口腔鱗癌患者唾液中IL-8的含量檢測及臨床意義*

王　華，鄺　華

(東莞厚街醫(yī)院口腔科，廣東　東莞　523945)

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口腔鱗癌患者唾液中IL-8的含量檢測及臨床意義*

王華，鄺華

(東莞厚街醫(yī)院口腔科，廣東東莞523945)

目的：分析口腔鱗癌患者唾液中IL-8含量對于口腔鱗癌患者的臨床意義。方法：選擇20例口腔鱗癌患者為實驗組，同時選擇同期健康體檢的20例為對照組，收集兩組觀察對象的唾液樣本，對兩組觀察對象唾液中IL-8的含量進(jìn)行檢測。結(jié)果：實驗組口腔鱗癌患者唾液中IL-8含量明顯高于對照組健康體檢者(P<0.05)，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論：針對口腔鱗癌患者行唾液中IL-8含量的檢測對診斷口腔鱗癌具有一定的臨床價值。

口腔鱗癌；唾液；IL-8

口腔鱗癌即口腔鱗狀細(xì)胞癌，屬于臨床中口腔頜面部較為常見的惡性腫瘤之一，目前，臨床中主要依靠影像學(xué)檢查、組織學(xué)檢驗及臨床檢查等對疾病進(jìn)行診斷[1]，隨著醫(yī)療技術(shù)的不斷發(fā)展，口腔鱗癌相關(guān)的腫瘤標(biāo)志物檢測也日漸得到廣泛應(yīng)用?？谇击[癌患者口腔黏膜組織若出現(xiàn)癌變，腫瘤細(xì)胞合成及分泌物質(zhì)將首先釋放在病變的局部體液內(nèi)，隨著淋巴液及血液的回流進(jìn)入血循環(huán)，最終被器官、組織代謝吸收[2]。因此，針對唾液中腫瘤標(biāo)志物含量的檢測對于診斷口腔鱗癌具有一定的意義。我院為了分析IL-8含量的檢測對于口腔鱗癌患者的臨床意義，針對收治的口腔鱗癌患者唾液中IL-8的含量進(jìn)行了分析及檢驗，現(xiàn)報告如下。

1　資料和方法

1.1臨床資料選擇20例口腔鱗癌患者及20例行健康體檢的患者作為本次觀察對象，收治時間為2012年6月至2014年6月，對兩組觀察對象的基線資料進(jìn)行對比分析。排除標(biāo)準(zhǔn)：①存在嚴(yán)重全身系統(tǒng)性疾病患者；②存在化療史、面部手術(shù)史患者；③存在明顯口腔黏膜疾病的患者及重度牙周炎患者。

對照組20例健康體檢者中，男12例，女8例，年齡20～52歲，年齡均值(36.12±3.58)歲。

實驗組20例口腔鱗癌患者中，男13例，女7例，年齡22～56歲，年齡均值(38.89±3.98)歲。

對兩組觀察對象的基線資料進(jìn)行均衡性檢驗，無統(tǒng)計學(xué)無意義(P>0.05)，組間可進(jìn)行對比。

1.2方法采用由上海森雄科技實業(yè)有限公司生產(chǎn)的IL-8 EILA試劑盒進(jìn)行檢測，兩組觀察對象均在早間6～8時(空腹?fàn)顟B(tài))左右采集好唾液樣本，口腔鱗癌患者唾液樣本在進(jìn)行放療及手術(shù)前進(jìn)行收集，告知觀察對象收集唾液前2 h內(nèi)禁止抽煙、喝水。指導(dǎo)觀察對象正確蓄積唾液的方式，將唾液順著漏斗吐入刻度試管內(nèi)收集觀察對象5 mL非刺激性全唾液，將試管封閉后放置在零下80 ℃冰箱內(nèi)保存。IL-8含量的檢測：采用雙抗夾心ELISA法，加入生物素化的抗人IL-8，形成免疫復(fù)合物，將顯色液加入后，人IL-8的濃度與顯色的深淺呈現(xiàn)正相關(guān)關(guān)系，進(jìn)行檢測前20 min，將試劑盒取出，放置在室溫25 ℃左右的房間，設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)孔(8孔)，在每個孔內(nèi)加入100 μL樣品稀釋液，在第一孔內(nèi)加入100 μL標(biāo)準(zhǔn)品，混淆后用加樣器吸出100 μL，放置于第二孔內(nèi)，以此類推，最后在第七孔內(nèi)吸出100 μL后處理掉，留下100 μL即可，第八孔作為對照孔，孔內(nèi)空白。在每孔中加入100 μL待測樣品，反應(yīng)板溫度設(shè)置為37 ℃，120 min，用洗滌液將反應(yīng)板洗滌5次左右，在濾紙上印干，每個孔內(nèi)加50 μL第一抗體工作液，將反應(yīng)板混勻，重復(fù)放置并洗滌，每個孔內(nèi)加入100 μL酶標(biāo)抗體工作液，再次放置并洗滌，再加入100 μL底物工作液，放置在37 ℃左右的暗處反應(yīng)10 min，每個孔內(nèi)加入50 μL終止液，在450 nm波長的酶標(biāo)儀讀取吸光度。

