急性冠脈綜合征患者局部IL-12水平及與短期不良預(yù)后的關(guān)系

周選民　王立琴▲　劉梅訊　黨書毅

1.湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬太和醫(yī)院介入放射科,湖北十堰442000；2.湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬太和醫(yī)院心內(nèi)科,湖北十堰442000

急性冠脈綜合征患者局部IL-12水平及與短期不良預(yù)后的關(guān)系

周選民1王立琴1▲劉梅訊1黨書毅2

1.湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬太和醫(yī)院介入放射科,湖北十堰442000；2.湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬太和醫(yī)院心內(nèi)科,湖北十堰442000

目的探討急性冠脈綜合征（ACS)患者冠脈竇局部白介素（IL)-12表達水平,及觀察其對ACS患者短期發(fā)生不良預(yù)后的影響。方法選擇湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬太和醫(yī)院2014年7月～2015年4月收治并確診的93例ACS患者為觀察組,同期接受冠脈造影無異常的25例胸痛患者為對照組,所有患者均采集靜脈竇血液,ELISA方法測定血漿IL-12水平。記錄ACS患者臨床資料,住院期間及出院后隨訪30 d的主要心血管不良事件。運用Lo鄄gistic多元回歸分析ACS患者短期內(nèi)發(fā)生主要心血管不良事件的危險因素。結(jié)果ACS組靜脈竇血漿IL-12水平明顯高于對照組,差異有高度統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01)。Logistic多元回歸分析顯示:IL-12水平、年齡、C反應(yīng)蛋白（CRP)、左室射血分?jǐn)?shù)（LVEF)是ACS患者短期內(nèi)（30 d)發(fā)生不良心血管事件的獨立因素（P＜0.05),局部血漿IL-12水平每升高10 ng/L,ACS患者發(fā)生不良心血管事件概率增加約50%（P=0.031)。結(jié)論IL-12在ACS患者靜脈竇血液中表達升高,并可作為ACS患者短期不良預(yù)后的獨立危險因素。

急性冠脈綜合征曰白介素-12曰靜脈竇曰預(yù)后

急性冠脈綜合征（acute coronary syndrome,ACS)是臨床常見的一類致死性心血管疾病,其主要病理生理過程是冠狀動脈粥樣硬化斑塊破裂、血管痙攣和隨之發(fā)生的血小板黏附、聚集及繼發(fā)性血栓形成。近年來,越來越多專家學(xué)者認(rèn)為:炎性反應(yīng)在冠脈粥樣斑塊破裂以及ACS疾病發(fā)展過程發(fā)揮極其重要的作用。促炎和抗炎因子的失衡易導(dǎo)致不穩(wěn)定斑塊發(fā)生、演變和破裂從而誘發(fā)ACS[1-4]。白介素-12（IL-12)是一種具有多種免疫調(diào)節(jié)功能的促炎癥性細胞因子,它作為效應(yīng)最強的NK細胞激活因子和T淋巴細胞誘導(dǎo)因子,能引起Th1、Th2細胞免疫應(yīng)答,參與機體的免疫炎癥反應(yīng)[5]。國內(nèi)外有文獻報道ACS患者體內(nèi)IL-12水平是升高的[6],另外,復(fù)雜病變的UA患者IL-12水平同樣較簡單病變的高[7],提示IL-12可能參與ACS發(fā)病過程。然而,外周血細胞因子水平所受影響因素較多,有時意義并非很大,而對病變局部炎性反應(yīng)的測定將有助于更深入地挖掘疾病的發(fā)病機制[8]。因此,本研究通過檢測ACS患者冠狀動脈局部血漿IL-12的表達水平并隨訪患者3個月不良事件發(fā)生情況,以探討IL-12在ACS發(fā)生、發(fā)展過程中的重要意義。

1　資料與方法

1.1一般資料

選擇湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬太和醫(yī)院心內(nèi)科2014年7月～2015年4月收治并確診為ACS的住院患者93例,平均年齡（60.3±11.3歲),其中不穩(wěn)定型心絞痛（UA) 30例,急性非ST段抬高型心肌梗死（NSTEMI)28例,急性ST段抬高型心肌梗死（STEMI)35例。另外,以同期25例胸痛待查入院,經(jīng)冠脈造影檢查冠脈正常者為對照組,平均年齡（63.5±12.9)歲。ACS診斷符合ACC/AHA 2007標(biāo)準(zhǔn)[9]；并排除現(xiàn)患嚴(yán)重感染性疾病、免疫系統(tǒng)疾病、惡性腫瘤、嚴(yán)重的肝腎功能不全、心功能不全（射血分?jǐn)?shù)＜50%),以及其他原因不能行冠脈介入治療,或者資料不全的患者。所有患者均知情同意,并接受隨訪30 d。

隨訪終點事件:對入選的ACS患者記錄在院及出院后隨訪30 d的心血管不良事件,以主要心血管不良事件如心源性猝死、非致命性心肌梗死、非致命性心力衰竭、頑固性心絞痛及需血運重建為隨訪終點事件。

