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    共混與同軸靜電紡載藥納米纖維的制備、表征及比較*

    2016-12-03 02:33:07邱玉宇盧杭詣聶清欣魏取福
    功能材料 2016年4期

    崔 靜,邱玉宇,盧杭詣,聶清欣,魏取福

    (江南大學(xué) 生態(tài)紡織教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,江蘇 無錫214122)

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    共混與同軸靜電紡載藥納米纖維的制備、表征及比較*

    崔 靜,邱玉宇,盧杭詣,聶清欣,魏取福

    (江南大學(xué) 生態(tài)紡織教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,江蘇 無錫214122)

    采用共混和同軸靜電紡制備了負(fù)載鹽酸四環(huán)素藥物的聚乙烯醇-苯乙烯吡啶鹽(PVA-SbQ)/玉米醇溶蛋白(Zein)復(fù)合納米纖維,在紫外光照射下得到光交聯(lián)載藥PVA-SbQ/Zein復(fù)合納米纖維。利用掃描電鏡(SEM)對不同纖維的形貌和直徑分布進(jìn)行了分析;采用透射電鏡(TEM)對不同靜電紡絲法制備的納米纖維結(jié)構(gòu)進(jìn)行了觀察和比較;強(qiáng)力測試表明同軸靜電紡絲制備的納米纖維力學(xué)性能更強(qiáng);傅里葉變換紅外光譜(FT-IR)曲線表明載藥PVA-SbQ/Zein復(fù)合納米纖維保持了原有的化學(xué)功能基團(tuán);最后比較了兩種方法制備的載藥納米纖維膜的藥物釋放行為。

    靜電紡絲;聚乙烯醇-苯乙烯吡啶鹽;玉米醇溶蛋白;載藥納米纖維

    0 引 言

    隨著人類社會(huì)的發(fā)展,人們對醫(yī)療藥品方面的要求也日益增長,而傳統(tǒng)給藥方式的問題和缺點(diǎn)如藥物利用率低、血藥濃度不穩(wěn)定、給藥頻繁等也逐漸表現(xiàn)出來。近年來,通過靜電紡絲制備的載藥納米纖維因其小尺寸效應(yīng)、多功能性、高效性等特性,受到了廣泛的關(guān)注[1]。納米纖維在載藥以及藥物緩釋方面具有一定的應(yīng)用優(yōu)勢[2]。具有生物相容性的納米纖維在結(jié)構(gòu)上可以模仿人體細(xì)胞外基質(zhì)(EMC),避免排異反應(yīng)[3];納米纖維本身的尺寸小,較高的孔隙率、極大的比表面積,使得納米纖維作為良好的藥物載體,能讓藥物更易被人體吸收[4];靜電紡納米纖維載藥不破壞藥物的活性,能很好地包載藥物;在制備紡絲液和靜電紡過程中,藥物能夠以無定形的形式均勻地分散在納米纖維中,有利于藥物的平緩釋放和吸收利用[5]。另外,基于傳統(tǒng)靜電紡絲基礎(chǔ)上發(fā)展起來的同軸靜電紡技術(shù),為藥物的包載和緩釋提供了更好的載體結(jié)構(gòu),同軸靜電紡可以制備具有皮芯結(jié)構(gòu)的納米纖維,將藥物包載在纖維的內(nèi)層,既能很好地貯存藥物,保持藥物活性,又有利于緩解藥物的突釋現(xiàn)象[6]。

    玉米醇溶蛋白作為天然高分子,具有很好的生物相容性和生物可降解性,成膜性、抗菌性良好[7],十分適合用來構(gòu)建生物材料,用于緩釋的藥物載體等[2],且其來源廣泛,成本低。此外,玉米醇溶蛋白對紫外線具有一定的抵抗能力,經(jīng)紫外照射處理后,玉米醇溶蛋白的強(qiáng)力得到一定增強(qiáng)[8]。聚乙烯醇-苯乙烯基吡啶鹽縮合物(PVA-SbQ),具有較高的感光性能,在大于300 nm的紫外光照射下,SbQ基團(tuán)就會(huì)發(fā)生光二聚反應(yīng),形成具有網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的聚合物[9],與Zein混紡可以提高纖維的力學(xué)性能。我們在前期對靜電紡制備Zein/PVA-SbQ復(fù)合納米纖維進(jìn)行了初步研究[10],但將其作為一種載體負(fù)載藥物的研究還未見報(bào)道。

