甘肅省規(guī)模場(chǎng)豬PRRSV變異株疫苗免疫抗體檢測(cè)與分析

郭慧琳，宋建國(guó)

（甘肅省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，甘肅 蘭州　730046）

甘肅省規(guī)模場(chǎng)豬PRRSV變異株疫苗免疫抗體檢測(cè)與分析

郭慧琳*，宋建國(guó)

（甘肅省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，甘肅 蘭州730046）

【方法】采用間接ELISA方法，對(duì)采自23個(gè)規(guī)模場(chǎng)戶的419份血清，進(jìn)行PRRSV變異株疫苗免疫抗體檢測(cè)?！窘Y(jié)果】17個(gè)場(chǎng)戶免疫抗體合格率在70 %以上，平均合格率為79.71 %，其中種豬為90.52 %、保育豬為80.17%，育肥豬為70.48 %；11個(gè)滅活疫苗免疫場(chǎng)戶中有6個(gè)場(chǎng)戶免疫抗體合格率在70 %以上，平均抗體合格率為71.48 %，12個(gè)弱毒疫苗免疫場(chǎng)戶中有10個(gè)場(chǎng)戶免疫抗體合格率在70 %以上，平均抗體合格率為87.55 %?！窘Y(jié)論】滅活疫苗免疫種豬、保育豬和育肥豬抗體合格率存在明顯差異，弱毒疫苗免疫種豬和保育豬與育肥豬抗體合格率之間存在明顯差異。

PRRSV變異株；免疫抗體；間接ELISA

高致病性豬藍(lán)耳病是由缺失Nsp2基因的豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）引起的一種以持續(xù)高熱、高發(fā)病率和高死亡率為特征的疫病。2006年國(guó)內(nèi)首次發(fā)生。2007年，我省豬群中豬繁殖與呼吸綜合征變異株病毒感染率為0.54 %，血清抗體陽(yáng)性率為42.83 %［1］。此后，有關(guān)我省豬PRRSV變異株疫苗免疫效果免疫調(diào)查情況除蘭州市有報(bào)道外，全省鮮有報(bào)道。為了解當(dāng)前甘肅省規(guī)模養(yǎng)豬場(chǎng)戶PRRSV變異株疫苗免疫效果，我們選擇中小規(guī)模養(yǎng)豬比較集中的23個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)戶進(jìn)行了免疫抗體檢測(cè)，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1　材料與方法

1.1樣品采集

隨機(jī)選擇全省12個(gè)市州的采用PRRSV變異株疫苗免疫30 d以上的23個(gè)規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)采集種豬、保育豬和肥育豬并分離血清。共采集種豬8場(chǎng)114份，保育豬6場(chǎng)116份，肥育豬9場(chǎng)166份共計(jì)419份血清樣品。

1.2檢測(cè)方法與結(jié)果判定

1.2.1間接ELISA，按試劑說(shuō)明書(shū)操作

1.2.2結(jié)果判定

陽(yáng)性對(duì)照OD630nm≥0.7，陰性對(duì)照OD630nm＜0.3時(shí)試驗(yàn)成立，計(jì)算KQ值。

KQ=（樣品OD630nm值/陽(yáng)性對(duì)照OD630nm平均值）×100

當(dāng)KQ≥20，判定為抗體陽(yáng)性及免疫合格；KQ＜20，判定為抗體陰性。

1.3試劑來(lái)源

ELISA試劑盒購(gòu)自武漢科動(dòng)物生物制品有限責(zé)任公司，批號(hào)：150101。

1.4疫苗來(lái)源

弱毒疫苗主要來(lái)源于哈爾濱維科生物技術(shù)開(kāi)發(fā)公司、天津輝瑞生物制品有限公司、上海海利生物制品有限公司、吉林正業(yè)生物制品有限公司4家，滅活疫苗主要來(lái)源于洛陽(yáng)普萊柯生物工程有限公司、齊魯動(dòng)物保健品有限公司、中牧實(shí)業(yè)股份有限公司成都藥械廠，瑞普（保定）生物藥業(yè)有限公司4家。

2　檢測(cè)結(jié)果（表1）

（1） 共檢測(cè)23個(gè)規(guī)模養(yǎng)豬場(chǎng)戶血清419份（種豬8場(chǎng)137份，保育豬6場(chǎng)116份，肥育豬9場(chǎng)166份）。其中檢測(cè)滅活疫苗免疫場(chǎng)戶11個(gè)202份，抗體合格144份，平均合格率為71.28 %；檢測(cè)弱毒疫苗免疫場(chǎng)戶12個(gè)217份，抗體合格190份，平均合格率為87.56 %。

