• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    脂聯(lián)素在結(jié)直腸癌患者中的表達(dá)及其對(duì)結(jié)直腸癌細(xì)胞增殖和Caspase-3表達(dá)的影響

    2016-11-09 02:40:48解寒冰夏云展薛建鋒楊大勇
    關(guān)鍵詞:脂聯(lián)素直腸癌血清

    解寒冰,夏云展,薛建鋒,楊大勇

    (1.河南省鄭州人民醫(yī)院普通外科,河南 鄭州 450053;2.鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院肝膽外科,河南 鄭州 450052)

    脂聯(lián)素在結(jié)直腸癌患者中的表達(dá)及其對(duì)結(jié)直腸癌細(xì)胞增殖和Caspase-3表達(dá)的影響

    解寒冰1,夏云展1,薛建鋒2,楊大勇1

    (1.河南省鄭州人民醫(yī)院普通外科,河南 鄭州 450053;2.鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院肝膽外科,河南 鄭州 450052)

    目的測(cè)定結(jié)直腸癌(CR C)患者血清中脂聯(lián)素水平,觀察脂聯(lián)素對(duì)人結(jié)直腸癌細(xì)胞LoVo增殖及凋亡相關(guān)蛋白Caspase-3的影響,初步探討其在CR C中的作用機(jī)制。方法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)CR C組及健康對(duì)照組血清脂聯(lián)素水平,活細(xì)胞計(jì)數(shù)法試劑盒(cell counting kit-8,CCK-8)細(xì)胞增殖試驗(yàn)檢測(cè)重組人脂聯(lián)素對(duì)LoVo細(xì)胞增殖的影響,Western blot檢測(cè)重組人脂聯(lián)素作用細(xì)胞后Caspase-3蛋白的表達(dá)。結(jié)果CR C組血清脂聯(lián)素水平(3.5±2.5)μg/ml低于健康對(duì)照組(4.6±2.1)μg/ml,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與健康對(duì)照組比較,重組人脂聯(lián)素作用LoVo細(xì)胞后,對(duì)細(xì)胞增殖有抑制作用,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),活化的Caspase-3蛋白表達(dá)量增加,且有劑量-效應(yīng)和時(shí)間-效應(yīng)。結(jié)論血清脂聯(lián)素水平與CR C發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)密切相關(guān),重組人脂聯(lián)素可以抑制LoVo細(xì)胞生長(zhǎng),呈時(shí)間-劑量依賴性,其機(jī)制可能與Caspase-3活化相關(guān)。

    結(jié)直腸癌;脂聯(lián)素;細(xì)胞增殖;Caspase-3

    結(jié)直腸癌(colorectal cancer,CRC)是常見的消化系統(tǒng)惡性腫瘤,占全部癌死亡原因的第3位[1]。多種風(fēng)險(xiǎn)因素可以促進(jìn)CRC的發(fā)展,包括飲食和遺傳。多項(xiàng)研究表明,肥胖與CRC發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)增加有關(guān)[2],其中肥胖引起脂肪組織增加,導(dǎo)致脂肪細(xì)胞因子(脂聯(lián)素、瘦素和腫瘤壞死因子-α)分泌的改變,可能影響癌癥啟動(dòng)和轉(zhuǎn)移[3-4]。有研究表明,脂聯(lián)素降低可能與結(jié)直腸癌的發(fā)生密切相關(guān)[5]。本研究擬檢測(cè)CRC患者外周血中脂聯(lián)素的表達(dá)水平,探討脂聯(lián)素與CRC患者發(fā)病的相關(guān)性,并用重組人脂聯(lián)素作用于結(jié)腸癌細(xì)胞,觀察其對(duì)細(xì)胞增殖及凋亡的作用,為脂聯(lián)素在CRC中作用機(jī)制的研究提供更多理論支持。

    1 材料與方法

    1.1一般資料

    1.1.1研究對(duì)象選取2015年1月-2016年1月鄭州人民醫(yī)院收治的原發(fā)性結(jié)直腸癌患者共58例(CRC組)。其中,男性34例,女性24例;平均年齡(55.4±8.5)歲,體重指數(shù)(body mass index,BMI)(23.4± 3.3)kg/m2,均經(jīng)病理診斷為腺癌。其中直腸癌19例,結(jié)腸癌39例;高分化癌5例,中分化癌25例,低分化癌28例。根據(jù)國際抗癌聯(lián)盟指定的TNM分期:Ⅰ期7例,Ⅱ期27例,Ⅲ期18例,Ⅳ期6例。所有入選患者入組前未接受任何治療。術(shù)前血清標(biāo)本采集后,置入-80℃冰箱保存?zhèn)溆?。收集同期健康體檢者30例為健康對(duì)照組。其中,男性18例,女性12例;平均年齡(52.6±9.3)歲,BMI(23.2±2.4)kg/m2,經(jīng)腹部超聲檢查、X線檢查、血常規(guī)檢查和生物化學(xué)檢查,確定無惡性腫瘤。兩組在性別、年齡上比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。所有入選對(duì)象簽署知情同意書。

    1.1.2細(xì)胞株及主要試劑LoVo人結(jié)直腸癌細(xì)胞株(上海中國科學(xué)院細(xì)胞庫),重組人脂聯(lián)素(美國Prospec公司),脂聯(lián)素酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(enzymelinked immunosorbent assay,ELISA)檢測(cè)試劑盒(美國RD公司),活細(xì)胞計(jì)數(shù)法試劑盒(cell counting kit-8,CCK-8)細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒(江蘇凱基生物技術(shù)公司),兔抗人含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(以下簡(jiǎn)稱Caspase-3)一抗(#9665,美國CST公司),兔抗人β-肌動(dòng)蛋白一抗、辣根過氧化物酶標(biāo)記羊抗兔二抗(北京博奧森生物技術(shù)公司),增強(qiáng)化學(xué)發(fā)光法(enhanced chemiluminescence,ECL)發(fā)光液(美國Millipore公司)。