    本文以玉米醇溶蛋白和聚乙烯醇-苯乙烯吡啶鹽為原料,以藥物鹽酸四環(huán)素為模型,采用共混和同軸靜電紡制備不同結(jié)構(gòu)的PVA-SbQ/Zein載藥納米纖維,并對不同纖維的表面形貌和直徑分布、強(qiáng)力性能、結(jié)構(gòu)、藥物釋放行為進(jìn)行一系列的表征與比較,有望將其應(yīng)用于藥物控釋、創(chuàng)傷敷料等領(lǐng)域。

    1 實(shí) 驗(yàn)

    1.1 實(shí)驗(yàn)試劑與主要儀器

    玉米醇溶蛋白(Zein),Mw=35 000,Sigma-Aldrich (St. Louis, MO) Company;冰乙酸,分析純(AR),上海申翔化學(xué)試劑有限公司;聚乙烯醇-苯乙烯吡啶鹽(PVA-SbQ),168-H型,上海光毅印刷器材科技有限公司;鹽酸四環(huán)素(tetracycline hydrochloride,TCH),分析標(biāo)準(zhǔn)品(USP),阿拉丁試劑有限公司。

    AL204型電子天平,Mettler Toledo公司;85-2A數(shù)顯測速恒溫磁力攪拌器,江蘇金壇榮華儀器制造有限公司;自制靜電紡絲裝置;同軸靜電紡絲裝置,深圳市通力微納科技有限公司;DZF-6210真空干燥箱,南京沃環(huán)科技實(shí)業(yè)有限公司;XQ350-500光催化儀,上海藍(lán)晟電子有限公司;SU1510掃描電子顯微鏡SEM,日本日立公司HITACHI;JEM-2100型透射電子顯微鏡 (TEM),日本JEOL公司;MP0涂鍍層測厚儀,德國Fiscfer公司;KDⅡ-0.05微機(jī)控制電子萬能試驗(yàn)機(jī),深圳凱強(qiáng)利實(shí)驗(yàn)儀器有限公司;NiCOLET iS10 FT-IR傅里葉紅外變換光譜儀,賽黙飛世爾科技(中國)有限公司;TGA/1100SF熱重分析儀,梅特勒-托利多國際貿(mào)易(上海)有限公司。

    1.2 共混靜電紡載藥納米纖維膜的制備

    將m(PVA-SbQ)/m(Zein)為1∶1的混合體系4 g加入到12 g冰乙酸中,常溫下攪拌1 h后加入藥物鹽酸四環(huán)素0.5 g,制得負(fù)載藥物的PVA-SbQ/Zein前驅(qū)體溶液。將前驅(qū)體溶液倒入20 mL帶針頭的注射器內(nèi),針頭內(nèi)徑為1 mm,常溫下進(jìn)行靜電紡絲,滾筒轉(zhuǎn)速200 r/min,紡絲條件為電壓15 kV,速度1 mL/h,接收距離20 cm[10]。

    1.3 同軸靜電紡載藥納米纖維膜的制備

    將m(PVA-SbQ)/m(Zein)為1∶1的混合體系4 g加入到12 g冰乙酸中,常溫下攪拌2 h,制得PVA-SbQ/Zein前驅(qū)體溶液作為同軸紡的外層溶液;將藥物鹽酸四環(huán)素0.5 g溶解于10 mL無水乙醇溶液中,常溫下攪拌1 h,制得鹽酸四環(huán)素前驅(qū)體溶液作為同軸紡的芯層溶液。分別將外層和芯層溶液倒入帶有同軸針頭的注射器中,針頭內(nèi)外層直徑分別為0.51和0.81 mm,常溫下進(jìn)行同軸靜電紡絲,滾筒轉(zhuǎn)速200 r/min,紡絲條件為電壓15 kV,芯層速度0.5 mL/h,外層速度1 mL/h,接收距離20 cm。

    紡絲結(jié)束后將所有樣品在60 ℃下干燥12 h,即得到共混和同軸紡PVA-SbQ/Zein載藥納米纖維膜,然后將纖維膜于功率為400 W的紫外燈下照射2 h得到光交聯(lián)復(fù)合納米纖維膜,用于各種測試表征。

    1.4 樣品表征

    采用SEM、TEM分別對不同紡絲方法制備的PVA-SbQ/Zein載藥納米纖維膜的表面形貌和直徑分布、結(jié)構(gòu)進(jìn)行觀察和分析。使用微機(jī)控制電子萬能試驗(yàn)機(jī)對纖維膜的強(qiáng)度進(jìn)行了測試。用FT-IR對PVA-SbQ/Zein載藥納米纖維進(jìn)行結(jié)構(gòu)分析。用紫外分光光度計(jì)對載藥納米纖維膜的藥物釋放行為進(jìn)行測試。

