生髓育麟湯對(duì)實(shí)驗(yàn)性少、弱精子大鼠附睪精子質(zhì)量的影響

古宇能　王　全▲　陳德寧　黃忠旺　廖紅珠.廣東省深圳市中醫(yī)院男科，廣東深圳　58000；.廣州中醫(yī)藥大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院，廣東廣州　50405

生髓育麟湯對(duì)實(shí)驗(yàn)性少、弱精子大鼠附睪精子質(zhì)量的影響

古宇能1王全1▲陳德寧1黃忠旺1廖紅珠2
1.廣東省深圳市中醫(yī)院男科，廣東深圳518000；2.廣州中醫(yī)藥大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院，廣東廣州510405

目的 觀察生髓育麟湯對(duì)少、弱精子大鼠附睪精子質(zhì)量的影響。方法 60只大鼠按照常規(guī)飼養(yǎng)方法飼養(yǎng)，1周后隨機(jī)抽出10只大鼠編入正常對(duì)照組，另外50只予雷公藤多苷片20 mg/（kg·d）灌胃26 d。造模完畢后隨機(jī)抽取10只編入造模組處死，將剩下的40只大鼠隨機(jī)分為4組：生髓育麟湯高劑量組[20 mL/（kg·d）]、低劑量組[10 mL/（kg·d）]、五子衍宗丸組以及不給予任何藥物，只給予正常食物和水的觀察對(duì)照組，每組各10只。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后獲取大鼠附睪精子對(duì)各組大鼠的精子質(zhì)量進(jìn)行分析。結(jié)果 生髓育麟湯能明顯增加精子密度、前向運(yùn)動(dòng)精子比例、精子活動(dòng)率，并且隨著濃度的增加，效果更顯著，此外，生髓育麟湯還能改善精子運(yùn)動(dòng)特征參數(shù)；生髓育麟湯低劑量組、生髓育麟湯高劑量組與觀察對(duì)照組比較，差異均有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。結(jié)論 生髓育麟湯能改善少、弱精子大鼠附睪中的精子質(zhì)量。

生髓育麟湯；少、弱精子癥；大鼠；動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

不育癥是男性常見(jiàn)疾病，也是影響夫妻感情、家庭穩(wěn)定的重要原因[1]。據(jù)世界衛(wèi)生組織（WHO）調(diào)查表明：男性精子質(zhì)量從20世紀(jì)中期開(kāi)始呈下降趨勢(shì)，目前已成為第三大疾病，僅次于心腦血管病和腫瘤[2]。早在1998年就有學(xué)者統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)全球共有8000萬(wàn)對(duì)夫婦患不育癥，并以每年200萬(wàn)對(duì)的速度遞增，其中約50%為男性因素[3]。男性不育癥臨床上常表現(xiàn)為少、弱精子癥，病因眾多，病機(jī)復(fù)雜，西醫(yī)對(duì)此治療手段有限，常常依賴(lài)人工輔助生殖技術(shù)。祖國(guó)醫(yī)學(xué)治療不育癥的歷史源遠(yuǎn)流長(zhǎng)，有很多特點(diǎn)和優(yōu)勢(shì)?！吧栌霚笔巧钲谑兄嗅t(yī)院男科專(zhuān)門(mén)針對(duì)男性少、弱精子癥而設(shè)定的方藥，經(jīng)過(guò)多年的臨床觀察證實(shí)該方有較好的療效。為了進(jìn)一步探討其作用機(jī)制，分析其作用靶點(diǎn)，2015年10月~2016年2月本研究采用生髓育麟湯對(duì)實(shí)驗(yàn)性少、弱精子大鼠進(jìn)行研究，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下：

1　對(duì)象與方法

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用的SD大鼠購(gòu)買(mǎi)于廣州中山大學(xué)（大學(xué)城）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心（合格證號(hào)：SCXK（粵）2015-0029），雄性，體重為185~200 g。

