白酒中鄰苯二甲酸二丁酯檢測方法的研究

熊秋萍，謝小蘭，何信，羅莉，孫琪

（四特酒有限責任公司，江西樟樹331200）

白酒中鄰苯二甲酸二丁酯檢測方法的研究

熊秋萍，謝小蘭，何信，羅莉，孫琪

（四特酒有限責任公司，江西樟樹331200）

研究開發(fā)了一種用于白酒中二甲酸二丁酯（dibutyl phthalate，DBP）的新的檢測方法：以氘代鄰苯二甲酸酯（D4-DBP）為內標的內標法。使用氣相色譜-質譜儀為研究手段，和國標中的外標法做了對比，評估了內標法的精密度和準確度。研究結果顯示，當DBP濃度處于0.6 mg/kg以下時，內標法的精密度和準確度與外標法類似。DBP濃度高于0.6 mg/kg時，內標法測量數(shù)據(jù)比外標法偏低。因此，內標法更適合在DBP濃度偏低時使用，在不影響測量結果的前提下，省去了配置標準曲線的步驟，比傳統(tǒng)外標法操作更為便利。

內標法；外標法；氣相色譜-質譜；DBP；D4-DBP

白酒在中國歷史悠久，蘊藏與傳承著深厚的中華文化。然而近年來白酒中的塑化劑問題引起人們的強烈關注。塑化劑是一類鄰苯二甲酸酯物質，可干擾人體內分泌系統(tǒng)，導致男性生殖能力減弱、引發(fā)女性性早熟，并且可能通過胎盤脂質及鋅代謝影響胎盤發(fā)育，導致胚胎生長緩慢，甚至具有致癌性［1］。

由于塑化劑在乙醇中的遷移率與時間有關，白酒會在貯存、運輸與包裝過程中與塑料制品接觸而產生鄰苯二甲酸酯物質的遷移。目前白酒中的塑化劑問題已成為整個白酒行業(yè)面臨的問題。本研究參照國標方法GB/T 21911—2008《食品中鄰苯二甲酸酯的測定》，結合白酒的實際情況，對標準中條件進行優(yōu)化和摸索其他方法，得出適合白酒中塑化劑的檢測方法，對白酒塑化劑的檢測和白酒產品質量的控制提供指導。

1　材料與方法

1.1材料、試劑及儀器

白酒：四特酒。

正己烷：色譜純（賽默飛）；標準品：鄰苯二甲酸二丁酯（DBP，純度≥99.6%），氘代鄰苯二甲酸二丁酯（D4-DBP，純度≥99.6%）；德國Dr.Ehrenstorfer GmbH公司。

儀器設備：氣相色譜-質譜聯(lián)用儀（GC-MS），7890A-5975C安捷倫公司；旋渦混合器。

1.2實驗方法

1.2.1色譜條件

色譜柱：HP-5MS 30 m×25 μm×0.25 μm；載氣（氦氣純度≥99.999%）：流速為1.2 mL/min，尾吹3 mL/min；進樣器溫度：280℃；四級桿溫度：150℃；柱箱二階升溫程序：60℃（保持1 min），20℃/min升至220℃（保持1 min），5℃/min升至280℃（保持4 min）。

進樣量：1 μL。

1.2.2質譜條件

色譜與質譜接口溫度：280℃；四級桿溫度：150℃；電離方式：電子轟擊源（EI）；監(jiān)測方式：選擇離子掃描模式（SIM）；電離能量：70 eV；溶劑延遲：5 min。

1.2.3內標法與外標法

標準儲備溶液和中間液的制備：準確稱取100.0 mg標準物質DBP（精確至0.1 mg），用正己烷定容至100 mL容量瓶中，配制為1000 mg/L的混合標準儲備液，于冰箱保存待用。臨用時，準確移取內標的標準儲備溶液1000 μL（精確至0.1 μL）于100 mL容量瓶中，用正己烷稀釋至刻度制成10 mg/L的中間液。

內標的標準儲備溶液和中間液的制備：準確稱取100.0 mg標準物質D4-DBP（精確至0.1 mg），用正己烷定容至100 mL容量瓶中，配制為1000 mg/L的混合標準儲備液，于冰箱保存待用。臨用時，準確移取內標的標準儲備溶液1000 μL（精確至0.1 μL）于100 mL容量瓶中，用正己烷稀釋至刻度即制成10 mg/L的中間液。

1.2.3.1外標法

用移液槍準確分別移取標準溶液中間液10 μL、20 μL、30 μL、50 μL、100 μL、200 μL加正己烷至最終體積為1000 μL，制備含DBP濃度為0.1 mg/L、0.2 mg/L、0.3 mg/L、0.5 mg/L、1.0 mg/L、2.0 mg/L或使用梯度稀釋法，進樣后制成標準曲線。