    2 結(jié)果與討論

    2.1 同軸靜電紡絲裝置

    靜電紡絲結(jié)構(gòu)示意圖如圖1(a)所示,紡絲過程照片及針頭如圖1(b)所示。同軸靜電紡絲時(shí),對于芯層溶液不一定要求其具有可紡性,但是外層溶液很重要,一定要有較好的可紡性才能形成皮芯結(jié)構(gòu)的納米纖維。皮芯結(jié)構(gòu)納米纖維由溶液性質(zhì)和紡絲參數(shù)等共同決定的。一般來說,噴絲頭的直徑與溶液流速有很大關(guān)系,而與溶液特性關(guān)系較小,相關(guān)關(guān)系如式(1)所示[11]

    D~Qt1/2(kγ)-1/6

    (1)

    其中,D為噴絲頭直徑,Qt為靜電紡絲溶液流速,γ為溶液的表面張力,k是溶液的導(dǎo)電性,同軸靜電紡絲中Qt是由芯層流速和外層流速共同決定的,在本文實(shí)驗(yàn)中,針頭外直徑和內(nèi)直徑分別為0.81和0.51 mm。

    圖1 同軸靜電紡絲結(jié)構(gòu)示意圖和紡絲過程照片

    2.2 掃描電鏡(SEM)分析

    如圖2為靜電紡納米纖維膜的掃描電鏡,圖2(a)和(d)分別為共混靜電紡未載藥PVA-SbQ/Zein納米纖維的掃描電鏡與直徑分布圖,可以看出,納米纖維平均直徑為(345±59) nm(表1所示),纖維表面光滑,沒有串珠,在此基礎(chǔ)上負(fù)載藥物鹽酸四環(huán)素得到共混靜電紡載藥PVA-SbQ/Zein納米纖維如圖2(b)所示,纖維表面更光滑平整,纖維平均直徑變大約為(765±21) nm,這可能是由于負(fù)載藥物后紡絲液的粘度和電導(dǎo)率改變導(dǎo)致的。采用同軸靜電紡制備的以藥物為芯層聚合物為外層的載藥PVA-SbQ/Zein納米纖維如圖2(c)所示,圖中可以看出纖維直徑更大,甚至達(dá)到微米級,而且纖維不均率很高,這可能是由于噴絲頭端芯外層復(fù)合液滴被牽伸時(shí)不穩(wěn)定造成的。

    表1 不同PVA-SbQ/Zein復(fù)合納米纖維的平均纖維直徑和直徑分布

    Table 1 Average fiber diameter and diameter distribution of different PVA-SbQ/Zein composite nanofibers

    SampleAveragediameter/nmDiameterdistribution/nma345±59160~585b765±21450~990c980±225560~1870

    2.3 透射電鏡(TEM)

    圖3(a)和(b)分別為共混靜電紡和同軸靜電紡載藥納米纖維的透射電鏡圖,從圖3(a)中可以看出藥物已均勻分散在聚合物中,滿足了靜電紡納米纖維可以均勻載藥的優(yōu)點(diǎn)。

    圖2 共混靜電紡未載藥、載藥和同軸靜電紡載藥PVA-SbQ/Zein納米纖維的掃描電鏡與直徑分布圖

    圖3 共混靜電紡和同軸靜電紡載藥PVA-SbQ/Zein納米纖維的透射電鏡圖

    Fig 3 TEM of electrospun and coaxial electrospun drug-loaded PVA-SbQ/Zein nanofibers

    圖3(b)是同軸靜電紡載藥納米纖維,圖中可以看到明顯的皮芯結(jié)構(gòu),藥物鹽酸四環(huán)素為芯層,PVA-SbQ/Zein聚合物為外層。

    2.4 紅外光譜(FT-IR)分析

    各原料的相容性對制備高性能和高穩(wěn)定性載藥納米纖維是很重要的,二階相互作用譬如靜電吸附作用力、氫鍵結(jié)合力、疏水作用力將會(huì)提高其相容性,這可以從紅外光譜中分析得出,如圖4所示。

    圖4 鹽酸四環(huán)素,Zein,PVA-SbQ與共混靜電紡載藥,同軸靜電紡載藥復(fù)合納米纖維紅外光譜圖

    Fig 4 FT-IR spectra of TCH, Zein, PVA-SbQ, electrospun and coaxial electrospun TCH-loaded PVA-SbQ/Zein composite ultrafine fibers

