人附睪分泌蛋白4和糖類抗原125對卵巢癌診斷意義*

牟永平，崔宏偉，斯 琴，蘇日娜，梁俊青

(內(nèi)蒙古醫(yī)科大學附屬人民醫(yī)院：1.檢驗科；3.婦瘤科；4.乳腺科，呼和浩特 010020；2.內(nèi)蒙古醫(yī)科大學附屬醫(yī)院臨床醫(yī)學研究中心，呼和浩特 010050)

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·論 著·

人附睪分泌蛋白4和糖類抗原125對卵巢癌診斷意義*

牟永平1，崔宏偉2，斯 琴3，蘇日娜1，梁俊青4△

(內(nèi)蒙古醫(yī)科大學附屬人民醫(yī)院：1.檢驗科；3.婦瘤科；4.乳腺科，呼和浩特 010020；2.內(nèi)蒙古醫(yī)科大學附屬醫(yī)院臨床醫(yī)學研究中心，呼和浩特 010050)

目的 探討血清中人附睪分泌蛋白4(HE4)和糖類抗原125(CA125)在盆腔腫瘤中的臨床診斷價值。方法 選取56例卵巢癌、64例盆腔良性腫瘤、60例健康女性的血清標本，采用電化學發(fā)光免疫方法檢測所有研究對象的血清HE4和CA125水平。 結(jié)果 卵巢癌組血清HE4(189.94 pmol/L)與CA125(89.39 U/L)表達水平明顯高于盆腔良性腫瘤組(HE4=56.74 pmol/L,CA125=45.11 U/L)和健康對照組(HE4=46.36 pmol/L,CA125=34.24 U/L)，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。卵巢癌不同病理分期的Ⅲ、Ⅳ期表達水平(HE4=236.25 pmol/L,CA125=206.35 U/L)明顯高于Ⅰ、Ⅱ期(HE4=96.36 pmol/L,CA125=67.8 U/L)，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。以盆腔良性腫瘤組作為參照，HE4 對卵巢癌的特異性、敏感性和陰性預測值、陽性預測值分別為 85.71%、71.67% 和73.84%、84.31%。HE4的特異性明顯高于 CA125(P<0.01)；CA125對卵巢癌的敏感性(86.67%)高于HE4(71.67%)，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。HE4曲線下面積(0.87)高于CA125(0.81)(P<0.01)。HE4與CA125聯(lián)合檢測明顯提高特異性和陰性預測值，分別為95.15%和92.13%(P<0.01)。結(jié)論 血清HE4對卵巢癌具有重要的臨床診斷價值，其鑒別診斷效能優(yōu)于CA125，且與CA125聯(lián)合檢測有助于提高卵巢癌的臨床意義。

人附睪分泌蛋白4； 糖類抗原125； 卵巢癌； 盆腔腫瘤

卵巢癌在婦科腫瘤中每年新發(fā)病例約23.8萬例，發(fā)病率僅次于子宮頸癌和子宮體癌，居第3位，而其致死率卻占首位，約15.2萬例患者死于卵巢癌[1]。卵巢癌早期癥狀不明顯，只有19%的患者在癌組織突破卵巢之前能夠被發(fā)現(xiàn)，大多數(shù)患者就診時已處于晚期，且易腹腔轉(zhuǎn)移及復發(fā)。卵巢癌早期治療，其5年生存率可達92%，但所有的卵巢癌5年生存率不足50%。因此早期診斷與治療是改善預后的關鍵[2]。糖類抗原125(CA125)是臨床應用最廣的卵巢癌血清標志物之一，在疾病監(jiān)測、化療評估、隨訪中發(fā)揮了重要作用，但早期患者的升高率不足一半，且在許多良性疾病中也有升高，其輔助診斷的特異性不高[3]。人附睪分泌蛋白4(HE4)是由Kirchoff等[4]發(fā)現(xiàn)的一種酸性小分子分泌蛋白。有學者發(fā)現(xiàn)HE4 mRNA在卵巢癌組織中高表達，但在正常組織中低表達或不表達。Drapkin等[5]發(fā)現(xiàn)HE4在卵巢癌患者的血清水平比健康者明顯增高。因此HE4作為一個新的卵巢癌腫瘤標志物，受到深入研究。

