細(xì)菌性陰道病患者陰道灌洗液中干擾素—γ和白細(xì)胞介素—4的含量分析

李淑 趙菊美 鄒振宇

【摘要】目的：檢測(cè)細(xì)菌性陰道病患者治療前后陰道灌洗液中干擾素-γ和白細(xì)胞介素-4的含量，以分析陰道局部免疫狀況和臨床治療效果。方法：通過分析2013年10月至2014年7月我院收治的47例細(xì)菌性陰道病患者的臨床資料，使用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)患者治療前后陰道灌洗液中干擾素-γ和白細(xì)胞介素-4的含量，同時(shí)對(duì)47例健康婦女檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行對(duì)比分析。結(jié)果：BV組患者IFN-γ水平顯著低于對(duì)照組健康婦女IFN-γ水平，組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。統(tǒng)計(jì)BV患者治療前后IFN-γ、IL-4兩項(xiàng)水平，BV治愈患者IFN-γ較治療前有顯著提高，IL-4則顯著降低，未治愈患者則呈反向變化，BV治愈患者和未治愈患者IFN-γ和IL-4水平差異顯著（P<0.05）。結(jié)論：BV患者患病同IFN-γ水平顯著降低和Th1/Th2比例失衡存在一定的相關(guān)關(guān)系，為治療BV提供了一定依據(jù)。

【關(guān)鍵詞】細(xì)菌性陰道?。魂幍拦嘞匆?；干擾素-γ；白細(xì)胞介素-4

Analysis on interferon -γ and interleukin-4 levels in vaginal lavage fluid of patients with bacterial vaginosisLI Shu1， ZHAO Jumei1△， ZOU Zhenyu2. 1.Department of Obstetrics and Gynecology， Panzhihua City Second Peoples Hospital， Panzhihua 617000， Sichuan， China； 2.Anesthesia Department， Panzhihua City Second Peoples Hospital， Panzhihua 617000， Sichuan， China

【Abstract】Objectives： To detect interferon-γ and interleukin-4 levels in vaginal lavage fluid of patients with bacterial vaginosis and analyze vaginal immune status and clinical outcomes. Methods： By analyzing clinical data of 47 cases of bacterial vaginosis in our hospital from October 2013 to July 2014 and using enzyme-linked immunosorbent assay to detect interferon -γ and interleukin - 4 content， the test results were analyzed. Results： IFN-γ level in patients with BV was significantly lower than that in control group. The difference was statistically significant （P<0.05）. IFN-γ level of BV cure patients after treatment significantly increased and IL-4 level significantly reduced. IFN-γ and IL-4 level of uncured patient were in opposite directions. IFN-γ and IL-4 levels of BV cured patients and uncured patients were significantly different （P<0.05）. Conclusion： Significant reduced level of IFN-γ in BV patients is correlative with Th1 / Th2 imbalance， which provides a certain basis for the treatment of BV.

【Key words】Bacterial vaginosis； Vaginal lavage； IFN -γ； Interleukin-4

【中圖分類號(hào)】R711.31【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】A

細(xì)菌性陰道?。╞acterial vaginosis，BV）是指發(fā)生于陰道內(nèi)的菌群失調(diào)，大量病原菌如加德納菌、彎曲弧菌、革蘭陰性菌和各種厭氧菌等在陰道內(nèi)繁殖，而乳酸桿菌數(shù)目大量減少的一種陰道炎癥[1]。該疾病多發(fā)于中青年女性人群中，可通過性接觸進(jìn)行傳播，此外大量服用抗生素和過度使用陰道洗液進(jìn)行清潔會(huì)破壞陰道環(huán)境進(jìn)而導(dǎo)致大量細(xì)菌病原體繁殖，發(fā)展成為BV[2，3]。目前臨床可使用陰道灌洗術(shù)控制BV，此外還有局部藥物治療方法減少病原菌的數(shù)目進(jìn)而控制病情[4]，本研究為分析BV患者行陰道灌洗術(shù)后局部免疫狀況可疾病轉(zhuǎn)歸情況，對(duì)47例BV患者治療前后陰道灌洗液中干擾素-γ（IFN-γ）和白細(xì)胞介素-4（IL-4）的含量進(jìn)行測(cè)量。現(xiàn)報(bào)道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

選取2013年10月至2014年7月到我院診治的BV患者47例及隨機(jī)選取的健康婦女47例作為對(duì)照組，年齡19～49歲。BV組47例，年齡19～48歲，平均（31.73±5.49）歲；對(duì)照組47例，年齡19-49歲，平均（30.92±6.81）歲。入選標(biāo)準(zhǔn)：（1）選取兩組女性均未妊娠，平素月經(jīng)規(guī)律；（2）均無陰道出血情況；（3）近1個(gè)月無藥物服用史；（4）就診時(shí)及1年內(nèi)宮頸細(xì)胞學(xué)檢查無異常；（5）全部女性無內(nèi)外科疾病和免疫系統(tǒng)疾病史；（6）3 d內(nèi)無性生活和陰道清洗史；（7）不存在盆腔炎和陰道炎患者；（8）檢查宮頸高危型人乳頭瘤病毒（HPV）DNA結(jié)果呈陰性。對(duì)照組女性無白帶增多和外陰瘙癢等癥狀；BV組患者存在白帶增多、有味等臨床癥狀，陰道分泌物檢測(cè)見線索細(xì)胞。所有患者簽署知情同意書。兩組患者年齡等一般資料組間無顯著性差異（P>0.05），具有可比性。