    2.5 力學(xué)性能測試分析

    纖維的力學(xué)性能表征通過斷裂強(qiáng)度和斷裂伸長率來體現(xiàn)[8],如圖5所示,同軸靜電紡載藥納米纖維膜的斷裂強(qiáng)度約為8.52 MPa,優(yōu)于共混靜電紡載藥納米纖維膜,這可能是因?yàn)橥S靜電紡納米纖維平均直徑較大,纖維不易拉斷從而導(dǎo)致斷裂強(qiáng)度較大。同軸靜電紡納米纖維膜的斷裂伸長率也大于共混靜電紡纖維膜,這可能是由于同軸靜電紡納米纖維直徑分布范圍較廣,在被拉伸時(shí)不同直徑的纖維可以承受不同的力后斷裂,使得斷裂伸長率增大。

    圖5 不同質(zhì)量比的Zein/PVA-SbQ樣品的斷裂強(qiáng)度和斷裂伸長率

    Fig 5 Tensilestrength and elongation at break of different mass ratio of Zein and PVA-SbQ

    2.6 鹽酸四環(huán)素標(biāo)準(zhǔn)曲線

    圖6為鹽酸四環(huán)素在溫度為37.4 ℃、pH值=7.4的磷酸緩沖液中的標(biāo)準(zhǔn)曲線,線性方程為C=0.03094A-0.0135(R2=0.99993),C為TCH的濃度(mg/L),A為360 nm下的吸光度值。

    圖6 鹽酸四環(huán)素在PBS中標(biāo)準(zhǔn)曲線

    2.7 藥物釋放行為

    圖7為共混和同軸靜電紡載藥納米纖維膜藥物釋放曲線,在1 h內(nèi),共混靜電紡載藥納米纖維膜藥物釋放量達(dá)到62.3%,且在3 h后藥物釋放量趨于平衡,累積釋放比為68.2%,而同軸靜電紡載藥納米纖維膜1 h的藥物釋放量僅為21.2%,12 h后藥物釋放量趨于平衡,累積釋放比為58.1%。通過比較可以得出,同軸靜電紡載藥納米纖維更能起到藥物緩釋的效果,這可能是由于藥物包覆在芯層,水分子需先滲透進(jìn)入納米纖維再溶解藥物分子,從而起到緩釋的效果。

    圖7 共混和同軸靜電紡載藥納米纖維藥物釋放行為

    Fig 7 In vitro drug release profiles of the single spinneret nanofibers and core-sheath nanofibers

    3 結(jié) 論

    采用共混和同軸靜電紡絲制備負(fù)載藥物鹽酸四環(huán)素的PVA-SbQ/Zein復(fù)合納米纖維膜。SEM可觀察到復(fù)合納米纖維的形貌和平均直徑。紅外結(jié)果顯示,兩種載藥納米膜中藥物和聚合物材料成功地發(fā)生了共混。力學(xué)性能測試說明同軸靜電紡復(fù)合納米纖維力學(xué)性能更佳。藥物釋放行為比較可以得出同軸靜電紡載藥PVA-SbQ/Zein納米纖維藥物緩釋效果更好,該復(fù)合納米纖維在藥物緩釋和創(chuàng)傷敷料等領(lǐng)域具有潛在應(yīng)用價(jià)值。

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    Preparation, performance and comparison of co-electrospun and coaxial-electrospun drug-loaded PVA-SbQ/Zein composite nanofibers

    CUI Jing, QIU Yuyu, LU Hangyi, NIE Qingxin, WEI Qufu

    (Key Laboratory of Eco-Textiles of Ministry of Education,Jiangnan University, Wuxi 214122, China)

    Drug tetracycline hydrochloride (TCH)-loaded PVA-SbQ/Zein composite nanofibers were fabricated by co-electrospinning and coaxial-electrospinning, respectively. Then the nanofibers were irradiated under UV light to get the cross-linked ones. The morphologies and diameter distributions of drug-loaded PVA-SbQ/Zein composite nanofibers were observed by SEM. TEM was used to compare the structure of the two kind of nanofibers. The strength test showed that the tensile strength of coaxial-electrospun nanofibers was better than the co-electrospun ones. The spectra of FT-IR indicated that composite nanofibers maintained their own original functional groups. Finally, the drug release behavior of drug-loaded nanofibers prepared with two methods was compared.

    electrospinning; PVA-SbQ;zein;drug-loaded nanofibers

    1001-9731(2016)04-04055-05

    國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(51203064)

    2015-06-04

    2015-09-01 通訊作者:魏取福,E-mail: qfwei@jiangnan.edu.cn

    崔 靜 (1991-),女,山東淄博人,在讀碩士,師承魏取福教授,研究方向?yàn)楣δ芗徔棽牧稀?/p>

    TQ342.94

    A

    10.3969/j.issn.1001-9731.2016.04.011

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