1.2藥物

雷公藤多苷片（glycosides of tripterygium wilfordii，GTW）由遠(yuǎn)大醫(yī)藥黃石飛云制藥有限公司出品（國(guó)藥準(zhǔn)字Z42021212），五子衍宗丸由北京同仁堂股份有限公司出品（國(guó)藥準(zhǔn)字：Z11020188），生髓育麟湯藥物組成：鹿茸、魚(yú)鰾、龜甲膠、紫河車(chē)、人參、當(dāng)歸、熟地、山茱萸、山藥、肉蓯蓉、柏子仁、五味子、枸杞子、菟絲子、麥冬、桑椹子，由深圳和順堂醫(yī)藥有限公司提供藥材，深圳市中醫(yī)院制劑室按照常規(guī)煎藥方法制作，濃度為680 mg/mL。

1.3模型制備

60只大鼠按照常規(guī)飼養(yǎng)方法飼養(yǎng)，1周后隨機(jī)抽出10只編入正常對(duì)照組（G1組），繼續(xù)日常飼養(yǎng)。另外50只給予GTW片20 mL/（kg·d）灌胃26 d。造模完畢后隨機(jī)抽取10只編入造模組（G6組）處死，分析造模是否成功。剩下40只均分為4組：生髓育麟湯低劑量組（G2組）、生髓育麟湯高劑量組（G3組）、五子衍宗丸組（G4組）、觀察對(duì)照組（G5組），每組各10只。

1.4用藥方法

G2組及G3組分別給予10、20 mL/（kg·d）生髓育麟湯灌胃26 d，同時(shí)給予正常飲食。G4組大鼠采用五子衍宗丸1.2 g/（kg·d），80 mg/mL灌胃26 d，同時(shí)給予正常飲食。G5組造模后不給予任何藥物，只給予正常食物和水。各組大鼠每周測(cè)量體重以調(diào)整給藥劑量。實(shí)驗(yàn)期間保持良好的實(shí)驗(yàn)環(huán)境，食物、飲水、溫度等各項(xiàng)基礎(chǔ)條件均相同。

1.5檢測(cè)指標(biāo)

1.5.1安全性檢測(cè)

處死大鼠后進(jìn)行腎臟、肝臟組織活檢，觀察肝、腎病理變化情況。

1.5.2療效性檢測(cè)

1.5.2.1大鼠精液質(zhì)量的常規(guī)檢測(cè)采用北京偉力彩色精子質(zhì)量分析系統(tǒng)（WLJY-9000）檢測(cè)。末次給藥24 h后處死大鼠，在37℃恒溫條件下快速摘取并剪碎雙側(cè)附睪尾部，分別置于1 mL 37℃生理鹽水中，并存放于37℃恒溫箱中。30 min后取懸液1滴置于精子記數(shù)板上，通過(guò)連接顯微鏡的攝像裝置獲取圖像并分析、記錄，檢測(cè)精子密度、前向運(yùn)動(dòng)精子比例、活動(dòng)率，進(jìn)行量化分析。

1.5.2.2大鼠精液運(yùn)動(dòng)特征參數(shù)的檢測(cè)通過(guò)計(jì)算機(jī)輔助精液分析系統(tǒng)（CASA）獲得相關(guān)運(yùn)動(dòng)特征參數(shù)，包括精子直線(xiàn)運(yùn)動(dòng)速度、平均行程速度、曲線(xiàn)運(yùn)動(dòng)速度、頭部平均擺動(dòng)頻率、頭部擺動(dòng)幅度、平均縱線(xiàn)性比值。

1.6脫落標(biāo)準(zhǔn)

實(shí)驗(yàn)過(guò)程中大鼠發(fā)生不明原因死亡列為脫落。

1.7統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，兩組間比較采用t檢驗(yàn)，多組計(jì)量資料比較采用方差分析；等級(jí)資料比較采用Ridit分析；以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1藥物對(duì)大鼠體重的影響

實(shí)驗(yàn)后各組大鼠體重分別為G1組：（475.80±24.04）g；G2組：（471.10±11.03）g；G3組：（468.00±13.21）g；G4組：（470.50±25.18）g；G5組：（4710.5±21.05）g；G6組：（463.50±21.07）g。各組體重有所增加，但6組體重進(jìn)行方差分析，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），體重增加對(duì)研究無(wú)影響，具有可比性。

