• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    高效液相色譜檢測(cè)運(yùn)動(dòng)飲料中的人工合成色素

    2016-11-05 02:19:25周峰
    食品研究與開(kāi)發(fā) 2016年20期
    關(guān)鍵詞:乙酸銨水溶液色素

    周峰

    (海南熱帶海洋學(xué)院體育與健康學(xué)院,海南三亞572000)

    高效液相色譜檢測(cè)運(yùn)動(dòng)飲料中的人工合成色素

    周峰

    (海南熱帶海洋學(xué)院體育與健康學(xué)院,海南三亞572000)

    建立一種同時(shí)測(cè)定運(yùn)動(dòng)飲料中檸檬黃、莧菜紅、胭脂紅、日落黃、誘惑紅、亮藍(lán)等6種人工合成色素的固相萃取-高效液相色譜(SPE-HPLC)方法。樣品前處理采用固相萃取小柱進(jìn)行富集和凈化,淋洗液選擇甲酸-水溶液,洗脫液選擇氨化甲醇,氮?dú)獯蹈珊笥盟畯?fù)溶上機(jī)檢測(cè)。采用Waters RP C18色譜柱(4.6 mm×250 mm,5 μm)分離,以甲醇-乙酸銨水溶液(20.0 mmol/L)作為流動(dòng)相,用PDA檢測(cè)器檢測(cè),外標(biāo)法峰面積定量。結(jié)果表明,6種人工合成色素在2.00 μg/mL~32.00 μg/mL濃度范圍內(nèi)線性良好,相關(guān)系數(shù)r2為0.99,檢出限在0.04 μg/mL~0.15 μg/mL,定量限為0.12 μg/mL~0.50 μg/mL,加標(biāo)回收率達(dá)到85.6%~92.4%。該方法具有前處理簡(jiǎn)單、凈化效果好、靈敏度高和檢測(cè)速度快的優(yōu)點(diǎn),適用于運(yùn)動(dòng)飲料中人工合成色素的分離和定量檢測(cè)。

    高效液相色譜;運(yùn)動(dòng)飲料;人工合成色素

    人工合成色素屬于化工染色劑,大多以苯、甲苯、萘等化工產(chǎn)品為原料,經(jīng)過(guò)磺化、硝化、偶氮化等一系列有機(jī)反應(yīng)化合而成。由于人工合成色素,生產(chǎn)成本低,給人的感觀度好,易溶于水,可直接進(jìn)行添加等特點(diǎn),一定程度上彌補(bǔ)了天然色素的一些不足,因此在食品生產(chǎn)加工中被大量應(yīng)用。但是,大量合成色素的攝入可能引起過(guò)敏、哮喘、喉頭水腫、鼻炎、蕁麻疫、皮膚瘙癢以及神經(jīng)性頭痛等癥狀,特別是兒童的成長(zhǎng)期間,若長(zhǎng)期過(guò)量攝入合成色素,對(duì)生長(zhǎng)發(fā)育會(huì)造成極為不利的影響[1-4]。因此,世界各國(guó)對(duì)合成色素的使用種類,使用范圍和使用量都做了嚴(yán)格限制。在我國(guó)標(biāo)準(zhǔn)中,針對(duì)運(yùn)動(dòng)飲料GB15266-2009《運(yùn)動(dòng)飲料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》規(guī)定了允許使用的色素品種、使用范圍及最大使用量[5]。

    運(yùn)動(dòng)飲料是根據(jù)人體運(yùn)動(dòng)的生理消耗而配置的,針對(duì)特殊人群的飲料。運(yùn)動(dòng)飲料中主要含有電解質(zhì),維生素,氨基酸等成分,能補(bǔ)充人體所需的營(yíng)養(yǎng)成分,抗疲勞,平衡新陳代謝[6]。但是近些年來(lái)運(yùn)動(dòng)飲料市場(chǎng)魚(yú)龍混雜,不法商家為了追求飲料的色澤亮麗,超量或者違規(guī)添加人工合成色素。由于現(xiàn)行國(guó)標(biāo)中人工合成色素的檢驗(yàn)方法GB/T 5009.35-2003《食品中合成著色劑的測(cè)定》[7]中的處理方法操作繁瑣,加標(biāo)回收率低等因素,本實(shí)驗(yàn)對(duì)標(biāo)準(zhǔn)中前處理方法進(jìn)行了一些相應(yīng)改變,并進(jìn)行了加標(biāo)回收驗(yàn)證。

    1 材料與方法

    1.1儀器與試劑

    高效液相色譜系統(tǒng):Waters 2695,配PDA檢測(cè)器:Waters 2998。

    檸檬黃(99%)、莧菜紅(98%)、胭脂紅(92%)、日落黃(97%)、誘惑紅(99%)、亮藍(lán)(92%)標(biāo)準(zhǔn)品:均購(gòu)于國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心。

