美洲品系葡萄葉多酚的提取工藝優(yōu)化及抗氧化活性研究

羅英花，王曉微，臧延青，金成浩

（1.黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，大慶163319；2.黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)食品學(xué)院；3.黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)生命科學(xué)技術(shù)學(xué)院）

美洲品系葡萄葉多酚的提取工藝優(yōu)化及抗氧化活性研究

羅英花1，王曉微2，臧延青2，金成浩3

（1.黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，大慶163319；2.黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)食品學(xué)院；3.黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)生命科學(xué)技術(shù)學(xué)院）

以美洲品系葡萄葉為原料，研究提取液濃度、溫度、時(shí)間及料液比對(duì)多酚提取率的影響，通過(guò)正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化工藝條件，并對(duì)體外抗氧化效果進(jìn)行了研究。結(jié)果表明：最佳工藝條件為乙醇濃度50%，浸提溫度70℃，浸提時(shí)間60 min，料液比1∶15，多酚提取率可達(dá)1.72%。美洲品系葡萄葉多酚對(duì)1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基、羥基自由基（·OH）和超氧陰離子自由基（O2-·）具有良好的清除能力，其清除率在樣品濃度為1.0 mg·mL-1時(shí)，分別為L(zhǎng)9：87.74%、64.92%和65.00%；L10：86.15%、58.00%和51.20%。

多酚；美洲品系葡萄葉；提取；自由基；抗氧化活性

植物多酚（Plant polyphenols）是一類(lèi)分子結(jié)構(gòu)中含有酚官能團(tuán)的化合物［1］，屬于植物的次生代謝產(chǎn)物，廣泛存在于植物的皮、根、莖、葉及果實(shí)中。國(guó)內(nèi)外學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，植物多酚具有多種生物學(xué)活性，如抗氧化、抗腫瘤、抗真菌、抗病毒、抗輻射等活性，它可以清除體內(nèi)代謝過(guò)程中產(chǎn)生的自由基，具有延緩機(jī)體衰老和心腦血管疾病的功效［2-5］。此外，多酚物質(zhì)還可用于制作除臭劑、防銹劑和廢水處理劑等［6-8］。因此，植物多酚在食品、醫(yī)療保健、日用化工、生態(tài)保護(hù)及農(nóng)業(yè)防害等諸多領(lǐng)域中具有很高的利用價(jià)值，已成為當(dāng)前研究的熱點(diǎn)。

關(guān)于葡萄多酚物質(zhì)的提取、測(cè)定、干燥及其抗氧化性、保健功能等方面的研究較多，這些研究的材料主要是葡萄皮（提取率2%～6.97%）和葡萄籽（提取率13.3%）［9-10］，但對(duì)葡萄植株其他材料多酚物質(zhì)的研究才剛剛開(kāi)始，尚未系統(tǒng)進(jìn)行。葡萄在夏季管理中經(jīng)常進(jìn)行摘心、抹芽、除副梢、剪枝等，要扔掉大量的材料，尤其是秋季葡萄成熟采摘后的葡萄植株幾乎全部廢棄，如果能夠從這些廢棄的材料中提取有效的生物活性物質(zhì)，使其變廢為寶，將會(huì)大大提高葡萄栽培的效益［11］。

研究利用正交實(shí)驗(yàn)法優(yōu)化美洲品系葡萄葉多酚的提取工藝，并進(jìn)一步測(cè)定其抗氧化活性，旨在對(duì)葡萄葉多酚的開(kāi)發(fā)利用提供理論基礎(chǔ)，同時(shí)也為開(kāi)發(fā)天然防癌、防衰老食品提供可利用的原料資源。

1 材料和方法

1.1 主要材料與試劑

美洲品系葡萄葉（L9（Noah）、L10（Sweson））由黑龍江省龍?jiān)r(nóng)業(yè)科技開(kāi)發(fā)有限公司提供，采摘于2013年10月。

Folio-Denis、1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）試劑購(gòu)自美國(guó)sigma公司；焦性沒(méi)食子酸、鄰苯三酚、水楊酸、過(guò)氧化氫、鄰菲啰啉、鄰二氮菲、硫酸亞鐵等常規(guī)化學(xué)試劑皆為國(guó)產(chǎn)分析純。

