生血寶合劑對心梗后心衰大鼠心功能及心肌結(jié)構(gòu)的影響

張　洋，張　艷，刁鳳聲，王仁和

(1.大連醫(yī)科大學附屬第二醫(yī)院 中醫(yī)理療科，遼寧 大連 116027；2.遼寧中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院 心內(nèi)科，遼寧 沈陽 110032；3.遼寧中醫(yī)藥大學 研究生學院，遼寧 沈陽 110032)

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生血寶合劑對心梗后心衰大鼠心功能及心肌結(jié)構(gòu)的影響

張洋1,3，張艷2，刁鳳聲1，王仁和3

(1.大連醫(yī)科大學附屬第二醫(yī)院 中醫(yī)理療科，遼寧 大連 116027；2.遼寧中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院 心內(nèi)科，遼寧 沈陽 110032；3.遼寧中醫(yī)藥大學 研究生學院，遼寧 沈陽 110032)

目的觀察生血寶合劑對心梗后心衰大鼠心功能及心肌結(jié)構(gòu)的影響。方法以冠脈結(jié)扎配合力竭式游泳制作心梗后大鼠心衰模型，將造模成功存活的大鼠隨機分為模型組、賴諾普利組、生血寶合劑組，每組10只；未行冠脈結(jié)扎術的大鼠10只為對照組。各組均通過灌胃給藥或蒸餾水，給藥6周后超聲心動圖檢測左室收縮末期容積(ESV)、左室舒張末期容積(EDV)、左室射血分數(shù)(LVEF)和左室每搏輸出量(SV)，后處死全部大鼠，取心肌組織HE染色觀察心肌組織結(jié)構(gòu)變化。結(jié)果與對照組比較，模型組、生血寶合劑組及賴諾普利組ESV、EDV明顯升高，LVEF、SV顯著下降，差異均有顯著性意義，P<0.05。與模型組比較，生血寶合劑組及賴諾普利組ESV、EDV顯著下降，LVEF、SV明顯升高，差異均有顯著性意義，P<0.05。生血寶合劑組與賴諾普利組比較，ESV、EDV、LVEF及SV數(shù)值，差異均無顯著性意義，P>0.05。HE染色顯示，對照組心肌細胞排列整齊、致密、結(jié)構(gòu)清晰，細胞外間質(zhì)較少，可見少量成纖維細胞。模型組心肌細胞淡染，排列紊亂，細胞間隙增大、形態(tài)模糊，成纖維細胞增多，伴有炎癥細胞浸潤。生血寶合劑組及賴諾普利組心肌細胞形態(tài)較清晰，成纖維細胞和炎癥細胞少見。結(jié)論生血寶合劑可改善心梗后心衰大鼠心功能，修復受損的心肌組織，起到治療心衰的作用。

生血寶合劑；心梗后心衰；心功能；心肌結(jié)構(gòu)

[引用本文]張洋，張艷，刁鳳聲，等.生血寶合劑對心梗后心衰大鼠心功能及心肌結(jié)構(gòu)的影響[J].大連醫(yī)科大學學報，2016,38(5)：436-439.

心力衰竭(簡稱心衰)是各種心血管疾病發(fā)展的終末階段，其發(fā)病率、致殘率以及病死率較高。心室重構(gòu)引起的心肌結(jié)構(gòu)改變和心功能下降是心衰發(fā)生發(fā)展的病理生理基礎。賴諾普利為血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑，是目前治療心衰的基石性藥物，具有抑制心室重構(gòu)及改善心功能等作用。生血寶合劑據(jù)中醫(yī)“精血相生”理論組方，已有研究證實具有調(diào)節(jié)免疫、抗血栓、調(diào)血脂，抗氧化、促進紅細胞生成及調(diào)節(jié)細胞分布紊亂等多重作用[1-2]。目前尚鮮見生血寶合劑對心衰相關影響的研究報道。本研究擬通過與賴諾普利療效進行比較，觀察生血寶合劑對心梗后心衰大鼠心功能及心肌結(jié)構(gòu)的影響，研究其作用機制及靶點，為中醫(yī)藥防治心衰提供新策略。

