羅氏e601電化學發(fā)光儀剩余試劑的再利用評價

于淼琛，潘立陽，朱　鴻

(1.大連醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院 檢驗科，遼寧 大連 116011；2.大連市疾病預(yù)防控制中心 傳染病地方病防治所，遼寧 大連 116011)

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羅氏e601電化學發(fā)光儀剩余試劑的再利用評價

于淼琛1，潘立陽2，朱鴻1

(1.大連醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院 檢驗科，遼寧 大連 116011；2.大連市疾病預(yù)防控制中心 傳染病地方病防治所，遼寧 大連 116011)

目的對羅氏e601電化學發(fā)光儀剩余試劑再利用進行評估。方法將HBsAb、HBcAb、HBeAg、HBeAb的混合剩余試劑，進行精密度、正確度驗證并與新試劑進行比對及相關(guān)性分析。結(jié)果剩余混合試劑HBsAb、HBcAb、HBeAg、HBeAb水平1批內(nèi)精密度分別為3.43、3.88、2.04、1.22，水平2批內(nèi)精密度分別為1.22、2.40、1.09、1.66；HBsAb、HBcAb、HBeAg、HBeAb水平1批間精密度分別為5.17、4.55、3.70、3.74；水平2批間精密度分別為4.99、3.93、4.16、6.91；正確度本室測定結(jié)果與室間質(zhì)評回報結(jié)果均相符、HBsAb相關(guān)系數(shù)r為 0.999；HBcAb、HBeAg、HBeAb兩試劑盒的陽性符合率和陰性符合率均為100%。結(jié)論羅氏e601電化學發(fā)光儀剩余試劑可以混合使用，穩(wěn)定性良好，能保證檢測質(zhì)量。

羅氏e601；剩余試劑再利用；電化學發(fā)光

[引用本文]于淼琛，潘立陽，朱鴻.羅氏e601電化學發(fā)光儀剩余試劑的再利用評價[J].大連醫(yī)科大學學報，2016,38(5)：480-482.

羅氏e601全自動電化學發(fā)光免疫分析儀應(yīng)用于臨床以來，因重復(fù)性好，故障率低，結(jié)果可靠穩(wěn)定，逐步取代了傳統(tǒng)的ELISA方法。但是由于配套試劑均為進口試劑，價格相對較高，試劑剩余量大，為了節(jié)約成本，本實驗室將相同批號的剩余試劑混合，并對其性能進行驗證評價。

1　材料和方法

1.1標本來源

標本來源于大連醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院住院無溶血、無乳糜患者血清。

1.2儀器與試劑

羅氏e601全自動電化學發(fā)光免疫分析儀。將儀器顯示為“0”的剩余試劑瓶剩余試劑輕輕充分混勻，倒入另一瓶儀器顯示為“0”的試劑瓶內(nèi)，輕輕混勻，注意不要產(chǎn)生氣泡，成為一盒新的“混合”試劑(同一項目試劑均為同一批號)。HBsAb、HBeAg、HBeAb需2盒剩余試劑，HBcAb需3盒剩余試劑。HBsAb試劑批號19026703、HBeAg試劑批號18813102、HBeAb試劑批號12375401、HBcAb試劑批號131753122。配套校準品及質(zhì)控品。

1.3方法

1.3.1精密度驗證：依據(jù)EP15-A2[1]，選取兩個水平的質(zhì)控，連續(xù)重復(fù)測定20次，計算批內(nèi)精密度，要求批內(nèi)精密度≤1/4允許總誤差(TEa)；將兩個濃度的質(zhì)控品每日檢測1次，連續(xù)檢測20 d，得到20個數(shù)據(jù)，計算批間精密度，要求批間精密度≤1/3允許總誤差(TEa)。