    1.1.3主要實(shí)驗(yàn)儀器奧地利CliniBio-128酶標(biāo)儀(奧地利CliniBio公司),美國Bio-Rad電泳儀(美國Bio-Rad公司),美國UVP GelDoc-It310凝膠成像系統(tǒng)(美國UVP公司)。

    1.2實(shí)驗(yàn)方法

    1.2.1標(biāo)本采集待測(cè)者清晨空腹采取靜脈血2ml,室溫靜置2h,3000×g離心5min,取血清置于-80℃冰箱冷凍保存待測(cè)。

    1.2.2外周血中脂聯(lián)素水平檢測(cè)采用ELISA檢測(cè)CRC組及健康對(duì)照組血清中脂聯(lián)素的水平,按照美國RD公司ELISA試劑盒說明書進(jìn)行操作,酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果。

    1.2.3細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)人LoVo細(xì)胞培養(yǎng)于Ham's F-12K培養(yǎng)基中(含10%胎牛血清,青霉素100u/ml,鏈霉素100 u/ml),在37℃、5%二氧化碳CO2飽和濕度細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的LoVo細(xì)胞以100μl/孔(約含1×104個(gè)細(xì)胞)接種于96孔板中,培養(yǎng)24 h后,加入不同終濃度的重組人脂聯(lián)素(終濃度分別為0、15、30、60和90ng/ml),每組設(shè)6個(gè)平行孔,于37℃、5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24和48h后,各孔加入10μl CCK-8溶液,繼續(xù)孵育4 h后,酶標(biāo)儀在450 nm波長(zhǎng)測(cè)定各孔吸光度(optical delnsity,OD)值。細(xì)胞抑制%=(對(duì)照細(xì)胞OD值-加藥細(xì)胞OD值)/對(duì)照細(xì)胞OD值×100%。

    1.2.4Western blot檢測(cè)Caspase-3表達(dá)水平不同濃度重組人脂聯(lián)素分別培養(yǎng)細(xì)胞24 h,同時(shí)以60ng/ml重組人脂聯(lián)素分別培養(yǎng)細(xì)胞12、24和48h,胰酶消化收集各組的細(xì)胞,蛋白裂解液處理并制備蛋白樣品。根據(jù)蛋白定量結(jié)果調(diào)整每孔上樣量,將蛋白樣品加在10%聚丙烯酰胺凝膠電泳膠中進(jìn)行電泳,電泳結(jié)束后用濕轉(zhuǎn)法將蛋白轉(zhuǎn)到硝酸纖維素膜上,5%脫脂奶粉室溫震蕩封閉2 h,三羥甲基氨基甲烷緩沖鹽溶液(tris buffered saline and tween 20,TBST)洗膜后分別加入Caspase-3(1∶1 000稀釋)、β-肌動(dòng)蛋白(1∶300稀釋)一抗,4℃冰箱孵育過夜。TBST洗膜后,加入二抗(1∶5000稀釋)室溫孵育1 h,加發(fā)光液進(jìn)行化學(xué)發(fā)光顯影,美國UVP Gel Doc-It 310凝膠成像系統(tǒng)拍照。

    1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

    采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,行正態(tài)性檢驗(yàn),偏態(tài)資料行LOG轉(zhuǎn)換。兩獨(dú)立組間的比較用成組t檢驗(yàn),多組間比較用單因素方差分析,多重比較為L(zhǎng)SD-t檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料以例數(shù)或率描述,組間比較用χ2檢驗(yàn),P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1CRC組與健康對(duì)照組外周血脂聯(lián)素水平比較

    兩組間年齡、性別、BMI[BMI=體重(kg)/身高(m)2]比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。CRC組血清脂聯(lián)素水平[(3.5±2.5)μg/ml]低于健康對(duì)照組[(4.6±2.1)μg/ml],差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

    表1 CRC組與健康對(duì)照組各因素比較

    2.2重組人脂聯(lián)素對(duì)LoVo細(xì)胞增殖的影響

    CCK-8法檢測(cè)結(jié)果顯示,15和30 ng/ml重組人脂聯(lián)素作用細(xì)胞24h,與0ng/ml細(xì)胞增殖活性比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);但隨著作用時(shí)間延長(zhǎng)至48 h,30 ng/ml重組人脂聯(lián)素對(duì)細(xì)胞增殖活性的影響與0 ng/ml比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。60和90ng/ml重組人脂聯(lián)素對(duì)細(xì)胞增殖活性有抑制作用,與0ng/ml比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。重組人脂聯(lián)素降低LoVo細(xì)胞活性,抑制細(xì)胞生長(zhǎng),且抑制作用與時(shí)間和劑量相關(guān)。見表2。

    表2 不同濃度重組人脂聯(lián)素蛋白對(duì)LoVo細(xì)胞增殖的影響(n=6,ng/ml±s)

    表2 不同濃度重組人脂聯(lián)素蛋白對(duì)LoVo細(xì)胞增殖的影響(n=6,ng/ml±s)

    注:抑制率資料經(jīng)LOG轉(zhuǎn)換后行參數(shù)分析。1)與24 h比較,P<0.05;2)與0 ng/ml比較,P<0.05;3)與15 ng/ml比較,P<0.05;4)與30 ng/ml比較,P<0.05;5)與60ng/ml比較,P<0.05