1.2.3.2內標法

用移液槍準確分別移取標準溶液中間液10 μL、20 μL、30 μL、50 μL、100 μL、200 μL加正己烷至最終體積為990 μL，再分別加標準溶液中間液10 μL內標中間液制備為含DBP濃度為0.1 mg/L、0.2 mg/L、0.3 mg/L、0.5 mg/L、1.0 mg/L、2.0 mg/L或使用梯度稀釋法，進樣后制成標準曲線。

1.2.4樣品前處理

外標準確稱取樣品2.00 g，加入正己烷2.0 mL，在漩渦混合器上振蕩1 min，靜置分層，取上層清液進行分析。內標法準確稱取樣品2.00 g，加入20 μL內標中間液，再加入正己烷2.0 mL，在漩渦混合器上振蕩1 min，靜置分層，取上層清液進行分析。

2　結果與分析

2.1標準曲線

按照安捷倫工作站操作程序由安捷倫工作站自動生成，見圖1。

監(jiān)測的主要碎片離子及保留時間見表1，離子圖見圖2。

2.2樣品測定

抽取10個不同酒體或不同讀數(shù)的酒樣分別采用外標法和內標法，用GC-MS進行測定，測定結果見表2。

2.3精密度與準確度實驗

圖1　標準曲線的制作

表1　監(jiān)測結果

表2　測定結果

用2種實驗方法測定酒精度為35%vol～45%vol的10個四特酒樣，參照國家標準中對不含油脂類物質中的塑化劑檢測精密度要求為：在重復性條件下測定的2次獨立測定結果的絕對差值不得超過算術平均值的15%，結果見表3。以10個樣品中的DBP 2次獨立測定結果為例，結果分析中的相對誤差均能滿足精密度要求。選擇樣品6進行加標實驗，驗證實驗方法的準確性，外標法回收率平均值為99.0%，內標法回收率平均值為94.0%，結果表明2種方法的精密度以及準確度均能滿足實驗要求，結果見表4。

將內標法與外標法所做平行樣的相對誤差作圖分析見圖3。

圖2　2種化合物離子圖

3　結論

本研究參照國標GB/T 21911—2008《食品中鄰苯二甲酸酯的測定》，開發(fā)了內標測定方法，為白酒中鄰苯二甲酸酯類物質檢測提供更多檢測方法。從精密度和準確度與外標法的對照實驗數(shù)據(jù)可以得出，在濃度為0.6 mg/kg以下的范圍是適用的。同時從數(shù)據(jù)分析可見在DBP濃度更高時，內標法測量數(shù)據(jù)比外標法偏低，雖然能滿足準確度要求，在含量更高的情況下應再進行實驗來確定是否適用。

表3　塑化劑檢測精密度結果

表4　外標法及內標法回收率實驗結果

塑化劑是指一類鄰苯二甲酸酯類物質，白酒中主要存在的塑化劑是DBP（鄰苯二甲酸二丁酯）和DEHP（鄰苯二甲酸二（2-乙基）己酯，這2種物質在本文所研究的方法中能得到很好分離，內標法檢測開啟了白酒中塑化劑檢測的新思路，同樣也可以延伸至其他種類的鄰苯二甲酸酯類，為白酒中塑化劑檢測帶來更廣闊的思路。

圖3　內標法與外標法平行樣的相對誤差圖

［1］靳秋梅，孫增榮.鄰苯二甲酸酯類化合物的生殖發(fā)育毒性［J］.天津醫(yī)科大學學報，2004（10）：15-18.

［2］國家質量監(jiān)督檢驗檢疫總局.食品中鄰苯二甲酸酯的測定：GB/T 21911—2008［S］.北京：中國標準出版社，2008.

Detection of Dibutyl Phthalate in Baijiu

XIONG Qiuping，XIE Xiaolan，HE Xin，LUO Li and SUN Qi
（Site Liquor Co.Ltd.，Zhangshu，Jiangxi 331200，China）

In this study，a new detection method of dibutyl phthalate in Baijiu by using deuterated phthalic acid ester（D4-DBP）as the internal standard has been developed.Compared with the external standard method in ISO Standards via GC-MS，the precision and the accuracy of both methods were close as DBP concentration was below 0.6 mg/kg，however，the detection data of internal standard method were comparatively lower than that of external standard method as DBP was above 0.6 mg/kg.Accordingly，internal standard method was more suitable as DBP concentration was low，which could shorten the operation time of preparing the standard curve without any adverse effects on the analytic results.

internal standard method；external standard method；GC-MS；DBP；D4-DBP

TS262.3；TS261.7；TS261.4

A

1001-9286（2016）10-0061-04

10.13746/j.njkj.2016205

2016-06-17

熊秋萍（1986-），女，江西宜豐人，主要從事白酒檢測及質量控制。

優(yōu)先數(shù)字出版時間：2016-08-05；地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/52.1051.TS.20160805.1337.004.html。