徐榮華
(昆明市第一人民醫(yī)院輸血科,云南昆明650011)
2015年3次輸血相容性室間質(zhì)評疑難結(jié)果分析
徐榮華
(昆明市第一人民醫(yī)院輸血科,云南昆明650011)
目的采用多種檢測方法對2015年3、6、9月衛(wèi)生部臨床檢驗中心發(fā)放的三次輸血相容性室間質(zhì)控品檢測,并進行方法比較與分析判斷,提高實驗室輸血前檢測質(zhì)量水平。方法依據(jù)衛(wèi)生部臨檢中心的要求,疑難質(zhì)控品檢測的多種方法進行比較分析,運用相關(guān)專業(yè)知識判斷正確結(jié)果、總結(jié)與討論。結(jié)果3次檢測中的疑難質(zhì)控品結(jié)果均與衛(wèi)生臨檢中心標準結(jié)果一致。結(jié)論專業(yè)技術(shù)人員進行輸血相容性室間質(zhì)評檢測時,須注重方法的有效性和可比性,及結(jié)果的分析,為臨床提供科學、安全、合理、有效的血液輸注。
輸血相容性檢測;疑難結(jié)果;檢測方法;室間質(zhì)量評價
室間質(zhì)量評價(下稱室間質(zhì)評)是多家實驗室分析同一樣本,并由外部獨立機構(gòu)收集和反饋實驗室上報結(jié)果評價實驗室能力的過程[1]。根據(jù)質(zhì)評結(jié)果對各輸血科檢測實驗室的檢測質(zhì)量、能力、存在的問題等進行分析、評估。結(jié)果通過質(zhì)評活動基本上了解醫(yī)療機構(gòu)臨床輸血相容性檢測實驗室現(xiàn)狀。室間質(zhì)評活動的開展,確實能發(fā)現(xiàn)參評實驗室存在的問題,有利于采取改進措施,促進實驗室檢測質(zhì)量和能力的提高[2]。2008年至今,我科每年都參加衛(wèi)生部輸血相容性室間質(zhì)量評價,檢測結(jié)果均與衛(wèi)生部臨檢中心標準結(jié)果完全一致?,F(xiàn)將我科2015年3次輸血相容性室間質(zhì)評疑難結(jié)果檢測方法,匯總分析,從而提高實驗室檢測質(zhì)量,更好的為臨床提供科學、合理、安全、有效的血液輸注。
1.1 質(zhì)控品衛(wèi)生部臨床檢驗中心統(tǒng)一發(fā)放,ABO正定型,每次5個樣本,共計15個;ABO反定型,每次5個樣本,共計15個;RhD血型,每次5個樣本,共計15個;抗體篩檢,每次5個樣本,共計15個;交叉配血,每次5個獻血員樣本+1個模擬患者樣本,共計15個獻血員樣本+3個模擬患者樣本。3次室間質(zhì)評質(zhì)控品,疑難質(zhì)控品編號為15125、15242、15342。
1.2 儀器37℃電熱恒溫水槽(上海森信實驗儀器有限公司),SEROMATICⅡ低速離心機(KUBOT CORPORATION),Ortho-BioVue離心機(Ortho-Clinical Diagnostics),血型血清學用離心機(長春博研科學儀器有限公司),CENCE湘儀臺式低速離心機(湖南湘儀實驗室儀器開發(fā)有限公司),免疫微柱孵育器(長春博研科學儀器有限公司),32型孵育器(Ortho-Clinical Diagnostics)。
1.3 試劑抗A抗B血型定型試劑(單克隆抗體)(上海血液生物醫(yī)藥有限責任公司,批號20140613,20141123),ABO、RhD血型檢測卡(單克隆抗體)(長春博訊生物技術(shù)有限責任公司,批號20150107,20150213,20150505),ABO/Rh正反定型血型定型試劑卡(強生醫(yī)療器材有限公司,批號ABR073A,ABR094A,ABR106A),RhD(IgG+ IgM)血型定型試劑(美國,批號BMA1402D,BMA1402B),ABO血型反定型試劑盒(人血紅細胞)(長春博訊生物技術(shù)有限責任公司,批號20150319,20150406,20150710),凝聚胺介質(zhì)試劑(Baso珠海貝索生物技術(shù)有限公司,批號114101,115032),不規(guī)則抗體檢測試劑(人血紅細胞)(長春博訊生物技術(shù)有限責任公司,批號20150101,20150501,20150801),抗人球蛋白檢測卡(長春博訊生物技術(shù)有限責任公司,批號20141004,20150302,20150403),抗體篩檢卡(強生醫(yī)療器材有限公司,批號IGC605A)。
1.4 方法按照輸血操作規(guī)程進行檢測[3],手工操作。ABO正定型、ABO反定型、RhD血型,均用鹽水試管法、微柱血型卡法;抗體篩檢、交叉配血,均用鹽水試管法、凝聚胺法、微柱抗人球卡法。
2.1 第一次室間質(zhì)評關(guān)于ABO反定型15125樣本是一個A型、含有IgG類抗體的樣本。鹽水試管法檢測不會受到IgG類抗體的干擾[4],加做凝聚胺法出現(xiàn)凝集。選擇微柱血型卡法會發(fā)現(xiàn)反定試劑的A細胞與B細胞在凝集強度上存在一定的差異,加做O細胞同樣會出現(xiàn)凝集,提示反定型有干擾。而ABO血型抗體屬IgM抗體,以此判斷15125為A型。見表1。
