氨基多糖螯合鹽對(duì)扣蟹非特異性免疫力的影響

王習(xí)達(dá)， 陳煥根， 王勝男，吳其平

(1．江蘇省漁業(yè)技術(shù)推廣中心,江蘇南京 210036；2.北京眾合發(fā)生物科技發(fā)展有限公司，北京 100010)

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氨基多糖螯合鹽對(duì)扣蟹非特異性免疫力的影響

王習(xí)達(dá)1， 陳煥根1， 王勝男2，吳其平2

(1．江蘇省漁業(yè)技術(shù)推廣中心,江蘇南京 210036；2.北京眾合發(fā)生物科技發(fā)展有限公司，北京 100010)

[目的]探討氨基多糖螯合鹽對(duì)扣蟹非特異性免疫力的影響。[方法]通過(guò)在配合餌料中添加氨基多糖螯合鹽，研究其對(duì)扣蟹非特異性免疫力[堿性磷酸酶(AKP)活性、酸性磷酸酶(ACP)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性、溶菌酶活性]的影響。[結(jié)果]氨基多糖螯合鹽可以有效提高扣蟹AKP、ACP、SOD和溶菌酶活性。[結(jié)論]在飼料中添加氨基多糖螯合鹽對(duì)于增強(qiáng)扣蟹非特異性免疫力有一定功效。

氨基多糖螯合鹽；扣蟹；免疫力

河蟹養(yǎng)殖是江蘇省漁業(yè)的重要支柱產(chǎn)業(yè),隨著河蟹養(yǎng)殖規(guī)模的擴(kuò)大,病害對(duì)河蟹養(yǎng)殖業(yè)的危害日益凸顯，因此提高河蟹自身免疫力與預(yù)防病害發(fā)生對(duì)于促進(jìn)河蟹產(chǎn)業(yè)的發(fā)展具有重要意義。近年來(lái)的營(yíng)養(yǎng)免疫學(xué)研究表明，免疫增強(qiáng)劑可以刺激河蟹免疫應(yīng)答，提高河蟹的抗病能力，從而預(yù)防河蟹養(yǎng)殖中后期疾病的暴發(fā)。目前，已報(bào)道的免疫增強(qiáng)劑有脂多糖、殼寡糖、殼聚糖等，但對(duì)氨基多糖螯合鹽的研究報(bào)道較少。

氨基多糖螯合鹽是一種新型生物材料，已被廣泛應(yīng)用于醫(yī)用領(lǐng)域，但在水產(chǎn)上的應(yīng)用鮮見報(bào)道。研究表明，氨基多糖螯合鹽可以通過(guò)調(diào)節(jié)動(dòng)物體內(nèi)的超氧化物岐化酶活性，來(lái)降低機(jī)體的脂質(zhì)過(guò)氧化水平[1-2]。通過(guò)殼糖胺可以刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答[3]，在飼料中添加氨基多糖螯合鹽可以提高鯽魚的超氧化物岐化酶和溶菌酶活性[4]。試驗(yàn)所用氨基多糖螯合鹽是以甲殼素為原料，經(jīng)脫乙酰基作用，再?gòu)?fù)配微量元素經(jīng)過(guò)特殊工藝制備而成。筆者通過(guò)在配合飼料中添加氨基多糖螯合鹽，探討其對(duì)扣蟹非特異性免疫力的影響，旨在為氨基多糖螯合鹽在河蟹生產(chǎn)中的應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)，并為河蟹的疾病防治提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 氨基多糖螯合鹽。氨基多糖螯合鹽，由北京眾合發(fā)生物科技發(fā)展有限公司提供。

1.1.2 扣蟹?？坌焚?gòu)自江蘇省海洋水產(chǎn)研究所如東育苗基地。選取平均體重5 g的扣蟹，按照15 000只/hm2的密度暫養(yǎng)于江蘇省漁業(yè)技術(shù)試驗(yàn)示范基地面積約0.33 hm2的試驗(yàn)池中，日投喂配合飼料2次，投喂氨基多糖螯合鹽30 d，待扣蟹穩(wěn)定后開始試驗(yàn)。

