學(xué)齡兒童奶粉中添加食源性生物活性肽對(duì)免疫調(diào)節(jié)作用的影響

尹 曼，王一俠，唐秉華，陳麗萍，谷瑞增，蔡木易，魏 穎

(1中國(guó)食品發(fā)酵工業(yè)研究院，北京 100015；2北京市蛋白功能肽工程技術(shù)研究中心，北京 100015；3宏樂集團(tuán)有限公司，廣州 510000)

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學(xué)齡兒童奶粉中添加食源性生物活性肽對(duì)免疫調(diào)節(jié)作用的影響

尹 曼1，2，王一俠1，2，唐秉華3，陳麗萍3，谷瑞增1，2，蔡木易1，2，魏 穎1，2

(1中國(guó)食品發(fā)酵工業(yè)研究院，北京 100015；2北京市蛋白功能肽工程技術(shù)研究中心，北京 100015；3宏樂集團(tuán)有限公司，廣州 510000)

應(yīng)用脂多糖(Lipopolysaccharide，LPS)誘導(dǎo)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞，檢測(cè)其中性紅吞噬能力和NO釋放量，應(yīng)用刀豆蛋白A(Concanavalin A，Con A)和LPS誘導(dǎo)小鼠T/B淋巴細(xì)胞檢測(cè)其增殖能力，通過與4種常見市售學(xué)齡兒童奶粉的免疫調(diào)節(jié)能力作比較，評(píng)價(jià)學(xué)齡兒童奶粉中添加食源性生物活性肽對(duì)的免疫調(diào)節(jié)能力。結(jié)果表明：學(xué)齡兒童奶粉中添加食源性生物活性肽對(duì)能夠提高腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬能力、NO釋放量和淋巴細(xì)胞的增殖能力，說明添加食源性生物活性肽的學(xué)齡兒童奶粉具有較好的增強(qiáng)免疫的功能。

學(xué)齡兒童奶粉；免疫調(diào)節(jié)；腹腔巨噬細(xì)胞；脾淋巴細(xì)胞

學(xué)齡兒童處于生長(zhǎng)發(fā)育的突增高峰期，必須供給足夠的蛋白質(zhì)、碳水化合物、脂肪、礦物質(zhì)、維生素等營(yíng)養(yǎng)素，其中奶類是蛋白質(zhì)和礦物質(zhì)的重要來源。學(xué)齡兒童奶粉主要包括牛乳、乳清蛋白、聚葡萄糖、低聚半乳糖、?；撬?、維生素和礦物質(zhì)等，保證學(xué)齡兒童能夠及時(shí)補(bǔ)充生長(zhǎng)所需的各類營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。乳清蛋白易于消化吸收，在提供優(yōu)質(zhì)蛋白的同時(shí)具有清除體內(nèi)自由基、抑菌防癌，其含有較高谷氨酸，能夠保證免疫細(xì)胞的功能[1，2]；脂肪酸主要指不飽和脂肪酸，在補(bǔ)充學(xué)齡兒童生長(zhǎng)所需大量能量的同時(shí)有助于兒童大腦發(fā)育并對(duì)自閉癥、多動(dòng)癥學(xué)習(xí)能力障礙等有一定緩解作用[3]，還可調(diào)節(jié)免疫、脂肪和血糖血脂的代謝[4]；低聚糖中聚葡萄糖在保證產(chǎn)品穩(wěn)定性的同時(shí)兼具益生功效[5]，低聚半乳糖作為母乳中的重要的雙歧因子，可以促進(jìn)胃腸道的消化，調(diào)節(jié)腸道菌群的平衡[6]；?；撬嶙鳛轶w內(nèi)必需的一種氨基酸，與神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育密切相關(guān)，調(diào)節(jié)機(jī)體正常的生理活動(dòng)，并發(fā)揮多種益生功效[7]；微量元素的補(bǔ)充主要來自飲食，是體內(nèi)多種酶的關(guān)鍵組成部分，與機(jī)體的免疫功能及體格智力發(fā)育等關(guān)系密切[8]。

