風(fēng)濕免疫病患者的血清可溶性補體受體2水平變化及應(yīng)用價值

曾惠芬，劉 芳，繆 蕙，劉 璽，沈明靜

（深圳市龍崗中心醫(yī)院，廣東深圳518000）

風(fēng)濕免疫病患者的血清可溶性補體受體2水平變化及應(yīng)用價值

曾惠芬，劉 芳，繆 蕙，劉 璽，沈明靜

（深圳市龍崗中心醫(yī)院，廣東深圳518000）

目的 探討風(fēng)濕免疫病患者的血清可溶性補體受體2（sCR2）水平變化及應(yīng)用價值。方法 隨機選取2013年3月至2016年3月我院收治的風(fēng)濕免疫病患者45例，將這些患者作為研究組，另選取同期來我院進行體檢的健康人員40例為對照組，運用固相的ELISA法對兩組人員的sCR2濃度進行測定，然后對兩組人員的血清sCR2水平、研究組中RA和SLE患者的血清sCR2水平和相關(guān)指標(biāo)的相關(guān)性及RA中處于活動期和非活動期患者的血清sCR2水平進行統(tǒng)計分析。結(jié)果 組內(nèi)比較，研究組中RA和SLE患者的血清sCR2水平之間的差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；組間比較，研究組中RA和SLE患者的血清sCR2水平均顯著低于對照組（P＜0.05）。RA患者的血清sCR2和RF水平無相關(guān)性；SLE患者的血清sCR2和C3水平無相關(guān)性。RA中處于活動期患者的血清sCR2水平顯著低于非活動期患者（P＜0.05）。結(jié)論

風(fēng)濕免疫??； 血清可溶性補體受體2； 水平變化； 應(yīng)用價值

風(fēng)濕免疫病屬于一種自身免疫病，和人類白細胞特異性抗原密切相關(guān)，存在大量免疫復(fù)合體及抗體，對人類健康造成了嚴(yán)重危害，常見類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）和系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）兩種類型［1］。sCR2屬于一種單鏈表面糖蛋白，能夠?qū)^度的炎癥及免疫反應(yīng)進行對抗［2］。但是，現(xiàn)階段，國內(nèi)還沒有風(fēng)濕免疫病患者血清sCR2水平的變化及應(yīng)用價值的相關(guān)報道［3］。本研究對2013年3月至2016年3月我

院收治的風(fēng)濕免疫病患者45例和進行體檢的健康人員40例的臨床資料進行了統(tǒng)計分析，探討了風(fēng)濕免疫病患者的血清可溶性補體受體2（sCR2）水平變化及應(yīng)用價值，現(xiàn)報道如下。

資料與方法

1 一般資料

隨機選取2013年3月至2016年3月我院收治的風(fēng)濕免疫病患者45例，所有患者均符合美國風(fēng)濕病協(xié)會（ARA）制定的RA及 SLE的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)［4］，均知情同意。其中男性患者3例，女性患者42例，年齡31～63歲，平均年齡為46.9±14.6歲。在疾病類型方面，29例患者為RA，其中20例患者處于活動期，9例患者處于非活動期；16例患者為SLE。將這些患者作為研究組，另選取同期來我院進行體檢的健康人員40例為對照組，其中男性患者6例，女性患者34例，年齡30～62歲，平均年齡45.1± 14.2歲。兩組患者各基線資料比較差異均不具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。見表1。