（2） 11個(gè)滅活疫苗免疫場(chǎng)戶中6個(gè)場(chǎng)戶免疫抗體合格率在70 %以上，群體免疫合格率為54.55 %，種豬、保育豬和育肥豬合格率分別為89.53 %、60.71 %和55 %；12個(gè)弱毒疫苗免疫場(chǎng)戶中有10個(gè)場(chǎng)戶免疫抗體合格率在70 %以上，群體免疫合格率為83.33 %，種豬、保育豬和育肥豬合格率分別為92.16 %、91.67 %和79.25 %；各場(chǎng)檢測(cè)結(jié)果詳見(jiàn)附表。

3 小結(jié)與討論

（1） 本次調(diào)查表明，規(guī)模場(chǎng)戶群體和個(gè)體免疫效果均是弱毒苗明顯好于滅活苗。本次共檢測(cè)23個(gè)規(guī)模場(chǎng)戶，其中弱毒疫苗免疫場(chǎng)戶12個(gè)，滅活疫苗免疫場(chǎng)戶11個(gè)，共有17個(gè)場(chǎng)戶免疫抗體合格率達(dá)到70 %以上，其中弱毒疫苗免疫場(chǎng)戶10個(gè)，滅活苗免疫場(chǎng)戶7個(gè)。弱毒疫苗免疫場(chǎng)戶群體和個(gè)體免疫合格率分別為83.33 %和87.55 %。滅活疫苗免疫場(chǎng)戶群體和個(gè)體免疫合格率分別為54.55 %和71.48 %。無(wú)論是群體還是個(gè)體，免疫合格率均是弱毒苗明顯高于滅活苗。

（2） 統(tǒng)計(jì)檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，無(wú)論是滅活疫苗還是弱毒疫苗，種豬免疫效果均明顯好于保育豬和育肥豬。本次檢測(cè)種豬滅活疫苗和弱毒疫苗免疫抗體合格率分別為89.53 %和92.16 %，兩者相差僅2.63 %。而保育豬和育肥豬滅活疫苗免疫抗體合格率與種豬相比，相差近20 %或以上；保育豬弱毒疫苗免疫抗體合格率91.67 %，與種豬抗體合格率92.16 %無(wú)明顯差異。而種豬與育肥豬抗體合格率79.25 %相差12.91 %；這與規(guī)模豬場(chǎng)重視種豬免疫和種豬多次免疫有關(guān)。保育豬弱毒疫苗效果好還與PRRSV免疫母源抗體存留時(shí)間長(zhǎng)有關(guān)。

（3） 本次調(diào)查通過(guò)對(duì)各場(chǎng)檢測(cè)結(jié)果和比較各場(chǎng)使用不同類(lèi)型疫苗情況分析，未發(fā)現(xiàn)不同廠家生產(chǎn)的弱毒疫苗和滅活疫苗，在使用相同免疫劑量的情況下，其效果存在明顯差異，且免疫安全性均較好。

（4） PRRSV經(jīng)典株和變異株弱毒疫苗多用于感染壓力大的豬場(chǎng)和仔豬使用，病毒陰性豬場(chǎng)和種豬特別是在妊娠期的母豬不提倡使用。滅活疫苗主要用于預(yù)防后備母豬和經(jīng)產(chǎn)母豬感染PRRS所造成的繁殖障礙［2］。因此，各場(chǎng)應(yīng)根據(jù)當(dāng)?shù)豍RRS兩種毒株疫情風(fēng)險(xiǎn)和場(chǎng)內(nèi)是否存在兩種毒株的隱性感染決定選用何種疫苗。當(dāng)前我省的規(guī)模豬場(chǎng)幾乎都是PRRSV陽(yáng)性場(chǎng)，因此使用PRRS變異株和經(jīng)典株對(duì)豬群進(jìn)行免疫注射免疫預(yù)防的必須措施，同時(shí)有針對(duì)性的開(kāi)展兩種毒株流行病學(xué)調(diào)查和疫苗免疫效果評(píng)價(jià)，尋找切合自身場(chǎng)戶的科學(xué)免疫程序及實(shí)施綜合防控措施才是預(yù)防和控制該病的重要手段。

［1］ 韓慶彥，宋建國(guó)，周 峰，等. 甘肅省高致病性豬繁殖與呼吸綜合征分布調(diào)查［J］.動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2012，11（6）：140-142.

［2］ 陳弟詩(shī)，李金海，鄧永強(qiáng)，等.豬繁殖與呼吸綜合征免疫的重重疑云［J］.豬業(yè)科學(xué)，2012（12）：92-94.

S855.3

A

1001-0769（2016）10-0030-03

郭慧琳（1963-），女，甘肅天水人，研究員、學(xué)士，從事動(dòng)物疫病防治和研究工作。