2.2安全性及不良反應(yīng)檢測(cè)

實(shí)驗(yàn)過(guò)程未見(jiàn)不良反應(yīng)。大鼠的肝臟和腎臟制成病理切片送檢，在高倍光鏡下觀察各組大鼠肝臟以及腎臟的病理變化。病理結(jié)果顯示：觀察對(duì)照組大鼠肝小葉內(nèi)和門(mén)管區(qū)有不同程度的單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)，肝細(xì)胞內(nèi)水分增多、腫脹，胞漿呈空網(wǎng)狀；腎小球無(wú)明顯變化，腎小管腔內(nèi)有透明管型。其他3組大鼠的肝臟和腎臟均未見(jiàn)到明顯的損傷，與正常對(duì)照組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

2.3實(shí)驗(yàn)后大鼠附睪精子的密度、前向運(yùn)動(dòng)精子比例、精子活動(dòng)率的統(tǒng)計(jì)

G1組大鼠附睪精子質(zhì)量最高，G6組精子密度、前向運(yùn)動(dòng)精子比例、精子活動(dòng)率明顯降低，G1組與G6組比較，差異均有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；G6組精子密度、前向運(yùn)動(dòng)精子比例、精子活動(dòng)率與G5組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；實(shí)驗(yàn)后G2、G3和G4組精子密度、活動(dòng)率和前向運(yùn)動(dòng)精子比例均有提高，且G3組更為顯著，與G1、G2、G4、G5組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05或P<0.01）；G2組與G1、G4、G5組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05或P<0.01）。見(jiàn)表1。

2.4計(jì)算機(jī)輔助精液分析系統(tǒng)圖像分析

G1組精子密度高，多為正常形態(tài)精子，運(yùn)動(dòng)軌跡以直線(xiàn)居多，單位時(shí)間內(nèi)行程較長(zhǎng)；G2組精子密度較高，可見(jiàn)少量畸形精子，精子運(yùn)動(dòng)軌跡較為雜亂；G3組精子密度較高，多數(shù)精子形態(tài)良好，單位時(shí)間內(nèi)行程較長(zhǎng)；G4組精子密度一般，可見(jiàn)較多畸形精子和圓形細(xì)胞，運(yùn)動(dòng)軌跡較為雜亂，單位時(shí)間內(nèi)行程較短；G5組精子密度低，可見(jiàn)大量圓形細(xì)胞和碎片，運(yùn)動(dòng)軌跡紊亂，單位時(shí)間內(nèi)行程較短；G6組精子密度低，畸形精子比例較高，運(yùn)動(dòng)軌跡紊亂，單位時(shí)間內(nèi)行程短。見(jiàn)圖1。

表1　各組大鼠附睪精子質(zhì)量比較（，n=10）

注：與G1組比較，▲P＜0.05，▲▲P＜0.01；與G2組比較，■P＜0.05；與G4組比較，*P＜0.01；與G5組比較，#P＜0.05，##P＜0.01

組別　精子密度（×106/mL）前向運(yùn)動(dòng)精子比例（%）精子活動(dòng)率（%）G1組G2組G3組G4組G5組G6組85.22±5.36 71.24±0.98▲##*78.35±2.82##*▲■23.54±8.68#9.48±3.81 8.42±2.52▲▲△36.01±2.51 23.24±1.02▲##*29.15±1.60##*▲■18.07±3.18#9.12±0.29 8.80±0.32▲▲△70.58±5.62 58.13±2.05▲##*62.23±4.39##*▲■35.48±23.52#13.53±6.79 12.56±3.55▲▲△