1.2 主要儀器與設(shè)備

UV-2550型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)（紫尤尼柯上海儀器有限公司），KH3200DE型數(shù)控超聲波清洗器（上海滬粵明科學(xué)儀器有限公司），TD4A臺(tái)式離心機(jī)（長(zhǎng)沙英泰儀器有限責(zé)任公司），HH-1數(shù)顯恒溫水浴鍋（江蘇省金壇市榮華儀器制造有限公司），DGG-9140B型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（上海森信實(shí)驗(yàn)儀器有限公司），SHB-ⅢA循環(huán)水式多用真空泵（鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司）。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 葡萄葉多酚提取

將新鮮葡萄葉去雜，清水漂洗并瀝干水分，陰干后粉碎，過(guò)60目篩，準(zhǔn)確稱(chēng)取1 g葡萄葉，于60℃條件下加入50%乙醇（料液的質(zhì)量與體積比為1∶10），回流提取1 h，布氏漏斗進(jìn)行減壓抽濾，濾渣按上述步驟重復(fù)兩次，將兩次濾液合并，在常溫下離心（3 500 rpm·min-1），取上清液獲得多酚粗提物。

1.3.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作

取沒(méi)食子酸樣品，準(zhǔn)確配制濃度為0.2 mg·mL-1的沒(méi)食子酸（標(biāo)準(zhǔn)品）溶液，分別取上述標(biāo)準(zhǔn)溶液0.25、0.50、0.75、1.00、1.25、1.50、1.75 mL于50 mL容量瓶中，加入3.0 mL Folin-Denis（稀釋一倍）試劑，混合搖勻；放置3 min，加入3.0 mL 10%Na2CO3，混合搖勻，于室溫下放置1 h，利用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)在760 nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度值。以標(biāo)準(zhǔn)品溶液濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.3.3 葡萄葉多酚含量的測(cè)定

按照1.3.1節(jié)方法提取多酚，將提取液按1∶10（體積比）稀釋?zhuān)瑴?zhǔn)確吸取0.5 mL于50.0 mL容量瓶中，加入3.0 mL Folin-Denis（稀釋一倍）試劑，混合搖勻；放置3 min，加入3.0 mL 10%Na2CO3，混合搖勻，于室溫下放置1 h，利用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)在760 nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度。根據(jù)沒(méi)食子酸標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得多酚含量，計(jì)算多酚提取率。

式中C0為樣液濃度（mg·L-1）；V0為定容后體積（mL）；V1為測(cè)定時(shí)樣液體積（mL）；V2為測(cè)定吸光度時(shí)所用樣液體積（mL）；w為稱(chēng)取葡萄葉粉末質(zhì)量（mg）。

1.3.4 美洲品系葡萄葉多酚提取的單因素實(shí)驗(yàn)

1.3.4.1 乙醇濃度對(duì)美洲品系葡萄葉多酚提取的影響

稱(chēng)取葡萄葉粉末1 g，料液比為1∶10，提取溫度70℃，浸提1 h，浸提試劑的乙醇體積分?jǐn)?shù)選取6個(gè)不同水平（30%、40%、50%、60%、70%、80%），研究乙醇濃度對(duì)多酚提取率的影響。

1.3.4.2 浸提時(shí)間對(duì)美洲品系葡萄葉多酚提取的影響

稱(chēng)取葡萄葉粉末1 g，浸提試劑為50%乙醇水溶液，料液比為1∶10，提取溫度70℃，浸提時(shí)間分別選取6個(gè)不同水平（30、45、60、75、90、105 min），研究浸提時(shí)間對(duì)多酚提取率的影響。

1.3.4.3 浸提溫度對(duì)美洲品系葡萄葉多酚提取的影響

稱(chēng)取葡萄葉粉末1 g，浸提試劑為50%乙醇水溶液，料液比為1∶10，浸提時(shí)間1 h，浸提溫度分別選取6個(gè)不同水平（30、40、50、60、70、80℃），研究浸提溫度對(duì)多酚提取率的影響。