    抑制率/% 24h24h48h 0ng/ml0.70±0.031.02±0.09t0.100.10 15ng/ml0.67±0.040.94±0.061)3.82±2.772)8.06±5.231)2)30ng/ml0.66±0.040.72±0.061)2)3)4.65±3.362)28.55±10.451)2)3)60ng/ml0.55±0.032)3)4)0.70±0.031)2)3)21.26±6.2242)3)3)30.42±6.731)2)3)90ng/ml0.51±0.022)3)4)5)0.67±0.031)2)3)27.63±5.542)3)4)34.46±6.582)3)整體分析HF系數(shù)0.98920.9521 F組間值44.70746.308 P組間值0.0000.000 F時(shí)間值609.23678.460 P時(shí)間值0.0000.000 F組間×?xí)r間值34.76116.737 P組間×?xí)r間值0.0000.000組別OD值48h

    2.3不同濃度重組人脂聯(lián)素作用LoVo細(xì)胞后對(duì)Caspase-3蛋白表達(dá)的影響

    以不同濃度重組人脂聯(lián)素分別培養(yǎng)細(xì)胞24 h,Western blot檢測(cè)發(fā)現(xiàn),30 ng/ml濃度時(shí)開始出現(xiàn)Caspase-3分解條帶(分子量17 kD),且隨著濃度逐漸增加,Caspase-3分解條帶相對(duì)表達(dá)水平逐漸增加,各組間比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),提示重組人脂聯(lián)素促進(jìn)Caspase-3蛋白活化的作用呈濃度依賴性。見圖1和表3。

    圖1 不同濃度重組人脂聯(lián)素作用LoVo細(xì)胞后對(duì)Caspase-3蛋白表達(dá)的影響(±s)

    表3 Caspase-3蛋白表達(dá)水平比較(n=6±s)

    表3 Caspase-3蛋白表達(dá)水平比較(n=6±s)

    注:t1、P1:0 ng/ml與15 ng/ml比較;t2、P2:0 ng/ml與30 ng/ml比較;t3、P3:0ng/ml與60ng/ml比較;t4、P5:0ng/ml與90ng/ml比較

    脂聯(lián)素濃度相對(duì)灰度值0ng/ml0.006±0.002 15ng/ml0.039±0.008 30ng/ml0.133±0.011 60ng/ml0.163±0.017 90ng/ml0.251±0.005 F值579.609 P值0.000 t1值5.712 P1值0.000 t2值22.029 P2值0.000 t3值27.211 P3值0.000 t4值42.370 P4值0.000

    2.4同一濃度重組人脂聯(lián)素作用LoVo細(xì)胞不同時(shí)間后對(duì)Caspase-3蛋白表達(dá)的影響

    以60ng/ml重組人脂聯(lián)素為實(shí)驗(yàn)濃度,分別培養(yǎng)細(xì)胞12、24和48 h,Western blot檢測(cè)觀察發(fā)現(xiàn),重組人脂聯(lián)素作用12h后出現(xiàn)Caspase-3分解條帶(分子量17 kD),且隨著作用時(shí)間逐漸延長(zhǎng),Caspase-3分解條帶相對(duì)表達(dá)水平逐漸增加,各組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),提示重組人脂聯(lián)素促進(jìn)Caspase-3蛋白活化的作用具有時(shí)間依賴性。見表4和見圖2。

    表4 60ng/ml重組人脂聯(lián)素作用LoVo細(xì)胞不同時(shí)間后的Caspase-3蛋白表達(dá)水平比較(n=6±s)

    表4 60ng/ml重組人脂聯(lián)素作用LoVo細(xì)胞不同時(shí)間后的Caspase-3蛋白表達(dá)水平比較(n=6±s)

    注:t1、P1:0h與12h比較;t2、P2:0h與24h比較;t3、P3:0h與48 h比較

    作用時(shí)間相對(duì)灰度值0h0.002±0.001 12h0.041±0.004 24h0.076±0.007 48h0.122±0.011 F值326.243 P值0.000 t1值9.721 P1值0.000 t2值18.477 P2值0.000 t3值30.007 P3值0.000

    圖2 60ng/ml重組人脂聯(lián)素作用LoVo細(xì)胞不同時(shí)間后的Caspase-3蛋白表達(dá)±s)

    3 討論

    脂聯(lián)素是由脂肪細(xì)胞分泌的一種內(nèi)源性生物活性蛋白質(zhì),具有抗動(dòng)脈粥樣硬化、保護(hù)心血管系統(tǒng)、改善胰島素抵抗、調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝及抗炎等多種功能[6]。另外,脂聯(lián)素還與肥胖相關(guān)的生殖、消化和內(nèi)分泌系統(tǒng)惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān),具有重要的抗腫瘤效應(yīng)[7]。而在結(jié)直腸癌中,KUMOR等[8]研究發(fā)現(xiàn),血清脂聯(lián)素水平在結(jié)直腸癌患者中明顯下降。CHEN等[9]研究發(fā)現(xiàn),血清高分子量脂聯(lián)素(脂聯(lián)素主要的活性形式)明顯增加男性結(jié)直腸癌的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。多項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn),血清脂聯(lián)素水平與結(jié)直腸癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)呈負(fù)相關(guān)[10-12],且隨著腫瘤分期的增加而降低[13]。本研究發(fā)現(xiàn),結(jié)直腸癌患者外周血脂聯(lián)素水平低于健康對(duì)照組,提示血清脂聯(lián)素水平與結(jié)直腸癌發(fā)病有一定的相關(guān)性,支持血清脂聯(lián)素濃度的降低是結(jié)直腸癌發(fā)病的危險(xiǎn)因素的研究論點(diǎn)。