1.2方法

BV組患者治療方案為：采用局部用藥治療，給予患者甲硝唑呋喃唑酮栓（哈藥集團(tuán)制藥總廠，國藥準(zhǔn)字H23022664，5s/粒）1粒/次，1次/晚，連續(xù)治療1周。BV組患者分別在治療前、后第2個(gè)月月經(jīng)干凈后對(duì)患者陰道灌洗液中IFN-γ和IL-4兩種細(xì)胞因子水平進(jìn)行檢測(cè)，具體檢測(cè)步驟為：（1）采集標(biāo)本：在月經(jīng)來潮前10d內(nèi)采集組員陰道灌洗液，在暴露陰道的狀態(tài)下取中上1/3的側(cè)壁分泌物進(jìn)行生殖道微生態(tài)檢測(cè)。取0.9%的無菌氯化鈉注射液5mL對(duì)陰道壁上1/3及宮頸陰道部進(jìn)行充分沖洗，在后穹窿處吸取灌洗液4mL，室溫條件下以2000r/min的速度離心5min，去除上清液分裝于-80℃條件下保存。使用無菌刷在宮頸表面順時(shí)針?biāo)?圈，將樣本置于保存液中為進(jìn)一步HPV DNA檢測(cè)做準(zhǔn)備。需注意制作標(biāo)本中不能混有血液和反復(fù)凍融處理。（2）陰道分泌物的檢測(cè)：采用革蘭染色鏡行生殖道微生態(tài)檢測(cè)，檢測(cè)項(xiàng)目包括清潔度、pH值及菌群多樣性、優(yōu)勢(shì)菌群、線索細(xì)胞和乳酸桿菌等。（3）IFN-γ和IL-4的含量測(cè)定：采用酶聯(lián)免疫吸附法定量檢測(cè)法檢測(cè)IFN-γ和IL-4的含量。試劑盒選用武漢博士德生物工程有限公司的人白介素7酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒IL-7（h）ELISA kit，貨號(hào)EK0779，具體操作按照說明書進(jìn)行[5，6]。

1.3觀察指標(biāo)

對(duì)BV組患者進(jìn)行1個(gè)月隨訪，測(cè)得患者治療前后陰道灌洗液中IFN-γ和IL-4的含量，并對(duì)比分析IFN-γ和IL-4水平變化，同時(shí)同對(duì)照組進(jìn)行比較分析。BV治愈標(biāo)準(zhǔn)：患者臨床癥狀消失，經(jīng)檢測(cè)陰道菌群恢復(fù)正常，未檢測(cè)出病原菌。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

利用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)軟件建立數(shù)據(jù)庫，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示， 組間比較采用t檢驗(yàn)， 計(jì)數(shù)資料用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1BV組患者和對(duì)照組兩組女性陰道灌洗液中IFN-γ和IL-4水平比較BV組患者IFN-γ和IL-4水平同對(duì)照組對(duì)比，組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

3討論

臨床統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)BV感染率相對(duì)較高，作為臨床常見的婦科病之一，BV疾病具有臨床表現(xiàn)不明顯的特點(diǎn)，大部分臨床患者無任何癥狀，少部分患者有臨床表現(xiàn)，常表現(xiàn)為白帶增多、有異味，同時(shí)極少數(shù)患者伴有輕度的外陰瘙癢和灼燒感癥狀[7，8]。據(jù)統(tǒng)計(jì)BV疾病臨床復(fù)發(fā)率相對(duì)較高，其發(fā)病機(jī)制和復(fù)發(fā)機(jī)制尚不能確定，故不能有效控制[9]。近年來有研究發(fā)現(xiàn)BV患者同健康患者陰道灌洗液中IFN-γ和IL-4水平存在一定差異，測(cè)定IFN-γ和IL-4水平有助于了解BV患者局部免疫微環(huán)境的變化，本研究對(duì)此進(jìn)行了深入探討。

