四磨湯不同提取部位對小鼠胃腸運(yùn)動的影響

黎銀波，胡宇飛，姚金成

（1.湖南省藥品審評認(rèn)證與不良反應(yīng)監(jiān)測中心，湖南長沙410013；2.湖南漢森醫(yī)藥研究有限公司，湖南長沙410013）

四磨湯不同提取部位對小鼠胃腸運(yùn)動的影響

黎銀波1，胡宇飛2，姚金成1

（1.湖南省藥品審評認(rèn)證與不良反應(yīng)監(jiān)測中心，湖南長沙410013；2.湖南漢森醫(yī)藥研究有限公司，湖南長沙410013）

目的探討四磨湯不同提取部位對不同機(jī)能狀態(tài)下小鼠胃腸運(yùn)動的影響。方法將四磨湯不同提取部位樣品分別對正常、腸亢進(jìn)及腸抑制小鼠口服灌胃，測量小鼠小腸全長及半固體糊狀物在小腸中的推進(jìn)距離，并計(jì)算小腸推進(jìn)率。結(jié)果四磨湯水提醇沉液低、中、高劑量組，醇提液和水洗物中、高劑量組小鼠的對正常小鼠的胃腸運(yùn)動具有顯著促進(jìn)作用（P＜0.05）；水提醇沉液，醇提液，水洗物的低、中、高劑量組對腸抑制模型小鼠的腸推進(jìn)有顯著促進(jìn)作用（P＜0.05）；水提醇沉液，醇提液，醇洗物的低、中、高劑量組對腸亢進(jìn)模型小鼠的腸推進(jìn)有顯著抑制作用（P＜0.05）。結(jié)論四磨湯具有明顯的促進(jìn)胃排空作用，并對小腸運(yùn)動具有雙向調(diào)節(jié)作用，四磨湯水洗物和醇洗物可能分別是四磨湯促進(jìn)和抑制小鼠腸運(yùn)動的有效部位。

四磨湯；雙向調(diào)節(jié)；胃腸運(yùn)動；小鼠

四磨湯由木香、枳殼、烏藥、檳榔4味中藥組方，收錄在明代的《痘疹金鏡錄》中［1］，方中木香疏肝理氣、消積導(dǎo)滯，枳殼行氣寬中、消積除脹；檳榔行氣導(dǎo)滯、除腹?jié)M，烏藥溫中散寒、理氣止痛，全方著眼于調(diào)暢中焦氣機(jī)，共奏疏肝和胃、順氣降逆、消積通下之功效［2］。研究表明，方中四味藥均對胃腸運(yùn)動有顯著影響，枳殼與烏藥對胃腸運(yùn)動呈雙向調(diào)節(jié)作用，木香與檳榔對胃排空及腸推進(jìn)功能均有促進(jìn)作用［3-6］。本研究中主要考察了四磨湯的不同提取部位對不同狀態(tài)下的小鼠胃腸功能的影響，為探討和進(jìn)一步研究和確定其物質(zhì)基礎(chǔ)提供試驗(yàn)依據(jù)?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1　材料與方法

1.1試藥與動物

試藥：羧甲基纖維素鈉（CMC-Na，上海山浦化工有限公司產(chǎn)品，批號為20100604）；活性炭（北京京東奧博科技發(fā)展有限公司，批號為20110928）；阿拉伯樹膠（天津市福晨化學(xué)試劑廠，批號為20111012）；嗎丁啉（江西匯仁藥業(yè)有限公司，批號為1402026）；硫酸阿托品注射液（天津藥業(yè)集團(tuán)新鄭股份有限公司，批號為141152）；甲硫酸新斯的明注射液（上海信誼制藥有限公司，批號為140903）。

動物：ICR小鼠，SPF級，由湖南斯萊克景達(dá)實(shí)驗(yàn)動物有限公司提供，實(shí)驗(yàn)動物質(zhì)量合格證號為No.43004700009553，實(shí)驗(yàn)動物生產(chǎn)許可證號為SCXK（湘）2013-0004。

1.2方法

1.2.1溶液制備

四磨湯水提醇沉液：取木香、枳殼、烏藥、檳榔各70 g粉碎成粗粉，加水煎煮2次，每次0.5 h，濾過，合并煎液，減壓濃縮至相對密度為1.10（60～70℃）的清膏，加乙醇使含醇量達(dá)75%，冷藏12 h，濾過，濾液減壓回收乙醇并濃縮后備用。