    HLB固相萃取小柱:Waters公司,規(guī)格3cc。

    1.2樣品來(lái)源

    樣品均為隨機(jī)抽取市場(chǎng)上銷售的運(yùn)動(dòng)型飲料。

    1.3色譜條件

    色譜柱:Waters RP C18(4.6 mm×250 mm,5 μm);流速:1.0 mL/min;進(jìn)樣量:10 μL。

    柱溫:30℃;流動(dòng)相:乙酸銨(20 mmol/L)水溶液(A)和甲醇(B),梯度洗脫程序?yàn)? min~5.0 min,20% B~35%B;3.0 min~5.0 min,35%B;5.0 min~10.0 min,35%B~98%B;10.0 min~15.0 min,98%B;15.0 min~16.0 min,90%B~15%B。

    1.4方法

    1.4.1甲醇-乙酸銨水溶液體系中乙酸銨對(duì)6種人工合成色素色譜行為的影響

    固定流動(dòng)相梯度洗脫程序,配制不同濃度的乙酸銨水溶液5.0、10.0、20.0、30.0、40.0、50.0 mmol/L,考察乙酸銨對(duì)6種合成人工合成色素色譜行為的影響。

    1.4.2檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇

    本試驗(yàn)采用PDA檢測(cè)器進(jìn)行全波長(zhǎng)掃描(掃描范圍200 nm~600 nm),根據(jù)6種人工合成色素的全波長(zhǎng)掃描圖,選擇比較合適的檢測(cè)波長(zhǎng)。

    1.4.3標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作

    稱取相應(yīng)質(zhì)量的檸檬黃、莧菜紅、胭脂紅、日落黃、誘惑紅、亮藍(lán)標(biāo)準(zhǔn)品,配制成濃度為2.00、4.00、8.00、16.00、32.00 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)混合溶液,進(jìn)行儀器分析,以峰面積為縱坐標(biāo),濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

    1.4.4樣品前處理?xiàng)l件的優(yōu)化

    運(yùn)動(dòng)飲料中除了固有的一些食品基質(zhì)外,還含有很多的人為添加的營(yíng)養(yǎng)元素,成分復(fù)雜,對(duì)前處理要求高,所以本實(shí)驗(yàn)樣品前處理使用HLB固相萃取小柱,對(duì)人工合成色素起到一個(gè)凈化和富集的作用。并對(duì)HLB固相萃取小柱操作條件進(jìn)行優(yōu)化,以樣品加標(biāo)平均回收率為比較依據(jù),制定較優(yōu)的前處理?xiàng)l件。

    1.4.5加標(biāo)回收試驗(yàn)

    以市售未檢出人工合成色素的運(yùn)動(dòng)飲料為空白基質(zhì),加入混合標(biāo)準(zhǔn)液,選擇優(yōu)化后的前處理?xiàng)l件操作,氮吹近干后再用水定容,上機(jī)檢測(cè),計(jì)算回收率。

    2 結(jié)果與討論

    2.1甲醇-乙酸銨水溶液體系中乙酸銨對(duì)6種人工合成色素色譜行為的影響

    為了了解乙酸銨對(duì)6種人工合成色素色譜行為的影響,本研究固定流動(dòng)相梯度洗脫程序,配制不同濃度的乙酸銨水溶液,乙酸銨濃度分別為5.0、10.0、20.0、30.0、40.0 mmol/L,考察了乙酸銨對(duì)六種合成人工合成色素色譜行為的影響。如圖1所示。

    結(jié)果表明:在甲醇-乙酸銨水溶液體系中,乙酸銨濃度對(duì)6種合成人工合成色素的色譜保留行為有不同程度的影響,其濃度與6種合成人工合成色素保留因子的相互關(guān)系符合lnk=a+cCB方程[8-10],且具有良好的線性(r2>0.99)。當(dāng)乙酸銨濃度在20.0 mmol/L時(shí),6種合成人工合成色素在RP C18柱上可得到良好的基線分離,其峰型良好。

    2.2檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇

    圖1 6種合成人工合成色素的色譜圖Fig.1The chromatogram of six synthetic colorants

    這6種人工合成色素均為水溶性酸性染料,在國(guó)標(biāo)方法中選用254 nm作為這6種人工合成色素的檢測(cè)波長(zhǎng)。但試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)運(yùn)動(dòng)型飲料經(jīng)前處理后樣品的譜圖在254 nm波長(zhǎng)處的干擾峰比較多,難以滿足實(shí)際檢測(cè)需要。所以本試驗(yàn)采用PDA檢測(cè)器進(jìn)行全波長(zhǎng)掃描(掃描范圍210 nm~700 nm),如圖2所示。

    圖2 6種合成人工合成色素的全波長(zhǎng)掃描圖Fig.2Full wavelength scanning chart of six synthetic colorants