1.3觀察指標(biāo)觀察對照組健康體檢者與實驗組口腔鱗癌患者之間唾液中IL-8含量之間的差異。

1.4統(tǒng)計學(xué)處理采用SPSS 23.0軟件對各項觀察指標(biāo)情況進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理,計量資料采用t檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2　結(jié)　果

對照組健康體檢者與實驗組口腔鱗癌患者之間對比的唾液中IL-8含量的差異較為顯著(P<0.05)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(見表1)。

表1　兩組觀察對象唾液中IL-8含量比較

3　討　論

IL-8是一種血管生成因子，屬于促炎癥細(xì)胞因子，對于調(diào)節(jié)腸道平衡有著較為重要的意義，具有抗炎癥作用[3]。正常情況下，IL-8在體外能直接誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞趨化效應(yīng)及增生效應(yīng)，在體內(nèi)能直接誘導(dǎo)血管生成。早期發(fā)現(xiàn)中性粒細(xì)胞是IL-8作用的靶細(xì)胞，IL-8具有能特異性趨化中性粒細(xì)胞進(jìn)入炎性組織的功能，使其脫顆粒，進(jìn)而產(chǎn)生超氧陰離子，激活炎性細(xì)胞，引發(fā)參與炎癥病理性損害，在炎性反應(yīng)中有著較為重要的意義[4]。除此之外，IL-8還能有效促進(jìn)炎性反應(yīng)進(jìn)程，刺激血管生成，促進(jìn)有絲分裂，調(diào)節(jié)免疫功能。

唾液樣本具有取樣方便、安全無創(chuàng)且能反復(fù)采集等優(yōu)勢，在臨床中較易被患者接受。唾液中含有口腔黏膜表層的脫落細(xì)胞及細(xì)胞的代謝分泌物，當(dāng)口腔黏膜出現(xiàn)癌細(xì)胞病變時[5]，癌細(xì)胞病變組織細(xì)胞與其代謝分泌產(chǎn)物進(jìn)入唾液中后，唾液內(nèi)部分指標(biāo)會隨之產(chǎn)生相應(yīng)變化，臨床中可通過檢測手段進(jìn)行鑒別。因此，通過對口腔鱗癌患者唾液中相關(guān)腫瘤標(biāo)志物含量變化進(jìn)行檢測，能作為診斷口腔鱗癌的主要依據(jù)。人類IL-8主要由3個內(nèi)含子及4個外顯子組成，IL-8是通過其受體發(fā)揮作用的[6]，IL-8受體主要為RB及RA兩種，IL-8的功能主要表現(xiàn)為對中性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞及T淋巴細(xì)胞等的激活，作用于炎癥損傷中。除此之外，IL-8還存在著較多炎癥反應(yīng)之外的生物學(xué)行為，如：誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞運(yùn)動、降解基底膜、誘導(dǎo)及促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞分裂、與頭頸部鱗癌發(fā)生存在較為緊密的聯(lián)系[7]?？谇火つづc唾液有著直接接觸的聯(lián)系，與口腔鱗癌組織有著緊密聯(lián)系，口腔鱗癌組織細(xì)胞分泌出的腫瘤標(biāo)志物能直接進(jìn)入唾液內(nèi)，目前，臨床中對口腔鱗癌患者唾液中腫瘤標(biāo)志物含量的改變機(jī)制尚未完全明確，可能是由于口腔黏膜組織發(fā)生癌細(xì)胞病變后，其相關(guān)的腫瘤標(biāo)志物表達(dá)量隨著病變發(fā)生增加趨勢(還可能是相關(guān)腫瘤標(biāo)志物表達(dá)量并無顯著增加，但釋放至唾液中的腫瘤標(biāo)志物明顯增多)等[8]。本次觀察的結(jié)顯示，實驗組口腔鱗癌患者IL-8含量明顯高于對照組健康體檢者,說明針對口腔鱗癌患者進(jìn)行IL-8含量的檢測能有效對口腔鱗癌進(jìn)行診斷，具有一定的輔助診斷作用。

綜上所述，通過對口腔鱗癌患者唾液中IL-8含量進(jìn)行檢驗發(fā)現(xiàn)，IL-8含量對診斷口腔鱗癌具有一定的臨床價值，且操作簡單便利，不會對患者產(chǎn)生任何創(chuàng)傷，值得推廣。

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東莞市科技計劃醫(yī)療衛(wèi)生類科研一般項目(201210515023164)

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10.3969/j.issn.1001-5779.2016.03.027

2016-03-22)(責(zé)任編輯：敖慧斌)