四磨湯醇提液：取木香、枳殼、烏藥、檳榔各70 g粉碎成粗粉，以95%乙醇浸泡1 h后，回流提取2次，第1次加560 mL乙醇，提取2 h，第2次加420 mL乙醇，提取1.5 h，合并提取液，過濾，濾液55℃左右減壓回收乙醇，濃縮，備用。

四磨湯水洗物和醇洗物：取適量四磨湯的醇提液，過大孔吸附樹脂柱，先用4倍柱體積的水，再用95%乙醇洗脫，收集洗脫液分別進(jìn)行濃縮，得到四磨湯水洗物和醇洗物。

半固體糊狀物：4 g CMC-Na和2 g阿拉伯樹膠溶于水，加2 g活性炭粉末攪拌均勻，加注射用水至200 mL。

1.2.2對正常小鼠腸推進(jìn)作用及胃排空的影響［7-8］

將130只ICR小鼠（雌雄各半）隨機(jī)分為13組，每組10只，分別為空白對照組及給藥組。各給藥組小鼠按0.2 mL/10 g口服灌胃，1次/日，連續(xù)4 d，空白對照組小鼠口服灌胃等體積注射用水。末次給藥前禁食不禁水16 h，給藥后1 h，各組小鼠均灌胃給予0.5 mL半固體黑色糊狀物。15 min后處死動物，分別稱量胃全重及胃凈重，測量小腸全長及半固體糊狀物在小腸中的推進(jìn)距離，計(jì)算胃內(nèi)殘留率和小腸推進(jìn)率，采用SPSS 16.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

1.2.3對阿托品致小鼠腸抑制的影響

給藥方法：將150只ICR小鼠（雌雄各半）隨機(jī)分為15組，每組10只，分別為空白對照組、模型對照組及給藥組，各給藥組（包括嗎丁啉組）小鼠按0.2 mL/10 g口服灌胃相應(yīng)藥液，1次/日，連續(xù)4 d，正常對照組、模型對照組小鼠按相同方法口服灌胃等體積注射用水。

建模：末次給藥前禁食不禁水16 h，給藥后1 h，除正常對照組外，其余各組小鼠均皮下注射阿托品（0.5 mg/kg），建立阿托品致小鼠腸抑制模型。15 min后，各組小鼠均灌胃給予0.5 mL半固體黑色糊狀物，15 min后處死動物。依法計(jì)算小腸推進(jìn)率。

1.2.4對新斯的明致小鼠腸亢進(jìn)的影響

給藥方法：將150只ICR小鼠（雌雄各半）隨機(jī)分為15組，每組10只，分別為空白對照組、模型對照組及給藥組，各給藥組（阿托品組除外）小鼠按0.2 mL/10 g口服灌胃相應(yīng)藥液，1次/日，連續(xù)4 d；阿托品組小鼠皮下注射0.5 mg/kg的阿托品；正常對照組、模型對照組小鼠按相同方法口服灌胃等體積注射用水。

建模：末次給藥前禁食不禁水16 h，給藥后1 h，除正常對照組外，其余各組小鼠均皮下注射新斯的明（0.11 mg/kg），建立新斯的明致小鼠腸亢進(jìn)模型。15 min后，各組小鼠均灌胃給予0.5 mL半固體黑色糊狀物，15 min后處死動物。依法計(jì)算小腸推進(jìn)率。

2　結(jié)果

2.1對正常小鼠腸推進(jìn)作用及胃排空的影響

與空白對照組比較，四磨湯水提醇沉液低、中、高劑量組，醇提液及水洗物中、高劑量組小鼠的小腸推進(jìn)率顯著升高（P＜0.05）；與空白對照組比較，四磨湯水提醇沉液，醇提液，水洗物低、中、高劑量組小鼠的胃殘留率顯著降低（P＜0.05）。結(jié)果見表1。結(jié)果表明，四磨湯水提醇沉液、醇提液、水洗物對正常小鼠胃排空及小腸推進(jìn)具有顯著的促進(jìn)作用，但醇洗物對正常小鼠胃排空及小腸推進(jìn)無顯著作用。

2.2對阿托品抑制小鼠小腸推進(jìn)的影響

與空白對照組比較，模型對照組小鼠小腸推進(jìn)率顯著降低（P＜0.01）；與模型對照組比較，嗎丁啉組及四磨湯水提醇沉液，醇提液，水洗物低、中、高劑量組小鼠的小腸推進(jìn)率顯著升高（P＜0.05）。結(jié)果見表2。結(jié)果表明，四磨湯水提醇沉液、醇提液、水洗物對阿托品抑制小鼠小腸推進(jìn)具有顯著的促進(jìn)作用，醇洗物對阿托品抑制小鼠小腸推進(jìn)無顯著作用。