1.3.2正確度驗證：用室間質(zhì)評的質(zhì)控物測定，判斷測定結(jié)果與室間質(zhì)評回報結(jié)果符合性。

1.3.3比對試驗

定量項目：依據(jù)EP9-A2[2]，將新盒檢測HBsAb的標本，用混合試劑再測，將新試劑盒的結(jié)果與混合試劑盒的結(jié)果作比較，實驗周期≥5 d，至少做20份病人樣品(如每天至少做4份病人標本)。比對試驗盡量在2 h內(nèi)檢測完成，將樣品按1、2、3、4的順序排列先測一遍，然后將順序倒過來做第2次測定。計算Y=aX+b，驗證線性范圍。要求：a值在1±0.03范圍內(nèi)，相關(guān)系數(shù)r≥0.975。

定性項目：選擇20份陰性標本(其它標志物陽性的8份)、20份陽性標本(弱陽性14份、強陽性6份)，使用混合試劑盒和新試劑盒分別檢測HBeAg、HBeAb、HBcAb，計算兩試劑盒的符合率，評價比對結(jié)果的可接受性。

1.4統(tǒng)計學方法

依據(jù)EP9-A2文件的要求對方法間離群值進行檢查; 用相關(guān)系數(shù)(r)對相關(guān)性作粗略評估，若r>0.975，則認為X范圍合適，兩種試劑的相關(guān)性好，直線回歸統(tǒng)計的斜率和截距可靠計算線性回歸方程。

2　結(jié)　果

2.1精密度驗證

HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb檢測，批內(nèi)精密度和批間精密度結(jié)果均合格，見表1。

表1　精密度驗證結(jié)果

2.2正確度驗證

測定結(jié)果與衛(wèi)生部臨檢中心2016年第一次室間質(zhì)評回報結(jié)果一致，判斷結(jié)果符合，見表2。

表2　正確度驗證結(jié)果

2.3比對試驗

2.3.1定量項目：HBsAb新試劑盒測定值的平均值為X，混合試劑盒測定值平均值為Y，回歸方程Y=0.9809X+0.996，相關(guān)系數(shù)r=0.999。見圖1。

圖1　HBsAb新舊試劑相關(guān)性Fig 1 Correlation of HBsAb between the two kits

2.3.2定性項目：HBeAg、HBeAb、HBcAb兩試劑盒的陽性及陰性符合率均為100%。見表3。

表3HBeAg，HBeAb，HBcAb的新舊試劑陰性、陽性符合率

Tab 3 The coincidence of HBeAg，HBeAb，HBcAb between the two kits

項目陽性符合率(%)陰性符合率(%)評價HBeAg100100可接受HBeAb100100可接受HBcAb100100可接受

3　討　論

羅氏e601全自動電化學發(fā)光免疫分析儀檢測試劑用完后，試劑瓶內(nèi)雖有剩余試劑，但儀器不會再進行檢測，但剩余試劑量卻超過了50%[3]。電化學發(fā)光儀器試劑價格昂貴，如將剩余試劑棄之不用，將造成極大的浪費?；旌鲜Ｓ嘣噭┑幕旌显噭┙?jīng)本實驗室驗證，重復(fù)性及準確性均可靠。HBsAb新試劑盒和剩余試劑混合試劑盒的比對結(jié)果，回歸方程良好，相關(guān)系數(shù)r=0.999，說明兩試劑盒高度正相關(guān)，且相關(guān)性都良好[4]。由于檢測標本量大，且兩臺羅氏e601全自動電化學發(fā)光免疫分析儀同時進行，通常今日的剩余試劑，在工作結(jié)束后，由崗位人員負責把剩余試劑混合，且做好標注，放入另一臺儀器明日備用。第2天質(zhì)控合格后，才能進行正常標本檢測。如當日質(zhì)控失控，應(yīng)查找原因，重新復(fù)測質(zhì)控品，質(zhì)控合格方能進行正常標本檢測；如質(zhì)控還是失控，不能用此混合試劑檢測標本，要棄去此混合試劑。

