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    丙肝核心抗原和丙肝抗體聯(lián)合檢測在丙肝感染診斷中的臨床價值

    2016-11-28 09:47連麗琴
    醫(yī)學信息 2016年29期
    關鍵詞:丙型肝炎

    連麗琴

    摘要:目的 探討丙肝核心抗原(HCV-cAg)和丙肝抗體(HCV-Ab)聯(lián)合檢測對提高丙肝患者早期感染診斷中臨床價值。方法 對324例臨床標本同時檢測HCV-cAg和HCV-Ab,并對HCV-cAg陽性標本和HCV-cAg陰性且HCV-Ab陰性標本進一步檢測丙肝RNA(HCV-RNA)。結果 單獨檢測HCV-Ab,丙肝的檢出率為22.5%,聯(lián)合檢測HCV-cAg和HCV-Ab則丙肝的檢出率為27.8%,在73例HCV-Ab陽性的標本中,HCV-cAg的陽性率達41.1%;在251例HCV-Ab陰性的標本中,HCV-cAg陽性的例數(shù)為17例,丙肝的漏診率達6.8%;如果以HCV-RNA檢測結果為標準,則HCV-cAg與HCV-RNA檢測結果的符合率達93.6%,特異性達98.3%。結論 HCV-cAg和HCV-RNA具有高度的相關性,聯(lián)合檢測HCV-cAg核心抗原和HCV-Ab抗體是防范HCV廣泛傳播和診療的有效手段。

    關鍵詞:丙型肝炎;丙肝核心抗原;丙肝抗體;丙肝RNA,酶聯(lián)免疫法

    根據(jù)統(tǒng)計顯示,目前全球丙肝的感染人數(shù)約為2億人,而我國丙肝感染率大概為3.2%[1]。約60%的丙肝感染都是無癥狀的,發(fā)病隱蔽,易轉慢性至纖維化,所以早期正確診斷病毒感染,防止病毒繼續(xù)傳播尤顯重要。丙肝篩查的常用方法是檢測丙肝抗體,其次是檢測丙肝核心抗原和丙肝RNA,HCV-RNA由于其價格昂貴限制其廣泛使用;根據(jù)國內(nèi)外近十幾年的許多研究報道顯示,HCV-cAg的靈敏度與HCV-RNA接近[2],且價格便宜,所以其使用所以其應用越來越受到重視。本文將對我院高危丙肝患者首次診查的血清標本進行HCV-cAg、HCV-Ab和HCV-RNA檢測,分析HCV-cAg和HCV-Ab的聯(lián)合檢測在提高丙肝感染診斷中的價值。

    1 資料與方法

    1.1一般資料 所有樣本來自我院2014年1月~2015年1月的消化內(nèi)科、傳染科、血透科、腫瘤科和急診科等共計324例,年齡分布:16~85歲,中位年齡:42歲,其中男性:185例,女性139例,所有患者標本均為首次就診所采集的標本。

    1.2試劑和儀器 丙肝抗體試劑來自廈門英科新創(chuàng)公司,丙肝核心抗原試劑來自湖南景達生物公司,HCVRNA核酸擴增PCR檢測試劑由廣州達安基因公司提供,所用內(nèi)標質控品購置衛(wèi)生部臨檢中心,達安基因DA7600熒光擴增儀PCR一臺,雅培公司I2000全自動免疫分析儀一臺。

    1.3分析檢測方法 丙肝抗體和丙肝核心抗原檢測采用標準酶聯(lián)免疫吸附試驗法(ELISA),按全自動免疫分析儀SOP文書標準化操作,丙肝RNA檢測采用DA7600熒光擴增PCR儀,所有檢測都與質控品同步進行確保結果準確可靠。324例臨床標本同時檢測HCV-Ab、HCV-cAg和HCV-RNA;對HCV-cAg檢測結果與HCV-RNA檢測結果進行比較分析。

    1.4結果判定 酶免法結果判定標準以S/CO≥1為陽性,PCR結果判定標準為≥500IU為陽性。

    1.5統(tǒng)計學方法 采用SPSS 18.0對結果進行統(tǒng)計學分析,以P>0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

    2 結果

    2.1 324例可疑標本檢測結果分析 本文對324例可疑標本分別進行HCV-cAg核心抗原、HCV-Ab抗體和HCV-RNA檢測,結果顯示,HCV-Ab抗體陽性標本73例,陽性率22.5%(73/324);HCV-cAg核心抗原陽性47例;在HCV-cAg、HCV-Ab均為陰性的234例標本和47例HCV-cAg核心陽性的標本中HCV-RNA陽性占48例。

    2.2丙肝核心抗原和丙肝RNA檢測結果比較抗原 在47例HCV-cAg核心陽性陽性的標本中,丙肝RNA的陽性例數(shù)為44例,與丙肝RNA檢測結果的符合率達93.6%(44/47);在234例丙肝核心抗原和丙肝抗體檢測均為陰性的標本中,丙肝RNA的陽性例數(shù)為4例。

    2.3 丙肝核心抗原和丙肝抗體聯(lián)合檢測結果比較 在73例丙肝抗體陽性的標本中,丙肝核心抗原陽性的例數(shù)為30例;丙肝核心抗原的陽性率達41.1%(30/73);在251例標本丙肝抗體陰性的標本中,丙肝核心抗原陽性的例數(shù)為17例,如果僅檢測丙肝抗體,則將有17例丙肝漏診,漏診率達6.8%(17/251),HCV-Ab陽性73例與漏診丙肝17例之和為90例,聯(lián)合檢測HCV-cAg核心抗原和HCV-Ab抗體所得丙肝陽性率為27.8%(90/324)。兩者相比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