1　材料和方法

1.1實驗動物

選用普通級，12周齡，健康雄性SD大鼠100只，體重220～260 g。由遼寧長生生物技術有限公司提供[SCXK(遼)2010-0001]。

1.2造模與分組

選取90只大鼠經(jīng)1周適應性喂養(yǎng)后采用2%戊巴比妥鈉溶液，按48 mg/kg劑量行腹腔注射麻醉。胸部備皮，于左側(cè)第4肋間開胸，分離胸部肌肉，暴露肋骨，分離肋骨間組織，剝離心包膜，于冠狀動脈前降支起點處結(jié)扎前降支[3]；心臟表面給予利多卡因注射液約0.1 mL，以預防室性心律失常，分層縫合胸壁[4-5]，術后記錄心電圖。心電圖ST段上抬0.05 mV以上或出現(xiàn)病理性Q波為判定心梗造模成功標準。術后連續(xù)注射青霉素鈉3 d，預防感染。常規(guī)喂養(yǎng)1周后，于第2周行力竭式游泳(把大鼠置于長2 m寬1.5 m水池中，水深約1 m，以大鼠頭部完全沉入水中，肢體無明顯擺動判斷為力竭)，1次/d，共4周[6-7]。后行超聲心動圖檢測，以左室射血分數(shù)(EF)≤60%或計算心臟指數(shù)(CI)≤180 mL/(min/kg)為心衰造模成功標準[8-9]。造模過程中，大鼠存活41只，死亡49只。將存活的大鼠隨機分為模型組、賴諾普利組、生血寶合劑組，每組10只；未行冠脈結(jié)扎術的大鼠10只為對照組。

1.3藥物與給藥劑量

生血寶合劑(每瓶100 mL)，由清華德人西安幸福制藥生產(chǎn)，國藥準字：Z20050770。賴諾普利片(每片10 mg)，由信誼萬象藥業(yè)股份提供，國藥準字：H1096026。對照組與模型組灌胃蒸餾水1.5 mL/次，2次/d。給藥組按人鼠劑量換算，給藥劑量(g/kg)=給出的人的劑量(g)×系數(shù)(0.018)/所求動物體重(kg)[10]，灌胃給藥。生血寶合劑組，給藥為9.2 g生藥/kg，2次/d；賴諾普利組，1.5 mg生藥/kg，2次/d。各組均灌胃6周。

1.4檢測方法

給藥6周后，各組大鼠行超聲心動圖檢測左室收縮末期容積(ESV)、左室舒張末期容積(EDV)、左室射血分數(shù)(LVEF)和左室每搏輸出量(SV)。后處死全部大鼠，取心肌組織1.5 cm3，10%福爾馬林溶液固定，HE染色，光學顯微鏡觀察并攝片。

1.5統(tǒng)計學方法

2　結(jié)　果

2.1各組大鼠心功能情況

與對照組比較，模型組、生血寶合劑組及賴諾普利組ESV、EDV明顯升高，LVEF、SV顯著下降，差異均有顯著性意義，P<0.05。與模型組比較，生血寶合劑組及賴諾普利組ESV、EDV顯著下降，LVEF、SV明顯升高，差異均有顯著性意義，P<0.05。生血寶合劑組與賴諾普利組比較，ESV、EDV、LVEF及SV數(shù)值差異均無顯著性意義，P>0.05。見表1。

表1　各組大鼠心功能變化情況

1)與對照組比較，P<0.05；2)與模型組比較，P<0.05

2.2各組大鼠心肌組織HE染色結(jié)果

對照組：心肌細胞排列整齊、致密、結(jié)構(gòu)清晰，細胞外間質(zhì)較少，可見少量成纖維細胞。

模型組：心肌細胞淡染，排列紊亂，細胞間隙增大、形態(tài)模糊，成纖維細胞增多，伴有炎癥細胞浸潤。

生血寶合劑組及賴諾普利組：心肌細胞形態(tài)較清晰，成纖維細胞和炎癥細胞少見。見圖1。

圖1　各組大鼠心肌組織HE染色Fig 1 The rats myocardial tissue HE staining results(HE ×40)A:對照組；B:模型組；C:賴諾普利組；D:生血寶合劑組

3　討　論

現(xiàn)代醫(yī)學中的心衰與中醫(yī)文獻記載的心衰存在著一定差異，屬中醫(yī)學“胸痹、痰飲、不寐、水腫、喘證、心悸”等范疇[11-12]。其病機之根為陽微陰弦本虛標實之證候，本虛以心腎氣虛為主，標實則以心血虧虛為重。故補益心腎，調(diào)和氣血為其有效治則。心室重構(gòu)是心衰發(fā)生發(fā)展的病理生理基礎[13]；心室重構(gòu)發(fā)生后，心室射血功能的下降和心室容量的增加可導致心室肥厚，出現(xiàn)心肌細胞結(jié)構(gòu)排列紊亂，進而加速了心衰進程[14-15]。