表1　四磨湯不同提取部位對正常小鼠腸推進(jìn)作用及胃排空的影響（±s，n=10）

表1　四磨湯不同提取部位對正常小鼠腸推進(jìn)作用及胃排空的影響（±s，n=10）

注：與空白對照組比較， P＜0.05，#P＜0.01。

組別空白對照組水提醇沉液低劑量組中劑量組高劑量組醇提液低劑量組中劑量組高劑量組醇洗物低劑量組中劑量組高劑量組水洗物低劑量組中劑量組高劑量組劑量（g / k g）0 . 5 3 3 1 . 0 6 5 2 . 1 3 0 0 . 5 3 3 1 . 0 6 5 2 . 1 3 0 0 . 5 3 3 1 . 0 6 5 2 . 1 3 0 0 . 5 3 3 1 . 0 6 5 2 . 1 3 0小腸推進(jìn)率（%）4 1 . 8 ± 4 . 9 6 2 . 8 ± 5 . 8 7 0 . 1 ± 9 . 1#6 5 . 3 ± 9 . 6#5 6 . 6 ± 7 . 7 6 9 . 0 ± 1 1 . 7#6 4 . 6 ± 6 . 4 4 2 . 5 ± 7 . 5 4 5 . 4 ± 6 . 4 4 8 . 2 ± 5 . 7 5 3 . 3 ± 6 . 6 6 8 . 6 ± 9 . 7#6 7 . 2 ± 6 . 9#胃殘留率（%）4 4 . 4 ± 5 . 7 2 7 . 9 ± 1 1 . 4 2 2 . 3 ± 7 . 7#2 9 . 5 ± 6 . 3 2 7 . 4 ± 9 . 6 2 4 . 6 ± 1 2 . 4#3 1 . 9 ± 4 . 2 4 4 . 2 ± 8 . 1 4 9 . 8 ± 9 . 3 4 6 . 7 ± 7 . 5 2 8 . 6 ± 8 . 2 2 2 . 8 ± 5 . 1#2 9 . 4 ± 8 . 3

表2　四磨湯不同提取部位對阿托品抑制小鼠小腸推進(jìn)的影響（±s，n=10）

表2　四磨湯不同提取部位對阿托品抑制小鼠小腸推進(jìn)的影響（±s，n=10）

注：與正常對照組比較， P＜0.01；與模型對照組比較，P＜0.05，#P＜0.01。表3同。

小腸推進(jìn)率（%）5 9 . 2 ± 1 0 . 2 2 5 . 2 ± 9 . 1 5 7 . 3 ± 1 2 . 3#4 6 . 3 ± 7 . 9 5 6 . 9 ± 8 . 5#4 1 . 8 ± 5 . 2 4 7 . 8 ± 6 . 5#5 5 . 2 ± 1 0 . 1#4 3 . 5 ± 6 . 4 2 6 . 5 ± 8 . 3 3 2 . 1 ± 1 1 . 8 2 8 . 8 ± 1 0 . 1 4 5 . 4 ± 1 2 . 9 5 6 . 3 ± 6 . 3#4 3 . 6 ± 1 0 . 8組別正常對照組模型對照組嗎丁啉組水提醇沉液低劑量組中劑量組高劑量組醇提液低劑量組中劑量組高劑量組醇洗物低劑量組中劑量組高劑量組水洗物低劑量組中劑量組高劑量組劑量（g / k g）4 . 7 3 m g / k g 0 . 5 3 3 1 . 0 6 5 2 . 1 3 0 0 . 5 3 3 1 . 0 6 5 2 . 1 3 0 0 . 5 3 3 1 . 0 6 5 2 . 1 3 0 0 . 5 3 3 1 . 0 6 5 2 . 1 3 0

2.3對新斯的明致小鼠腸亢進(jìn)的影響

與空白對照組比較，模型對照組小鼠小腸推進(jìn)率顯著降低（P＜0.01）；與模型對照組比較，阿托品組及四磨湯水提醇沉液、四磨湯醇提液、四磨湯醇洗物低、中、高劑量組小鼠的小腸推進(jìn)百分率顯著升高（P＜0.05）。結(jié)果見表3。結(jié)果表明，四磨湯水提醇沉液、醇提液、醇洗物對新斯的明致腸亢進(jìn)小鼠的小腸推進(jìn)具有顯著的抑制作用，但水洗物對對阿托品抑制小鼠小腸推進(jìn)無顯著作用。