    3 討論

    HCV病毒呈球形, 直徑小于80 nm,隸屬于黃病毒科,大約有9.6 Kbp,其為單股正鏈RNA病毒。 HCV病毒具有顯著異源性和高度可變性,HCV基因組各部位的變異程度不相一致;HCV-cAg核心抗原是由HCV最保守的C區(qū)編碼基因產(chǎn)生,研究顯示,HCV-cAg核心抗原檢查對HCV早期感染診斷相依性高[3-4]。目前實驗室檢測HCV-Ab抗體所包被的基因抗原是由基因工程制備的第三代抗原,主要是衣殼蛋白,NS2,NS3,NS4和NS5等,它的敏感度和特異性都較第二代抗原大幅提高,但是由于廠家基因抗原生產(chǎn)工藝的不同以及包被基因抗原比例不同,導致各實驗室檢出丙肝抗體的陽性率不完全相同,這樣容易導致檢出丙肝抗體的漏診或誤診,因此對在實驗室中只查HCV-Ab抗體可能與臨床表現(xiàn)不符。采用HCVRNA檢查,要求實驗室建制嚴格且成本高,限制了在基礎實驗室使用。隨著第四代基因技術的成熟,HCV-cAg核心抗原的檢測也更加廣泛的引用于臨床。

    本文研究顯示,在47例HCV-cAg核心抗原陽性標本組中,用HCVRNA檢出陽性44例,HCV-cAg檢測率與HCVRNA檢出率相符為93.6%,這與Akihiko Kato[5]和Keslia[6]等結論相似。因為根據(jù)病毒感染規(guī)律,其HCV-cAg核心抗原在HCV感染后大約14~70 d就可以在血液中檢測到[7],它在體內(nèi)產(chǎn)生的時間相較HCVRNA出現(xiàn)約晚1 d[8],而當HCV-Ab抗體出現(xiàn)后,原來出現(xiàn)的HCV-cAg核心抗原等會被抗體中和消失。但也有一些免疫力缺陷患者從不產(chǎn)生HCV-Ab抗體,導致HCV-Ab抗體可以在患者體內(nèi)長時間存在。所以HCV-cAg核心抗原檢測可以防止早期丙肝感染患者和免疫缺陷感染丙肝的漏診。

    本文表2可見,單用HCV-Ab抗體對所有標本檢測,丙肝檢出率為22.5%,共有17例HCV-cAg核心抗原陽性標本漏檢,漏診率達6.8%,這提示只用HCV-Ab抗體檢查可能發(fā)現(xiàn)不了HCV-cAg核心抗原陽性標本,容易造成丙肝漏診,這也與張磊[9]等曾報道的結果相同;由表2可知如果聯(lián)合檢測HCV-Ab抗體和HCV-cAg核心抗體,可以將丙肝檢出率提高到為27.8%,對比用HCV-Ab抗體檢測,差異有顯著性(P<0.05),其結論和陳開慧[10],王燕[11]和楊靜[12]等的報道相似,進一步證實聯(lián)合篩查HCV-cAg核心抗原和HCV-Ab抗體可以縮短窗口期,提高丙肝的檢出率,防止丙肝漏診。

    綜上所述,HCV-cAg核心抗原與HCVRNA的檢測結果高度符合,且HCV-cAg核心抗原檢測方法簡單,價格低廉,易于在基層醫(yī)院推廣使用,聯(lián)合檢測HCV-cAg核心抗原和HCV-Ab抗體是防范HCV廣泛傳播和診療的有效手段。

    參考文獻:

    [1]李輝,張小倩,李永偉.丙肝核心抗原檢測在臨床中的應用價值[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志,2014,24(5):699-700.

    [2]Courouce AM,LeMarrec N,Bouchardeau F,et al. Efficacy of HCV core antigen detection during the preseroconversion period[J].Transfusion,2000,40:1198 -1202.

    [3]Zeisel MB,Turek M,Baumert TF. Getting closer to the patient:upgrade of hepatitis C virus infection in primary human hepatocytes[J]. J Hepatol,2010,53(2):388-389.

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    [5]Akihiko Kato, TakakoTakita, Mitsuyoshi Furuhashi, etal. Association of HCV Core Antigen Seropositivity with Long-Term Mortality in Patients on Regular Hemodialysis[J].Nephron Extra,2012,2:76-86.

    [6]Keslia R,Polat H,Terzi Y,et al.Comparison of a newly developed automated and quantitative hepatitis C virus ( HCV) core antigen test with the HCV RNA assay for clinical usefulness in confirming anti-HCV results[J].J Clin Microbiol,2011,49(12):4082-4093.

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    [10]陳開慧.探討三種檢測方法在丙型肝炎診斷中的應用價值[J].免疫學雜志,2011,4(27):319-321.

    [11]王燕,竇恒利,徐軍. 酶聯(lián)法抗-HCV 和HCV-cAg 聯(lián)檢對丙型肝炎實驗室診斷的應用價值[J].放射免疫學雜志,2012, 25(3):279-281.

    [12]楊靜,黃錦江,劉小琦. 丙型肝炎病毒核心抗原檢測技術的應用評價[J]. 國際檢驗醫(yī)學雜志,2011,32(14):1567-1568.編輯/金昊天

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