1.2方法

1.2.1臨床資料收集收集患者入院時一般資料以及住院期間常規(guī)化驗和影像學(xué)檢查結(jié)果。

1.2.2冠脈竇血液采集及測定[9]患者平臥位,常規(guī)消毒鋪巾局部麻醉,Seldinger法穿刺右側(cè)股靜脈,置入6F鞘管,經(jīng)鞘管注入肝素3000 U,經(jīng)靜脈鞘管沿導(dǎo)引鋼絲送入右心導(dǎo)管至冠狀靜脈竇,導(dǎo)管中滯留血液棄去,隨后采集5 mL血液,置于肝素鈉抗凝管中,以3000 r/min,離心10 min,取上清分裝2支試管,-80℃冰箱保存待測。采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA)法檢測血漿IL-12水平,試劑盒購自北京友誼中聯(lián)生物技術(shù)有限公司,由R&D systems（U.S)公司生產(chǎn),操作嚴(yán)格按照產(chǎn)品說明進行。

1.3統(tǒng)計學(xué)方法

采用統(tǒng)計軟件SPSS 20.0對數(shù)據(jù)進行分析,正態(tài)分布的計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（依s)表示,多組間比較采用方差分析,兩兩比較采用LSD-t檢驗。計數(shù)資料以率表示,采用χ2檢驗。ACS組主要心血管不良事件發(fā)生的相關(guān)危險因素的分析采用Logistic多元逐步回歸分析。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1兩組一般臨床特征及局部血漿IL-12水平比較

比較兩組患者性別、年齡等一般資料比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05)。與對照組比較,ACS組患者CRP、LDL-C水平升高,心功能較差。見表1。

表1　兩組患者一般臨床特征與局部血漿IL-12水平（依s)

表1　兩組患者一般臨床特征與局部血漿IL-12水平（依s)

組別例數(shù)性別（男/女)年齡（歲) IL-12（ng/L)總膽固醇（mmol/L)三酰甘油（mmol/L)低密度脂蛋白膽固醇（mmol/L) C反應(yīng)蛋白（mg/L)腦尿鈉肽（ng/L)左心射血分?jǐn)?shù)（%)對照組ACS組P值25 93 18/7 70/23 0.384 63.5±12.9 60.3±11.3 0.583 122.18±15.24 254.67±30.94 0.001 4.27±0.81 4.64±0.73 0.421 1.61±0.65 1.87±0.84 0.294 2.76±1.01 3.15±1.23 0.019 3.75±0.84 9.74±1.86 0.003 127.47±30.14 204.61±29.37 0.009 65.17±20.23 53.42±16.85 0.031

ACS患者基線時的局部血漿IL-12水平顯著高于對照組,差異有高度統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01)。見表1。

2.2心血管不良事件發(fā)生情況

觀察記錄93位ACS患者住院期間和隨訪30 d主要心血管不良事件發(fā)生情況詳見表2。

2.3Logistic多元逐步回歸分析

以主要心血管不良事件發(fā)生與否作為因變量,將IL-12水平、年齡、LDL-C、BNP、CRP、LVEF作為自變量進行Logistic多元逐步回歸分析。結(jié)果顯示IL-12水平、年齡、CRP、LVEF是影響ACS患者短期不良預(yù)后的獨立危險因素（P＜0.05)。見表3。

表2　住院期間及隨訪30 d心血管不良事件發(fā)生情況[n（%)]

表3　Logistic多因素逐步回歸分析結(jié)果

3　討論

隨著社會的發(fā)展,ACS已經(jīng)成為全球范圍內(nèi)威脅人類健康的頭號殺手,每年死于ACS與心臟猝死者數(shù)以千萬計[11]。近年來,對ACS發(fā)病機制研究的不斷深入,發(fā)現(xiàn)ACS發(fā)病的中心啟動環(huán)節(jié)是由于斑塊不穩(wěn)定和血栓形成,其中炎性反應(yīng)發(fā)揮至關(guān)重要的角色。目前,針對ACS患者外周血炎癥因子水平,特別是細胞因子和趨化因子的研究非常多[12],這些炎癥介質(zhì)與ACS的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)[13],其中針對某些炎癥因子的靶向治療已具有一定臨床治療作用[14]。然而,外周血炎癥因子的測定只能一定程度上反映全身炎癥水平,但炎性反應(yīng)有時所受影響因素較多,每個患者全身狀況也不盡相同（年齡、基礎(chǔ)疾病、用藥情況等),因此冠脈粥樣硬化斑塊局部取樣或冠脈竇取血因可避免稀釋效果,從而提高其評價局部心臟炎癥反應(yīng)的敏感性和特異性[15-16]。本實驗采取的冠狀動脈竇取血是觀察炎癥因子與冠心病關(guān)系的方法之一。一般冠狀靜脈竇收集來自左冠脈的大部分血液,因此冠狀靜脈竇血漿炎癥因子濃度更能反映左冠脈及其以遠血管床的炎性反應(yīng)程度[8]。

