早期先兆流產(chǎn)中醫(yī)辨證分型與外周血中封閉抗體CD4、CD8、CD4/CD8低下的相關(guān)性研究*

鄧志林，宋春花，韓立民

(1.江西中醫(yī)藥大學(xué)2014級(jí)在讀碩士研究生，江西　南昌　330004；2.贛南醫(yī)學(xué)院 a.第一附屬醫(yī)院，江西　贛州　341000)

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早期先兆流產(chǎn)中醫(yī)辨證分型與外周血中封閉抗體CD4、CD8、CD4/CD8低下的相關(guān)性研究*

鄧志林1,2，宋春花2a，韓立民2

(1.江西中醫(yī)藥大學(xué)2014級(jí)在讀碩士研究生，江西南昌330004；2.贛南醫(yī)學(xué)院 a.第一附屬醫(yī)院，江西贛州341000)

目的：探討早期先兆病中醫(yī)辨證分型與外周血中封閉抗體(BA)CD4、CD8、CD4/CD8低下的相關(guān)性，為早期先兆流產(chǎn)的中醫(yī)辨證分型提供客觀(guān)化依據(jù)，從而指導(dǎo)臨床早期先兆流產(chǎn)的中醫(yī)辨證施治。方法：對(duì)124例早期先兆流產(chǎn)病患者進(jìn)行血清封閉抗體CD4、CD8、CD4/CD8檢測(cè)，依據(jù)《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》為標(biāo)準(zhǔn)對(duì)每位患者進(jìn)行中醫(yī)辨證分型，。結(jié)果：①與對(duì)照組相比，早期先兆流產(chǎn)病各中醫(yī)證型血清封閉抗體CD4/CD8均具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。②早期先兆流產(chǎn)病腎虛證的血清封閉抗體CD4/CD8與血熱證、氣血虛弱證、跌仆傷胎證進(jìn)一步比較具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，均值比較為：腎虛證<氣血虛弱證<血熱證<跌仆傷胎證。③腎虛證患者CD4值(-2.15±2.43)明顯小于血熱證患者CD4值(-0.78±1.25)，有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。④與對(duì)照組比較，腎虛證血清封閉抗體CD4有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),其余三證型無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論：腎虛證對(duì)早期先兆流產(chǎn)病患者血清封閉抗體CD4、CD4/CD8低下的影響最大，可以將血清封閉抗體CD4、CD4/CD8作為早期先兆流產(chǎn)病腎虛證分型的客觀(guān)指標(biāo)。

早期先兆流產(chǎn)；中醫(yī)證型；封閉抗體；CD4、CD8、CD4/CD8

早期先兆流產(chǎn)病以陰道少量流血，伴陣發(fā)性下腹痛或腰背痛為主要癥狀，屬于中醫(yī)“胎漏、胎動(dòng)不安”等范疇。近年來(lái)，生殖免疫研究表明[1]，免疫因素導(dǎo)致的早期先兆流產(chǎn)比例日益增加，而在各類(lèi)的免疫指標(biāo)中認(rèn)為封閉抗體(block antibody，BA)的價(jià)值最大。封閉抗體是在妊娠時(shí)，滋養(yǎng)細(xì)胞攜帶的父系抗原刺激母體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生的一類(lèi)IgG抗體，它作為一種體液免疫，是妊娠成功的一個(gè)重要因素。母體中的淋巴細(xì)胞及胚胎滋養(yǎng)細(xì)胞能與之相結(jié)合，從而阻斷母體與胎兒間的抗原識(shí)別及其引起的繼發(fā)排斥反應(yīng)。若妊娠早期母體缺乏足夠的BA，則會(huì)導(dǎo)致母體的同種免疫識(shí)別功能降低,母體無(wú)法識(shí)別胎兒而作異物排斥，進(jìn)而引發(fā)流產(chǎn)。

本文選取早期先兆流產(chǎn)患者124例,進(jìn)行中醫(yī)辨證分型和血清封閉抗體CD4、CD8、CD4/CD8檢測(cè)，以探討早期先兆流產(chǎn)病中醫(yī)各證型與外周血中封閉抗體CD4、CD8、CD4/CD8的相關(guān)性，現(xiàn)報(bào)道如下。

1　對(duì)象與方法

1.1研究對(duì)象臨床病例均為江西中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院2015年9月至2016年1月住院的早期先兆流產(chǎn)患者，共計(jì)124例，最小年齡22歲，最大年齡45歲，平均32歲。正常對(duì)照組共40例，為2015年9月至12月江西中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院婦科門(mén)診，年齡為20～40歲的就診保胎者。