    實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:以上6種人工合成色素除了在紫外區(qū)有著較強(qiáng)特征吸收外,由于各種色素的結(jié)構(gòu)中含有不同的發(fā)色及助色基團(tuán),在可見(jiàn)光區(qū)也有最大吸收波長(zhǎng)。6種色素最大吸收波長(zhǎng)分別為檸檬黃:257.2、427.1 nm;莧菜紅215.9、520.7 nm;胭脂紅214.7、 509.7 nm;日落黃234.7、484.2 nm;誘惑紅212.3、509.7 nm;亮藍(lán)307.2、407.8 nm。綜合考慮,選擇在500 nm的條件下同時(shí)檢測(cè)檢測(cè)6種人工合成色素,此時(shí)各組分的響應(yīng)值高,背景干擾小,符合試驗(yàn)的要求。如圖3。

    圖3 運(yùn)動(dòng)飲料中莧菜紅、胭脂紅分別在254 nm波長(zhǎng)、500 nm波長(zhǎng)下的色譜圖Fig.3The chromatograms of amaranth,carmine in sports drink at 254 nm wavelength and 500 nm wavelength

    是一款運(yùn)動(dòng)型飲料中兩種人工合成色素分別在254 nm和500 nm的檢測(cè)條件下的色譜圖對(duì)比,可以發(fā)現(xiàn)在500 nm的檢測(cè)條件下,樣品的色譜圖中雜峰干擾明顯小于254 nm檢測(cè)條件下的譜圖。

    2.3標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作

    為了驗(yàn)證6種合成人工合成色素在甲醇-乙酸銨(20 mmol/L)水溶液流動(dòng)相體系中的線性關(guān)系,配制了濃度為2.00、4.00、8.00、16.00、32.00 μg/mL的系列混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。結(jié)果見(jiàn)表1。

    試驗(yàn)結(jié)果表明,6種合成人工合成色素在2.00μg/mL~32.00 μg/mL內(nèi)均具有良好的線性關(guān)系(r2>0.99);采用在空白基質(zhì)中添加目標(biāo)組分的方法,依據(jù)色譜峰的性噪比(S/N)大于3倍確定檢出限(LOD),S/N大于10倍確定定量限(LOQ),得到6種目標(biāo)組分的LOD和LOQ分別為0.04 μg/mL~0.15 μg/mL和0.12 μg/mL~0.50 μg/mL。

    表1 6種合成人工合成色素的保留時(shí)間、標(biāo)準(zhǔn)曲線、相關(guān)系數(shù)、檢出限與定量限Table 1Retention time,standard curve,correlation coefficient,detection limit and quantitative limit of six synthetic colorants

    2.4淋洗液、洗脫液的選擇

    參考相關(guān)文獻(xiàn)[11-12]后,針對(duì)于運(yùn)動(dòng)飲料的固相萃取流程,樣品選擇過(guò)濾后上樣,然后淋洗,最后洗脫。淋洗液是在樣品進(jìn)入吸附劑、目標(biāo)化合物被吸附后,用較弱的溶劑將弱保留干擾化合物洗掉,一般有用酸化甲醇-水溶液、甲酸-水溶液、檸檬酸-水溶液、水這四種淋洗方式,分別對(duì)這4種的淋洗效果進(jìn)行比較;洗脫液一般是用較強(qiáng)的溶劑將目標(biāo)化合物洗脫下來(lái),常用的有氨化甲醇、甲醇、酸化甲醇3種洗脫溶劑。

    試驗(yàn)結(jié)果以6種人工合成色素的平均回收率為比較依據(jù),如圖4所示:甲酸-水溶液作為淋洗液效果最好;氨化甲醇的洗脫效果要優(yōu)于甲醇和酸化甲醇。

    圖4 淋洗液、洗脫液的選擇對(duì)6種人工合成色素平均回收率的影響Fig.4The effect of leaching solution and elution solution on the average recovery rate of six synthetic colorants

    2.5樣品的測(cè)定及加標(biāo)回收

    在我們隨機(jī)抽取的30個(gè)批次的運(yùn)動(dòng)飲料樣品中,根據(jù)上述試驗(yàn)結(jié)果選擇優(yōu)化后儀器條件,上樣后選擇甲酸-水溶液淋洗HLB小柱,氨化甲醇洗脫后氮吹,最后用水復(fù)容上機(jī)檢測(cè)。結(jié)果表明:在所檢測(cè)的運(yùn)動(dòng)飲料樣品中,6種合成人工合成色素檢出7批次,但均未超過(guò)國(guó)家限量值。加標(biāo)回收試驗(yàn)中,在加標(biāo)濃度為16.00 μg/mL的飲料樣品中,6種色素的加標(biāo)回收率在85.6%~92.4%之間,符合檢測(cè)要求。