    脂聯(lián)素在結(jié)直腸癌發(fā)病過程中的具體作用機(jī)制尚未明確。以往文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn),體外實(shí)驗(yàn)中脂聯(lián)素能夠明顯抑制前列腺癌細(xì)胞株的生長(zhǎng)[14];且脂聯(lián)素對(duì)多種人乳腺癌細(xì)胞具有抑制其增殖的作用,生理濃度的脂聯(lián)素能夠有效抑制人乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞的增殖,并且繼續(xù)給予脂聯(lián)素,可以使細(xì)胞生長(zhǎng)停滯甚至引起細(xì)胞的凋亡[15]。本研究采用不同濃度的重組人脂聯(lián)素作用細(xì)胞不同時(shí)間后,結(jié)果發(fā)現(xiàn),30 ng/ml重組人脂聯(lián)素作用48 h或60 ng/ml作用24 h能夠明顯降低結(jié)直腸癌LoVo細(xì)胞的增殖活力,且其抑制效果隨著濃度和時(shí)間的增加而增強(qiáng),有較良好的時(shí)效和量效關(guān)系。本研究結(jié)果提示,脂聯(lián)素具有抑制細(xì)胞增殖的作用,這可能是血清脂聯(lián)素水平降低與結(jié)直腸癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)增高相關(guān)的一個(gè)重要因素。

    Caspase是一組存在于細(xì)胞質(zhì)中具有類似結(jié)構(gòu)的蛋白酶[16]。Caspase與真核細(xì)胞凋亡密切相關(guān),并參與細(xì)胞的生長(zhǎng)、分化與凋亡調(diào)節(jié)。其中Caspase-3是家族中關(guān)鍵的凋亡蛋白酶,其激活可以水解特異性細(xì)胞蛋白和聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶。研究發(fā)現(xiàn),脂聯(lián)素能夠抑制胰腺癌Pan-2細(xì)胞的增殖,且該過程伴隨細(xì)胞凋亡增加和Caspase-3的活化[17]。本研究檢測(cè)脂聯(lián)素作用結(jié)直腸癌LoVo細(xì)胞后,細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白Caspase-3的表達(dá)水平,結(jié)果發(fā)現(xiàn),30ng/ml脂聯(lián)素作用24 h或60 ng/ml脂聯(lián)素作用12h后,能夠檢測(cè)出活化的Caspase-3,并且表達(dá)水平隨著濃度升高和作用時(shí)間的增加而逐漸加強(qiáng)。本研究提示,脂聯(lián)素可能通過激活Caspase-3蛋白,導(dǎo)致結(jié)直腸癌LoVo細(xì)胞發(fā)生凋亡。

    綜上所述,血清脂聯(lián)素水平與結(jié)直腸癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)密切相關(guān),血清脂聯(lián)素濃度降低是結(jié)直腸癌發(fā)病的危險(xiǎn)因素。脂聯(lián)素能夠抑制結(jié)直腸癌細(xì)胞LoVo增殖,并且脂聯(lián)素可能通過激活Caspase-3而誘導(dǎo)結(jié)直腸癌細(xì)胞凋亡,為重組人脂聯(lián)素治療結(jié)直腸癌患者提供新的思路。

    [1]FERLAY J,SOERJOMATARAM I,DIKSHIT R,et al.Cancer incidence and mortality worldwide:sources,methods and major patterns in GLOBOCAN 2012[J].Int JCancer,2015,136(5): E359-E386.

    [2]PIETRZYK L,TORRES A,MACIEJEWSKI R,et al.Obesity and obese-related chronic low-grade inflammation in promotion of colorectal cancer development[J].Asian Pacific Journal of Cancer Prevention,2015,16(10):4161-4168.

    [3]MANNA P,JAIN S K.Obesity,Oxidative Stress,Adipose Tissue Dysfunction,and the Associated Health Risks:Causes and Therapeutic Strategies[J].Metab Syndr Relat Disord,2015,13(10): 423-444.

    [4]JOSHI R K,LEE S A.Obesity related adipokines and colorectal cancer:a review and meta-analysis[J].Asian Pacific Journal of Cancer Prevention,2014,15(1):397-405.

    [5]HOPKINS M H,FLANDERS W D,BOSTICK R M.Associations of circulating inflammatory biomarkers with risk factors for colorectal cancer in colorectal adenoma patients[J].Biomark Insights, 2012,7:143-150.

    [6]FREITAS LIMA L C,BRAGA V A,DO SOCORRO de FRANCA SILVA M,et al.Adipokines,diabetes and atherosclerosis:an inflammatory association[J].Front Physiol,2015,6:304.

    [7]BOOTH A,MAGNUSON A,FOUTS J,et al.Adipose tissue, obesity and adipokines:role in cancer promotion[J].Horm Mol Biol Clin Investig,2015,21(1):57-74.

    [8]KUMOR A,DANIEL P,PIETRUCZUK M,et al.Serum leptin, adiponectin,and resistin concentration in colorectal adenoma and carcinoma(CC)patients[J].Int J Colorectal Dis,2009,24(3):275-281.

    [9]CHEN MW,YE S,ZHAO L L,et al.Association of plasma total and high-molecular-weight adiponectin with riskof colorectal cancer:an observational study in Chinese male[J].Med Oncol, 2012,29(5):3129-3135.

    [10]TAEC H,KIM S E,JUNG S A,et al.Involvement of adiponectin in early stage of colorectal carcinogenesis[J].BMC Cancer,2014,14:811.

    [11]GIALAMAS S P,PETRIDOU E T,TSELENI-BALAFOUTA S,et al.Serumadiponectinlevelsandtissueexpressionof adiponectin receptors are associated with risk,stage,and grade of colorectal cancer[J].Metabolism,2011,60(11):1530-1538.