表1 兩組患者各基線資料比較

2 方法

清晨將兩組人員的空腹靜脈血采集下來，采用瑞士帝肯公司生產(chǎn)的Rainbow星酶標(biāo)儀，應(yīng)用美國RaidBio公司生產(chǎn)的sCR2雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗試劑盒，運用固相的ELISA法對兩組人員的sCR2濃度進行測定。同時，將兩組患者的其中3mL靜脈血抽取出來，在血清管中放置血清，放置前對其進行離心，然后凍存在冰箱中，冰箱溫度為-80℃。實驗前先對試劑盒和凍存的血清標(biāo)本的溫度進行平衡，使其達到室溫。將已包被抗體的酶標(biāo)版取出來，位置為sCR2試劑盒，將sCR2標(biāo)準(zhǔn)品及血清加入到每孔中，劑量為20μL，同時將抗人sCR2抗體工作液依次加入到每孔中，劑量為100μL，室溫下將液體甩干，時長為0.5h，然后進行5次洗滌；將抗人sCR2 POD依次加入到每孔中，劑量為150μL，室溫下進行溫育，時長為20min，然后進行5次洗滌；將TMB顯色液依次加入到每孔中，劑量為100μL，室溫下進行溫育，時長為20min；將Stop Solution終止液依次加入到每孔中，劑量為50μL，采用酶標(biāo)儀對A值進行檢測，酶標(biāo)儀波長為450nm，將濃度計算出來。將橫坐標(biāo)設(shè)定為sCR2的標(biāo)準(zhǔn)品濃度，將縱坐標(biāo)設(shè)定為A值，將標(biāo)準(zhǔn)曲線（已知二者之間是多項式關(guān)系）做出來。依據(jù)多形式方程和各樣本A值將sCR2水平計算出來。

3 統(tǒng)計學(xué)分析

結(jié) 果

1 兩組人員的血清sCR2水平比較

組內(nèi)比較，研究組中RA和SLE患者的血清sCR2水平之間的差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；組間比較，研究組中RA和SLE患者的血清sCR2水平均低于對照組（P＜0.05），見表2。

表2 兩組人員的血清sCR2水平比較（μg/L，±s）

表2 兩組人員的血清sCR2水平比較（μg/L，±s）

注：與同組SLE患者比較，#P＜0.05；與對照組比較，*P＜0.05

組別分類例數(shù)sCR2研究組RA29162.1±21.4*#SLE16131.5±27.3*對照組40315.5±61.3

2 研究組中RA和SLE患者的血清sCR2水平和相關(guān)指標(biāo)的相關(guān)性

RA患者的血清sCR2和RF水平無相關(guān)性；SLE患者的血清sCR2和C3水平也無相關(guān)性。

3 RA中處于活動期和非活動期患者的血清sCR2水平比較

RA中處于活動期患者的血清sCR2水平顯著低于非活動期患者（P＜0.05），見表3。

表3 RA中處于活動期和非活動期患者的血清sCR2水平比較（μg/L，±s）

表3 RA中處于活動期和非活動期患者的血清sCR2水平比較（μg/L，±s）

注：與同組非活動期患者比較，#P＜0.05

分類例數(shù)sCR2活動期20129.4±43.3#非活動期9231.5±21.2

討 論

sCR2分布的主要場合為所有成熟濾泡樹突狀細胞及B細胞上，一些T細胞系的原始細胞及上皮細胞上也是其在一些情況下存在的場合，有膜型CR2和可溶型CR2兩種形式，后者只具有前者胞外的活性部位，能夠和后者對配體進行競爭［5-7］。風(fēng)濕免疫病屬于一種自身免疫性疾病，常見RA和SLE兩種類型，主要臨床特征為T細胞及B細胞功能障礙、免疫復(fù)合物沉積等。自身免疫病在B淋巴細胞高度活化產(chǎn)生自身抗體的情況下發(fā)生，其中一個極為重要的因素就是T淋巴細胞無法有效調(diào)控B淋巴細胞［8-10］。本研究結(jié)果表明，組內(nèi)比較，研究組中RA和SLE患者的血清sCR2水平的差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；組間比較，研究組中RA和SLE患者的血清sCR2水平均低于對照組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），充分說明了疾病本身直接而深刻地影響著血清sCR2的減少，其一方面會降低血清sCR2水平，另一方面還能夠有效排除掉不同性別及年齡組之間的差異。在被免疫復(fù)合物及B細胞受體吞噬的C2d的作用下，B細胞被激活，進而促進 B細胞表面CR2濃度的降低。因此，相關(guān)醫(yī)學(xué)學(xué)者認(rèn)為［11-12］，血漿sCR2的清除在循環(huán)免疫復(fù)合物吞噬的C3d的作用下增加、B細胞激活兩個方面降低了血清 sCR2水平。sCR2從細胞表面向細胞質(zhì)中脫落，屬于CR2糖蛋白的細胞外部分。將健康受試者和RA患者的外周血中的T細胞及B細胞收集起來，然后對其進行細胞培養(yǎng)，最后深入分析CR2的脫落，結(jié)果表明，免疫復(fù)合物不斷清除sCR2是RA患者血清sCR2水平降低的主要原因。同時，sCR2對體內(nèi)免疫復(fù)合物的協(xié)助清除及對B細胞功能的調(diào)節(jié)作用在其水平降低的情況下減弱，進而促進自身免疫病發(fā)展速度的極大加快。從這里我們可以看出，在自身免疫病的發(fā)生發(fā)展中，sCR2發(fā)揮著極為重要的作用。