2.5實(shí)驗(yàn)后各組大鼠附睪CASA精子運(yùn)動(dòng)特征

G1組大鼠精子運(yùn)動(dòng)最佳，G6組的精子VSL、VAP、VCL、BCF、ALH、STR明顯下降，與G1組比較差異均有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；實(shí)驗(yàn)后G5組參數(shù)無(wú)改善，與G6組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；實(shí)驗(yàn)后G2、G3組和G4組上述運(yùn)動(dòng)特征參數(shù)均有所提高，且G3組更為顯著，與G1、G2、G4、G5組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05或P＜0.01）；G2組與G1、G4、G5組上述參數(shù)比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05或P＜0.01）。見(jiàn)表2。

3　討論

祖國(guó)醫(yī)學(xué)博大精深，歷代的眾多醫(yī)家都很重視男性不育癥，在歷史眾多醫(yī)學(xué)著作中我們可以找到關(guān)于男性不育的病名，如“精少”“精冷”“天宦”“無(wú)子”等，其中的生理特點(diǎn)、病因病機(jī)、辨證論治等方面都不乏記載?！饵S帝內(nèi)經(jīng)》是古老的中醫(yī)典籍，文中有關(guān)于男性的性與生殖系統(tǒng)的論述，闡明了人體形體與生殖功能盛衰的過(guò)程[4]，如《素問(wèn)·上古天真論》云：“丈夫八歲，腎氣實(shí)，發(fā)長(zhǎng)齒更；二八，腎氣盛，天癸至，精氣溢瀉，陰陽(yáng)和，故能有子……”[5]又如文中還提到“腎者主水，受五藏六府之精而藏之，……今五藏皆衰，筋骨解墮，天癸盡矣。故發(fā)鬢白，身體重，步行不正，而無(wú)子耳”。雖然腎氣由盛至衰是自然規(guī)律，但養(yǎng)生得法能延緩衰老——“道者能卻老而全形，身年雖壽，能生子也”。文中認(rèn)為腎氣的盛衰，天癸的有無(wú)，臟腑功能是否協(xié)調(diào)，直接決定著男性的生殖能力，并且尚須夫婦“陰陽(yáng)和”“故能有子”，這就為中醫(yī)學(xué)關(guān)于治療男性不育和養(yǎng)生保健奠定了理論基礎(chǔ)[6]。明清時(shí)期中醫(yī)理論繼續(xù)發(fā)揚(yáng)與創(chuàng)新，對(duì)男性不育癥的病因、病機(jī)、診斷和治療水平達(dá)到了一個(gè)全新的高度，涌現(xiàn)出大批有價(jià)值的文獻(xiàn)著作，例如《石室秘錄》和《傅青主男科》[7]。以傅山為代表的學(xué)派從“脾、腎”論治不育，認(rèn)為脾為后天之本，腎為先天之本，先后天相互化生、相互促進(jìn)。人體正常孕育功能需要脾腎關(guān)系的協(xié)調(diào)、五臟陰陽(yáng)的調(diào)和，故治法當(dāng)以“溫潤(rùn)填精、扶中健運(yùn)”“君相并重、健脾益氣”[8]。精液清冷、質(zhì)地稀少者，多因先天稟賦不足或者后天勞傷所致，對(duì)此類(lèi)患者若只是片面溫陽(yáng)、滋陰則收效甚微，若不慎誤用攻伐之品則后果更加不堪，應(yīng)通過(guò)益精填髓之法，兼顧氣血陰陽(yáng)，廣納血肉有情之品，以求腎精充足，血?dú)馄秸@就為臨床治療少、弱精子癥提供了理論依據(jù)。清代名醫(yī)陳士鐸是男科學(xué)方面頗有建樹(shù)的一員，其著作《辨證錄》中體現(xiàn)的學(xué)術(shù)思想與傅山一脈相承，生髓育麟丹[9]就是其中驗(yàn)方之一。該方由鹿茸、魚(yú)鰾、龜甲膠、紫河車(chē)、人參、當(dāng)歸、熟地、山茱萸、山藥、肉蓯蓉、柏子仁、五味子、枸杞子、菟絲子、麥冬、桑椹子組成，具有益精填髓、生精種子之效。全方以“滋補(bǔ)腎精”為核心，所采用的“鹿茸”“龜甲膠”“熟地”等九味藥皆入腎經(jīng)，其中熟地黃“滋陰補(bǔ)血，填精益髓”，加上血肉有情之紫河車(chē)、龜甲膠、鹿角膠、魚(yú)鰾共為君藥；山茱萸、菟絲子、肉蓯蓉、五味子為臣藥，助君藥補(bǔ)益腎精，并有收斂固精之效；俗話(huà)說(shuō)“養(yǎng)精須養(yǎng)血”“精血同源”，故采用補(bǔ)血之當(dāng)歸，加上麥冬、桑椹子滋養(yǎng)胃陰共為佐藥。方中加入人參、山藥為臣，以求健脾培土，補(bǔ)益中氣，防止食滯中焦妨礙脾土運(yùn)化，有利于促進(jìn)藥物發(fā)揮效果。該方藥性不溫不燥，無(wú)金石、毒蟲(chóng)等峻烈之品，無(wú)傷胃之弊。陳氏言此方“妙在純用填精益髓之味，無(wú)金石之犯，可以久服無(wú)害，不但可以種子，兼可益壽延年[10]?！睆V東省深圳市中醫(yī)院長(zhǎng)期應(yīng)用此方治療“腎虛”以及“脾腎兩虛”型的男性不育癥，深感此方之妙！