HE4檢測方法有酶聯(lián)免疫吸附測定法(ELISA)、時間分辨熒光免疫分析法(TRIFA)、化學發(fā)光免疫分析法(CLIA)。ELISA法敏感性低，適用于定性和半定量檢測；TRIFA法操作復雜，反應時間長，試劑成本高；CLIA法操作簡單，試劑較穩(wěn)定，進口試劑成本較高，國產(chǎn)試劑合理。本研究采用以磁珠為載體，吖啶酯標記檢測抗體的化學發(fā)光免疫分析技術開發(fā)HE4定量檢測試劑盒，能輔助疾病的預防與控制、臨床用藥等。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2014年9月至2015年10月在內(nèi)蒙古醫(yī)科大學附屬醫(yī)院和內(nèi)蒙古醫(yī)科大學附屬人民醫(yī)院婦科收治的、經(jīng)手術及病理檢查報告確診為卵巢惡性腫瘤和盆腔良性腫瘤的患者，根據(jù)國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟(FIGO)2009年手術病理分期標準，56例上皮性卵巢癌患者包括漿液性腺癌、黏液性腺癌、子宮內(nèi)膜癌、移行細胞癌(卵巢癌組)。盆腔良性腫瘤患者包括盆腔炎、子宮肌瘤等(盆腔良性腫瘤組)。健康對照者60例作為健康對照組。

1.2 檢測方法 本研究獲得醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會批準，所有研究對象均簽署知情同意書。所有對象均空腹使用促凝管抽取靜脈血5 mL，室溫靜置30 min,離心獲取上層血清分裝于試管，-80 ℃保存待測。試劑由廣州達瑞生物技術股份有限公司提供(化學發(fā)光免疫分析法)，儀器為 E601。采用羅氏電化學發(fā)光法檢測血清 HE4 和 CA125 水平。所有操作均嚴格按照試劑盒及儀器說明書進行。陽性結(jié)果評價血清 HE4 和CA125 的參考值分別為0～140 pmol/L 和0～35 U/mL。

1.3 統(tǒng)計學處理 采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析，計量資料數(shù)據(jù)呈偏態(tài)分布，以中位數(shù)及四分位數(shù)表示，組間比較使用非參數(shù) Kruskal-Wallis 秩和檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié) 果

2.1 3組研究對象的一般資料結(jié)果比較 56例卵巢癌組進行分期，Ⅰ、Ⅱ期患者36例(64%)，Ⅲ、Ⅳ期患者20例(36%)，包括卵巢囊腫、良性子宮平滑肌瘤、巧克力囊腫、黏液性腺瘤；年齡36～72歲，平均年齡59歲。盆腔良性腫瘤組64例，年齡25～65歲，平均57歲。健康對照組60例，年齡16～77歲，平均48歲。見表1。

表1 3組研究對象的一般資料結(jié)果比較

2.2 3組研究對象血清HE4與CA125水平結(jié)果比較 卵巢癌組血清HE4水平中位數(shù)(189.84 pmol/L)高于盆腔良性腫瘤組(56.74 pmol/L)和健康對照組(46.369 pmol/L)，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。卵巢癌組血清CA125水平中位數(shù)(89.39 U/mL)高于盆腔良性腫瘤組(45.11 U/mL)和健康對照組(34.24 U/mL)，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。盆腔良性腫瘤組和健康對照組的2個指標比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。卵巢癌組Ⅲ、Ⅳ期患者HE4表達量為(247.28±32.04)pmol/L,明顯高于Ⅰ、Ⅱ期[(67.35±9.58)pmol/L]，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。見圖1、2和表2。