表1 15125反定型試驗
2.2 第二次室間質(zhì)評15241號和15242號為抗篩陽性樣本,其余15243號、15244號15245號為陰性樣本。15241號抗體為Rh血型系統(tǒng)IgG類的抗D,為較常見、易檢出的抗體。15242號抗體為MNS血型系統(tǒng)IgM類的抗S??筍屬于可以造成溶血性輸血反應(yīng)的抗體[5,6]??购Y細胞若含有S抗原,微柱卡法、凝聚胺法等應(yīng)均可檢出,而鹽水試管法則不易檢出。見表2。
表2 15242抗體篩檢試驗
2.3 第三次室間質(zhì)評抗體篩檢項目檢測15342號和15343號為抗篩陽性樣本,其余15341號、15344號15345號為陰性樣本。抗體篩檢15342抗體為Kidd血型系統(tǒng)抗Jka抗體[7,8],由于Jka抗體先結(jié)合補體,它們所引起的凝集經(jīng)常很弱,檢測結(jié)果見表3。
室間質(zhì)評是利用實驗室間的比對來確定實驗室能力的活動,實際上它是指為確保實驗室維持較高的檢測水平而對其能力進行考核、監(jiān)督和確認的一種驗證活動[9],為維持輸血科較高的檢測水平。
表3 15342抗體篩檢試驗
因此我們在進行輸血相容性室間質(zhì)評檢測時應(yīng)該注意:首先,檢測試劑一般都有局限性,因此應(yīng)仔細閱讀檢測說明書,并嚴格按照操作步驟進行檢測。要關(guān)注試劑說明書的版本號。
其次,根據(jù)檢測項目選用適宜的檢測方法。ABO正定型,選用凝聚胺法、酶法是不正確的,應(yīng)使用鹽水試管法、微柱血型卡或?qū)iT用于ABO血型的微板法。ABO反定型,選用玻片法、凝聚胺法、酶法都是不正確的,應(yīng)選擇鹽水試管法、微柱血型卡或?qū)iT用于ABO血型[10]的微板法。RhD血型,檢測方法的選擇與所用試劑類型有關(guān)。如:應(yīng)用是IgM類的抗D試劑則應(yīng)選用鹽水試管法等;若應(yīng)用IgG類的抗D試劑則應(yīng)選用凝聚胺法、試管抗人球法等。如果選擇微柱卡法時應(yīng)使用血型卡進行檢測。抗體篩檢,選用玻片法、單純應(yīng)用鹽水試管法是不正確的,應(yīng)選擇凝聚胺法、微柱抗人球卡、試管抗人球法等。交叉配血,選用玻片法、單純應(yīng)用鹽水試管法是不正確的,應(yīng)選擇凝聚胺法、微柱抗人球卡、試管抗人球法等。
第一次室間質(zhì)評,15125號樣本若選用鹽水試管法檢測則不會受到IgG類抗體的干擾。因此提示在反定型檢測懷疑微柱血型卡法不能確定時,可選擇鹽水試管法來重新復檢可以排除IgG類抗體的干擾。針對微柱血型卡式方法的逐漸興起,我們大部分輸血實驗室慢慢缺失了試管法的使用與建立,我們?nèi)匀恍枰⑴c完善必要經(jīng)典的檢測方法。
第二次室間質(zhì)評,抗體篩檢15242號樣本為MNS血型系統(tǒng)IgM類的抗S[11],部分生產(chǎn)廠家缺失S抗原的表達或即使有S抗原的表達但因其為雜合細胞表達欠規(guī)范,容易導致抗體的漏檢。微柱抗人球卡法、凝聚胺法等應(yīng)均可檢出,而鹽水試管法則不易檢出。檢測方法與試劑的配套使用主要體現(xiàn)在試劑與使用微柱卡法不配套,隨意搭配試劑、配制稀釋試劑欠規(guī)范導致不能檢出稀有的或效價較低的抗體。因此試劑配套使用時應(yīng)進行相關(guān)驗證,不能使用自配試劑,選擇批間變化較小的試劑。
第三次室間質(zhì)評,Kidd抗體通常為IgG或IgG和IgM的混合物,但幾乎沒有純IgM型[12]。許多抗-Jka與Jk(a+b-)細胞的反應(yīng)比與Jk(a+b+)細胞反應(yīng)強,同時一些抗-Jka只能與Jk(a+b-)細胞反應(yīng)[13,14]。若需要檢測出抗-Jka宜選擇含有Jk(a+b-)抗原的譜細胞。應(yīng)用的譜細胞應(yīng)具備與有臨床意義抗體相匹配的抗原表達,檢測方法應(yīng)配套使用,不能使用非國家認證的試劑和自制的譜細胞,否則會有漏檢抗體的風險。
綜上所述,衛(wèi)生部臨檢中心發(fā)放的質(zhì)控品,檢測難度系數(shù)逐年提高。我們實驗室技術(shù)人員只有積極加強自身學習,不斷學習輸血各項試驗檢測新方法,不但能在同一試驗中運用多種方法進行準確操作,而且對檢測項目的各種方法的原理、檢測儀器及試劑項目校準、操作步驟、結(jié)果判斷、干擾因素及注意事項、臨床意義都熟練掌握,才能對室間質(zhì)評疑難結(jié)果做出準確判斷[15]。以此證明該實驗室的檢測能力,從而為臨床提供科學、合理、安全、有效的血液輸注!
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R457.1+3
A
1674-1129(2016)05-0686-03
10.3969/j.issn.1674-1129.2016.05.053
2016-05-10;
2016-07-08)