羅氏HBsAb、HBcAb、HBeAg、HBeAb試劑瓶蓋打開后上機穩(wěn)定期為8周，本科室4種試劑用量大，及時拼裝后立即使用，包被的抗原抗體性質(zhì)與效價未發(fā)生改變，不影響繼續(xù)使用，使用過程中嚴密監(jiān)控質(zhì)控結(jié)果，保證實驗質(zhì)量[5]。經(jīng)本實驗室驗證，在日常工作中，可將羅氏e601全自動電化學發(fā)光免疫分析儀上使用的HBsAb、HBcAb、HBeAg、HBeAb試劑剩余混合用于檢測，與新試劑的檢測結(jié)果具有可比性，在嚴格按說明書保存及規(guī)定有效期內(nèi)使用的前提下，既保證了檢驗質(zhì)量, 又能有效節(jié)約成本, 值得推廣[6]。同時，應(yīng)在同類型的檢測儀器項目中推廣，科學實驗，有效降低科室成本。

[1] Clinical and Laboratory Standards Institute.EP15-A2.Evaluation of precision performance of quantitative measurement methods[S].Wayne,PA,USA:CLSI,2000.

[2] National Committee for Clinieal Laboratory Standards. EP9-A2 Method Comparison and BiasEstimation Using patient Samples[S].Wayne,PA:NCCLS,2002.

[3] 劉振杰,鐘偉國,曹永堅，等.關(guān)于全自動電化學發(fā)光免疫分析儀HCV剩余試劑再利用的研究[J].職業(yè)與健康,2015,31(8):1114-1119.

[4] 于淼琛,李士軍,孫國華，等.生化部分常規(guī)項目干濕化學檢測結(jié)果一致性分析[J].大連醫(yī)科大學學報,2016, 38(2):172-176.

[5] 黃維綱,賈汝靜,張健，等.醫(yī)學檢驗領(lǐng)域能力驗證計劃的比較[J].檢驗醫(yī)學,2013,28(10):937-943.

[6] 彭德珍,林武洲. 應(yīng)用質(zhì)控品對羅氏混合回收試劑穩(wěn)定性的觀察[J].檢驗醫(yī)學與臨床,2010,7(4):343-344.

Recycling value of remaining reagent by Roche e601 electrochemiluminescence analyzer

YU Miao-chen1,PAN Li-yang2,ZHU Hong1

(1.ClinicalLaboratory,theFirstAffiliatedHospitalofDalianMedicalUniversity,Dalian116011,China; 2.DepartmentofInfectiousDiseasesandEndemic,DalianCityCenterforDiseaseControlandPrevention,Dalian116011,China)

Objective To evaluate the recycling value of remaining reagent by Roche e601 electrochemiluminescence analyzer. Methods The precision, accuracy, comparison and correlation analysis were performed between original reagents and recycling reagents for HBsAb、HBcAb、HBeAg、and HBeAb. Results The intra batch precision results of level 1 were 3.43,3.88,2.04,1.22 respectively，the intra batch precision results of level 2 were 1.22,2.40,1.09,1.66 respectively；the inter batch precision results of level 1 were 5.17,4.55,3.70,3.74 respectively；the inter batch precision results of level 2 were 4.99,3.93,4.16,6.91 respectively. The accuracy result was consistent with the EQA result；the correlation coefficient of HBsAb was 0.999；the positive rate and negative coincidence rate(%)of HBcAb,HBeAg,HBeAb were 100%. Conclusion The remaining reagents can be combined and recycled by Roche e601, demonstrate good stability and ensure the quality of measurement.

Roche e601; recycling of remaining reagent; electrochemiluminescence

于淼琛(1982-)，女，遼寧大連人，主管技師。E-mail：ymc7788999@163.com

朱 鴻，主任技師。E-mail：zhuhong0411@126.com

??著

10.11724/jdmu.2016.05.16

R446.69

A

1671-7295(2016)05-0480-03

2016-06-20；

2016-09-11)