圖1 3組研究對象血清HE4的表達量

圖2 3組研究對象血清CA125的表達量

卵巢癌組nHE4(pmol/L)中位數(shù)范圍PCA125(U/mL)中位數(shù)范圍PⅠ、Ⅱ期3696.3655.09～233.19P<0.0167.8065.60～109.90P<0.01Ⅲ、Ⅳ期20236.25121.56～413.61206.3549.16～449.48

表3 血清HE4和CA125在卵巢癌中的診斷結(jié)果比較(%)

注：與HE4比較，*P<0.05。

2.3 卵巢癌組血清HE4和CA125的診斷結(jié)果比較 HE4受試者工作特征(ROC)曲線下面積為0.876，以50.52 pmol/L為臨界值，HE4檢測卵巢癌的特異性和敏感性達到最佳，分別為85.71%和71.63%。血清CA125單獨檢測在盆腔包塊的ROC曲線下面積為0.809，以73.35 U/L為臨界值，CA125檢測卵巢癌的敏感性和特異性達到最佳，分別為86.67%和66.07%。血清HE4檢測診斷卵巢癌的敏感性、陰性預測值均高于CA125，CA125診斷卵巢癌的特異性、陽性預測值均高于HE4，HE4和CA125聯(lián)合檢測的敏感性較兩者單獨檢測有所提高(P<0.05)。見表3和圖3。

圖3 卵巢癌組患者血清HE4和CA125的ROC曲線

3 討 論

CA125是一種高分子糖蛋白，來自體腔上皮組織的腫瘤相關抗原，在卵巢癌的診治及預后中被廣泛應用[6]。Medeiros等[7]檢測CA125 對卵巢癌的診斷分析發(fā)現(xiàn)，其敏感性為80%，特異性為75%，尤其對Ⅰ期患者的敏感性達50%～60%，需其他腫瘤標志物作為補充。雖然 CA125 對晚期卵巢癌具有較高的敏感性，但仍然有20%的上皮性卵巢癌患者血清 CA125 檢測呈陰性，在某些生理情況下(如妊娠、月經(jīng)期)和婦科良性疾病(如盆腔炎性、子宮內(nèi)膜異位癥、卵巢囊腫等)患者，血清 CA125 水平也可高于健康者[8]。因此單純應用血清CA125 診斷卵巢癌發(fā)熱特異性較差，臨床應用價值較低。HE4作為一種酸性蛋白，在人體組織中具有蛋白酶抑制劑的作用。HE4 基因位于染色體 20q12～13.1,長度約為12 kb，該基因編碼的蛋白質(zhì)與精子成熟和機體天然免疫有關。HE4 在人類生殖管道的上皮組織中呈高表達，在腎臟、前列腺和甲狀腺組織中低表達，在健康卵巢組織中不表達或低表達，而在卵巢癌組織中呈異常的高表達[9]。HE4在卵巢癌確診前1 年即發(fā)生變化，檢測HE4 水平可作為卵巢癌早期篩查的有效方法。