1.3.4.4 料液比對(duì)美洲品系葡萄葉多酚提取的影響

稱(chēng)取葡萄葉粉末1 g，浸提試劑為50%乙醇水溶液，提取溫度70℃，浸提時(shí)間1 h，料液比（葡萄葉質(zhì)量/乙醇體積）分別選取6個(gè)不同水平（1∶5、1∶10、1∶15、1∶20、1∶25、1∶30），研究料液比對(duì)多酚提取率的影響。

1.3.5 美洲品系葡萄葉多酚提取的正交實(shí)驗(yàn)

在單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果基礎(chǔ)上選取乙醇濃度、浸提時(shí)間、浸提溫度、料液比為4個(gè)因素，以美洲品系葡萄葉中多酚提取率為考察指標(biāo)，用L9正交表安排試驗(yàn)，得出最佳浸提條件。

表1 正交實(shí)驗(yàn)因素水平表Table 1Experimental factors and levels of the orthogonal array design

1.3.6 美洲品系葡萄葉多酚的抗氧化活性測(cè)定

1.3.6.1 美洲品系葡萄葉多酚清除DPPH自由基能力的測(cè)定

準(zhǔn)確配置0.10 mmol·L-1DPPH溶液。不同濃度（分別為25、50、75、100、125 μg·mL-1）的多酚溶液，加入3 mL在室溫下反應(yīng)5 min，測(cè)定519 nm處吸光度值。

式中A2為不加待測(cè)液時(shí)反應(yīng)體系的吸光度值；A1為加入待測(cè)液時(shí)反應(yīng)體系的吸光度值。

1.3.6.2 美洲品系葡萄葉多酚清除羥基自由基（·OH）能力的測(cè)定

采用鄰二氮菲-Fe2+氧化法［12］。取4 mL 0.075 mmol·L-1的磷酸鹽緩沖液（pH 7.4），加入1.5 mL 0.5 mmol·L-1的鄰二氮菲溶液，充分混勻；加入1 mL 0.75 mmol·L-1的Fe2SO4溶液，立即混勻；加入2 mL濃度分別為25、50、75、100、125 μg·L-1的多酚溶液，立即混勻；再加入1.5 mL雙蒸水以補(bǔ)充體積；最后加入1.0 mL濃度為1%的H2O2溶液，輕輕混勻；在37℃反應(yīng)60 min，測(cè)定510 nm處吸光度值。

式中：A0為空白對(duì)照液吸光度值；Ax為加入多酚溶液后吸光度值；Ax0為多酚溶液本底吸光度值。

1.3.6.3 美洲品系葡萄葉多酚清除超氧陰離子（O2-）能力的測(cè)定

取5 mL 0.075 mmol·L-1的磷酸鹽緩沖液（pH 8.2），加入2 mL濃度分別為25、50、75、100、125 μg·mL-1多酚樣液，置于25℃水浴中預(yù)熱20 min。加入已預(yù)熱的4.50 mmol·L-1鄰苯三酚0.10 mL，混勻后置于25℃水浴中反應(yīng)4 min，用8.00 mol·L-1HCl終止反應(yīng)。用雙蒸水調(diào)節(jié)儀器零點(diǎn)，在420 nm處測(cè)定吸光度值，讀數(shù)為A1。以離子水取代鄰苯三酚，獲得吸光度值記為A2。以離子水取代樣品，獲得吸光度值標(biāo)記為A3。

2 結(jié)果與分析

2.1 沒(méi)食子酸標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立

如圖1所示，沒(méi)食子酸在濃度0～8 μg·mL-1內(nèi)與其吸光度值呈良好的線性關(guān)系，回歸方程為y=0.172 6x-0.002 7，相關(guān)系數(shù)R2=0.992 1。

圖1 沒(méi)食子酸標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig.1The standard curve of gallic acid

2.2 美洲品系葡萄葉多酚提取的單因素試驗(yàn)結(jié)果分析

2.2.1 乙醇濃度對(duì)美洲品系葡萄葉多酚提取率的影響

如圖2所示，隨著浸提試劑乙醇濃度的增加，美洲品系葡萄葉多酚的提取率呈先增后減的趨勢(shì)，當(dāng)乙醇濃度為60%時(shí)美洲品系葡萄葉多酚提取率達(dá)到最高值。

