昆侖雪菊揮發(fā)物GC-MS分析

王　波，曾　瑜，羅詠彬，劉　倩

（1. 中國(guó)科學(xué)院廣州化學(xué)研究所，中國(guó) 廣州 510650；2. 廣州中科檢測(cè)技術(shù)服務(wù)有限公司，中國(guó) 廣州 510650）

昆侖雪菊揮發(fā)物GC-MS分析

王波，曾瑜，羅詠彬，劉倩

（1. 中國(guó)科學(xué)院廣州化學(xué)研究所，中國(guó) 廣州 510650；2. 廣州中科檢測(cè)技術(shù)服務(wù)有限公司，中國(guó) 廣州 510650）

比較了水蒸氣蒸餾法和固相微萃取法對(duì)昆侖雪菊發(fā)揮性成分萃取能力和萃取物種類的區(qū)別。分別利用水蒸氣蒸餾法（HD）和頂空―固相微萃取法（HS-SPME）對(duì)昆侖雪菊揮發(fā)物進(jìn)行萃取富集，用氣相色譜―質(zhì)譜法分析測(cè)定。結(jié)果表明，兩種方法共提取、鑒定出65種化合物，其中水蒸氣蒸餾法鑒定出49個(gè)化合物，頂空固相微萃取方法鑒定出35個(gè)化合物；兩種方法相同的化合物共19個(gè)，占水蒸氣蒸餾法鑒定化合物的78%，占固相微萃取法鑒定化合物的91%。兩種提取方法得到的揮發(fā)物組分有部分差異，因此同時(shí)采用兩種方法能夠更加全面、完整地對(duì)昆侖雪菊的揮發(fā)性組分進(jìn)行分析。

昆侖雪菊；揮發(fā)性物質(zhì)；水蒸氣蒸餾；固相微萃??；氣質(zhì)聯(lián)用

昆侖雪菊（拉丁名）學(xué)名“蛇目菊”、“雙色金雞菊”，別名“昆侖血菊”，屬菊科（Compositae），蛇目菊屬（Sanvitalia），蛇目菊種[1]。昆侖雪菊形狀如雛菊，花瓣呈金黃色，花蕊呈棕色，為一年生草本植物，成熟植株高達(dá) 50 cm，由于該菊花期短暫，采摘不易，故產(chǎn)量不多。昆侖雪菊是藥食兩用植物，含有多種藥理成分，當(dāng)?shù)啬撩駳v來將其沖泡后飲用，起到了（解毒、抗衰老、美容）等作用。現(xiàn)代藥理學(xué)研究認(rèn)為，昆侖雪菊具有（抗病毒、抗腫瘤、增強(qiáng)免疫力）的功效。昆侖雪菊現(xiàn)已成為營(yíng)養(yǎng)學(xué)家和藥理學(xué)家研究的熱點(diǎn)，市場(chǎng)上已有昆侖雪菊的產(chǎn)品問世。昆侖雪菊的主要成分包括黃酮、生物堿、揮發(fā)油、有機(jī)酸、皂苷、氨基酸等，其中揮發(fā)油是重要的藥理活性成分，有（解毒消炎、清肝益氣）的功效[2]。揮發(fā)油的主要提取方法有超臨界萃取[3]、柱層析法等[4]，但這些方法分析出的成分有一定差異。

本文分別利用水蒸氣蒸餾法[5]與固相微萃?。⊿PME）法[6]對(duì)昆侖雪菊的揮發(fā)性成分進(jìn)行提取富集，以便更全面地了解昆侖雪菊的揮發(fā)物的組成。采用氣相色譜―質(zhì)譜聯(lián)用（GC-MS）法對(duì)揮發(fā)物進(jìn)行分析測(cè)定。

1　實(shí)驗(yàn)

1.1試劑和儀器

昆侖雪菊（安徽千億藥業(yè)有限公司）；無水乙醚、無水硫酸鈉等，國(guó)產(chǎn)分析純。

揮發(fā)油提取器；氣相色譜―質(zhì)譜聯(lián)用儀Shimadzu QP2010 GC/MS，日本島津公司；固相微萃?。⊿PME）套件，萃取頭為DVB/CAR/PDMS，50/30 μm，StableflexTM24Ga，美國(guó)西格瑪奧德里奇公司。

1.2方法

1.2.1水蒸氣蒸餾

準(zhǔn)確稱取100 g樣品，置于蒸餾瓶中，加入蒸餾水和沸石，電熱套加熱，利用揮發(fā)油提取器提取4～5 h，至揮發(fā)油量不再增加，餾出液加適量乙醚萃取。乙醚層用無水硫酸鈉干燥、濃縮，注入GC-MS進(jìn)行分析。

1.2.2頂空―固相微萃取

取適量樣品，置于25 mL樣品瓶中，插入萃取頭，在60℃條件下頂空吸附30 min。吸附完畢后，將萃取頭插入GC-MS進(jìn)樣口，250℃解吸90 s。

1.3氣相色譜―質(zhì)譜條件

色譜條件：色譜柱為DB-5 MS（30 m×0.25 mm×0.25 μm）彈性石英毛細(xì)管柱。程序升溫：柱溫50℃（保留2 min），以10℃/min升溫至280℃，保持30 min。汽化室溫度250℃，載氣為高純He（99.999%），流速1.0 mL/min；不分流進(jìn)樣，溶劑延遲時(shí)間2.0 min。