    3 結(jié)論

    建立了一種固相萃取-反相高效液相色譜法梯度洗脫同時(shí)檢測(cè)運(yùn)動(dòng)飲料中6種人工合成色素的分析方法。結(jié)果表明,在甲醇-乙酸銨體系中,乙酸銨對(duì)于溶質(zhì)的色譜保留行為具有較強(qiáng)的調(diào)節(jié)能力;在甲醇與乙酸銨的協(xié)同作用下,甲醇-乙酸銨(20 mmol/L)水溶液流動(dòng)相體系中,6種人工人工合成色素得到了良好的基線分離。在500 nm的檢測(cè)波長(zhǎng)下,優(yōu)化后的HLB固相萃取柱法可有效去除樣品中的復(fù)雜基質(zhì),實(shí)現(xiàn)對(duì)6種人工人工合成色素的凈化與富集,準(zhǔn)確有效地檢測(cè)運(yùn)動(dòng)飲料中的人工合成色素。

    [1]Haveland-Smith R B,Combes R D.Screening of food dyes for genotoxic activity[J].Food and cosmetics toxicology,1980,18(3):215-221

    [2]Brown M A,De Vito S C.Predicting azo dye toxicity[J].Critical reviewsin environmental scienceandtechnology,1993,23(3):249-324

    [3]Tsuda S,Murakami M,Matsusaka N,et al.DNA damage induced byred food dyes orally administered to pregnant and male mice[J]. Toxicological Sciences,2001,61(1):92-99

    [4]Gottlieb A,Shaw C,Smith A,et al.The toxicity of textile reactive azo dyes after hydrolysis and decolourisation[J].Journal of Biotechnology,2003,101(1):49-56

    [5]中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部.GB15266-2009運(yùn)動(dòng)飲料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)[S].北京:中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社,2009

    [6]文劍.運(yùn)動(dòng)飲料市場(chǎng)現(xiàn)狀及未來(lái)發(fā)展方向[J].食品與發(fā)酵工業(yè),2007,33(4):101-106

    [7]中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部,中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì).GB/T 5009.35-2003食品中合成著色劑的測(cè)定[S].北京:中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社,2003

    [8]Dolan J W,Gant J R,Synder L R.Gardient elution in high performance liquid chromatography:II.partical application to reversed phase systems[J].J Chromatogr,1979,165(1):31-58

    [9]鄒漢法,張玉奎,盧佩章.反相離子對(duì)色譜法及其應(yīng)用[J].色譜,1992,10(6):329-333

    [10]PC Lu,XM Lu.Development of a high performance liquid chromatography with artifical intelligence[J].J Chromatogr,1984,292(1):169-188

    [11]劉曉穎,魯莉,于維森.食品中人工合成著色劑測(cè)定方法的改進(jìn)[J].衛(wèi)生研究,2002(12):479-480

    [12]李曉芹,徐振東.固相萃取-高效液相色譜法在食品中合成著色劑檢測(cè)中的應(yīng)用[J].食品工業(yè),2014,35(6):56-58

    Analysis of Synthetic Colorants in Sports Drink by High Performance Liquid Chromatography

    ZHOU Feng
    (School of Physical Education and Health,Hainan Tropical Ocean University,Sanya 572000,Hainan,China)

    A rapid and effective method was established for the determination of six synthetic colorants,including tartrazine,amaranth,carmine,sunset yellow,allura red,and brilliant blue in sports drink by solid-phase extraction coupled with reversed-phase high performance liquid chromatography(SPE-HPLC).The samples were concentrated and purified by solid phase extraction column,and the leaching solution of formic acid aqueous solution,the eluent of amonium methanol The elution liquid was dried under nitrogen,and detected after re-dissolution with water.The separation of targeted compound was performed on a Waters RP C18chromatographic column(4.6 mm×250 mm,5 μm)using ammonium acetate aqueous solution(20.0 mmol/L)as mobile phase,with PDA detector and external standard method peak area quantification.The linear range of 6 synthetic colorants was inthe range of 2.00 μg/mL-32.00 μg/mL with a correlation coefficient of 0.99.The detection limit was 0.04 μg/mL-0.15 μg/mL and the quantitative limit was 0.12 μg/mL-0.50 μg/mL.The recovery rate was 85.6%-92.4%.The method has the advantages of simple pretreatment,good purifying effect,high sensitivity and fast detection rate,andis suitable for the separationandquantitative detectionofsynthetic colorants insports drink.