1.2診斷標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1早期先兆流產(chǎn)的診斷標(biāo)準(zhǔn)參照第8版《婦產(chǎn)科學(xué)》[2]和第7版《中醫(yī)婦科學(xué)》[3]早期先兆流產(chǎn)診斷標(biāo)準(zhǔn)如下：①病史：停經(jīng)史、伴早孕反應(yīng)；②癥狀：陰道少許出血，或伴小腹墜痛或腰酸痛；③妊娠試驗(yàn)：尿妊娠試驗(yàn)陽(yáng)性；④B型超聲波檢查：子宮大小、孕囊或胚胎(胎兒)發(fā)育與孕周相符；⑤婦科檢查：宮頸口未開(kāi)，子宮體軟，大小與孕周相符；⑥血清絨毛膜促性腺激素(β-HCG)、孕酮(P)水平與孕周和B超結(jié)果基本相符;⑦基礎(chǔ)體溫測(cè)定：保持黃體期水平(維持高溫曲線(xiàn))。

1.2.2早期先兆流產(chǎn)的中醫(yī)證型分型標(biāo)準(zhǔn)參考國(guó)家藥品食品監(jiān)督局2002年修訂的《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》[4]，將早期先兆流產(chǎn)分為腎虛型、血熱型、氣血虛弱型和跌仆傷胎(血瘀)型4型。具體分型如下：

1.2.2.1腎虛證主證：陰道少量出血，色淡暗，質(zhì)??；小腹墜痛，腰酸痛；兩膝酸軟。次證：頭暈耳鳴，夜尿頻多，或曾屢有墮胎。舌脈：舌質(zhì)淡，苔白，脈沉細(xì)略滑。

1.2.2.2血熱證主證：陰道少量出血，色鮮紅或深紅；小腹疼痛或腰脹痛；口干咽燥。次證：心煩少寐，手足心熱，小便短黃，大便秘結(jié)。舌脈：舌質(zhì)紅，苔黃，脈滑數(shù)或弦滑。

1.2.2.3氣血虛弱證主證：陰道少量出血，色淡紅，質(zhì)清??；小腹墜痛伴腰酸痛；神疲肢倦。次證：心悸氣短，面色無(wú)華或萎黃。舌脈：舌質(zhì)淡，苔薄白，脈細(xì)緩略滑。

1.2.2.4跌仆傷胎證(血瘀)主證：陰道少量出血，色紅，小腹疼痛或腰脹痛；有外傷史。次證：精神倦怠。舌脈：舌質(zhì)紅，苔薄白，脈滑無(wú)力。

各證型中主證陰道少量出血必備，另應(yīng)具備1～2項(xiàng)，同時(shí)次證應(yīng)具備3項(xiàng)方可診斷。運(yùn)用中醫(yī)理論進(jìn)行辨證分型，124例中腎虛證型40例，氣血虛弱證型38例，血熱證型32例，跌仆傷胎(血瘀)證型14例。

1.3病例納入標(biāo)準(zhǔn)參考國(guó)家藥品食品監(jiān)督局2002 年修訂的《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》[4](1)符合西醫(yī)診斷及中醫(yī)辨證標(biāo)準(zhǔn)，并且患者所抽外周血用流式細(xì)胞儀檢測(cè)封閉抗體至少有一項(xiàng)低下者。(2)自愿接受本研究者。(3)年齡20～45歲。

1.4病例排除標(biāo)準(zhǔn)參考國(guó)家藥品食品監(jiān)督局2002 年修訂的《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》[4](1)年齡>45歲或<20歲。(2)中醫(yī)四診資料不全，難以進(jìn)行中醫(yī)辨證分型者。(3)不符合本病西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)及中醫(yī)癥候診斷標(biāo)準(zhǔn)。(4)合并有心、肝、腎或神經(jīng)系統(tǒng)、造血系統(tǒng)等嚴(yán)重疾患者。(5)排除染色體、生殖器解剖、內(nèi)分泌因素、生殖器感染、免疫五項(xiàng)及優(yōu)生四項(xiàng)異常、外界不良因素等導(dǎo)致早期先兆流產(chǎn)的患者。

1.5研究方法于入院次日清晨空腹采取患者及其配偶的靜脈血，將二者混合，檢測(cè)其血清封閉抗體CD4、CD8、CD4/CD8。采用江西中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科血生化標(biāo)準(zhǔn)：CD4>0、CD8>0，CD4/CD8:0.7～2.87。其中任何一項(xiàng)出現(xiàn)負(fù)值即代表封閉抗體CD4、CD8、CD4/CD8低下。