學(xué)齡期兒童的免疫系統(tǒng)發(fā)育尚未成熟，補(bǔ)充足夠的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)對(duì)其生長(zhǎng)發(fā)育具有重要的促進(jìn)和保障作用。目前已研究的免疫增強(qiáng)劑主要包括微生物類、生物因子類、人工合成類、微量元素類以及天然類藥物[9]，微量元素主要為礦物質(zhì)和維生素；其中我國(guó)已將維生素和礦物質(zhì)作為營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑，可以維生素和礦物質(zhì)為原料，制備兒童增免類營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑[10]。近年來，隨著易吸收食源性生物活性肽的研究與發(fā)展，其免疫調(diào)節(jié)等功能越來越引起關(guān)注，有大量研究表明，大豆肽、小麥肽、酪蛋白肽等均具有刺激機(jī)體淋巴細(xì)胞的增殖、NK細(xì)胞的活性、釋放免疫因子等增強(qiáng)機(jī)體免疫功能的功效[11-13]。

配合其他營(yíng)養(yǎng)素，希望能夠增強(qiáng)學(xué)齡兒童的免疫調(diào)節(jié)能力。本實(shí)驗(yàn)從腹腔巨噬細(xì)胞吞噬能力和脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率入手，探討添加易于人體胃腸道吸收的食源性生物活性肽的學(xué)齡兒童奶粉對(duì)免疫調(diào)節(jié)的影響，通過與4種常見市售奶粉作對(duì)比，評(píng)價(jià)自制學(xué)齡兒童奶粉的免疫調(diào)節(jié)功能，為后期奶粉配方的調(diào)整提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

4種市售學(xué)齡兒童奶粉：購于超市，主要含牛乳、脂肪酸、低聚糖、?；撬帷⒕S生素和礦物質(zhì)；添加FDBP學(xué)齡兒童奶粉：自制產(chǎn)品。小鼠(Balb/c，6～8w齡)，北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司；刀豆蛋白A、脂多糖、MTT，Sigma公司；RPMI-1640培養(yǎng)基，Hyclone公司；胎牛血清(FBS)、青霉素鏈霉素溶液(雙抗)，四季青公司；紅細(xì)胞裂解液、CCK-8、緩沖液PBS、Griess試劑，碧云天生物技術(shù)研究所；DMSO，西隴化工股份有限公司；中性紅，Amresco公司。

1.2 儀器與設(shè)備

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 基礎(chǔ)理化分析 蛋白質(zhì)含量的測(cè)定[16]采用國(guó)際GB/T 22492—2008《大豆肽粉》測(cè)定。水分含量的測(cè)定[17]采用國(guó)際GB 5009.3—2010《食品中水分的測(cè)定》測(cè)定學(xué)齡兒童奶粉中水分含量。

1.3.2 學(xué)齡兒童奶粉對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的影響

(1)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞懸液的制備：制備方法參考文獻(xiàn)[14]。小鼠腹腔注射1.5 mL 4 %肉湯淀粉溶液，誘導(dǎo)3d后拉頸處死，無菌收集腹腔液，離心收集細(xì)胞，流式細(xì)胞儀計(jì)數(shù)，用RPMI-1640完全培養(yǎng)液(含10 %胎牛血清、1%雙抗)調(diào)整細(xì)胞密度為1×106個(gè)/mL，100μL /孔加入96 孔細(xì)胞培養(yǎng)板中，于二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 2.5 h，制備96 孔板巨噬細(xì)胞單層。

(2)學(xué)齡兒童奶粉對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞增殖的影響：將細(xì)胞分為空白對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組，實(shí)驗(yàn)組加入奶粉樣品，于二氧化碳培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24 h，棄上清，PBS洗2 次，加入MTT溶液100μL，繼續(xù)培養(yǎng)4h，棄上清，加入DMSO 100 μL，震蕩使溶解，用酶標(biāo)儀測(cè)定OD490nm值。增殖率計(jì)算公式如(1)式：

(1)