    high performance liquid chromatography(HPLC);sports drink;synthetic colorants

    10.3969/j.issn.1005-6521.2016.20.037

    周峰(1970—),男(漢),副教授,碩士,研究方向:運(yùn)動(dòng)營(yíng)養(yǎng)學(xué)。

    2016-07-04

    猜你喜歡
    乙酸銨水溶液色素
    娃娃樂(lè)園·綜合智能(2022年9期)2022-08-16 02:00:08
    “聽(tīng)話”的色素
    流動(dòng)相組分及比例對(duì)苯甲酸、山梨酸、糖精鈉保留時(shí)間的影響
    不同土壤陽(yáng)離子交換量測(cè)定方法的對(duì)比分析
    快速檢測(cè)土壤陽(yáng)離子交換量的方法優(yōu)化
    甜油的生產(chǎn)及色素控制
    二氮雜菲分光光度法測(cè)定水中總鐵試劑空白的討論
    DMAC水溶液乙酸吸附分離過(guò)程
    聚焦水溶液中的三大守恒關(guān)系
    TEA水溶液的流變性研究
    videos熟女内射| 国产人妻一区二区三区在| 色哟哟·www| 日韩大片免费观看网站| 亚洲综合色惰| av国产免费在线观看| 午夜福利在线在线| 午夜日本视频在线| 久久精品人妻少妇| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 中文字幕av成人在线电影| 亚洲av免费高清在线观看| 国产一级毛片在线| 69av精品久久久久久| 啦啦啦啦在线视频资源| 久久久久九九精品影院| 国产高清有码在线观看视频| 一级毛片久久久久久久久女| 国产精品爽爽va在线观看网站| 国产精品爽爽va在线观看网站| 欧美另类一区| 一级a做视频免费观看| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 亚洲最大成人av| av在线天堂中文字幕| 中国国产av一级| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | 久久久久性生活片| av女优亚洲男人天堂| 禁无遮挡网站| 卡戴珊不雅视频在线播放| 18禁在线播放成人免费| 淫秽高清视频在线观看| 2018国产大陆天天弄谢| 国国产精品蜜臀av免费| 国产成人精品婷婷| 黑人高潮一二区| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 爱豆传媒免费全集在线观看| 亚洲国产精品专区欧美| av播播在线观看一区| av福利片在线观看| 亚洲av二区三区四区| 全区人妻精品视频| 成年版毛片免费区| 国产成人午夜福利电影在线观看| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 波多野结衣巨乳人妻| 热99在线观看视频| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 日韩av在线免费看完整版不卡| 22中文网久久字幕| 边亲边吃奶的免费视频| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 成人毛片a级毛片在线播放| 身体一侧抽搐| 亚洲av国产av综合av卡| 最近中文字幕2019免费版| 看十八女毛片水多多多| 一个人看视频在线观看www免费| www.av在线官网国产| 国产成人a区在线观看| 久久久久久久久久久丰满| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久 | 亚洲乱码一区二区免费版| 国产 一区精品| 精品久久久久久电影网| 99热网站在线观看| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 欧美另类一区| 免费大片18禁| 欧美zozozo另类| 午夜老司机福利剧场| 日本欧美国产在线视频| 最近2019中文字幕mv第一页| 国产成人aa在线观看| 日韩一区二区三区影片| 国产久久久一区二区三区| av黄色大香蕉| 青春草视频在线免费观看| a级一级毛片免费在线观看| 人人妻人人看人人澡| 欧美+日韩+精品| 欧美最新免费一区二区三区| 亚洲国产高清在线一区二区三| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 街头女战士在线观看网站| 日韩欧美精品v在线| 久久99精品国语久久久| 男女边摸边吃奶| 91av网一区二区| 久久99热这里只有精品18| 免费电影在线观看免费观看| 中文精品一卡2卡3卡4更新| av一本久久久久| 69人妻影院| 高清欧美精品videossex| 国产美女午夜福利| 久久草成人影院| 国产高清三级在线| 18+在线观看网站| 久久鲁丝午夜福利片| 国产男女超爽视频在线观看| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 亚洲成人中文字幕在线播放| 亚洲av.av天堂| 色综合站精品国产| 日本爱情动作片www.