2.2.2 浸提時(shí)間對(duì)美洲品系葡萄葉多酚提取率的影響

如圖3所示，隨著浸提時(shí)間的增加，美洲品系葡萄葉多酚的提取率呈先增后減的趨勢(shì)，當(dāng)浸提時(shí)間達(dá)到60 min時(shí)，美洲品系葡萄葉多酚提取率達(dá)到最高值。

圖2 乙醇濃度對(duì)美洲品系葡萄葉多酚提取率的影響Fig.2Effect of ethanol concentration on yield of polyphenol from American strain of grape leaves

圖3 浸提時(shí)間對(duì)美洲品系葡萄葉多酚提取率的影響Fig.3Effect of extraction time on yield of polyphenol from American strain of grape leaves

2.2.3 浸提溫度對(duì)美洲品系葡萄葉多酚提取率的影響

如圖4所示，隨著浸提溫度的升高，美洲品系葡萄葉多酚的提取率呈先增后減的趨勢(shì)，當(dāng)浸提溫度達(dá)到70℃時(shí)，美洲品系葡萄葉多酚提取率達(dá)到最高值。

2.2.4 料液比對(duì)美洲品系葡萄葉多酚提取率的影響

如圖5所示，隨著浸提試劑容量的增加，美洲品系葡萄葉多酚的提取率呈先增后減的趨勢(shì)，當(dāng)料液比達(dá)到1∶20時(shí)，美洲品系葡萄葉多酚提取率達(dá)到最高值。

圖4浸提溫度對(duì)美洲品系葡萄葉多酚提取率的影響Fig.4Effect of extraction temperature on yield of polyphenol from American strain of grape leaves

圖5 料液比對(duì)美洲品系葡萄葉多酚提取率的影響Fig.5Effect of material/liquid ratio on yield of polyphenol from American strain of grape leaves

2.3 美洲品系葡萄葉多酚提取的正交試驗(yàn)結(jié)果分析

如表2所示，影響美洲品系葡萄葉多酚提取效果的主次順序?yàn)锳＞B＞C＞D，即乙醇濃度＞浸提時(shí)間＞浸提溫度＞料液比。由k值分析可知，美洲品系葡萄葉多酚提取的最佳方案為A2B2C2D1，即乙醇濃度50%、浸提時(shí)間60 min、浸提溫度70℃、料液比1∶15時(shí)，美洲品系葡萄葉多酚提取的效果最好（表1），多酚提取率可達(dá)1.72%。

表2 正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果Table 2Orthogonal array design and results

續(xù)表2正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果Continued table 2Orthogonal array design and results

2.4 美洲品系葡萄葉多酚的抗氧化活性

2.4.1 美洲品系葡萄葉多酚對(duì)DPPH自由基的清除作用

如圖6所示，L9、L10品系的葡萄葉和茶多酚對(duì)DPPH自由基的清除率隨溶液質(zhì)量濃度的增加而增大。DPPH自由基半抑制劑量（IC50）分別是L9型葡萄葉多酚為0.151 6 mg·mL-1；L10型葡萄葉多酚為0.229 5 mg·mL-1；茶多酚為0.296 8 mg·mL-1。由此可見(jiàn)，三者對(duì)DPPH的清除能力與濃度之間存在量效關(guān)系，且L9與L10型葡萄葉對(duì)DPPH自由基的清除效果都優(yōu)于同濃度茶多酚，L9葡萄葉多酚對(duì)DPPH自由基的清除能力是茶多酚的1.96倍，L10葡萄葉多酚對(duì)DPPH自由基的清除能力是茶多酚的1.29倍，即L9＞L10＞茶多酚。

圖6 美洲品系葡萄葉多酚（L9、L10）對(duì)DPPH自由基清除作用Fig.6Effect of polyphenol from American strain of grape leaves on DPPH radical inhibition

2.4.2 美洲品系葡萄葉多酚對(duì)羥基自由基（·OH）的清除作用

如圖7所示，L9、L10品系的葡萄葉和茶多酚對(duì)羥基自由基的清除率隨溶液質(zhì)量濃度的增加而增大。羥基自由基半抑制劑量（IC50）分別是L9型葡萄葉多酚為0.850 3 mg·mL-1；L10型葡萄葉多酚為0.955 mg·mL-1；茶多酚為0.997 4 mg·mL-1。由此可見(jiàn)，三者對(duì)羥基自由基的清除能力與濃度之間存在量效關(guān)系，且L9與L10型葡萄葉對(duì)羥基自由基的清除效果都優(yōu)于同濃度茶多酚，L9葡萄葉多酚對(duì)羥基自由基的清除能力是茶多酚的1.17倍，L10葡萄葉多酚對(duì)羥基自由基的清除能力是茶多酚的1.03倍，即L9＞L10＞茶多酚。