表2　各組大鼠精子運(yùn)動(dòng)特征比較（，n=10）

表2　各組大鼠精子運(yùn)動(dòng)特征比較（，n=10）

注：與G1組比較，▲P＜0.05，▲▲P＜0.01；與G2組比較，■P＜0.05；與G4組比較，*P＜0.01；與G5組比較，#P＜0.05，##P＜0.01；VSL：精子直線(xiàn)運(yùn)動(dòng)速度；VAP：平均行程速度；VCL：曲線(xiàn)運(yùn)動(dòng)速度；BCF：頭部平均擺動(dòng)頻率；ALH：頭部擺動(dòng)幅度；STR：平均縱線(xiàn)性比值

組別　VSL（μm/s）　VAP（μm/s）　VCL（μm/s）　BCF（Hz）　ALH（μm）　STR（%）G1組G2組G3組G4組G5組G6組33.25±2.03 27.30±2.14##*▲30.69±1.86##*▲■21.02±6.68#13.25±1.02 12.12±2.32▲▲40.82±1.02 30.10±4.73##*▲34.50±2.31##*▲■26.43±1.90#15.63±8.20 13.96±5.13▲▲46.78±6.32 33.85±6.25##*▲39.74±9.15##*▲■28.48±7.01#13.64±1.84 11.49±7.83▲▲6.62±5.91 4.40±3.83##*▲5.42±6.80##*▲■3.49±9.02# 2.02±1.88 1.52±1.13▲▲4.24±0.71 3.30±6.23##*▲3.92±7.58##*▲■2.80±5.04#1.62±3.61 1.41±4.80▲▲81.52±6.46 70.25±0.19##*▲78.80±1.47##*▲■53.28±6.08#31.29±2.92 28.84±6.07▲▲

本實(shí)驗(yàn)簡(jiǎn)化制作工藝，改丸劑為湯劑，專(zhuān)門(mén)針對(duì)少、弱精子癥患者而設(shè)。根據(jù)我們前期的臨床觀察表明：生髓育麟湯有明顯提高不育癥患者精子數(shù)量、活動(dòng)力，降低精子畸形率的作用[11]；前期實(shí)驗(yàn)研究顯示：生髓育麟湯能改善不育癥患者內(nèi)分泌功能，提高血清睪酮水平，抑制生精細(xì)胞的凋亡[12]。

五子衍宗丸源自明代《醫(yī)學(xué)入門(mén)》，是添精種子之方，舊稱(chēng)“古今第一種子方”。該方由“枸杞子”“菟絲子”“五味子”“覆盆子”“車(chē)前子”組成，經(jīng)烘焙、曬干，上為細(xì)末，煉蜜為丸。經(jīng)長(zhǎng)期的臨床驗(yàn)證具有補(bǔ)益腎精之功，為治療男性不育癥的經(jīng)典藥方。故本實(shí)驗(yàn)選擇該中成藥作為對(duì)照藥。