在线观看| 春色校园在线视频观看| 午夜激情欧美在线| 亚洲国产成人一精品久久久| 国产免费又黄又爽又色| 午夜免费观看性视频| 亚洲无线观看免费| 亚洲最大成人中文| 国产免费一级a男人的天堂| 免费观看a级毛片全部| 亚洲av福利一区| 91久久精品国产一区二区三区| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 美女cb高潮喷水在线观看| 国内精品宾馆在线| 日韩一区二区三区影片| 丝瓜视频免费看黄片| 日本一本二区三区精品| 18+在线观看网站| 黄色一级大片看看| 亚洲欧美一区二区三区黑人 | 日本三级黄在线观看| 国产免费又黄又爽又色| 久久久久久久久久成人| 亚洲成人av在线免费| 中文天堂在线官网| av免费观看日本| 免费电影在线观看免费观看| 亚洲国产欧美人成| 成人午夜高清在线视频| 精品欧美国产一区二区三| 美女高潮的动态| 欧美成人午夜免费资源| 一级爰片在线观看| 国产又色又爽无遮挡免| 欧美激情久久久久久爽电影| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 亚洲av中文av极速乱| 五月伊人婷婷丁香| 久久久国产一区二区| 最近中文字幕高清免费大全6| 日本欧美国产在线视频| 啦啦啦韩国在线观看视频| 夜夜爽夜夜爽视频| 久久久久久久久久成人| 欧美三级亚洲精品| 亚洲精品亚洲一区二区| 日韩伦理黄色片| xxx大片免费视频| 嫩草影院精品99| 性插视频无遮挡在线免费观看| 国产人妻一区二区三区在| 男人狂女人下面高潮的视频| 99久久人妻综合| 成人午夜精彩视频在线观看| 国产精品不卡视频一区二区| 老司机影院毛片| 亚洲欧美日韩无卡精品| 亚洲精品色激情综合| 国产精品女同一区二区软件| 男插女下体视频免费在线播放| 成人av在线播放网站| 日日啪夜夜爽| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 免费无遮挡裸体视频| 国产爱豆传媒在线观看| 亚洲成人中文字幕在线播放| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 免费大片18禁| 亚洲av免费高清在线观看| 内地一区二区视频在线| 日韩在线高清观看一区二区三区| 白带黄色成豆腐渣| 久久久久久九九精品二区国产| 五月伊人婷婷丁香| 搡老乐熟女国产| 性色avwww在线观看| 青春草国产在线视频| 国产乱人偷精品视频| 中文资源天堂在线| 寂寞人妻少妇视频99o| 久久精品国产自在天天线| 国产亚洲午夜精品一区二区久久 | 久久久国产一区二区| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 久久99热6这里只有精品| 十八禁国产超污无遮挡网站| 亚洲欧美日韩东京热| 日日啪夜夜撸| 七月丁香在线播放| 欧美zozozo另类| 久久精品国产亚洲网站| 久久久久久久亚洲中文字幕| 网址你懂的国产日韩在线| 亚洲av中文av极速乱| av又黄又爽大尺度在线免费看| 亚洲av一区综合| 日韩 亚洲 欧美在线| 最近最新中文字幕大全电影3| 看十八女毛片水多多多| 日韩精品青青久久久久久| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 国产免费视频播放在线视频 | 日韩欧美 国产精品| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 观看美女的网站| 日韩亚洲欧美综合| 亚洲久久久久久中文字幕| 伦精品一区二区三区| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | 日本欧美国产在线视频| 亚洲不卡免费看| 久久精品国产亚洲av涩爱| 日韩一本色道免费dvd| 我的女老师完整版在线观看| 色播亚洲综合网| 成人鲁丝片一二三区免费| 国产激情偷乱视频一区二区| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 色综合亚洲欧美另类图片| 国产免费视频播放在线视频 | 男女边摸边吃奶| 一边亲一边摸免费视频| 午夜福利视频1000在线观看| 国产久久久一区二区三区| 日韩国内少妇激情av| 国产精品福利在线免费观看| 精品一区在线观看国产| 成人av在线播放网站| 黄色欧美视频在线观看| 白带黄色成豆腐渣| 男女下面进入的视频免费午夜| 国产黄片视频在线免费观看| 午夜激情欧美在线| 成人欧美大片| 永久网站在线| 美女国产视频在线观看| 国产免费视频播放在线视频 | 亚洲熟女精品中文字幕| av在线天堂中文字幕| 国产乱来视频区| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 午夜福利高清视频| 日韩av免费高清视频| 禁无遮挡网站| 日本一本二区三区精品| 国产有黄有色有爽视频| 热99在线观看视频| 久久6这里有精品| 亚洲国产成人一精品久久久| 亚洲最大成人中文| 日韩中字成人| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 国产麻豆成人av免费视频| 欧美潮喷喷水| 男的添女的下面高潮视频| 一边亲一边摸免费视频| 乱系列少妇在线播放| 国产成人aa在线观看| 亚洲在线观看片| 欧美xxⅹ黑人| 777米奇影视久久| 国产在视频线精品| 国产一区有黄有色的免费视频 | 精品久久久久久久久亚洲| 国产精品爽爽va在线观看网站| 色播亚洲综合网| 亚洲av在线观看美女高潮| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | 校园人妻丝袜中文字幕| 人妻少妇偷人精品九色| 黄色欧美视频在线观看| 看十八女毛片水多多多| 