(3)學(xué)齡兒童奶粉對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬活性的測(cè)定：將細(xì)胞分為空白對(duì)照組、模型組和實(shí)驗(yàn)組，模型組加入LPS(終濃度30 μg/mL)，試驗(yàn)組分為2 種，即LPS與奶粉共同作用組和奶粉單獨(dú)添加組。每組各設(shè)6 個(gè)復(fù)孔，于二氧化碳培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24 h。之后，洗滌細(xì)胞2 次，每孔加入100 μL 0.1 %中性紅溶液，于二氧化碳培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)1 h，棄上清，每孔加入100 μL細(xì)胞溶解液[含體積分?jǐn)?shù)1 %乙酸的50 %(體積分?jǐn)?shù))乙醇溶液]，室溫放置2 h，待細(xì)胞溶解后，酶標(biāo)儀測(cè)定OD550nm值。吞噬指數(shù)(Pinocytosis index，PI)計(jì)算如(2)、(3)式：

俄羅斯認(rèn)為俄羅斯是歐洲的俄羅斯，但是卻注定漂泊。橫跨歐亞的國(guó)土和以前蠻荒的歷史讓他之于亞洲、歐洲仿佛是禽鳥、野獸之間的蝙蝠?？v使它歷史綿長(zhǎng)，自認(rèn)承拜占庭之正統(tǒng)；縱使它幅員遼闊，坐擁世界上最大的版圖。

(2)

(3)

(4)學(xué)齡兒童奶粉對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞NO生成量的測(cè)定：小鼠腹腔巨噬細(xì)胞經(jīng)樣品干預(yù)24 h后，取各孔培養(yǎng)上清液，Griess法檢測(cè)細(xì)胞NO生成量。

1.3.3 學(xué)齡兒童奶粉對(duì)T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞增殖的影響

(1)小鼠脾細(xì)胞懸液的制備：制備方法參考文獻(xiàn)[15]。將小鼠拉頸處死，無菌取脾臟研磨，離心，收集細(xì)胞，用RPMI-1640完全培養(yǎng)基重懸。流式細(xì)胞儀調(diào)整細(xì)胞濃度。

(2)學(xué)齡兒童奶粉對(duì)脾淋巴細(xì)胞增殖的影響：將調(diào)整好細(xì)胞濃度的脾細(xì)胞懸液(2.25×106個(gè)細(xì)胞/mL)90 μL/孔接入到96 孔板中，將細(xì)胞分為空白對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組，實(shí)驗(yàn)組加入奶粉樣品，于二氧化碳培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24 h，加入CCK-8繼續(xù)培養(yǎng)4h，用酶標(biāo)儀測(cè)定OD450nm值，按(1)式計(jì)算細(xì)胞增殖率。

(3)學(xué)齡兒童奶粉對(duì)B淋巴和T淋巴細(xì)胞增殖的影響：將調(diào)整好細(xì)胞濃度的脾細(xì)胞懸液(2.5×106個(gè)細(xì)胞/mL)80 μL/孔接入到96 孔板中，添加 ConA/LPS(LPS終濃度5 μg/mL、ConA終濃度10 μg/mL)、設(shè)置模型組，ConA/LPS、不同濃度的樣品溶液設(shè)置樣品組，20不完全培養(yǎng)基為空白對(duì)照組，每組4個(gè)復(fù)孔，將培養(yǎng)板置于二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72 h。CCK-8法測(cè)定細(xì)胞增殖率，結(jié)果用刺激指數(shù)(Stimulation index，SI)表示T/B淋巴細(xì)胞增殖的結(jié)果，計(jì)算如(4)、(5)式：

(4)

(5)

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié)果與分析

2.1 學(xué)齡兒童奶粉基礎(chǔ)理化性質(zhì)分析

學(xué)齡兒童奶粉中總蛋白含量占27.96%±0.08%，其中酸溶蛋白即包括肽及氨基酸等較低分子量的蛋白水解物占6.916%±0.721%，極顯著高于4種市售奶粉(附表)，說明自制奶粉中含有較高含量的生物活性肽，更易于學(xué)齡兒童的吸收，補(bǔ)充生長(zhǎng)發(fā)育所需的蛋白質(zhì)。