精子在睪丸生精小管中產(chǎn)生，經(jīng)過(guò)曲細(xì)精管、睪丸網(wǎng)和睪丸輸出小管進(jìn)入附睪，循附睪頭-體-尾運(yùn)行，逐步達(dá)到成熟并存儲(chǔ)在于附睪[13]。附睪的頭端和體端是精子成熟的部位，尾端是精子貯存部位[14]，所以實(shí)驗(yàn)動(dòng)物精子一般是通過(guò)附睪尾部來(lái)獲得，一來(lái)數(shù)量較多易獲取，二來(lái)可以排除其他性腺的干擾，較客觀反映睪丸、附睪物質(zhì)代謝情況。任何損害睪丸曲細(xì)精管上皮結(jié)構(gòu)及內(nèi)分泌功能的因素都可以導(dǎo)致精子的生發(fā)障礙，也造成附睪內(nèi)儲(chǔ)存的精子數(shù)量減少，活力下降，例如環(huán)境因素、食品、藥品因素等[15]。據(jù)多方面報(bào)道顯示，GTW具有明顯的生殖毒性，能夠抑制睪丸的各級(jí)生精細(xì)胞，包括精母細(xì)胞、精子細(xì)胞和精子，甚至出現(xiàn)大量精原細(xì)胞脫落，阻塞曲細(xì)精管腔道造成少精子癥[16]。大劑量使用GTW還對(duì)肝臟及腎臟造成一定的損害，并且所造成的病變隨著時(shí)間推移不能自行修復(fù)[17]。精液分析是確定男性生育能力的重要手段[18]，但以往簡(jiǎn)單的顯微鏡下檢測(cè)技術(shù)存在較大誤差，并且不能測(cè)定精子微細(xì)運(yùn)動(dòng)特點(diǎn)，不符合現(xiàn)代男性不育癥的診斷要求[19]。CASA則能較客觀地評(píng)價(jià)上述指標(biāo)，運(yùn)動(dòng)特征的描述更能反映精子受精能力、精子穿透能力[20]。所以本實(shí)驗(yàn)采用SD大鼠為研究對(duì)象，采用GTW造模，采取生髓育麟湯和五子衍宗丸灌胃，收集大鼠附睪尾部的精子，通過(guò)CASA觀察實(shí)驗(yàn)藥物對(duì)大鼠精子密度、前向運(yùn)動(dòng)精子比例和活動(dòng)率，并收集比較精子運(yùn)動(dòng)特征各項(xiàng)參數(shù)，參照人類(lèi)的標(biāo)準(zhǔn)全方位地評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)藥物的作用機(jī)制和靶點(diǎn)。

本研究顯示：大鼠經(jīng)造模后與正常對(duì)照組比較精子質(zhì)量顯著下降，精子密度和前向運(yùn)動(dòng)精子比例、活動(dòng)率都較低，精子運(yùn)動(dòng)特征參數(shù)也下降，說(shuō)明GTW損害了睪丸生精能力，造成大鼠附睪中的精子數(shù)量和質(zhì)量都下降；造模組與觀察對(duì)照組比較，其差異不明顯，說(shuō)明隨著時(shí)間推移睪丸精子生發(fā)功能未見(jiàn)恢復(fù)，少、弱精子大鼠造模成功；生髓育麟湯高、低劑量組和五子衍宗丸組分別與觀察對(duì)照組比較，其精子密度和前向運(yùn)動(dòng)精子比例、活動(dòng)率均存在顯著差異，運(yùn)動(dòng)特征參數(shù)也提升，說(shuō)明兩者可能減輕了GTW的損害，恢復(fù)了大鼠的生精上皮細(xì)胞部分功能，促使生精細(xì)胞的成熟和分化，以至于附睪內(nèi)的精子數(shù)量和活動(dòng)力有顯著提升，精子的穿透能力和受精能力也增強(qiáng)，從而改善了大鼠的生殖能力。兩者比較生髓育麟湯更勝一籌，且隨著劑量增加效果更顯著。從安全角度觀察：生髓育麟湯組和五子衍宗丸組肝臟和腎臟均未見(jiàn)到明顯的損傷，說(shuō)明兩組藥物藥性溫和，應(yīng)用于臨床較為可靠。生髓育麟湯各組與正常對(duì)照組比較精子質(zhì)量仍然較差，說(shuō)明采用該方治療后雖然改善了實(shí)驗(yàn)大鼠的精子質(zhì)量，但還沒(méi)有達(dá)到完全健康的水平。是否因?yàn)閮蓚€(gè)生精周期（26 d）的治療時(shí)間不夠？繼續(xù)用藥或者加大劑量是否可以達(dá)到更好效果？中西藥結(jié)合治療是否可以提高療效？也許未來(lái)可以通過(guò)優(yōu)化藥品制作工藝、增加實(shí)驗(yàn)觀察時(shí)間進(jìn)一步探討。