亚洲国产av新网站| 日日摸夜夜添夜夜爱| 国产精品蜜桃在线观看| 国产探花极品一区二区| 久久99蜜桃精品久久| 免费看美女性在线毛片视频| 欧美3d第一页| 国产精品99久久久久久久久| 免费高清在线观看视频在线观看| 亚洲内射少妇av| 精品一区二区三区视频在线| 亚洲人成网站高清观看| 日本黄大片高清| 天堂√8在线中文| 国产淫片久久久久久久久| 亚洲av成人精品一区久久| 亚洲成人av在线免费| 男女下面进入的视频免费午夜| 免费观看性生交大片5| 国产v大片淫在线免费观看| 人妻一区二区av| 91av网一区二区| 免费观看无遮挡的男女| 欧美极品一区二区三区四区| 三级经典国产精品| 国产成人91sexporn| 一区二区三区乱码不卡18| 国产久久久一区二区三区| 全区人妻精品视频| 国产成人福利小说| 午夜爱爱视频在线播放| 成人午夜精彩视频在线观看| 日韩av在线免费看完整版不卡| 乱人视频在线观看| 一级av片app| 国产精品.久久久| 我的女老师完整版在线观看| 99久久精品国产国产毛片| 国产高清三级在线| 人妻夜夜爽99麻豆av| 国产黄a三级三级三级人| 五月天丁香电影| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 久久久精品94久久精品| 久久精品久久久久久久性| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 国产人妻一区二区三区在| 欧美人与善性xxx| 看非洲黑人一级黄片| 久久久久九九精品影院| 日韩视频在线欧美| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 一二三四中文在线观看免费高清| 丝袜喷水一区| 日韩人妻高清精品专区| 一级毛片久久久久久久久女| 欧美极品一区二区三区四区| 肉色欧美久久久久久久蜜桃 | 国产视频首页在线观看| 免费看日本二区| 国产有黄有色有爽视频| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 久久久久性生活片| 99久久九九国产精品国产免费| 亚洲自偷自拍三级| 少妇熟女欧美另类| 白带黄色成豆腐渣| 午夜激情久久久久久久| 少妇人妻精品综合一区二区| 亚洲最大成人中文| 国产成年人精品一区二区| 日韩一区二区三区影片| 一个人看的www免费观看视频| 亚洲18禁久久av| 美女高潮的动态| 肉色欧美久久久久久久蜜桃 | 亚洲av一区综合| 高清在线视频一区二区三区| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 六月丁香七月| 亚洲人成网站在线观看播放| 亚洲熟女精品中文字幕| 性色avwww在线观看| 国产激情偷乱视频一区二区| 国产不卡一卡二| 亚洲精品日本国产第一区| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 国产 亚洲一区二区三区 | 日本一二三区视频观看| 国产亚洲精品av在线| 精品一区二区免费观看| 亚洲人与动物交配视频| 免费看光身美女| 97超视频在线观看视频| 三级毛片av免费| 国产高清不卡午夜福利| 综合色av麻豆| 亚洲av成人精品一区久久| 国产真实伦视频高清在线观看| 国产精品久久视频播放| av专区在线播放| 久久这里只有精品中国| 欧美xxxx性猛交bbbb| 少妇高潮的动态图| 国产亚洲91精品色在线| 婷婷色av中文字幕| av.在线天堂| 国产黄片视频在线免费观看| 国产一区有黄有色的免费视频 | 一夜夜www| 精品一区二区三卡| 国产精品无大码| 成年人午夜在线观看视频 | 久久这里只有精品中国| 最近的中文字幕免费完整| 精品不卡国产一区二区三区| 激情五月婷婷亚洲| 丝瓜视频免费看黄片| 2022亚洲国产成人精品| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 91精品伊人久久大香线蕉| 成人欧美大片| 91aial.com中文字幕在线观看| 嫩草影院入口| 中文字幕久久专区| 少妇人妻一区二区三区视频| 亚洲欧美清纯卡通| 中国美白少妇内射xxxbb| 在线免费观看的www视频| 秋霞在线观看毛片| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 亚洲av福利一区| 国产单亲对白刺激| 亚洲电影在线观看av| 国产av国产精品国产| 美女被艹到高潮喷水动态| 日韩中字成人| 麻豆成人午夜福利视频| 久久久久国产网址| 男女国产视频网站| 99久久人妻综合| 2022亚洲国产成人精品| 好男人视频免费观看在线| 欧美高清成人免费视频www| 国产成人91sexporn| 成年人午夜在线观看视频 | 午夜福利在线在线| 午夜福利视频精品| 日韩视频在线欧美| 日韩伦理黄色片| 免费在线观看成人毛片| 免费观看在线日韩| 久久99热这里只频精品6学生| 可以在线观看毛片的网站| 日韩伦理黄色片| 亚洲欧美一区二区三区国产| 亚洲经典国产精华液单| 久久久精品94久久精品| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 国产极品天堂在线| 性插视频无遮挡在线免费观看| 国产精品人妻久久久久久| 亚洲国产精品专区欧美| 国产视频内射| 高清午夜精品一区二区三区| 久久久精品94久久精品| 极品少妇高潮喷水抽搐| 久久国产乱子免费精品| 精品欧美国产一区二区三| 少妇熟女aⅴ在线视频| 久久久久久国产a免费观看| 99热这里只有精品一区| 一区二区三区高清视频在线| 日韩av在线大香蕉| 永久免费av网站大全| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 一边摸一边做爽爽视频免费| av.