1.2 方法

1.2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)。試驗(yàn)設(shè)置3個(gè)試驗(yàn)組和1個(gè)對(duì)照組：試驗(yàn)組Ⅰ,在配合飼料中添加1%氨基多糖螯合鹽，全程投喂；試驗(yàn)組Ⅱ，在配合飼料中添加1%氨基多糖螯合鹽，脫殼期投喂；試驗(yàn)組Ⅲ,在配合飼料中添加3%%氨基多糖螯合鹽,全程投喂；對(duì)照組中不添加氨基多糖螯合鹽，每組設(shè)3個(gè)平行。試驗(yàn)期90 d。1.2.2 測(cè)定項(xiàng)目與方法。分別在30、60、90 d提取扣蟹肝臟和肌肉組織，測(cè)定AKP、ACP、SOD和溶菌酶活性等非特異性免疫指標(biāo)。酶活性使用南京建成生物工程研究所試劑盒測(cè)定。1.2.3 數(shù)據(jù)處理。試驗(yàn)數(shù)據(jù)使用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)與分析，采用單因子方差分析(ANOVA)中的LSD方法進(jìn)行多重比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 肌肉和肝臟中AKP活性 從圖1可以看出，90 d各試驗(yàn)組扣蟹肝臟和肌肉中AKP活性顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，其中在肝臟中表現(xiàn)更明顯，且試驗(yàn)組ⅢAKP活性顯著高于其他組。

2.2 肌肉和肝臟中ACP活性 從圖2可以看出，60和90 d各試驗(yàn)組扣蟹肝臟和肌肉中ACP活性均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，其中試驗(yàn)組Ⅲ扣蟹肝臟和肌肉中ACP活性顯著高于其他組。

2.3 肌肉和肝臟中SOD活性 從圖3可以看出，60和90 d各試驗(yàn)組扣蟹肝臟和肌肉中SOD活性均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，其中試驗(yàn)組 Ⅰ、Ⅲ SOD活性顯著高于其他2組(P<0.05)。

注：A.30 d；B.60 d;C.90 d。同一圖片標(biāo)有不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)。Note:A.30 d;B.60 d;C.90 d.Different lowercases indicated significant differences(P<0.05).圖1 氨基多糖螯合鹽對(duì)扣蟹肝臟和肌肉中AKP活性的影響Fig.1 Effects of amino polysaccharide chelate salt on the AKP activity in liver and muscle of buckle crab

注：A.30 d；B.60 d;C.90 d。同一圖片標(biāo)有不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)。Note:A.30 d;B.60 d;C.90 d.Different lowercases indicated significant differences(P<0.05).圖2 氨基多糖螯合鹽對(duì)扣蟹肝臟和肌肉中ACP活性的影響Fig.2 Effects of amino polysaccharide chelate salt on the ACP activity in liver and muscle of buckle crab

注：A.30 d；B.60 d;C.90 d。同一圖片標(biāo)有不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)。Note:A.30 d;B.60 d;C.90 d.Different lowercases indicated significant differences(P<0.05).圖3 氨基多糖螯合鹽對(duì)扣蟹肝臟和肌肉中SOD活性的影響Fig.3 Effects of amino polysaccharide chelate salt on the SOD activity in liver and muscle of buckle crab

2.4 肌肉和肝臟中溶菌酶活性 從圖4可以看出，90 d各試驗(yàn)組扣蟹肝臟和肌肉中溶菌酶活性均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，60 d試驗(yàn)組 Ⅰ、Ⅲ 溶菌酶活性顯著高于其他2組(P<0.05)。

3 結(jié)論與討論

該試驗(yàn)結(jié)果表明，除了30 d各試驗(yàn)組一些指標(biāo)低于對(duì)照組外，60 d、90 d各試驗(yàn)組扣蟹肌肉和肝臟中AKP、ACP、SOD、溶菌酶活性均高于對(duì)照組，說(shuō)明氨基多糖螯合鹽可以提高扣蟹的免疫力。除了30 d試驗(yàn)組 Ⅰ 一些免疫指標(biāo)試驗(yàn)組Ⅲ 外，60 d和90 d試驗(yàn)組 Ⅲ 扣蟹的免疫指標(biāo)均高于試驗(yàn)組 Ⅰ，并且試驗(yàn)組Ⅲ均顯著高于對(duì)照組，這說(shuō)明在一定劑量的范圍內(nèi)扣蟹的免疫應(yīng)答水平與氨基多糖螯合鹽的添加量呈正相關(guān)。大量研究表明，高劑量的免疫增強(qiáng)劑不僅不能提高動(dòng)物機(jī)體免疫力，還會(huì)對(duì)機(jī)體造成免疫抑制[5-6]。研究表明，免疫增強(qiáng)劑的效果也會(huì)呈現(xiàn)前期一般、后期明顯的趨勢(shì)[7]。陳玉春等[8]研究表明飼喂藥餌15 d后頭腎溶菌酶活性與對(duì)照組相比升高不明顯，而30 d后頭腎溶菌酶活性則顯著升高(P>0.05)。因此，飼料中氨基多糖螯合鹽的添加量還不確定，有待進(jìn)一步試驗(yàn)。此外，30 d試驗(yàn)組 Ⅱ 扣蟹的免疫指標(biāo)低于對(duì)照組；60 d、90 d試驗(yàn)組 Ⅱ 扣蟹的免疫指標(biāo)則略高于對(duì)照組，但明顯低于試驗(yàn)組Ⅰ。這說(shuō)明全程投喂氨基多糖螯合鹽的效果最好。