表3　四磨湯不同提取部位對新斯的明致小鼠腸亢進(jìn)的影響（±s，n=10）

表3　四磨湯不同提取部位對新斯的明致小鼠腸亢進(jìn)的影響（±s，n=10）

組別正常對照組模型對照組阿托品組水提醇沉液低劑量組中劑量組高劑量組醇提液低劑量組中劑量組高劑量組醇洗物低劑量組中劑量組高劑量組水洗物低劑量組中劑量組高劑量組劑量（g / k g）0 . 5 m g / k g 0 . 5 3 3 1 . 0 6 5 2 . 1 3 0 . 5 3 3 1 . 0 6 5 2 . 1 3 0 . 5 3 3 1 . 0 6 5 2 . 1 3 0 . 5 3 3 1 . 0 6 5 2 . 1 3小腸推進(jìn)率（%）5 1 . 1 ± 7 . 2 7 1 . 7 ± 1 2 . 9 5 3 . 9 ± 1 0 . 2#6 2 . 2 ± 9 . 6 5 6 . 7 ± 5 . 2#5 2 . 8 ± 1 1 . 9#6 1 . 5 ± 5 . 4 6 0 . 1 ± 8 . 2 5 5 . 5 ± 6 . 6#6 2 . 1 ± 8 . 1 6 0 . 4 ± 7 . 5 5 4 . 8 ± 6 . 6#7 1 . 3 ± 1 1 . 0 7 0 . 6 ± 7 . 6 6 9 . 8 ± 1 0 . 4

3　討論

由本研究結(jié)果可知，四磨湯不同提取部位對正常、腸抑制及亢進(jìn)小鼠的胃腸道運(yùn)動的影響，以水提醇沉液及醇提液具有明顯的促進(jìn)胃排空作用，且對腸道運(yùn)動具有雙向調(diào)節(jié)作用。水洗物（醇提液過大孔樹脂后收集）對正常及阿托品致腸抑制小鼠的腸運(yùn)動均具有顯著的促進(jìn)作用，但對新斯的明所致腸亢進(jìn)小鼠的腸運(yùn)動無明顯作用；醇洗物對新斯的明所致腸亢進(jìn)小鼠的腸運(yùn)動具有顯著的抑制作用，但對正常及阿托品致腸抑制小鼠的腸運(yùn)動均無明顯作用，說明水洗物可能是其促進(jìn)小鼠腸運(yùn)動的有效部位，醇洗物可能是其抑制小鼠腸運(yùn)動的有效部位。

綜上所述，四磨湯具有明顯的促進(jìn)胃排空作用，并對小腸運(yùn)動具有雙向調(diào)節(jié)作用，四磨湯水洗物和醇洗物分別可能為四磨湯促進(jìn)和抑制小鼠腸運(yùn)動的有效部位，但其具體作用機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

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Effect of Different Extracts of Simotang on Gastrointestinal Movement of Mice

Li Yinbo1，Hu Yufei2，Yao Jincheng1
（1.Hunan Center for Drug Evaluation and ADR Monitoring，Changsha，Hunan，China410013；2.Hunan Hansen Medical Research Co.，Ltd，Changsha，Hunan，China410013）

ObjectiveTo investigate the effects of the different extracts of Simotang on gastrointestinal movement of mice in different state.MethodsThe mice in different states were given different extracts of Simotang by oral lavage.The total length of the small intestine of mice and pushing distance of paste were measured，and the rate of intestinal propulsive was then calculated.ResultsThe all dose of water extracting and alcohol precipitation liquids，the medium and high dose of ethanol extract liquids and water extract can promote gastrointestinal motility of normal mice significantly（P＜0.05）；the all dose of water extracting and alcohol precipitation liquids，ethanol extract liquids and water extract can enhance intestinal motility of intestinal inhibition mice significantly（P＜0.05）；the all dose of water extracting and alcohol precipitation liquids，ethanol extract liquids and 95%ethanol extract can reduced intestinal motility of intestinal hyperactivity mice significantly（P＜0.05）.ConclusionSimotang has obvious effect on gastric emptying promotion，and has two-way adjustment on intestinal motion.The water extract and the ethanol extract maybe the valid parts of Simotang in promoting and inhibiting intestinal movement of mice.

Simotang；gastrointestinal motility；two-way adjustment；mice

R285.5

A

1006-4931（2016）15-0027-03

湖南省科技廳戰(zhàn)略新興產(chǎn)業(yè)項(xiàng)目，項(xiàng)目編號：2014GK1046；湖南省科技重大專項(xiàng)，項(xiàng)目編號：2015SK1001。

黎銀波，男，副主任藥師，主要從事新藥審評認(rèn)證及研究工作，（電子信箱）280574335@qq.com。參考文獻(xiàn):

（2016-04-05）