本研究共檢測180例標本，其中57例卵巢癌、64 例盆腔良性腫瘤、60例健康對照者的血清 HE4 和CA125 表達情況，結(jié)果表明，卵巢癌組患者血清 HE4和 CA125 水平均高于盆腔良性腫瘤組和健康對照組，且卵巢癌組Ⅲ、Ⅳ期患者血清腫瘤標志物水平分別高于Ⅰ、Ⅱ期患者，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.01)，提示血清HE4和CA125 水平檢測對卵巢癌診斷具有重要的臨床價值，而 HE4 較 CA125 在卵巢癌組和盆腔良性腫瘤組的鑒別意義更大。王耀楷[10]的研究顯示，HE4是卵巢癌和婦科其他良性疾病有價值的鑒別指標，卵巢癌組、盆腔良性腫瘤組、健康對照組血清HE4水平比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，且卵巢癌組 Ⅲ、 Ⅳ 患者血清HE4水平高于Ⅰ、 Ⅱ 期患者，有淋巴轉(zhuǎn)移的卵巢癌患者高于無淋巴轉(zhuǎn)移者，本研究結(jié)果與其一致。本研究對2種腫瘤標志物聯(lián)合檢測與單獨檢測的卵巢癌診斷結(jié)果進行比較，證實血清 HE4 檢測卵巢癌的敏感性、 特異性、 陽性預測值、陰性預測值均高于 CA125，但兩者聯(lián)合檢測的診斷效能優(yōu)于 HE4，尤其特異性可達 94.8%，楊冬梅[11]研究報道，卵巢癌患者、 卵巢良性病變患者、健康者的血清 HE4和CA125 水平存在差異，卵巢癌患者血清HE4 和CA125 水平明顯升高，聯(lián)合檢測血清HE4 和CA125 可提高診斷卵巢癌的準確性。肖林等[12]研究結(jié)果表明血清 HE4和CA125 聯(lián)合檢測對卵巢癌診斷的價值更大。

綜上所述，血清 HE4和CA125 聯(lián)合檢測可彌補單項檢測的不足，提高早期卵巢癌的診斷率，可作為卵巢癌高危人群早期篩查的血清腫瘤標志物。

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Significance of serum human HE4 and CA 125 for diagnosis of epithelial ovarian cancer*

MUYongping1,CUIHongwei2,SIQin3,SURina1,LIANGJunqing4△

(1.DepartmentofClinicalLaboratory;3.DepartmentofGynecologicalCancer;4.DepartmentofGalactophore,AffiliatedPeople′sHospitalofInnerMongoliaMedicalUniversity,Hohhot,InnerMongolia010020，China；2.DepartmentofClinicalMedicalReasearchCenter,AffiliatedHospitalofInnerMongoliaMedicalUniversity,Huhhot,InnerMongolia010050,China)

Objective To evaluate the value of HE4,CA125 in the diagnosis of epithelial ovarian cancer (EOC).Methods A total of 54 samples with epithelial ovarian cancer，64 suspicious benign pelvic mass,and 60 health controls were consecutively enrolled in this study.Results Good diagnostic performance in discriminating benign from EOC patients was obtained for CA125 and HE4.Serum level of HE4 of the patients in the three group were 189.94 pmol/L，56.74 pmol/L and 46.36 pmol/L.Levels of CA125 were 89.39 U/L，45.11 U/L and 34.24 U/L.There were stastically significant differences between the groups(P<0.05).The serum HE4 and CA125 levels of the patients with ovarian cancer at stage Ⅲ,Ⅳ(HE4=236.25 pmol/L,CA125=206.35 U/L) were significantly higher than the cases at stage Ⅰ,Ⅱ(HE4=96.36 pmol/L,CA125=67.8 U/LP<0.05).Benign pelvic mass as control,the specificity (SP) was 86.6%,sensitivity (SN) was 82.6%,positive predictive value and negative predictive value of the serum HE4 were 85.71%，71.67%,73.84%，and 84.31% respectively.SN of CA125 was 86.67%,higher than that of HE4 (71.67%,P<0.01).The area under curves (AUC) of HE4 was 0.87 higher than that of CA125 (0.81),(P<0.01).Combing detection of ovarian cancer was higher than that of HE4 and CA125 alone.SP was 95.15%,negative predictive value was 92.13%(P<0.01).Conclusion Overall,the level of serum CA125 and HE4 increase significantly,which showes well diagnostic performance to EOC from benign diseases.The combined detection of CA125 and HE4 could improve the diagnostic power in cervical cancer prominently,so it has great reference value in the diagnosis of epithelial ovarian cancer.

CA125； HE4； epithelial ovarian cancer； pelvic mass

國家重大專項科研子課題(20120901000700002472)。

牟永平，女，副主任技師，主要從事腫瘤標志物研究?！?/p>

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.20.001

A

1673-4130(2016)20-2805-03

2016-04-11

2016-06-16)