氣相色譜法測定酒中氨基甲酸乙酯

◎黃振波

（河源市疾病預防控制中心，廣東 河源 517000）

氣相色譜法測定酒中氨基甲酸乙酯

◎黃振波

（河源市疾病預防控制中心，廣東 河源 517000）

采用氣相色譜法對市面黃酒中氨基甲酸乙酯（EC）含量進行測定。黃酒中氨基甲酸乙酯（EC）中色譜柱為HP-5（30.00 mm×0.25 mm,0.25 μ m），進樣量為1μ L，分流比為50∶1；進樣口溫度控制在200 ℃，柱溫控制在170 ℃。結(jié)果表明：當EC質(zhì)量濃度達到2～30 μ g/mL時，其能夠達到最佳線性關系，r=1.000；EC加樣回收率為89.67%，相對標準偏差R SD為3.99%；10種黃酒樣品中，只有2種測出含有EC。由此表明，在黃酒EC測定中氣相色譜法具有一定的應用價值。

氣相色譜法；黃酒；氨基甲酸乙酯

氨基甲酸乙酯（EC）是一種致癌物質(zhì)，可引起淋巴癌、肺腫瘤、皮膚癌等多種癌癥。根據(jù)國際癌癥調(diào)研機構(gòu)（IARC）的調(diào)查結(jié)果發(fā)現(xiàn)[1]，氨基甲酸乙酯對人體的致病毒性屬于2B群。黃酒作為廣受我國民眾歡迎的酒精飲料，其含有的EC直接影響著民眾的身心健康。因此，采取有效措施積極加強黃酒中EC含量測定成了研究重點。本研究擬運用氣相色譜法進行定性定量測定。

1　材料與方法

1.1樣品、試劑與儀器

1.1.1樣品

自市場購入10種黃酒樣品。

1.1.2 試劑

無水硫酸鈉（分析純），乙醚、乙酸乙酯、甲醇均為色譜純，D50氨基甲酸乙酯內(nèi)標、氨基甲酸乙酯純度達到99%以上。

1.1.3儀器

氣相色譜儀（北京北分天普儀器技術(shù)有限公司，GC-8600），旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（上海瑪尼儀器設備有限公司，RE-2020Z），電子天平（梅特勒-托利多，XS303S）；Agilent ChemStation化學工作站等。

1.2方法

1.2.1樣品處理

采用量筒精確稱取黃酒樣品300 mL，將其放置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)燒瓶內(nèi)，將水溫加熱至70 ℃，調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速，使燒瓶能夠以緩慢且穩(wěn)定的速度進行旋轉(zhuǎn)。確保樣品能夠在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上由原本的300 mL蒸發(fā)至30～50 mL，取出樣品后將其移入球型滴液漏斗內(nèi)，取2∶3甲醇與乙酸乙酯配置溶液5 mL，活化氨基柱，對漏斗開關進行調(diào)節(jié)，較緩慢地將酒樣通過活化之后的氨基柱，以2∶3甲醇與乙酸乙酯配置溶液5 mL進行淋洗萃取柱，以2∶3甲醇與乙酸乙酯配置溶液10 mL進行洗脫萃取柱，將洗脫液與淋洗液充分混合并將其放置到氮吹管內(nèi)，并在氮吹儀器上行吹干處理，以乙腈定容至刻度2 mL，備測。

1.2.2分析條件

氣相色譜條件：色譜柱為HP-5（30.00 m m×0.25 m m, 0.25 μ m）；進樣量為1μ L，分流比為50∶1；進樣口溫度控制在200 ℃；柱溫控制在170 ℃。

2　結(jié)果與分析

2.1檢測條件優(yōu)化

根據(jù)氣象色譜檢測條件，因固相萃取中的洗脫劑使用劑量和種類會給回收率造成較大的影響，加之EC該化合物具有較強極性[2]。本試驗分別以正已烷-丙酮（95∶5）、乙腈-水（1∶1）、甲醇-乙酸乙酯（40∶60）等行EC標準溶液的萃取柱，并對流分進行收集，而且進行氣相色譜測定分析，對凈化、回收進行考察。研究結(jié)果顯示，甲醇-乙酸乙酯（40∶60）具有最佳洗脫效果；另行洗脫劑量分析發(fā)現(xiàn)，回收率會伴隨著洗脫容積體積呈現(xiàn)為正比，但當體積達到8 mL之后，回收率的體積不會再發(fā)生任何改變。為此，試驗明確了SPE最佳洗脫劑的使用劑量為8 mL；通過優(yōu)化對檢測條件進行優(yōu)化，色譜峰獲得的分離效果更加，同時基于此行其他參數(shù)的優(yōu)化，最終基于該條件獲得EC離子色譜圖（見圖1）。