IL-12是近年來發(fā)現(xiàn)的由p40和p35亞基通過二硫鍵連接而成的異源二聚體分子,作為IL-12細胞因子家族中典型代表,正常情況下主要由單核/巨噬細胞和成熟樹突狀細胞產(chǎn)生[17]。在人類免疫網(wǎng)絡(luò)中, IL-12占據(jù)著十分重要的位置,它是一個非常重要的Th1細胞極化因子,可促進Th1細胞增殖和分化,上調(diào)干擾素-γ的表達,從而在調(diào)節(jié)Th1/Th2細胞反應(yīng)中起重要作用,參與到炎癥級聯(lián)反應(yīng)中；另外,IL-12是誘導(dǎo)細胞毒性T淋巴細胞（CTL)免疫應(yīng)答的最佳細胞因子,啟動細胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng),可殺傷很多組織和細胞,包括促進粥樣斑塊的破裂[18-21]。國內(nèi)外相繼有文獻發(fā)現(xiàn)ACS患者外周血IL-12水平升高,并且可能與其疾病嚴(yán)重程度有關(guān)。然而,ACS患者病變局部IL-12水平如何變化,以及其與患者短期預(yù)后的相關(guān)性研究還非常少。

本文通過檢測93例ACS和25例對照組患者靜脈竇血漿IL-12水平,發(fā)現(xiàn)ACS患者IL-12水平明顯高于對照組,同國外的文獻報道結(jié)果相似[22-23],提示IL-12可能在ACS患者粥樣斑塊局部炎癥發(fā)揮一定作用。進一步對ACS患者進行30 d隨訪,發(fā)現(xiàn)這組患者主要心血管不良事件發(fā)生率總共約29%,其中1/3患者需再次血運重建如支架植入以及約1/3患者出現(xiàn)頑固性心絞痛。進一步的Logistic多元回歸分析發(fā)現(xiàn):IL-12水平、年齡、CRP、LVEF是ACS患者短期內(nèi)發(fā)生不良心血管事件的獨立危險因素。局部血漿IL-12水平每升高10 ng/L,ACS患者發(fā)生不良心血管事件概率增加約50%（P=0.031)。本次研究發(fā)現(xiàn)冠狀竇血漿IL-12在ACS患者中升高,并且是評估ACS患者短期不良預(yù)后的獨立預(yù)測因素,提示IL-12可能通過一系列炎癥通路,參與到炎癥級聯(lián)反應(yīng)過程,從而在ACS發(fā)生、發(fā)展過程中發(fā)揮著重要作用。當(dāng)然由于本研究入選的ACS及正常對照患者較少,對于IL-12能否作為ACS患者的炎癥標(biāo)志物運用于臨床實踐,還需更深入的基礎(chǔ)研究和更大規(guī)模的臨床實驗。

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Local interleukin-12 level and its effect on prognosis of short-term ad鄄verse cardiovascular outcome in patients with acute coronary syndrome

ZHOU Xuanmin1WANG Liqin1▲LIU Meixun1DANG Shuyi2
1.Department of Interventional Radiology,Taihe Hospital Affiliated to Hubei Medical College,Hubei Province,Shiyan 442000,China;2.Department of Cardiology,Taihe Hospital Affiliated to Hubei Medical College,Hubei Province, Shiyan442000,China

Objective To investigate local interleukin-12 level and its effect on prognosis of short-term adverse cardiovascular outcome in patients with acute coronary syndrome(ACS).Methods From July 2014 to April 2015,in Taihe Hospital Affiliated to Hubei Medical College,93 ACS patients were selected as observation group,at same time,25 chest pain patients without coronary artery stenosis confirmed by coronary arteriography were selected as control group. Local IL-12 level in coronary sinus were detected by ELISA,clinical characteristics and major adverse cardiovascular events(MACEs)happened in ACS patients during their hospitalization and 30 days of follow-up were collected.Logistic regression model was used to analysis the risk factors for MACES.Results Compared with control group,local IL-12 level was significantly higher that in patients with ACS,the difference was statistically significant(P＜0.01).Logistic regression analysis showed that IL-12 level,age,CRP level and left ventricular ejection fraction(LVEF)were independent risk factors which may predict the MACEs of ACS patients in a short time(P＜0.05).Local IL-12 level increase per 10 ng/L,the incidence of MACEs happened in ACS patients increase about 50%.Conclusion Local IL-12 level is significantly higher in ACS patients and it can be one of independent risk factors to predict the short-term MACEs of these patients.

Acute coronary syndrome;Interleukin-12;Coronary sinus;Prognosis

R541.4

A

1673-7210(2016)06(b)-0050-04

湖北省自然科學(xué)基金計劃項目（2011CDC049)；湖北省十堰市科學(xué)技術(shù)研究與開發(fā)項目（14Y17)。

周選民（1969.4-),男,碩士,副主任技師,副教授；研究方向:介入放射技術(shù)在冠心病中的應(yīng)用。

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（2016-03-15本文編輯:蘇暢)