2.2 學(xué)齡兒童奶粉對(duì)腹腔巨噬細(xì)胞的影響

巨噬細(xì)胞屬于機(jī)體固有免疫細(xì)胞，在非特異免疫反應(yīng)和特異性免疫反應(yīng)中起著關(guān)鍵作用，巨噬細(xì)胞具有可塑性，受到不同抗原刺激會(huì)分化為不同類型的巨噬細(xì)胞，起到促進(jìn)或抑制炎癥反應(yīng)的發(fā)生。經(jīng)典的巨噬細(xì)胞的激活方式是受LPS、干擾素-γ(IFN-γ)及腫瘤壞死因子(TNF)的激活，巨噬細(xì)胞會(huì)增加細(xì)胞毒性物質(zhì)NO和活性氧中間體的釋放，清除細(xì)胞內(nèi)的病原體[16]。本實(shí)驗(yàn)通過LPS誘導(dǎo)腹腔巨噬細(xì)胞，通過細(xì)胞對(duì)中性紅的吞噬能力和NO釋放量的檢測(cè)結(jié)果，來評(píng)價(jià)自制奶粉和常見市售奶粉的免疫調(diào)節(jié)能力。在3個(gè)樣品濃度下5種奶粉均能極顯著的促進(jìn)正常腹腔巨噬細(xì)胞的增殖(P<0.01)，說明幾種奶粉均有很好的增強(qiáng)免疫的能力，具體可通過LPS誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞中性紅吞噬能力和NO釋放量來進(jìn)一步表現(xiàn)出來(圖1)。

附表 學(xué)齡兒童奶粉基礎(chǔ)理化成分含量 單位：%

圖1 學(xué)齡兒童奶粉對(duì)小鼠正常腹腔巨噬細(xì)胞增殖的影響

對(duì)正常腹腔巨噬細(xì)胞而言，3 個(gè)濃度的5 種奶粉均能提高其吞噬中性紅的能力，自制奶粉組的PI檢測(cè)結(jié)果呈“倒U”型，在400 μg/mL時(shí)達(dá)到最大PI值，并優(yōu)于其他幾種市售奶粉組，在200 μg/mL時(shí)優(yōu)于奶粉4，在800 μg/mL時(shí)優(yōu)于奶粉1和奶粉3；對(duì)LPS誘導(dǎo)的腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬能力，幾種奶粉并沒有表現(xiàn)出很好的增強(qiáng)作用，自制奶粉能夠提高LPS誘導(dǎo)的腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬能力，但相比于模型組而言并沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義上的差異，在200、400 μg/mL時(shí)優(yōu)于奶粉3，在800 μg/mL時(shí)優(yōu)于奶粉2、奶粉3和奶粉4(圖2、圖3)。

圖2 學(xué)齡兒童奶粉對(duì)小鼠正常腹腔巨噬細(xì)胞吞噬能力的影響

圖3 學(xué)齡兒童奶粉對(duì)LPS誘導(dǎo)的腹腔巨噬細(xì)胞吞噬能力的影響

3個(gè)濃度下5種奶粉均能促進(jìn)LPS誘導(dǎo)的腹腔巨噬細(xì)胞NO的釋放，且促進(jìn)NO釋放的能力與樣品濃度正相關(guān)。在400、800 μg/mL時(shí)自制奶粉能夠極顯著的促進(jìn)LPS誘導(dǎo)的腹腔巨噬細(xì)胞釋放NO(P<0.01)，并與奶粉3相當(dāng)(圖4)。

圖4 學(xué)齡兒童奶粉對(duì)LPS誘導(dǎo)的腹腔巨噬細(xì)胞NO釋放量的影響

綜合腹腔巨噬細(xì)胞中性紅吞噬能力和NO釋放量檢測(cè)結(jié)果，添加FDBP學(xué)齡兒童奶粉對(duì)腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬能力具有一定的增強(qiáng)作用，奶粉4相對(duì)來說對(duì)腹腔巨噬細(xì)胞的作用效果最好，奶粉4含有相對(duì)較高含量的鐵、鋅，豐富的維生素和牛磺酸；而礦物質(zhì)、維生素作為營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑可以增強(qiáng)腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬能力及T/B淋巴細(xì)胞的增殖能力和CD4/CD8的比值[17，18]，同時(shí)，?；撬峥赏ㄟ^增強(qiáng)免疫細(xì)胞的抗氧化能力來增強(qiáng)機(jī)體免疫[19]，此結(jié)果說明，較高含量的礦物質(zhì)、維生素以及較高含量的?；撬釋?duì)增強(qiáng)免疫力有一定影響，可作為后期奶粉配方調(diào)整的依據(jù)。