2　結(jié)　果

2.1各證型組封閉抗體情況4種早期先兆流產(chǎn)病中醫(yī)證型與血清封閉抗體CD4、CD8、CD4/CD8的關(guān)系比較見(jiàn)表1。

表1　124 例早期先兆流產(chǎn)患者各證型組封閉抗體情況±s

注：四證型與對(duì)照組比較※P<0.01，與腎虛證比較△P<0.01；四證型與對(duì)照組比較★P<0.01，&P>0.05，與腎虛證比較#P<0.01，$P>0.05。

3　討　論

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為，早期先兆流產(chǎn)是妊娠病的一種常見(jiàn)并發(fā)癥，屬現(xiàn)代醫(yī)學(xué)免疫流產(chǎn)范圍[5]。正常妊娠時(shí)，胎兒在母體中能正常生長(zhǎng)發(fā)育是由于母體的免疫系統(tǒng)能通過(guò)識(shí)別父源性MHC分子，從而誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生保護(hù)性的封閉抗體。BA通過(guò)與母體在妊娠早期產(chǎn)生的一種免疫細(xì)胞(致敏T淋巴細(xì)胞)表面的CD4和CD8分子特異性結(jié)合，從而使CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞向細(xì)胞內(nèi)傳遞的第一信號(hào)系統(tǒng)受到干擾。因此，胎兒可繼續(xù)生長(zhǎng)發(fā)育。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)[6]，BA缺乏是導(dǎo)致早期先兆流產(chǎn)的一個(gè)重要原因，其發(fā)病機(jī)制為：由于這些患者體內(nèi)存在未被抑制的致敏T淋巴細(xì)胞，其可直接作用于胚胎，或通過(guò)釋放炎性介質(zhì)間接損害胎兒或胎盤(pán)，最終導(dǎo)致流產(chǎn)。

中醫(yī)古籍中并無(wú)血清封閉抗體CD4、CD8、CD4/CD8的記載，我們可將其認(rèn)為是人體之正氣，如《素問(wèn)·刺法論》[7]中有“正氣存內(nèi)，邪不可干”、《素問(wèn)·評(píng)熱病論》[7]有“邪之所湊，其氣必虛”等論述，這里的正氣指的是維持人體正常生理活動(dòng)的免疫功能。中醫(yī)理論認(rèn)為，正氣指人體內(nèi)具有抗病、驅(qū)邪、調(diào)節(jié)、修復(fù)等作用的一類(lèi)細(xì)微物質(zhì)。這與現(xiàn)代免疫學(xué)認(rèn)為的免疫三大功能：防御、自穩(wěn)、監(jiān)視是一致的。若人體正氣不足，則抗邪無(wú)力，病邪入侵，即損害人體免疫功能，故致血清封閉抗體CD4、CD8、CD4/CD8低下。

本研究外周血中封閉抗體以CD4、CD4/CD8分布低下為主，CD8分布以正常為主，均為正值。由于CD8 是抑制性因素，則呈負(fù)相關(guān)性作用。而現(xiàn)代免疫學(xué)研究表明，免疫功能的正常發(fā)揮關(guān)鍵在于CD4/CD8所形成的T細(xì)胞免疫網(wǎng)絡(luò)的調(diào)控作用。

由表1中我們可以看出，早期先兆流產(chǎn)病腎虛證、氣血虛弱證、血熱證和跌仆傷胎證血清封閉抗體CD4/CD8與對(duì)照組相比較均具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。此結(jié)果與朱蘊(yùn)璞等[8]研究結(jié)果相似。結(jié)合中醫(yī)理論思考可認(rèn)為：腎虛可致胎元不固，氣血虛弱可致胎元失養(yǎng)，血熱可熱擾胞宮，跌仆傷胎可致淤血內(nèi)阻胞宮，胎元失養(yǎng)不固，從而導(dǎo)致血清封閉抗體CD4/CD8低下。故可解釋此四型血清封閉抗體CD4/CD8與對(duì)照組的比較皆具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。從表1中我們可以進(jìn)一步看出，早期先兆流產(chǎn)病腎虛證的血清封閉抗體CD4/CD8與血熱證、跌仆傷胎證、氣血虛弱證進(jìn)一步比較具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，均值比較為：腎虛證<氣血虛弱證<血熱證<跌仆傷胎證。所得結(jié)果與賈科萍等[5]研究結(jié)果一致。