圖1　氨基甲酸乙酯離子峰圖

2.2標準曲線與檢出限

對不同質(zhì)量濃度EC標準溶液進行配制，并根據(jù)上述條件來對其進行測定，以質(zhì)量濃度為X，峰高為Y行線性回歸分析，得到EC標準曲線與相關系數(shù)，同時獲得檢出限[3]。結(jié)果顯示，當EC質(zhì)量濃度達到2.0～30.0 μ g/mL范圍內(nèi)，線性方程為：Y=32 099X+159 128，r=1.000；檢出限為64.5 μ g/L。該結(jié)果表明，當EC質(zhì)量濃度達到2.0～30.0 μ g/mL時，其能夠達到最佳線性關系。這表明該方法對黃酒在EC定量與定性分析中具有較高準確性。

2.3回收率與精密度

在未發(fā)現(xiàn)EC的樣品中，分別添加EC標準溶液50.0、100.0、150.0 μ g/L，并按照上述方法對樣品進行處理和測定，樣品回收率見表1。EC加樣回收率為89.67%，相對標準偏差RSD為3.99%。

2.4樣品測定

根據(jù)上述操作方法對購入的10種黃酒樣品中EC含量進行測定，結(jié)果顯示，本研究購入的10種黃酒樣品中，8種未測出EC（見表2）。

表1　加標回收率與精密度表

表2　樣品測定結(jié)果表

3　結(jié)論

本研究通過運用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)的方式對黃酒樣品進行處理，再采用氨基固相萃取小柱，并對樣品中的EC進行提取，同時運用氣相色譜法對EC進行定性與定量范圍。色譜柱為HP-5（30.00 mm×0.25 mm,0.25 μ m）；進樣量為1 μ L，分流比為50∶1；進樣口溫度控制在200 ℃；柱溫控制在170 ℃。通過測定結(jié)果發(fā)現(xiàn)，氣象色譜法在黃酒EC測定中，具有較高準確度和精密度，而且操作方法簡單快捷，可快速發(fā)現(xiàn)黃酒中含有的EC，對提高黃酒質(zhì)量有著重要意義[4]。

[1]Roberto Rodrguez Madrer. Determination of ethylcarbamate in ciderspirits by HPLC-FLD[J]. Food Control，2009，25（20）：139-143.

[2]崔 鵬，韓澄華，張 輝.青稞酒中氨基甲酸乙酯的氣相色譜-四級桿質(zhì)譜測定法[J].環(huán)境與健康雜志，2012，28（1）：71-72.

[3]劉紅麗，張榕杰，盧素格.酒中氨基甲酸乙酯的測定分析[J].中國衛(wèi)生工程學，2010，18（4）：299-300，303.

[4]陳達煒，苗 虹，趙云峰.分散固相萃取/氣相色譜-質(zhì)譜法測定醬油及食醋中氨基甲酸乙酯[J].分析測試學報，2014，32（1）：108-111.

Determination of Ethyl Carbamate in Wine by Gas Chromatography

Huang Zhenbo
（Heyuan Center for Disease Control and Prevention， Heyuan 517000， China）

To determinate the ethyl urethane （EC） content in yellow rice wine by gas chromatography，the chromatographic column was HP-5 （30.00 mm×0.25 mm， 0.25 μm）， the sample volume was 1 L， the split ratio was 50∶1； the sample inlet temperature was controlled at 200 ℃， and the column temperature was controlled at 170℃. The results showed that when the EC mass concentration was reached 2～30 g/mL， which was capable of the best linear relationship， r = 1.000； EC and sample recovery rate was 89.67%， the relative standard deviation （RSD） was 3.99%； 10 kinds of yellow rice wine samples， only two were detected containing EC. This showed that determination has certain application value of gas chromatography in Yellow Wine EC.

Gas chromatography； Wine； Urethane

TS261.7；O657.63

10.16736/j.cnki.cn41-1434/ts.2016.06.026

黃振波（1981-），男，漢，廣東省河源市人，本科，商品檢驗工程師，主要研究方向為食品風險監(jiān)測。