sCR2能夠和膜型CR2對配體進行競爭，從而將抗原結(jié)合膜型CR2的現(xiàn)象阻斷，對過度的炎癥及免疫反應(yīng)進行對抗，使損害機體的現(xiàn)象得到有效的預(yù)防和避免［11］。相關(guān)動物實驗研究結(jié)果顯示［13］，重組sCR2一方面能夠在較低的濃度下將有效作用充分發(fā)揮出來，另一方面也能夠?qū)R的功能及活性結(jié)構(gòu)有效保留下來。從這里我們可以看出，臨床在治療自身免疫病的過程中，sCR2可能發(fā)揮著積極有效的作用。本研究結(jié)果表明，分析RA患者的血清sCR2水平和RF濃度的相關(guān)性，結(jié)果表明，二者無相關(guān)性；分析SLE患者的血清sCR2水平和C3濃度的相關(guān)性，結(jié)果表明，二者也無相關(guān)性。RA中處于活動期患者的血清sCR2水平顯著低于非活動期患者（P＜0.05），充分說明了RA的活動度直接而深刻地影響著血清 sCR2水平?；颊哐錽CR2濃度在疾病活動期顯著降低，無法對炎癥及免疫反應(yīng)進行充分的對抗，從而加重病情。因此，臨床普遍認(rèn)為［14］，血清sCR2水平可能在一定程度上影響著自身免疫病的活動程度。

綜上所述，風(fēng)濕免疫病患者的血清sCR2水平較低，可能在一定程度上影響到疾病的活動程度，值得臨床充分重視。

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（李 凌編輯）

Soluble Complement Receptor 2 Level and Clinical Value in Patients with Rheumatologic Disease

ZENG Hui-fen，LIU Fang，MIU Hui，LIU Xi，SHEN Ming-jing
（Longgang Shenzhen Central Hospital，Shenzhen 518000，China）

Objective To investigate the serum levels of soluble complement receptor 2（sCR2）level and application value in patients with rheumatologic disease.Methods A total of 45 patients with rheumatologic disease were randomly selected，these patients were regarded as the study group，and the other 40 healthy subjects were selected as the control group.sCR2 concentration of the two groups were measured by solid phase the ELISA method.sCR2 levels in RA and SLE and sCR2 levels of active and inactive stage of RA were analyzed.Results sCR2 levels between RA and of SLE in the study group showed no differences（P＞0.05）.sCR2 levels between the study group and the control group were statistically different（P＜0.05）.The serum sCR2 levels and rheumatoid factor in RA patients showed no correlation.The serum sCR2 levels and C3 concentration of SLE patients showed no correlation.The serum sCR2 level in active RA patients was significantly lower than non-active patients（P＜0.05）.Conclusion The serum sCR2 levels in patients with rheumatologic disease are decreased.，Our study suggests there might be a negative correction between sCR2 and active level of rheumatoid arthritis.

Rheumatological disease； Serum levels of soluble complement receptor 2； Levels；Application value

10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2016.11.025

2016-04-20；

2016-09-28

曾惠芬（1982—），女，碩士，主治醫(yī)師，主要從事風(fēng)濕免疫方面的研究。Tel：18928761935；E-mail：zenghuifen82@163.com

風(fēng)濕免疫病患者的血清sCR2水平較低，可能在一定程度上影響到疾病的活動程度。