久久精品国产a三级三级三级| 日韩一本色道免费dvd| 日韩欧美精品免费久久| 女人久久www免费人成看片| xxx大片免费视频| 丁香六月天网| 99久久中文字幕三级久久日本| 免费看av在线观看网站| 欧美三级亚洲精品| 黄色毛片三级朝国网站 | 国产黄色免费在线视频| 日韩av免费高清视频| 少妇人妻精品综合一区二区| 亚洲精品一二三| 久久鲁丝午夜福利片| 国产黄片视频在线免费观看| 18+在线观看网站| 我的女老师完整版在线观看| 中文字幕制服av| 最新的欧美精品一区二区| 国产精品熟女久久久久浪| 欧美区成人在线视频| 日韩免费高清中文字幕av| 内射极品少妇av片p| 青春草亚洲视频在线观看| 秋霞伦理黄片| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 3wmmmm亚洲av在线观看| 最近2019中文字幕mv第一页| 亚洲av国产av综合av卡| 在线 av 中文字幕| 久久久国产精品麻豆| 久久6这里有精品| 人人妻人人看人人澡| 欧美另类一区| av专区在线播放| 亚洲国产精品一区三区| 中文字幕久久专区| 色吧在线观看| 免费黄频网站在线观看国产| 日韩三级伦理在线观看| 国产乱人偷精品视频| 最新中文字幕久久久久| 亚洲av综合色区一区| 一区二区三区精品91| 国产精品一二三区在线看| 男的添女的下面高潮视频| 亚洲国产色片| 国产免费福利视频在线观看| 大香蕉97超碰在线| 看免费成人av毛片| 国精品久久久久久国模美| 免费大片黄手机在线观看| 人人澡人人妻人| 国产一级毛片在线| 最新的欧美精品一区二区| 日日摸夜夜添夜夜爱| 成年人免费黄色播放视频 | 少妇 在线观看| 日本黄大片高清| 麻豆成人午夜福利视频| 国产熟女欧美一区二区| 高清不卡的av网站| 国产黄片美女视频| 91久久精品国产一区二区成人| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 亚洲高清免费不卡视频| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 91精品伊人久久大香线蕉| 插逼视频在线观看| 日日摸夜夜添夜夜爱| 午夜福利,免费看| av国产精品久久久久影院| 看免费成人av毛片| 亚洲,一卡二卡三卡| .国产精品久久| 亚洲色图综合在线观看| 国产精品一区二区三区四区免费观看| 久久97久久精品| 亚洲成人av在线免费| 最近手机中文字幕大全| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 久久久久网色| 亚洲精品,欧美精品| 亚洲精品国产av蜜桃| 最新中文字幕久久久久| 国产精品久久久久久精品古装| 国产真实伦视频高清在线观看| 丰满饥渴人妻一区二区三| 中文欧美无线码| 欧美 日韩 精品 国产| 亚洲欧洲国产日韩| 国产日韩欧美亚洲二区| 亚州av有码| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 九色成人免费人妻av| a级一级毛片免费在线观看| 国产精品女同一区二区软件| 久久久国产精品麻豆| 大香蕉97超碰在线| 亚洲第一区二区三区不卡| 精品卡一卡二卡四卡免费| 欧美最新免费一区二区三区| 免费观看的影片在线观看| 日韩一本色道免费dvd| 色视频www国产| 少妇丰满av| 日日啪夜夜爽| 国产男人的电影天堂91| 在线播放无遮挡| 精品少妇久久久久久888优播| 国产成人freesex在线| 天美传媒精品一区二区| 精品酒店卫生间| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 亚洲成色77777| 国产精品嫩草影院av在线观看| 日韩av在线免费看完整版不卡| 另类精品久久| 精品国产一区二区久久| 日日啪夜夜爽| 亚洲内射少妇av| 在线精品无人区一区二区三| 嫩草影院入口| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 热99国产精品久久久久久7| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 亚洲精品456在线播放app| 亚洲av成人精品一二三区| 亚洲第一av免费看| 国产日韩一区二区三区精品不卡 | 久久久国产欧美日韩av| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 亚洲国产精品999| 精品卡一卡二卡四卡免费| 两个人的视频大全免费| 亚洲精品成人av观看孕妇| 最黄视频免费看| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 日韩三级伦理在线观看| 在线播放无遮挡| 大片免费播放器 马上看| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 少妇人妻精品综合一区二区| 哪个播放器可以免费观看大片| 91成人精品电影| 夫妻午夜视频| 国产伦在线观看视频一区| 六月丁香七月| 边亲边吃奶的免费视频| 韩国高清视频一区二区三区| 亚洲熟女精品中文字幕| 国产在线一区二区三区精| 色哟哟·www|