    [12]TOUVIER M,FEZEU L,AHLUWALIA N,et al.Pre-diagnostic levelsofadiponectinandsolublevascularcelladhesion molecule-1 are associated with colorectal cancer risk[J].World J Gastroenterol,2012,18(22):2805-2812.

    [13]ALEKSANDROVA K,BOEING H,JENAB M,et al.Total and high-molecular weight adiponectin and risk of colorectal cancer: the european prospective investigation into cancer and nutrition study[J].Carcinogenesis,2012,33(6):1211-1218.

    [14]TAN W,WANG L,MA Q,et al.Adiponectin as a potential tumor suppressor inhibiting epithelial-to-mesenchymal transition but frequently silenced in prostate cancer by promoter methylation[J].Prostate,2015,75(11):1197-1205.

    [15]MAURO L,PELLEGRINO M,de AMICIS F,et al.Evidences that estrogen receptor alpha interferes with adiponectin effects on breast cancer cell growth[J].Cell Cycle,2014,13(4):553-554. [16]GALLUZZI L,LOPEZ-SOTO A,KUMAR S,et al.Caspases connect cell-death signaling to organismal homeostasis[J].Immunity,2016,44:221-231.

    [17]KATO M,WATABE K,TSUJII M,et al.Adiponectin inhibits murine pancreatic cancer growth[J].Dig Dis Sci,2014,59(6): 1192-1196.

    (童穎丹編輯)

    Expression of adiponectin in patients with colorectal cancer and its influence on colorectal cancer cell proliferation and caspase-3 expression

    Han-bing Xie1,Yun-zhan Xia1,Jian-feng Xue2,Da-yong Yang1
    (1.Department of General Surgery,Zhengzhou People's Hospital,Zhengzhou,Henan 450053,China;2.Department of Hepatobiliary Surgery,the First Affiliated Hospital of Zhengzhou University,Zhengzhou,Henan 450052,China)

    Objective To detect the serum adiponectin level in patients with colorectal cancer(CRC),and to observe the effect of adiponectin on colorectal cancer LoVo cell proliferation and apoptosis-related protein caspase-3,andpreliminarilydiscussthemechanism.MethodsELISAwasusedtodetecttheserum adiponectin levels of colorectal cancer group and healthy control group.CCK 8 test was used to detect the influence of recombinant human adiponectin on LoVo cell proliferation.Western blot was adopted to detect the effect of recombinant human adiponectin on caspase-3 protein expression.Results The serum adiponectin level in the CRC patients[(3.5±2.5)μg/ml]was lower than that of the control group[(4.6±2.1)μg/ml],the difference was statistically significant(P<0.05).Compared with the control group,recombinant human adiponectin significantly inhibited proliferation of LoVo cells(P<0.05).Adiponectin significantly increased the expression of activated caspase-3 in the cells in a dose-and time-dependent manner.Conclusions Serum adiponectin level is closely associated with colorectal cancer risk.Recombinant human adiponectin can inhibit the proliferation of LoVo cells,and the effect is time-and dose-dependent.Its mechanism may be associated with caspase-3 activation.

