氯霉素殘留檢測方法研究進展

劉 閆，王康康（黃淮學院化學化工系，河南 駐馬店 463000）

氯霉素殘留檢測方法研究進展

劉 閆，王康康
（黃淮學院化學化工系，河南 駐馬店 463000）

氯霉素殘留對人體的危害極大，因此在國際上有關氯霉素的檢測方法備受關注和研究。起初是利用微生物進行定性檢測，目前應用較多的是先進檢測技術的聯(lián)用，例如：UPLC-MS/MS，LC-MS等技術使氯霉素的檢測限、精密度和回收率等方面都得到了極大提高。

氯霉素；檢測方法；研究進展

目前有關氯霉素的檢測方法有十幾種，在這些現有檢測方法中，公認的方法是色譜法和色譜-質譜聯(lián)用法，但此技術仍需不斷地改進。在國內外對氯霉素殘留量的檢測方法仍在不斷的研究中。

1　色譜法

1.1薄層色譜法

莫金娜［1］等利用薄層色譜方法（TLC）檢測化妝品中的氯霉素殘留量。該方法是先用乙醇溶劑提取，以硅膠制板為載體、在展開劑為三氯甲烷-甲烷（85∶15）的薄層條件下鑒別化妝品中的氯霉素殘留量。從此實驗得知，所檢驗的樣品最小的檢限度為1.0mg/g。

1.2高效液相色譜-熒光檢測法

潘瑩宇等［2］高效液相色譜-熒光檢測方法（HPLC-FL）檢測牛奶中氯霉素殘留量。氯霉素易與鋅粉發(fā)生還原反應，將氯霉素與鋅粉反應后的溶液在緩沖溶液（醋酸鈉-醋酸）條件下可發(fā)生熒光衍生化反應，之后加入熒光胺丙酮溶液。將待測品逐漸稀釋后在一定的色譜條件下進行檢測。上述實驗得出，氯霉素檢測檢出限為0.2μg/L。運用此方法檢測牛奶中氯霉素的殘留量準確度高，靈敏度好，操作較簡便等優(yōu)點。

1.3超高效液相色譜-串聯(lián)質譜法

彭麟等［3］利用超高效液相色譜-串聯(lián)質譜（UPLC-MS/MS）方法檢測黃鱔肌肉中氯霉素殘留量。此實驗首先在黃鱔肌肉樣品中加入無水硫酸鈉和氯化鈉溶液，用堿性乙酸乙酯提取兩次。合并兩次提取液，在45℃水浴中氮吹至干。之后用5%甲醇溶液復溶，再加正己烷除脂，將下層水相過0.22μm濾膜，進樣檢測。上述實驗得出氯霉素檢測限為0.1μg/kg。本實驗使用的UPLC-MS/MS方法具有精密度高，重現性好等優(yōu)點，同時可以在保證回收率的基礎上有效地提高了檢測效率。

1.4氣相色譜-負化學離子源質譜檢測法

潘玉香等［4］利用氣相色譜-負化學離子源質譜（GC-MS/NCI）檢測方法對各種動物源性食品中氯霉素殘留量進行檢測。此實驗方法以氘代氯霉素（D5-CAP）為內標物，用乙酸乙酯對各類樣品中的氯霉素進行提取，用正己烷和40g/LNaCl溶液液液分配除脂肪，經硅烷化衍生后由GC-MS/NCI在選擇離子監(jiān)測模式下進行測定。此實驗得出動物源性食品中氯霉素殘留量的檢出限為0.5μg/kg。GC-MS/NCI檢測方法具有分析快速，操作簡便等優(yōu)點。

2　免疫分析法

免疫分析法在食品分析中正得到越來越廣泛的運用，免疫分析法具有特異性、靈敏度高、快速和低成本等優(yōu)點，能夠用于樣品的定性篩選，也能夠對樣品進行定量測定以確定樣品中氯霉素的含量，常用的有下面三種。

2.1免疫膠體金法

用于快速檢測樣品中氯霉素殘留含量的膠體金免疫層析試紙條，采用免疫競爭法，將抗氯霉素單克隆抗體-膠體金復合物包被在膠體金結合墊上，并將人工合成的氯霉素抗原包被在硝酸纖維素薄膜表面作為檢測線，其與待測樣品中氯霉素競爭結合膠體金標記的氯霉素單克隆抗體。李余動等［5］利用免疫膠體金法檢測蝦肉等組織試樣時，靈敏度最低值可達到1ng/ml，試紙條具有較高的靈敏度及特異性，操作便捷，穩(wěn)定可靠，可作為氯霉素殘留現場監(jiān)控的有效篩檢手段。