在线天堂| 91精品国产国语对白视频| kizo精华| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 乱人伦中国视频| 制服诱惑二区| 国产精品久久久久成人av| 日韩视频在线欧美| 高清黄色对白视频在线免费看| 成人黄色视频免费在线看| av福利片在线| 丝袜人妻中文字幕| 成年美女黄网站色视频大全免费| 最近最新中文字幕大全免费视频 | 777久久人妻少妇嫩草av网站| 亚洲成av片中文字幕在线观看 | 一本久久精品| 亚洲男人天堂网一区| 国产激情久久老熟女| 免费黄频网站在线观看国产| 精品国产乱码久久久久久小说| 亚洲国产色片| 欧美变态另类bdsm刘玥| 又大又黄又爽视频免费| 人妻少妇偷人精品九色| 人妻一区二区av| 精品一区二区三区四区五区乱码 | 亚洲国产精品一区二区三区在线| 精品少妇内射三级| 看免费成人av毛片| 国产片内射在线| 欧美97在线视频| 七月丁香在线播放| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 国产熟女午夜一区二区三区| 黄网站色视频无遮挡免费观看| av网站免费在线观看视频| 一区二区三区乱码不卡18| 成人亚洲精品一区在线观看| 国产一区二区 视频在线| 国产精品国产av在线观看| 一级毛片电影观看| 丝袜喷水一区| 国产国语露脸激情在线看| 热re99久久精品国产66热6| 最新的欧美精品一区二区| 精品少妇一区二区三区视频日本电影 | 日日摸夜夜添夜夜爱| 18禁国产床啪视频网站| 男女国产视频网站| 精品一品国产午夜福利视频| 精品久久蜜臀av无| 精品亚洲成国产av| 久久这里只有精品19| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 在线观看免费日韩欧美大片| 精品少妇一区二区三区视频日本电影 | 国产成人aa在线观看| 女性被躁到高潮视频| 久久久久国产一级毛片高清牌| 成年人免费黄色播放视频| 边亲边吃奶的免费视频| 国产亚洲最大av| 一边摸一边做爽爽视频免费| 99精国产麻豆久久婷婷| 亚洲欧洲国产日韩| 午夜91福利影院| 国产日韩欧美亚洲二区| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 成年女人毛片免费观看观看9 | 国产黄色免费在线视频| 亚洲欧洲日产国产| 九九爱精品视频在线观看| 日本午夜av视频| 亚洲国产精品成人久久小说| 国产成人午夜福利电影在线观看| 久久精品国产自在天天线| 性色avwww在线观看| 免费看不卡的av| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 另类精品久久| 亚洲欧美一区二区三区黑人 | 91成人精品电影| 在线观看免费日韩欧美大片| 国产精品久久久久久av不卡| av线在线观看网站| 在线观看免费日韩欧美大片| 狂野欧美激情性bbbbbb| 亚洲经典国产精华液单| 日本av手机在线免费观看| 久久久久久久亚洲中文字幕| 两性夫妻黄色片| 最近2019中文字幕mv第一页| 国产免费现黄频在线看| www.熟女人妻精品国产| 国产又爽黄色视频| a级毛片在线看网站| 亚洲成人手机| 90打野战视频偷拍视频| 国产1区2区3区精品| 精品酒店卫生间| 综合色丁香网| 国产精品香港三级国产av潘金莲 | 成年av动漫网址| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 久久99热这里只频精品6学生| 波多野结衣av一区二区av| 亚洲美女黄色视频免费看| 好男人视频免费观看在线| 国产一区二区激情短视频 | 天堂8中文在线网| h视频一区二区三区| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 天堂俺去俺来也www色官网| 国产成人精品久久二区二区91 | 国产精品无大码| 成年人午夜在线观看视频| 寂寞人妻少妇视频99o| 在线 av 中文字幕| 久久精品国产亚洲av高清一级| 高清欧美精品videossex| 国产精品av久久久久免费| 精品少妇久久久久久888优播| 久久毛片免费看一区二区三区| 国产精品 欧美亚洲| 国产精品国产av在线观看| 国产片内射在线| 国产精品不卡视频一区二区| av网站在线播放免费| 伊人久久大香线蕉亚洲五| av福利片在线| 国产精品久久久久久精品古装| 人成视频在线观看免费观看| 婷婷色综合www| 亚洲一码二码三码区别大吗| 不卡av一区二区三区| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 久久97久久精品| 亚洲第一青青草原| 欧美精品av麻豆av| 成年女人在线观看亚洲视频| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 欧美av亚洲av综合av国产av | 精品国产一区二区久久| 妹子高潮喷水视频| av网站免费在线观看视频| 最近手机中文字幕大全| 亚洲人成77777在线视频| 国产精品久久久久久av不卡| 免费大片黄手机在线观看| 日本av手机在线免费观看| 亚洲久久久国产精品| 卡戴珊不雅视频在线播放|