研究中統(tǒng)計(jì)BV組患者和對(duì)照組女性陰道灌洗液中的IFN-γ和IL-4水平，發(fā)現(xiàn)BV患者陰道灌洗液中的IFN-γ含量同對(duì)照組具有顯著性差異（P<0.05）。近年來，有學(xué)者發(fā)現(xiàn)免疫因子的異常分泌同陰道炎發(fā)病存在一定的關(guān)系，T輔助細(xì)胞則是影響人體免疫功能的重要免疫細(xì)胞，T輔助細(xì)胞的Th1可分泌IFN-γ，IFN-γ具有抗病毒、免疫調(diào)節(jié)及抗腫瘤特性，可介導(dǎo)細(xì)胞免疫，而Th2可分泌IL-4，具有調(diào)節(jié)體液免疫和適應(yīng)性免疫的作用，可介導(dǎo)體液免疫[10-12]。正常情況下人體Th1/Th2維持在一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定的水平，一旦兩者平衡遭到破壞，人體局部免疫微環(huán)境即發(fā)生變化，導(dǎo)致人體出現(xiàn)感染或其他病理情況。研究結(jié)果顯示BV組患者的IFN-γ水平顯著較高，推測(cè)其在陰道感染中起著至關(guān)重要的作用，BV患者的IFN-γ分泌受到了一定的抑制，改善Th1細(xì)胞分泌IFN-γ有助于改善病情發(fā)展[13，14]。此外研究中還分析了BV治愈患者和BV未治愈患者的兩種細(xì)胞因子的變化，發(fā)現(xiàn)治療前后兩種細(xì)胞因子均發(fā)生一定的變化，其中IL-4發(fā)生變化較顯著，治愈患者和未治愈患者IL-4含量差異也較大。未治愈患者Th1/Th2平衡狀態(tài)同正常婦女差異較大，推測(cè)Th1/Th2失衡也是導(dǎo)致BV疾病發(fā)作的重要原因之一[15]。

綜上所述，BV患者發(fā)病機(jī)制同陰道局部免疫微環(huán)境變化有一定的關(guān)系，適當(dāng)提高IFN-γ水平和降低IL-4水平對(duì)改善患者Th1/Th2平衡狀態(tài)和改善病情有一定的幫助，有一定的臨床指導(dǎo)意義。

參考文獻(xiàn)

[1]李桂軍，蔣琰瑛，周建娟，等.恢復(fù)陰道微生態(tài)在細(xì)菌性陰道病個(gè)體化治療中的價(jià)值分析.實(shí)用婦產(chǎn)科雜志，2013，29（2）：147-151.

[2]周亞芬，張靜.婦科門診細(xì)菌性陰道病發(fā)病率及相關(guān)危險(xiǎn)因素分析.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2013，23（4）：852-854.

[3]姜志鳳，宗瑋芳，孫佩芳，等.BV Blue法在細(xì)菌性陰道病中的診斷價(jià)值評(píng)估.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2012，27（5）：386-388.

[4]周志強(qiáng)，孫占學(xué)，李元文，等.性活躍女性陰道病原體檢測(cè)結(jié)果分析.中國性科學(xué)，2010，19（6）：35-36

[5]劉紅芳，黃進(jìn)梅，薛汝增，等.陰道局部免疫狀態(tài)與復(fù)發(fā)性外陰陰道念珠菌病發(fā)病的關(guān)系.皮膚性病診療學(xué)雜志，2011，18（6）：369-372

[6]梅慧華，吳衛(wèi)英.霉菌性陰道炎患者陰道灌洗液細(xì)胞因子檢測(cè)臨床分析.中國藥物與臨床，2013，13（12）：1613-1614.

[7]Raju， Gautam，Hanneke，et al. Correlates of the molecular vaginal microbiota composition of African women.BMC Infectious Diseases，2015，15（1）：831.

[8]朱麗莎，王鳳玲，冉訓(xùn)，等.1000例婦科門診細(xì)菌性陰道病聯(lián)合檢測(cè)的結(jié)果及分析.國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2012，33（3）：349-350.

[9]Marconi C， Donders GGG， Bellen G， et al. Sialidase activity in aerobic vaginitis is equal to levels during bacterial vaginosis.European Journal of Obstetrics， Gynecology and Reproductive Biology： An International Journal，2013，167（2）：205-209.

[10]Donders GGG， Zodzika J， Rezeberga D. Treatment of bacterial vaginosis： What we have and what we miss. Expert Opinion on Pharmacotherapy， 2014，15（5）：645-657.

[11]孫倩男，王祥珍.關(guān)于17型T輔助細(xì)胞相關(guān)因子與宮腔粘連的探析.中國醫(yī)學(xué)創(chuàng)新，2015（5）：147-149，150.

[12]朱亮，奚耀，趙雷，等.升降散對(duì)膿毒癥小鼠 Th1/Th2和 Th17/Treg失衡的干預(yù).中國急救醫(yī)學(xué)，2015（5）：402-406.

[13]袁媛，張宇嬌，傅曉冬.干擾素α-2b對(duì)早孕合并細(xì)菌性陰道病絨毛血管超微結(jié)構(gòu)及血管內(nèi)皮生長因子表達(dá)的影響.中國計(jì)劃生育和婦產(chǎn)科，2014，6（1）：46-48，54.

[14]Yano J，Noverr MC，F(xiàn)idel Jr PL. et al.Cytokines in the host response to Candida vaginitis： Identifying a role for non-classical immune mediators， S100 alarmins.Cytokine，2012，58（1）：118-128.

[15]言獻(xiàn)波.胎膜早破原因與血清中Th1/Th2細(xì)胞因子變化的相關(guān)性研究.菏澤醫(yī)學(xué)專科學(xué)校學(xué)報(bào)，2012，24（2）：1-3.