2.3 學(xué)齡兒童奶粉對(duì)脾淋巴細(xì)胞增殖的影響

脾臟在特異性免疫反應(yīng)中具有重要的作用，其中B淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化能力是反映機(jī)體體液免疫的重要方法、T淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化能力是反映機(jī)體細(xì)胞免疫的重要方法。LPS可以通過Toll樣受體4(TLR4)和另一種Toll樣受體蛋白R(shí)P105的表達(dá)直接促進(jìn)B淋巴細(xì)胞的分化成熟[20]；Con A可以通過促進(jìn)T淋巴細(xì)胞活化過程中重要信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)膜分子CD3ε以及相關(guān)趨化因子的表達(dá)來促進(jìn)T淋巴細(xì)胞的活化[21]。本實(shí)驗(yàn)采用LPS和ConA對(duì)提取的脾淋巴細(xì)胞進(jìn)行誘導(dǎo)，通過MTT增殖實(shí)驗(yàn)來判斷奶粉對(duì)T-/B-淋巴細(xì)胞增殖的影響，評(píng)價(jià)自制學(xué)齡兒童奶粉和市售奶粉的免疫調(diào)節(jié)功能。

由圖5可看出，3個(gè)濃度的5 種奶粉均能極顯著的促進(jìn)正常脾淋巴細(xì)胞的增殖(P<0.01)，且促進(jìn)增殖的能力與樣品濃度正相關(guān)。在200 μg/mL時(shí)自制奶粉組促進(jìn)脾淋巴細(xì)胞增殖的能力高于其他幾種市售奶粉，在400、800 μg/mL時(shí)的促進(jìn)增殖能力僅低于奶粉2。

圖5 學(xué)齡兒童奶粉對(duì)小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖能力的影響

學(xué)齡兒童奶粉對(duì)LPS誘導(dǎo)的小鼠B淋巴增殖的影響結(jié)果見圖6。由圖6可看出，3 個(gè)濃度下5 種奶粉均能促進(jìn)LPS誘導(dǎo)的B淋巴細(xì)胞的增殖。自制奶粉組在3個(gè)濃度下對(duì)B淋巴細(xì)胞增殖的能力相差不大，與奶粉4相當(dāng)，且均優(yōu)于奶粉2。由圖7可看出，3 個(gè)濃度下5 種奶粉均能促進(jìn)ConA誘導(dǎo)的T淋巴細(xì)胞的增殖，且促進(jìn)增殖的能力與樣品濃度正相關(guān)，這與奶粉對(duì)脾淋巴細(xì)胞增殖的實(shí)驗(yàn)結(jié)果相一致，說明這幾種奶粉具有很好的促進(jìn)T淋巴細(xì)胞增殖的能力。在200 μg/mL時(shí)自制奶粉促進(jìn)T淋巴細(xì)胞增殖的能力與奶粉2相當(dāng)，在400 μg/mL時(shí)優(yōu)于奶粉3并與其他幾種奶粉，在800 μg/mL時(shí)的促增殖能力要遠(yuǎn)高于其他幾種市售奶粉。

圖6 學(xué)齡兒童奶粉對(duì)LPS誘導(dǎo)的B淋巴細(xì)胞增殖的影響

圖7 學(xué)齡兒童奶粉對(duì)ConA誘導(dǎo)的T淋巴細(xì)胞增殖的影響

綜合脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)結(jié)果，添加FDBP學(xué)齡兒童奶粉可促進(jìn)T、B淋巴細(xì)胞的增殖，在800μg/mL時(shí)既能顯著促進(jìn)B淋巴細(xì)胞增殖(P<0.05)又能極顯著促進(jìn)T淋巴細(xì)胞增殖(P<0.01)，且至少優(yōu)于1種奶粉對(duì)學(xué)齡兒童來說，優(yōu)質(zhì)的蛋白對(duì)其生長(zhǎng)發(fā)育、認(rèn)知能力和免疫功能是必需的[22]，生物活性肽易于人體吸收，在供給兒童生長(zhǎng)發(fā)育所需蛋白質(zhì)和氨基酸的同時(shí)，可發(fā)揮其生理功效，將其添加到營(yíng)養(yǎng)輔食中，對(duì)學(xué)齡兒童的生長(zhǎng)發(fā)育具有一定促進(jìn)作用。