2.2酶聯(lián)免疫法

酶聯(lián)免疫法（ELISA）又稱酶標法，是測定水產品中氯霉素含量的一種好方法。張勝幫等［6］利用酶聯(lián)免疫檢測方法測定水產品中殘留氯霉素殘留量。實驗得出∶樣品在0.025～2.00ng/mL測定范圍內呈良好的線性關系，檢出限為0.009ng/mL。ELISA法具有檢測快速快、靈敏度高、穩(wěn)定性好、適用范圍寬等優(yōu)點。

2.3化學發(fā)光酶免疫法

張啟模等［7］以人工合成的氯霉素-牛血清白蛋白免疫Balb/c小鼠，應用雜交瘤技術獲得了一株分泌抗氯霉素單克隆抗體的雜交瘤細胞5D7，并對其進行效價、親和力和特異性測定。應用上述單抗建立的檢測氯霉素的化學發(fā)光酶免疫分析法，檢出限達0.0025μg/L可滿足我國對水產品中氯霉素殘留檢測的要求。

3　其他新型的檢測技術

3.1分子印跡膜技術

李歡歡等［8］合成了對氯霉素具有快速響應能力的聚苯胺分子印跡膜，實驗結合差示脈沖伏安法建立了對氯霉素殘留量的檢測方法，同時將聚苯胺分子印跡膜用作電化學傳感器可以用以測定氯霉素眼藥水中的氯霉素。這種分子印跡膜制備方法具有操作簡單，耗時短，分子印跡膜均勻穩(wěn)定等優(yōu)點。

3.2比色適配體傳感器

高慧菊等［9］提出了一種新穎的比色適配體傳感器用于快速檢測魚肉和鵝肉中氯霉素。本方法的建立是基于核酸適配體特異性結合目標物的高選擇性能和氧化鈀納米顆粒標記聚合酶螯合物的雙重信號放大效應，它能特異性、靈敏性地快速檢測樣品中痕量氯霉素。該方法已經成功地應用于分析魚肉和鵝肉樣品中的氯霉素，其結果與傳統(tǒng)的酶聯(lián)免疫吸附測定方法相一致。

4　結語

氯霉素殘留問題已引起國際組織和許多國家和地區(qū)的高度重視，氯霉素殘留快速檢測方法的研究備受關注。氯霉素殘留量的檢測還有其他方法，如毛細管電泳法、生物傳感器法、超臨界流體色譜等。同時各種技術的聯(lián)用具有很重要的研究意義。

［1］潘瑩宇，許茜，康學軍等.高效液相色譜-熒光檢測法測定牛奶中氯霉素的殘留量［J］.色譜，2013（23）:577-580

［2］彭麟，郭大偉，張偉等.UPLC-MS/MS法檢測黃鱔中氯霉素類藥物殘留［J］.畜牧與獸醫(yī)，2016，48（04）:30-35

［3］潘玉香，董靜，呂建霞等.GC-MS/NCI穩(wěn)定同位素稀釋技術檢測動物源性食品中氯霉素的含量［J］.分析試驗室，2010，29（02）:720-1000.

［4］李余動，張少恩，吳志剛等.膠體金免疫層析法快速檢測氯霉素殘留［J］.中國食品衛(wèi)生雜志，2005（05）:416-419.

［5］張勝幫，董士華.中國食品學報.酶聯(lián)免疫檢測法測定水產品中殘留氯霉素的研究［J］.2006（06）:1009-7848.

［6］張啟模，楊姝，馬玲.氯霉素及其在畜水產品中殘留檢測技術研究進展動物醫(yī)學進展［J］.2011，32（8）:12-16.

［7］李歡歡，常志顯等.聚苯胺分子印跡膜電化學傳感器檢測氯霉素［J］.化學研究，2013（06）:11-1008.

［8］高慧菊，潘道東，孫楊贏等.魚肉和鵝肉中氯霉素的比色適配體傳感器快速檢測［J］.現代食品科技，2016，32，5.

10.16640/j.cnki.37-1222/t.2016.18.005