    colorectal cancer;adiponectin;cell proliferation;caspase-3

    R 735.3

    A

    10.3969/j.issn.1005-8982.2016.19.010

    1005-8982(2016)19-0047-05

    2015-12-11

    猜你喜歡
    脂聯(lián)素直腸癌血清
    血清免疫球蛋白測(cè)定的臨床意義
    中老年保健(2021年3期)2021-08-22 06:50:04
    Meigs綜合征伴血清CA-125水平升高1例
    慢性鼻-鼻竇炎患者血清IgE、IL-5及HMGB1的表達(dá)及其臨床意義
    腹腔鏡下直腸癌前側(cè)切除術(shù)治療直腸癌的效果觀察
    脂聯(lián)素生物學(xué)與消化系統(tǒng)腫瘤
    直腸癌術(shù)前放療的研究進(jìn)展
    COXⅠ和COX Ⅲ在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)及其臨床意義
    自噬與脂聯(lián)素誘導(dǎo)的人乳腺癌MCF-7細(xì)胞凋亡的關(guān)系
    GRP及GRPR在結(jié)直腸癌中的表達(dá)及意義
    脂聯(lián)素、瘦素與2型糖尿病患者輕度認(rèn)知功能障礙的關(guān)系
    免费无遮挡裸体视频| ponron亚洲| 在线a可以看的网站| 乱码一卡2卡4卡精品| 特大巨黑吊av在线直播| 精品欧美国产一区二区三| 午夜精品在线福利| 99热精品在线国产| 怎么达到女性高潮| 亚洲精品456在线播放app | 久久久久久久久久黄片| 最好的美女福利视频网| 国产亚洲精品av在线| a级一级毛片免费在线观看| 欧美另类亚洲清纯唯美| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 国产伦人伦偷精品视频| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| av福利片在线观看| 久久精品91蜜桃| 波多野结衣巨乳人妻| 搡老熟女国产l中国老女人| 看免费av毛片| 国产成+人综合+亚洲专区| 波野结衣二区三区在线| 欧美国产日韩亚洲一区| 久久伊人香网站| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 亚洲在线自拍视频| 国产成人啪精品午夜网站| 精品午夜福利视频在线观看一区| 精品人妻一区二区三区麻豆 | av在线老鸭窝| 久久久久久久久久黄片| 午夜福利欧美成人| 午夜a级毛片| 男女下面进入的视频免费午夜| 国产午夜精品论理片| 如何舔出高潮| 特大巨黑吊av在线直播| 91麻豆av在线| 别揉我奶头 嗯啊视频| 亚洲七黄色美女视频| 亚洲av美国av| 午夜精品久久久久久毛片777| 亚洲av免费高清在线观看| 国产欧美日韩精品亚洲av| 88av欧美| 99热6这里只有精品| 亚洲精品影视一区二区三区av| 亚洲精品成人久久久久久| 亚洲,欧美精品.| 俄罗斯特黄特色一大片| 日本a在线网址| 亚洲成av人片免费观看| 免费在线观看亚洲国产| 直男gayav资源| 波多野结衣巨乳人妻| 国产免费男女视频| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 国产一级毛片七仙女欲春2| 久久国产乱子伦精品免费另类| 免费电影在线观看免费观看| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 成人午夜高清在线视频| 男人的好看免费观看在线视频| 久久99热6这里只有精品| 亚洲男人的天堂狠狠| 日日夜夜操网爽| 亚洲欧美日韩东京热| 亚洲成人久久性| www日本黄色视频网| 日本精品一区二区三区蜜桃| 18禁在线播放成人免费| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 国产中年淑女户外野战色| 直男gayav资源| 韩国av一区二区三区四区| 黄色日韩在线| 日本免费一区二区三区高清不卡| 最新中文字幕久久久久| 亚洲熟妇熟女久久| 最近最新免费中文字幕在线| 久99久视频精品免费| 国产成人啪精品午夜网站| 成人美女网站在线观看视频| 亚洲无线观看免费| 国产老妇女一区| av在线观看视频网站免费| 久久这里只有精品中国| 哪里可以看免费的av片| 日韩欧美免费精品| 亚洲最大成人手机在线| 很黄的视频免费| 高清在线国产一区| 在线国产一区二区在线| 国语自产精品视频在线第100页| ponron亚洲| 久久精品久久久久久噜噜老黄 | 91午夜精品亚洲一区二区三区 | 色哟哟·www| 亚洲黑人精品在线| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 色综合婷婷激情| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 亚洲 国产 在线| 国产高清激情床上av| 亚洲内射少妇av| 天美传媒精品一区二区| 99精品久久久久人妻精品| 欧美3d第一页| 国产探花在线观看一区二区| 国内精品一区二区在线观看| 国内精品美女久久久久久| 草草在线视频免费看| 成人特级av手机在线观看| 亚洲五月天丁香| 国产成人aa在线观看| 色尼玛亚洲综合影院| 日日摸夜夜添夜夜添小说| av天堂中文字幕网| 午夜福利在线在线| 久久精品国产清高在天天线| 一个人免费在线观看的高清视频| 久久性视频一级片| 校园春色视频在线观看| 午夜日韩欧美国产| 精品不卡国产一区二区三区| 久久国产乱子免费精品| 国产高清视频在线观看网站| 性插视频无遮挡在线免费观看| 在线看三级毛片| 十八禁国产超污无遮挡网站| 欧美+日韩+精品| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 黄色女人牲交| 日韩欧美免费精品| 国产美女午夜福利| 久久国产精品人妻蜜桃| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 国产三级中文精品| 国产精品一区二区三区四区久久| 成人午夜高清在线视频| 国产亚洲欧美98| 亚洲在线观看片| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 神马国产精品三级电影在线观看| 久久久久久久久久黄片| 欧美在线一区亚洲| 很黄的视频免费| 亚洲av成人精品一区久久| 欧美最新免费一区二区三区 | 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 嫩草影院入口| 亚洲欧美精品综合久久99| 窝窝影院91人妻| 悠悠久久av| 1024手机看黄色片| 国产v大片淫在线免费观看| netflix在线观看网站| 12—13女人毛片做爰片一| 十八禁网站免费在线| 最近中文字幕高清免费大全6 | 十八禁人妻一区二区| 欧美极品一区二区三区四区| 9191精品国产免费久久| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 国产精品,欧美在线| 偷拍熟女少妇极品色| 精品人妻熟女av久视频| 久久人妻av系列| 亚洲经典国产精华液单 | 色av中文字幕| 亚洲,欧美,日韩| 亚洲精品在线观看二区| 长腿黑丝高跟| 亚洲精华国产精华精| 国产精品久久电影中文字幕| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片 | 日韩欧美国产一区二区入口| 国产成人福利小说| 国产欧美日韩一区二区精品| 精品人妻一区二区三区麻豆 | 免费看美女性在线毛片视频| 久99久视频精品免费| 免费观看精品视频网站| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 