圖7 美洲品系葡萄葉多酚（L9、L10）對(duì)羥基自由基的清除作用Fig.7Effect of polyphenol from American strain of grape leaves on superoxide anion inhibition

2.4.3 美洲品系葡萄葉多酚對(duì)超氧陰離子（O2－）的清除作用

如圖所示，L9、L10品系的葡萄葉和茶多酚對(duì)超氧陰離子的清除率隨溶液質(zhì)量濃度的增加而增大。超氧陰離子半抑制劑量（IC50）分別是L9型葡萄葉多酚為0.839 7 mg·mL-1；L10型葡萄葉多酚為0.849 7 mg·mL-1；茶多酚為1.014 2 mg·mL-1。由此可見(jiàn)，三者對(duì)超氧陰離子的清除能力與濃度之間存在量效關(guān)系，且L9與L10型葡萄葉對(duì)超氧陰離子的清除效果都優(yōu)于同濃度茶多酚，L9葡萄葉多酚對(duì)超氧陰離子的清除能力是茶多酚的1.21倍，L10葡萄葉多酚對(duì)超氧陰離子的清除能力是茶多酚的1.19倍，即L9＞L10＞茶多酚。

圖8 美洲品系葡萄葉多酚（L9、L10）對(duì)超氧陰離子的清除作用Fig.8Effect of polyphenol from American strain of grape leaves on hydroxyl radical inhibition

3 結(jié)論與討論

通過(guò)對(duì)美洲品系葡萄葉多酚的提取工藝進(jìn)行優(yōu)化，得出的最佳提取條件為：乙醇濃度50%，浸提溫度70℃，浸提時(shí)間60 min，料液比1∶15，多酚提取率可達(dá)1.72%。研究表明美洲品系葡萄葉多酚提取率低于其他品種，如新疆瑣碎葡萄葉黃酮提取率為4.70%［13］，新疆吐魯番葡萄葉片黃酮提取率為5.33%［5］，其原因可能與材料采集季節(jié)有關(guān)。在此條件下提取的美洲品系葡萄葉多酚進(jìn)行抗氧化試驗(yàn)的結(jié)果顯示：美洲品系葡萄葉多酚對(duì)DPPH自由基、羥基自由基以及超氧離子具有很高的清除能力，尤其超氧陰離子清除能力（65%）顯著高于文獻(xiàn)報(bào)道（25%）［14］，其原因可能為不同品種葡萄葉中所含多酚種類(lèi)與含量不同所致。結(jié)果表明，美洲品系葡萄葉多酚含量雖低于其他品種葡萄葉，但其提取物具有較強(qiáng)的體外抗氧化能力。研究所用材料采摘于10月，屬于葡萄成熟后的廢棄資源，因此可為美洲系葡萄葉的廢棄資源有效利用以及以葡萄葉為原料的功能性食品、藥品和化妝品的開(kāi)發(fā)提供一定的科學(xué)依據(jù)。

［1］魯玉妙，馬惠玲.我國(guó)植物多酚研究文獻(xiàn)計(jì)量及研究熱點(diǎn)分析［J］.食品科學(xué)，2012（17）：290-296.

［2］馬萍，郭希娟，李思荻.響應(yīng)面法優(yōu)化紅小豆中總酚的提?。跩］.黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)學(xué)報(bào)，2011，23（5）：64-68.

［3］Li A N，Li S，Zhang Y J，et al.Resources and biological activities of natural polyphenols［J］.Nutrients，2014，6（12）：6020-6047.

［4］Khan H Y，Zubair H，F(xiàn)aisal M，et al.Plant polyphenol induced cell death in human cancer cells involves mobilization of intracellular copper ions and reactive oxygen species generation：a mechanism for cancer chemopreventive action［J］.Mol Nutr Food Res，2014，58（3）：437-446.