從表1中還可看出，腎虛證患者CD4值(-2.15±2.43)明顯小于血熱證患者CD4值(-0.78±1.25)，有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。與對(duì)照組比較，腎虛證血清封閉抗體CD4有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，其他三組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。由此可認(rèn)為腎虛證對(duì)早期先兆流產(chǎn)病患者血清封閉抗體CD4低下的影響最大，可以將血清封閉抗體CD4、CD4/CD8作為早期先兆流產(chǎn)病腎虛證分型的客觀(guān)指標(biāo)。因此，在實(shí)際臨床中，對(duì)于早期先兆流產(chǎn)病腎虛證的患者，要更加密切關(guān)注其血清封閉抗體CD4、CD4/CD8的水平，其可作為早期先兆流產(chǎn)中醫(yī)辨證分型的一項(xiàng)參考依據(jù)，從而指導(dǎo)中醫(yī)辨證施治。

[1]應(yīng)翩,姜彥,任輝,等.張萍青治療封閉抗體不足性復(fù)發(fā)性流產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)[J].浙江中西醫(yī)結(jié)合雜志,2010,20(1):1-3.

[2]謝幸,茍文麗,林仲秋,等.婦產(chǎn)科學(xué)[M].第8版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2013:48.

[3]張玉珍.中醫(yī)婦科學(xué)[M].第7版.北京:中國(guó)中醫(yī)藥出版社,2002:210-211.

[4]中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部.中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則(試行)[S].北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社,2002:73-77.

[5]賈科萍,傅萍.封閉抗體低下性復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者外周血中CD3、CD4、CD8相關(guān)性探討及中醫(yī)證型分布研究[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊,2014,32(10):2407-2411.

[6]許紅,雷靈梅.反復(fù)流產(chǎn)與封閉抗體缺乏的關(guān)聯(lián)研究[J].河北醫(yī)藥,2011,33(5):690-691.

[7]田代華整理.黃帝內(nèi)經(jīng)素問(wèn)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2005.

[8]朱蘊(yùn)璞.早期先兆流產(chǎn)中醫(yī)證型分布規(guī)律探討及中醫(yī)藥干預(yù)效應(yīng)評(píng)價(jià)[D].南京：南京中醫(yī)藥大學(xué),2011.

The Relationship Between TCM Syndrome Differentiation of the Early Threatened Abortion and Insufficiency in Blocking Antibodies CD4, CD8 and CD4/CD8 in Peripheral Blood

DENGZhi-lin1,2,SONGChun-hua2,HANLi-min3

(1. 2014-gradegraduatestudent,JiangxiUniversityofTraditionalChineseMedicine,NanchangJiangxi330004;2.TheFirstAffiliatedHospitalofGannanMedicalUniversity;3.GannanMedicalUniversity,GanzhouJiangxi341000)

Objective: To study the relationship between traditional Chinese medicine (TCM) syndrome differentiation of the early threatened abortion and the level of blocking antibodies (BA) CD4, CD8 and CD4/CD8 in peripheral blood, so as to provide an objective basis for TCM syndrome types which can be used to guide the clinical treatment of the early threatened abortion. Methods: Serum levels of blocking antibodies CD4,CD8 and CD4/CD8 were measured in 124 cases of early threatened abortion patients. Using the Guidance and Principle of Clinical Study on New Drugs as the standard, TCM syndrome differentiation was performed on each patient. All data were analyzed by SPSS 17.0 software. Results:①I(mǎi)n Comparison with the control group, all the TCM syndrome types in the early threatened abortion group exhibited significant difference in the level of serum blocking antibody CD4/CD8 (P<0.01).②The levels of serum blocking antibodies CD4/CD8 in patients with kidney deficiency syndrome were significantly different from those with blood heat syndrome, deficiency of Qi and blood syndrome, or blood stasis syndrome due to injury (P<0.01). The average level of the blocking antibodies ranks as follows: kidney deficiency syndrome < deficiency of Qi and blood syndrome< blood heat syndrome < blood stasis syndrome due to injury.③The CD4 level in patients with kidney deficiency (-2.15±2.43) was significantly less than that of patients with blood heat syndrome (-0.78±1.25) (P<0.01).④Compared to the control group, the patient with kidney deficiency syndrome serum exhibited significantly different level of blocking CD4 antibody (P<0.01), while the CD4 level in the other three TCM types were not different from that of the control group (P>0.05). Conclusion:Kidney deficiency syndrome has a great impact on the serum levels of blocking antibodies CD4, CD8 and CD4/CD8 in early threatened abortion patients, therefore, CD4, CD8 and CD4/CD8 can be used as an objective index for early threatened abortion with kidney deficiency syndrome type.

Early threatened abortion; TCM syndrome types; Blocking antibodies; CD4, CD8, CD4/CD8

韓立民，男，教授，博士，博士生導(dǎo)師。E-mail：jxhlm@163.com

R285.5

A

1001-5779(2016)03-0370-04

10.3969/j.issn.1001-5779.2016.03.011

2016-03-15)(責(zé)任編輯：敖慧斌)