3 結(jié)論

對(duì)自制研發(fā)學(xué)齡兒童奶粉的免疫調(diào)節(jié)能力進(jìn)行了研究，結(jié)果表明：對(duì)經(jīng)LPS誘導(dǎo)和正常的小鼠腹腔巨噬細(xì)胞，自制奶粉均能提高其中性紅吞噬能力，促進(jìn)LPS誘導(dǎo)的腹腔巨噬細(xì)胞NO的釋放，并極顯著促進(jìn)腹腔巨噬細(xì)胞的增殖(P<0.01)；自制奶粉對(duì) ConA和LPS 誘導(dǎo)的小鼠T和B淋巴細(xì)胞增殖均有促進(jìn)作用，并極顯著的促進(jìn)脾淋巴細(xì)胞的增殖(P<0.01)，說明自制學(xué)齡兒童奶粉具有較好的增強(qiáng)免疫的功效。與其他4種市售奶粉相比，除了LPS誘導(dǎo)的腹腔巨噬細(xì)胞NO釋放量外，其他檢測(cè)指標(biāo)都至少優(yōu)于一種奶粉，這可能與其小分子生物活性肽有關(guān)。

生物活性肽由于易于吸收且具有一定的功效性，可作為優(yōu)質(zhì)蛋白，同時(shí)作為營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑的微量元素的加入，可協(xié)同增強(qiáng)產(chǎn)品的功效。本次實(shí)驗(yàn)為后期奶粉配方的調(diào)整提供一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。相關(guān)增免奶粉的專利中包括維生素與礦物質(zhì)的配[23]比，胡蘿卜素和多不飽和脂肪酸的配比[24]以及從調(diào)節(jié)腸道菌群入手的復(fù)合益生元的配比等，這些均為配方的優(yōu)化提供一定參考，進(jìn)一步去提高產(chǎn)品的功效?！?/p>

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(責(zé)任編輯 李婷婷)

Effect of School-age Children Milk Powder Added with Food Borne Bioactive Peptides on Immunoregulation in Vitro

YIN Man1，2，WANG Yi-xia1，2，TANG Bing-hua3，CHEN Li-ping3，GU Rui-zeng1，2，CAI Mu-yi1，2，WEI Ying1，2

(1Beijing Engineering Research Center of Protein & Functional Peptides，Beijing 100015，China；2China National Research Institute of Food and Fermentation Industries，Beijing 100015，China；3Wineer Wells Group Limited，Guangzhou 510000，China)

Totally three kinds of school-age children milk powder selected from market，the other one added with food borme bioactive peptides lab were selected as samples.The effect of school-age children milk powder on the proliferation of murine splenocytes was detected by WST-8.The effects of school-age children milk powder on phagocytic activity and the NO production by macrophages were studied in order to evaluate the cell viability of mouse peritoneal.Results showed that the school-age children milk powder added with food borne bioactive peptides had the better immunoregulationon effect，indicating that the milk powder added with food borme bioactive peptides had good immune-modulation.

school-age children milk powder；immunoregulation；macrophages；splenocytes

十三五國(guó)家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃(項(xiàng)目編號(hào)：2016YFD0400604)；國(guó)家高技術(shù)研究發(fā)展計(jì)劃(863計(jì)劃)項(xiàng)目(項(xiàng)目編號(hào)：2013AA102205-02)。

尹曼(1991— )，女，碩士，研究方向：食品營(yíng)養(yǎng)。

魏穎(1981— )，女，博士，高級(jí)工程師，研究方向：功能食品。