［5］江蓉.酯化淀粉制取工藝條件研究［J］.赤峰學(xué)院學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2015，31（2上）：48-49.

［6］李洪飛，李文杰，孫大慶，等.微波輔助提取綠豆多酚的工藝研究［J］.黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)學(xué)報(bào)，2015，27（5）：116-122.

［7］李華.現(xiàn)代葡萄酒工藝學(xué)［M］.西安：西安人民出版社，2000.

［8］江念，陳根洪，鄭小江，等.正交法優(yōu)化烏蘞莓多糖提取工藝研究［J］.湖北民族學(xué)院學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2015（3）：334-336.

［9］李鳳英，崔蕊靜，李春華.從葡萄葉中提取多酚物質(zhì)［J］.食品與發(fā)酵工業(yè)，2005，31（4）：147-149.

［10］熊何健，陳益梅，吳國(guó)宏，等.葡萄籽多酚提取條件的優(yōu)化［J］.工藝技術(shù)，2004，25（4）：115-116.

［11］徐懷德，羅安偉，師俊玲，等.天然產(chǎn)物提取工藝學(xué)［M］.北京：中國(guó)輕工業(yè)出版社，2006.

［12］李浩，賀幫亮，洪松，等.大蒜渣中多酚物質(zhì)的提取研究［J］.安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014，42（30）：10669-10672.

［13］金鳴，蔡亞欣，李金榮，等.鄰二氮菲-Fc2+氧化法檢測(cè)H2O2/Fe2+產(chǎn)生的羥自由基［J］.生物化學(xué)與生物物理學(xué)進(jìn)展，1996，23（6）：553-555.

［14］古麗巴哈爾·阿巴拜克力.新疆瑣瑣葡萄葉總黃酮提取工藝及抗氧化活性［J］.食品科學(xué)，2013，34（13）：104-108.

Study on the Extraction Process Optimization of Polyphenols from American Strain of Grape Leaves and its Antioxidant Activity

Luo Yinghua1，Wang Xiaowei2，Zang Yanqing2，Jin Chenghao3
（1.College of Animal Science and Technology，Heilongjiang Bayi Agricultural University，Daqing 163319；2.College of Food Science，Heilongjiang Bayi Agricultural University；3.College of Life Science and Technology，Heilongjiang Bayi Agricultural University）

American grape leaves were used as raw materials to study the effect of extraction solvent，temperature，time，and solid to liquid ratio on the extraction rate of polyphenols，the process conditions were optimized by orthogonal experiment，and antioxidant activities were tested as well.The results showed that the optimized extraction conditions were as follows：extraction solvent 50% ethanol，temperature 70℃，time of 60 min，solid to liquid ratio 1∶15.Under these conditions，the extraction rate of polyphenols was 1.72%.The polyphenols extraction showed strong scavenging activities on 1，1-diphenyl-2-picrylhydrazyl（DPPH）radical，hydroxyl redical（·OH）and superoxide redical（O2-·）methods，the scavenging rates for the radicals were 87.74%、64.92%and 65.00%（L9）；86.15%、58.00%and 51.20%（L10），respectively，when the concentration was 1.0 mg·mL-1.

polyphenols；american strain of grape leaves；extraction；free redical；antioxidant activity

Q78

A

1002-2090（2016）04-0055-06

10.3969/j.issn.1002-2090.2016.04.013

2015-06-10

黑龍江省留學(xué)歸國(guó)人員科學(xué)基金項(xiàng)目（LC2015036）；黑龍江省博士后科研啟動(dòng)資助項(xiàng)目（LBH-Q13132）；留學(xué)人員科技活動(dòng)項(xiàng)目擇優(yōu)資助；學(xué)成、引進(jìn)人才科研啟動(dòng)計(jì)劃項(xiàng)目（XYB2013-24）；黑龍江省大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計(jì)劃項(xiàng)目（201510223003）。

羅英花（1976-），女，助理實(shí)驗(yàn)師，延邊大學(xué)畢業(yè)，現(xiàn)主要從事中草藥藥理方面的研究工作。

金成浩，男，教授，博士研究生導(dǎo)師，E-mail：jinchenghao3727@qq.com。