Cellectis：基因療法量產(chǎn)化

王眾

CAR-T給無數(shù)的病患帶來了生的希望，UCART的通用性有利于CAR-T治療的標準化和平民化。

成立于1999年的Cellectis是一家以細胞免疫療法為技術(shù)手段的法國公司，擁有同種異源的CAR-T（Chimeric Antigen Receptor T-CellImmunotherapy，嵌合抗原受體T細胞免疫療法）技術(shù)平臺。該平臺可以改造單個供體的T細胞，并用于多個不同的患者。Cellectis讓細胞療法的適用性得以擴展到一個人群，而不僅僅局限于單個個體，從而能夠?qū)崿F(xiàn)工業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)，成為CAR-T領(lǐng)域的一匹黑馬。2014年，Cellectis和制藥巨頭輝瑞達成了關(guān)于CAR-T療法的合作協(xié)議。2015年，Cellectis上市成功，市值10億美元。

基因抗癌界的網(wǎng)紅

這個不明覺厲的CAR-T技術(shù)是近幾年基因抗癌界的網(wǎng)紅。這種免疫療法通過特異性修飾的T細胞，高效識別腫瘤細胞，能在治療腫瘤的同時避免了對正常組織的損傷。要建立治療性的CAR-T細胞，需要通過分離患者體內(nèi)的T細胞并在體外進行特定腫瘤抗體的修飾，經(jīng)過擴增后再回輸至患者體內(nèi)，整個過程耗時約兩周。可以看出，這是一個定制型療法，目前的戰(zhàn)績十分輝煌。

CAR-T治療的臨床研究始于2010年，當時CAR-T的發(fā)明人、賓夕法尼亞大學教授CarlH.June利用CAR-T治療成功緩解了三位淋巴細胞白血病患者，其中有兩位患者維持了健康的狀態(tài)，沒有復發(fā)的跡象。2012年，身患急性淋巴細胞白血病的7歲小姑娘Emily Whitehead成為第一個接受CAR-T治療的兒童，當時CAR-T治療技術(shù)尚處于臨床Ⅰ期。

2015年11月Waseem Qasia教授結(jié)合基因編輯與CAR-T技術(shù)，成功挽救了1歲小姑娘Layla的生命。在這次治療過程中，Qasia使用的T細胞株來自于Cellectis。這就引出了這個療法的另一個關(guān)鍵詞——T細胞株。

這個細胞株是在體外培養(yǎng)后植入患者體內(nèi)的。當外源的物質(zhì)進入人體之后，通常會激發(fā)人體強烈的排異反應，最容易理解的例子是器官移植。T細胞株也是外來物質(zhì)，也很可能激發(fā)人體的排異反應。所以在CAR-T免疫治療中，最好的辦法是收集患者自身的免疫細胞，體外改造后再輸回患者體內(nèi)，這樣做基本可以避免排異反應。CAR-T療法的先驅(qū)諾華公司采用的就是個性化CAR-T免疫治療。但是，與個性化伴生的是高額的成本。

Cellectis公司的首席執(zhí)行官AndréChoulika認為，個性化與高成本無疑阻礙工業(yè)化生產(chǎn)，也就相應地阻礙了療法的推廣。值得慶幸的是，Cellectis成功破解了這個難題，也實現(xiàn)了彎道超車、后來居上。

基因療法也能量產(chǎn)

Cellectis的做法是用Talen基因編輯技術(shù)“關(guān)閉”導致人體排異反應的基因，將CAR-T制成UCART（通用型CAR-T）。由于關(guān)閉了與CAR-T的排異相關(guān)的基因，理論上，Cellectis的T細胞株可以輸入到同類疾病的所有患者體內(nèi)，不需要做配型。

Cellectis公司的執(zhí)行副總裁David Sourdive在聲明中說：“以往的細胞療法都屬于自體移植范疇?；赥alen的基因編輯方法，使得細胞療法的適用性得以擴展到一個人群，而不僅僅局限于單個個體，從而能夠?qū)崿F(xiàn)工業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)?！惫I(yè)化生產(chǎn)讓Cellectis公司有信心獲得90%的毛利潤。

不過，這并不是說，UCART本身是抗癌良藥，事實上，它是一招緩兵之計?；氐絃ayla的案例。Layla所患的急性淋巴細胞性白血病，其主要特征為，免疫淋巴細胞在骨髓內(nèi)異常增生，導致人體造血功能紊亂，以及大量器官被侵犯。

醫(yī)生發(fā)現(xiàn)，在異常增殖的免疫淋巴細胞（也就是癌細胞）表面有CD19蛋白，這個蛋白可以被CAR19蛋白識別，但是Layla的體內(nèi)沒有攜帶CAR19蛋白的合適供體。UCART19細胞（有CAR19蛋白），盡管不是合適的配型，但成為了Layla唯一的希望。

Qasim利用ZFNs基因編輯技術(shù)“關(guān)閉”了導致排異反應的關(guān)鍵基因，將UCART19安全輸入Layla體內(nèi)。UCART19將Layla體內(nèi)惡性增殖細胞消滅干凈，讓Layla能接受新一輪骨髓移植（此時有沒有CAR19蛋白已經(jīng)不重要了），目前恢復良好。當然，是不是完全康復，還需要時間的考驗。

從目前的臨床試驗結(jié)果來看，即使是已經(jīng)獲得FDA“突破性”稱號的諾華CTL019，盡管治療結(jié)束后，患者的完全緩解率較高，但是在1年時間之內(nèi)會有1/4左右的患者出現(xiàn)復發(fā)的現(xiàn)象。

CAR-T的局限

另外，盡管CAR-T的格局是抗癌，但目前的局限性和風險性也是不容忽視的。

首先，該技術(shù)的治療主要集中在血液癌癥。對付血液癌癥，只需要干掉血液中的癌細胞；但實體腫瘤是長在固定組織或者器官上的腫塊，治療難度要大得多。而且目前大多數(shù)的CAR-T針對的是CD19這個抗原，CD19只作用在B淋巴細胞上，所以它能夠殺死B淋巴細胞衍生出的急性淋巴細胞白血病和非霍奇金淋巴瘤。如果患者的白血病細胞因為基因的突變沒有生成CD19抗原，也是無效的。

另外，由于CAR-T見效過快，會產(chǎn)生一種嚴重的副作用，叫做細胞因子風暴（也稱“細胞因子釋放綜合癥”），病癥表現(xiàn)為高熱。當T細胞在殺死白血病細胞時，會釋放很多蛋白，叫作細胞因子，它們的作用是激活更多的免疫細胞來一起對抗這些病原體，就是我們?nèi)粘Ｊ煜さ难装Y反應。

但是，由于CAR-T細胞過于高效，能夠瞬間在局部產(chǎn)生超大量的細胞因子，引起驚人的免疫反應，可能產(chǎn)生的癥狀有發(fā)熱、心動過速、低血壓、毛細血管滲透綜合癥，以及呼吸系統(tǒng)癥狀。這些副作用對于身體機能已經(jīng)衰弱的癌癥患者來說，是非常危險的。

盡管如此，CAR-T，尤其是Cellectis的UCART仍然給無數(shù)的病患帶來了生的希望，UCART的通用性，更有利于CAR-T治療的標準化和平民化。