免费人成视频x8x8入口观看| 99热6这里只有精品| 日日夜夜操网爽| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 亚洲av美国av| 一区二区三区免费毛片| 成年女人毛片免费观看观看9| 欧美日韩国产亚洲二区| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 97超视频在线观看视频| 久久久久久大精品| 99精品久久久久人妻精品| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 一级黄色大片毛片| av欧美777| 制服丝袜大香蕉在线| 欧美黄色淫秽网站| 亚洲一区二区三区不卡视频| av在线观看视频网站免费| 亚洲无线在线观看| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 看片在线看免费视频| 三级国产精品欧美在线观看| 黄片小视频在线播放| 免费人成视频x8x8入口观看| 性欧美人与动物交配| 久久国产精品人妻蜜桃| 看十八女毛片水多多多| 欧美在线黄色| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 精品人妻熟女av久视频| 99久久精品一区二区三区| 亚洲精品在线美女| avwww免费| 亚洲av熟女| 美女高潮的动态| 在线观看舔阴道视频| 亚洲 国产 在线| 国产精品三级大全| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 免费观看精品视频网站| 欧美+亚洲+日韩+国产| 丰满乱子伦码专区| 简卡轻食公司| av在线老鸭窝| ponron亚洲| 有码 亚洲区| 亚洲成av人片免费观看| 免费观看精品视频网站| 欧美一区二区精品小视频在线| 亚洲av免费在线观看| 亚洲最大成人手机在线| 国产大屁股一区二区在线视频| 日本黄色视频三级网站网址| 精品一区二区免费观看| 日韩欧美精品免费久久 | 他把我摸到了高潮在线观看| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 99久久成人亚洲精品观看| 国产精品亚洲一级av第二区| 国产精品免费一区二区三区在线| 久久亚洲真实| 日韩欧美国产在线观看| 在线观看66精品国产| 国产高清视频在线观看网站| 国产人妻一区二区三区在| av专区在线播放| 最好的美女福利视频网| 超碰av人人做人人爽久久| 欧美成人免费av一区二区三区| 欧美不卡视频在线免费观看| 少妇丰满av| 97热精品久久久久久| 男女那种视频在线观看| 精品一区二区三区人妻视频| 亚洲18禁久久av| bbb黄色大片| 搡老熟女国产l中国老女人| 色在线成人网| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 亚洲欧美精品综合久久99| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 制服丝袜大香蕉在线| 亚洲av不卡在线观看| 99久久九九国产精品国产免费| 精品久久久久久久久亚洲 | 欧美黑人巨大hd| 在线播放国产精品三级| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 变态另类丝袜制服| 又黄又爽又免费观看的视频| 久久亚洲精品不卡| 97热精品久久久久久| 高潮久久久久久久久久久不卡| 午夜福利在线在线| 日本a在线网址| 成人美女网站在线观看视频| 国产男靠女视频免费网站| 亚洲黑人精品在线| 午夜精品一区二区三区免费看| 村上凉子中文字幕在线| 观看美女的网站| 欧美极品一区二区三区四区| 国产色爽女视频免费观看| 天堂网av新在线| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 变态另类丝袜制服| 亚洲欧美激情综合另类| 国产乱人伦免费视频| 国产精品三级大全| 老司机午夜福利在线观看视频| 中文字幕高清在线视频| 窝窝影院91人妻| 免费在线观看影片大全网站| 美女黄网站色视频| 性色avwww在线观看| 99久久精品一区二区三区| 亚洲欧美日韩无卡精品| 老鸭窝网址在线观看| 国产综合懂色| 日本五十路高清| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 99久久成人亚洲精品观看| 不卡一级毛片| 九九热线精品视视频播放| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 看十八女毛片水多多多| 麻豆国产97在线/欧美| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 欧美不卡视频在线免费观看| 国产精品免费一区二区三区在线| 久久久国产成人免费| 亚洲人成伊人成综合网2020| 国产乱人伦免费视频| 一二三四社区在线视频社区8| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 国产老妇女一区| 欧美一区二区亚洲| 亚洲天堂国产精品一区在线| 国产高清视频在线播放一区| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 中文字幕久久专区| 五月伊人婷婷丁香| av女优亚洲男人天堂| 日日夜夜操网爽| 日本与韩国留学比较| 男人的好看免费观看在线视频| 欧美日韩国产亚洲二区| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 日本 欧美在线| 国产主播在线观看一区二区| a级一级毛片免费在线观看| 桃色一区二区三区在线观看| 好男人在线观看高清免费视频| 在线看三级毛片| 成人亚洲精品av一区二区| 一本久久中文字幕| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 国产精品综合久久久久久久免费| 性色av乱码一区二区三区2| 老女人水多毛片| 久久精品人妻少妇| 亚洲av熟女| 天堂网av新在线| 国产野战对白在线观看| 亚洲精品影视一区二区三区av| 美女被艹到高潮喷水动态| 一级a爱片免费观看的视频| 美女cb高潮喷水在线观看| 在线播放无遮挡| 他把我摸到了高潮在线观看| bbb黄色大片| 一个人看的www免费观看视频| 国产黄a三级三级三级人| 欧美成人免费av一区二区三区| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 精品久久久久久久久av| 99久久无色码亚洲精品果冻| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 国产一区二区三区视频了| 一个人免费在线观看的高清视频| 人妻久久中文字幕网| 亚洲第一电影网av| 欧美精品啪啪一区二区三区| 精品午夜福利在线看| 日本 欧美在线| 人人妻人人看人人澡| 欧美日韩黄片免| 久久精品综合一区二区三区| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 亚洲无线观看免费| 亚州av有码| 亚洲男人的天堂狠狠| 99久久精品国产亚洲精品| 熟女电影av网| 欧美一区二区亚洲| 观看美女的网站| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 国产一区二区在线观看日韩| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 中文字幕免费在线视频6| av福利片在线观看| 亚洲,欧美精品.| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 国产欧美日韩一区二区精品| 国产精品永久免费网站| 国产野战对白在线观看| 免费观看的影片在线观看| 国产v大片淫在线免费观看| 午夜福利高清视频| 两个人视频免费观看高清| 午夜福利视频1000在线观看| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 波多野结衣巨乳人妻| 99国产极品粉嫩在线观看| 国产精品免费一区二区三区在线| 精品午夜福利视频在线观看一区| ponron亚洲| 欧美成人一区二区免费高清观看| 亚洲成av人片在线播放无| 香蕉av资源在线| 亚洲黑人精品在线| 一本一本综合久久| 日韩欧美在线乱码| 中文字幕av成人在线电影| 欧美成人一区二区免费高清观看| 亚洲无线在线观看| 亚洲av电影在线进入| 亚洲av熟女| 真人一进一出gif抽搐免费| 国产成人a区在线观看| 丁香欧美五月| 国产av不卡久久| 黄色丝袜av网址大全| 深夜a级毛片| 少妇人妻精品综合一区二区 | 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 国产精品爽爽va在线观看网站| 久久国产精品人妻蜜桃| 男人舔女人下体高潮全视频| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 久久精品综合一区二区三区| 国产在线精品亚洲第一网站| 欧美一区二区精品小视频在线| 综合色av麻豆| 亚洲成人久久爱视频| 日本黄色视频三级网站网址| 乱人视频在线观看| av在线老鸭窝| 动漫黄色视频在线观看| 性插视频无遮挡在线免费观看| 欧美另类亚洲清纯唯美| 国语自产精品视频在线第100页| 久久精品国产清高在天天线| 成熟少妇高潮喷水视频| 亚洲男人的天堂狠狠| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 国产成人影院久久av| 少妇熟女aⅴ在线视频| 亚洲av成人av| 色av中文字幕| 两人在一起打扑克的视频| 国产极品精品免费视频能看的| 色播亚洲综合网| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 女同久久另类99精品国产91| 嫩草影院新地址| 亚洲人成网站高清观看| 好男人电影高清在线观看| or卡值多少钱| 看免费av毛片| 国产视频一区二区在线看| 亚洲精品一区av在线观看| 我要看日韩黄色一级片| 麻豆国产av国片精品| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 亚洲精品日韩av片在线观看| 免费搜索国产男女视频| 免费看光身美女| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 大型黄色视频在线免费观看| 18美女黄网站色大片免费观看| 欧美日本视频| 三级国产精品欧美在线观看| 国产成人影院久久av| 午夜视频国产福利| 草草在线视频免费看| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 午夜免费成人在线视频| 两个人视频免费观看高清| 国产精品永久免费网站| 国产不卡一卡二| 欧美乱妇无乱码| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 最好的美女福利视频网| 亚洲成人久久爱视频| 网址你懂的国产日韩在线| a级毛片a级免费在线| 免费在线观看日本一区| 五月伊人婷婷丁香| 真人一进一出gif抽搐免费| h日本视频在线播放| 69av精品久久久久久| 成人永久免费在线观看视频| 精品乱码久久久久久99久播| 十八禁人妻一区二区| 欧美区成人在线视频| 性色av乱码一区二区三区2| 看免费av毛片| 国产高清视频在线观看网站| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 又黄又爽又免费观看的视频| 欧美日韩乱码在线| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 麻豆国产97在线/欧美| 美女被艹到高潮喷水动态| 香蕉av资源在线| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 亚洲精品在线观看二区| 中文字幕熟女人妻在线| 日韩欧美在线乱码| 黄片小视频在线播放| 日韩欧美在线二视频| 国产精品亚洲一级av第二区| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 91九色精品人成在线观看| or卡值多少钱| 禁无遮挡网站| 999久久久精品免费观看国产| 亚洲av美国av| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 午夜a级毛片| 国产久久久一区二区三区| 免费看光身美女| 国产高清有码在线观看视频| 欧美日韩国产亚洲二区| 午夜影院日韩av| 能在线免费观看的黄片| 亚洲专区中文字幕在线| 免费电影在线观看免费观看| 国产综合懂色| 久久精品久久久久久噜噜老黄 | 日本免费一区二区三区高清不卡| 黄片小视频在线播放| 久久国产精品人妻蜜桃| 久久国产精品影院| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 久久亚洲精品不卡| 免费人成视频x8x8入口观看| 国产精品亚洲美女久久久| 亚洲av免费在线观看| 天堂影院成人在线观看| 国产一区二区三区视频了| 男人和女人高潮做爰伦理| 久久久久久九九精品二区国产| 国产精品爽爽va在线观看网站| 91在线观看av| 国产精品,欧美在线| 成人美女网站在线观看视频| АⅤ资源中文在线天堂| 日本黄色片子视频| 一级a爱片免费观看的视频| 午夜精品在线福利| 一级黄色大片毛片| 国模一区二区三区四区视频| 国产精品一区二区性色av| 嫁个100分男人电影在线观看| 又紧又爽又黄一区二区| 日本一二三区视频观看| ponron亚洲| 亚洲成a人片在线一区二区| 精品人妻视频免费看| 俺也久久电影网| 国产精品综合久久久久久久免费| 少妇人妻精品综合一区二区 | 最新在线观看一区二区三区| 亚洲真实伦在线观看| 欧美色欧美亚洲另类二区| 色在线成人网| 无人区码免费观看不卡| 精品久久久久久,| 精品午夜福利视频在线观看一区| 国产真实伦视频高清在线观看 | 国产美女午夜福利| 搡老熟女国产l中国老女人| 在线观看美女被高潮喷水网站 | 好男人电影高清在线观看| 超碰av人人做人人爽久久| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 日本熟妇午夜| 好男人电影高清在线观看| 欧美成人免费av一区二区三区| 亚洲美女视频黄频| 亚洲不卡免费看| 美女黄网站色视频| 久久久久久久亚洲中文字幕 | 国产av一区在线观看免费| 99热只有精品国产| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 最近视频中文字幕2019在线8| 久久伊人香网站| 国产精品三级大全| 久久久久久久久久成人| 国产一区二区激情短视频| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 久久久久国内视频| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 久久九九热精品免费| 久久国产精品影院| а√天堂www在线а√下载| av福利片在线观看| 色播亚洲综合网| 永久网站在线| 亚洲精华国产精华精| 12—13女人毛片做爰片一| 国产亚洲欧美98| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 91麻豆av在线| 婷婷六月久久综合丁香| 又爽又黄无遮挡网站| 丰满的人妻完整版| 国产高清三级在线| 日本与韩国留学比较| 国产精品久久电影中文字幕|