生血寶合劑為棕褐色液體，氣微香，味甜、微苦，其主要成分為黃芪、白芍、桑葚、何首烏、女貞子、黑早蓮、狗脊等，具有益氣生血，滋補心腎之功效。賴諾普利為血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑，具有抑制心室重構(gòu)及改善心功能等作用。本實驗通過對大鼠行冠脈結(jié)扎術及配合力竭式游泳的方法，成功制作了大鼠心梗后心衰模型，予生血寶合劑及賴諾普利進行干預觀察。行超聲心動圖發(fā)現(xiàn)，與對照組比較，模型組大鼠心功能明顯下降，生血寶合劑組及賴諾普利組大鼠心功能較模型組有明顯改善。行心肌組織HE染色發(fā)現(xiàn)，模型組心肌細胞淡染，排列紊亂，細胞間隙增大、形態(tài)模糊，成纖維細胞增多，伴有炎癥細胞浸潤。生血寶合劑組及賴諾普利組心肌細胞形態(tài)較清晰，成纖維細胞和炎癥細胞少見。本實驗結(jié)果提示生血寶合劑與賴諾普利均可改善心梗后心衰大鼠心功能，可修復受損心肌組織。其作用機制可能是通過改善受損心肌纖維的抗牽拉性、彈性及提高心室順應性，進而達到治療心衰的作用。本研究表明，生血寶合劑中各味中藥配伍后，其功效在治療心衰過程中起到了協(xié)同及促進作用，為中醫(yī)“氣能生血，血能養(yǎng)氣”的理論提供了科學客觀的實驗依據(jù)，佐證了“補益心腎，調(diào)和氣血”治則在治療心衰中的重要意義。本研究為生血寶合劑防治心衰提供了實驗研究基礎。生血寶合劑價格較為低廉，具備較好的經(jīng)濟依從性，可期待其作為防治心衰的新手段。但其防治心衰的療效還有待于進一步臨床研究予以證實。

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Shengxuebao mixture effect on cardiac function and cardiac structure for heart failure after myocardial infarction rats

ZHANG Yang1,3, ZHANG Yan2, DIAO Feng-sheng1, WANG Ren-he3

(1.DepartmentofTraditionalChineseMedicineandPhysicalTherapy,theSecondAffiliatedHospitalofDalianMedicalUniversity,Dalian116027,China; 2.DepartmentofCardioiogy,AffiliatedHospitalofLiaoningUniversityofTraditionalChineseMedicine,Shenyang110032,China;3.GraduateSchool,LiaoningUniversityofTraditionalChineseMedicine,Shenyang110032,China)

Objective To observing Shengxuebao mixture effect on cardiac function and cardiac structure for heart failure after myocardial infarction rats. Methods coronary artery ligation method and swimming exhaustion caused by the rats heart failure model after myocardial infarction，the Survivals were randomly divided into model group，Lisinopril group，Shengxuebao mixture group，no coronary artery ligation in rats as control group，10 rats in each group，by gavage administration or distilled water. After 6 weeks of medication，by doppler echocardiography machine detected between groups in the rats cardiac function；Using HE staining to observe the structure changes of myocardial tissue. Results Compared with control group, model group, Shengxuebao mixture group and lisinopril group ESV and EDV were significantly higher, LVEF and SV dropped significantly,P<0.05. Compared with model group, Shengxuebao mixture group and lisinopril group ESV, EDV dropped significantly, LVEF and SV increased significantly,P<0.05.Shengxuebao mixture group Compared with Lisinopril group，ESV,EDV,LVEF and SV were no significant difference，P>0.05.HE staining results: Control group myocardial cell neatly, compact, the structure was clear, the outer cell mass was less, can be found in a small amount of fibroblasts.Model group myocardial cell light dye, disordered arrangement, intercellular space increases, ambiguous, fibroblasts increased, accompanied by inflammatory cells infiltration. Shengxuebao mixture group and lisinopril group myocardial cell morphology was clear, that can be found small amount of fibroblast cells and inflammatory cells. Conclusion Shengxuebao mixture can improve cardiac function in rats with heart failure after myocardial infarction and repair damaged heart tissue, thus achieve effect for the treatment of heart failure.

Shengxuebao mixture; heart failure after myocardial infarction; cardiac function; cardiac structure

遼寧省科學事業(yè)公益研究基金項目(2013001002)

張 洋(1983-)，男，遼寧新民人，博士研究生。E-mail:yangzhang44944 @163.com

刁鳳聲，教授。E-mail:Diaofs1964@163.com

??著

10.11724/jdmu.2016.05.05

R289.9

A

1671-7295(2016)05-0436-04

2016-06-04；

2016-09-10)