質(zhì)譜條件：離子源為電子轟擊（EI）源；離子源溫度230℃，電子能量70 eV，接口溫度280℃。質(zhì)量分析器為單四極桿，質(zhì)量范圍20～500 amu，檢測(cè)電壓為1.00 kV。

2　結(jié)果與討論

分別按“1.2.1”和“1.2.2”小節(jié)所述的實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行提取，采用GC-MS分析，分別得到兩種提取方式對(duì)應(yīng)的雪菊中揮發(fā)性物質(zhì)的總離子流色譜圖（如圖1、圖2所示）。利用質(zhì)譜圖計(jì)算機(jī)檢索法對(duì)圖譜進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)譜庫（NIST08）檢索，檢索結(jié)果如表1、表2所示。

由表1可知，利用水蒸氣蒸餾法共檢測(cè)出139個(gè)峰，鑒定出49個(gè)化合物，其含量占總揮發(fā)性物質(zhì)的79.84%。含量最高的為D-檸檬烯。在已鑒定的組分中烯烴類占58.57%，苯取代衍生物占20.20%，酮類占8.27%，醇類占7.03%，脂肪酸甲酯占1.99%。從表2可知，利用固相微萃取方法共檢測(cè)出58個(gè)峰，鑒定出35個(gè)化合物，其含量占總揮發(fā)性物質(zhì)的92.52%。含量最高的組分亦為D-檸檬烯。在已鑒定的組分中烯烴類占65.17%，苯取代衍生物占21.34%，酮類占3.29%，醇類占2.28%。兩種方法共鑒定出65種化合物，其中相同的化合物19種，占水蒸氣蒸餾法鑒定化合物的78%，占頂空固相微萃取法鑒定化合物的91%。

圖1　水蒸氣蒸餾樣品的總離子流色譜圖

圖2　頂空固相微萃取樣品的總離子流色譜圖

表1　水蒸氣蒸餾法提取的揮發(fā)物的化學(xué)成分

續(xù)表1

表2　固相微萃取法提取揮發(fā)物的化學(xué)成分

續(xù)表2

3　結(jié)論

水蒸氣蒸餾是利用沸水的蒸氣將揮發(fā)性物質(zhì)餾出，冷卻得到揮發(fā)油。固相微萃取是在60℃的較低溫度下，利用非極性萃取頭直接吸附、富集樣品的。兩種方法的結(jié)果均以烯烴類、苯取代衍生化合物為主，水蒸氣蒸餾中烯烴類、苯取代衍生化合物含量比頂空固相微萃取低，但醇類、酮類、酯類化合物含量比固相微萃取高。因此在對(duì)昆侖雪菊揮發(fā)性物質(zhì)的分析中可以同時(shí)采用兩種萃取方法，使分析結(jié)果更加全面完整。

[1] 國(guó)家藥典委員會(huì). 中華人民共和國(guó)藥典[M]. 一部. 北京: 化學(xué)工業(yè)出版社, 2010: 附錄63.

[2] 方瑞萍, 唐輝, 黃鍵, 等. 雪菊的藥理作用及營(yíng)養(yǎng)成分的分析方法研究進(jìn)展[J]. 材料導(dǎo)報(bào)A, 2014, 28(10): 143-146.

[3] 王淑敏, 劉春明, 劉志強(qiáng), 等. 玫瑰花中揮發(fā)油成分的超臨界萃取及質(zhì)譜分析[J]. 質(zhì)譜學(xué)報(bào), 2006, 27(1): 45-49.

[4] 肖會(huì)敏, 王四旺, 王建波, 等. 層析法富集連翹揮發(fā)油中β析蒎烯的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 中國(guó)民族明間醫(yī)藥, 2009, 18(20): 20-23.

[5] 王平, 陳錫林, 李麗, 等. 川穹、高良姜等揮發(fā)油的水蒸汽蒸餾法和超臨界流體萃取法的比較研究[J]. 中成藥, 2004, 26(6): 440-443.

[6] 肖丹. 頂空固相微萃取技術(shù)的應(yīng)用與展望[J]. 中國(guó)衛(wèi)生工程學(xué), 2015, 14(1): 88-92.

Comparison of Different Pre-treatment Methods for Extracting KunlunXueju Volatile Substances

WANG Bo, ZENG Yu, LUO Yong-bin, LIU Qian
（1. Guangzhou Institute of Chemistry, Chinese Academy of Sciences, Guangzhou 510650, China; 2. Guangzhou CAS Test Technical Services Co., Guangzhou 510650, China）

Comparison of extraction competence and volatile substance types between steam distillation and SPME methods. SD and SPME were utilized and GC-MS was employed for analyzing volatile compounds. 65 compounds were found by both the two methods. And 49 compounds were identified by SD, and 35 by SPME. Within them, 19 compounds were the same, which was up to 78% of the whole by SD and 91% by SPME. The number and types of compounds were partially different by the two methods and the volatile substances of Kunlun Xueju could be discovered more entirely.

Kunlun Chrysanthemum; volatile substance; steam distillation; SPME; GC-MS

O652.1

A

1009-220X(2016)03-0006-05

10.16560/j.cnki.gzhx.20160303

2016-03-01

王 波（1987~），男，本科，工程師；主要從事分析化學(xué)的研究。ms@gic.ac.cn