注：A.30 d；B.60 d;C.90 d。同一圖片標(biāo)有不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)。Note:A.30 d;B.60 d;C.90 d.Different lowercases indicated significant differences(P<0.05).圖4 氨基多糖螯合鹽對(duì)扣蟹肝臟和肌肉中溶菌酶活性的影響Fig.4 Effects of amino polysaccharide chelate salt on the lysozyme activity in liver and muscle of buckle crab

有研究表明同一種免疫增強(qiáng)劑對(duì)不同器官的作用存在差異[9]。Mills等[10]研究表明水產(chǎn)動(dòng)物的免疫應(yīng)答在血液、肝臟中要比在肌肉中更加明顯，該試驗(yàn)也證實(shí)了這一點(diǎn)。

近年來(lái)，關(guān)于氨基多糖螯合鹽在水產(chǎn)免疫方面的研究主要體現(xiàn)在魚類上。張耀武等[4]研究發(fā)現(xiàn)在日糧中添加0.5%的氨基多糖螯合鹽，可提高異育銀鯽血清中溶菌酶的活力。王樹芹等[11]研究表明添加0.5%或1.0%的氨基多糖螯合鹽都可以提高異育銀鯽血清中溶菌酶的活性。劉軍等[12]研究發(fā)現(xiàn)稀土殼聚糖螯合鹽可以有效提高鯽魚腸道的酶活。常青等[13]在對(duì)花鱸的研究中發(fā)現(xiàn)氨基多糖螯合鹽可以短時(shí)間內(nèi)提高花鱸的免疫應(yīng)答水平。沈錦玉等[14]研究表明通過(guò)口服或注射免疫增強(qiáng)劑的方法都可以顯著提高河蟹血清中SOD的活性。

近年來(lái)，水產(chǎn)養(yǎng)殖逐漸趨向于高密度、高產(chǎn)量，加之養(yǎng)殖投入品(飼料、藥物等)的不當(dāng)使用，影響了水產(chǎn)品質(zhì)量安全和養(yǎng)殖效益。筆者通過(guò)將氨基多糖螯合鹽應(yīng)用在扣蟹生產(chǎn)上的臨床試驗(yàn)，獲得了一些免疫防病的基礎(chǔ)資料，為后續(xù)水產(chǎn)動(dòng)物疾病防治提供了一些科學(xué)依據(jù)。

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Effects of the Amino Polysaccharide Chelate Salt on Nonspecific Immunity of Buckle Crab

WANG Xi-da1,CHEN Huan-gen1,WANG Sheng-nan2et al

(1.Fisheries Technology Promotion Center of Jiangsu Province,Nanjing,Jiangsu 210036; 2.Zhonghefa Biotechnology Development Co.,Ltd.,Beijing 100010)

[Objective] To discuss the effects of amino polysaccharide chelate salt on nonspecific immunity of buckle crab.[Method] Amino polysaccharide chelate salt was added into compound feed.We researched its effects on nonspecific immunity (AKP activity,ACP activity,SOD activity and lysozyme activity) of buckle crab.[Result] Amino polysaccharide chelate salt effectively enhanced the AKP activity,ACP activity,SOD activity and lysozyme activity.[Conclusion] Adding amino polysaccharide chelate salt into the feed has certain function on enhancing the nonspecific immunity of buckle crab.

Amino polysaccharide chelate salt; Buckle crab; Immunity

江蘇省水產(chǎn)三新工程項(xiàng)目(Y2015-21)。

王習(xí)達(dá)(1977- )，男，安徽宿松人，高級(jí)工程師，碩士，從事水產(chǎn)藥物臨床試驗(yàn)與水產(chǎn)品質(zhì)量安全研究。

2016-07-18

S 912

A

0517-6611(2016)28-0133-03