綜合各項(xiàng)研究結(jié)果可以證實(shí)：生髓育麟湯能改善實(shí)驗(yàn)性大鼠附睪中的精子密度、活動(dòng)率和前向運(yùn)動(dòng)精子比例，優(yōu)化了精子運(yùn)動(dòng)特征。本實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了生髓育麟湯的作用靶點(diǎn)在睪丸和附睪，作用機(jī)制是維護(hù)了睪丸和附睪內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，促進(jìn)生精細(xì)胞的分化和成熟。五子衍宗丸作為治療不育癥的傳統(tǒng)藥物其療效已受肯定[21-22]，而生髓育麟湯較五子衍宗丸更有優(yōu)勢(shì)，顯示了推廣生髓育麟湯治療不育癥的良好前景以及從“脾腎論治不育癥”的科學(xué)性。生髓育麟湯是如何影響精子的生發(fā)功能？下一步也許可以從睪丸物質(zhì)代謝、基因調(diào)控和蛋白表達(dá)干預(yù)方面進(jìn)一步深入研究。

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Effect of the Shengsui Yulin Decoction on the sperm quality in rats w ith oligosperm atism

GU Yuneng1WANG Quan1▲CHEN Dening1HUANG Zhongwang1LIAO Hongzhu2
1.Department of Andrology,Shenzhen Hospital of TCM,Guangdong Province,Shenzhen518000,China;2.The First Clinical Medicine College,Guangzhou University of Chinese Medicine,Guangdong Province,Guangzhou510405,China

Ob jective To study the effect of Shengsui Yulin Decoction on the sperm quality in rats with oligospermatism.Methods Sixty rats were fed by normol way for a week,then fifty rats oligospermatism models been made by GTW.Ten rats were killed as models after molding,the other 40 rats were equally divided into four groups:the highdose Shengsui Yulin Decoction group[20 mL/(kg·d)],the low-dose Shengsui Yulin Decoction group[10 mL/(kg·d)], WuZiYanZong Tablets group and the observation control group only feed by water and food.The sperm from the rats epididymis was extracted and sperm quality of each group was detected.Resu lts Sperm density,proportion of progressive sperm,spermatozoal motivity were increased by Shengsui Yulin Decoction,and the therapeutic effect was increased with the increasing of the concentration of Shengsui Yulin Decoction,and the sperm motion parameters were improved by Shengsui Yulin Decoction;compared with observation control group,those indexes of the high-dose Shengsui Yulin Decoction group and the low-dose Shengsui Yulin Decoction group had statistically significant difference(P<0.01). Conclusion Shengsui Yulin Decoction can improve the sperm quality of the rat testis with oligospermatism．

Shengsui Yulin Decoction;Oligospermatism;Rat;Zoopery

R271.14

A

1673-7210（2016）04（b）-0022-05

廣東省中醫(yī)藥局建設(shè)中醫(yī)藥強(qiáng)省科研課題（20151087）。

古宇能（1979.10-），男，碩士，副主任醫(yī)師；研究方向：泌尿男科。

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（2016-01-10 本文編輯：任念）