藏西北絨山羊血液γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶（γ-GT）指標(biāo)偏高原因調(diào)查

宋天增 ，曲 久 ，任子利 ，巴 貴 ，索朗格列 ，珠 多 ，益西多吉

（1.西藏自治區(qū)農(nóng)牧科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所，西藏 拉薩 850009；2.西藏日土縣原種場，西藏 日土 859700；3.西藏農(nóng)牧學(xué)院動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，西藏 林芝 860000）

藏西北絨山羊血液γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶（γ-GT）指標(biāo)偏高原因調(diào)查

宋天增1，曲 久2，任子利3，巴 貴1，索朗格列2，珠 多2，益西多吉1

（1.西藏自治區(qū)農(nóng)牧科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所，西藏 拉薩 850009；2.西藏日土縣原種場，西藏 日土 859700；3.西藏農(nóng)牧學(xué)院動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，西藏 林芝 860000）

為闡明藏西北絨山羊血液γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶（γ-GT）指標(biāo)偏高原因，選取血液γ-GT指標(biāo)偏高的藏西北絨山羊個(gè)體，利用電子血壓計(jì)測(cè)定其血壓，采用試劑盒法和肝臟穿刺等方法對(duì)其進(jìn)行乙型肝炎、戊型肝炎、肝包蟲病、膽結(jié)石等疾病的診斷，同時(shí)觀察應(yīng)激因素對(duì)其γ-GT指標(biāo)的影響，研究血壓、相關(guān)疾病及應(yīng)激因素與藏西北絨山羊血液γ-GT指標(biāo)偏高的相關(guān)性。結(jié)果表明，在血清γ-GT指標(biāo)偏高的25只實(shí)驗(yàn)羊中，有4只血壓高，有11只呈HEV-IgG陽性，無HBV抗原陽性羊只，有12只呈肝棘球蚴（包蟲）抗體陽性，有3只膽囊膽管結(jié)石，應(yīng)激因素刺激后有7只羊血清γ-GT指標(biāo)偏高。綜上提示，戊型肝炎病毒、肝棘球蚴（包蟲）所引起的肝炎、膽結(jié)石以及應(yīng)激因素等是引起藏西北絨山羊血液γ-GT指標(biāo)偏高的主要原因。

絨山羊；γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶；肝包蟲??；戊型肝炎

γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶（gamma-glutamyl transpeptidase，γ-GT）在生物體內(nèi)分布廣泛，從細(xì)菌到哺乳動(dòng)物體內(nèi)都有它的存在。γ-GT在動(dòng)物的腎內(nèi)最多，其次為胰和肝，胚胎期則以肝內(nèi)最多，在肝內(nèi)主要分布于肝細(xì)胞漿和肝內(nèi)膽管上皮中，正常動(dòng)物血清中的γ-GT主要來自肝臟。該酶能催化轉(zhuǎn)肽反應(yīng)、自轉(zhuǎn)肽反應(yīng)和γ-谷氨?；乃夥磻?yīng)。γ-GT最初只是用來反映乙醇攝入和肝臟疾病的指標(biāo)，在體內(nèi)的主要功能為參與谷胱甘肽的代謝，其在生物體內(nèi)能夠催化轉(zhuǎn)移谷氨?；纬晒劝滨Ｑh(huán)，通過這一循環(huán)可以為細(xì)胞內(nèi)谷胱甘肽的再合成提供原料氨基酸［1］。γ-GT在急性肝炎、慢性活動(dòng)性肝炎及肝硬變失代償時(shí)僅輕中度升高，但當(dāng)發(fā)生阻塞性黃疸時(shí)，該酶因排泄障礙而逆流入血。發(fā)生原發(fā)性肝癌時(shí)，該酶在肝內(nèi)合成亢進(jìn)，可引起血中轉(zhuǎn)肽酶顯著升高，甚至達(dá)到正常的10倍以上。γ-GT在臨床檢測(cè)中可作為生物標(biāo)志物，已經(jīng)作為肝臟和其他器官疾病的常規(guī)檢測(cè)指標(biāo)［2］。

肝內(nèi)或肝外膽管梗阻時(shí)，可出現(xiàn)γ-GT的顯著升高；部分病毒性肝炎，壞死區(qū)鄰近的肝細(xì)胞γ-GT合成亢進(jìn)，引起血清γ-GT升高。γ-GT水平與血壓水平呈正相關(guān)［3］，肝癌、急性肝炎患者肝功能指標(biāo)中γ-GT升高明顯［4］。血清γ-GT在糖尿病周圍神經(jīng)病變患者體內(nèi)的水平明顯升高，可能通過氧化應(yīng)激的機(jī)制參與糖尿病周圍神經(jīng)病變的發(fā)生［5］。

表1 實(shí)驗(yàn)羊只血壓、相關(guān)疾病檢測(cè)結(jié)果及應(yīng)激因素對(duì)其血液γ-GT指標(biāo)的影響 只

筆者在2015年10月對(duì)成年藏西北 （日土縣）絨山羊的血液生理生化指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定時(shí)發(fā)現(xiàn)，三成以上成年羊血清中γ-GT指標(biāo)偏高。為探明藏西北絨山羊血液γ-GT指標(biāo)偏高原因，該研究選取血液γ-GT指標(biāo)偏高的藏西北絨山羊個(gè)體，采用試劑盒法和肝臟穿刺等方法對(duì)其進(jìn)行戊型肝炎、肝包蟲病、膽結(jié)石等疾病的診斷，同時(shí)觀察應(yīng)激因素對(duì)其γ-GT指標(biāo)的影響，研究相關(guān)疾病及應(yīng)激因素與藏西北絨山羊血液γ-GT指標(biāo)偏高的相關(guān)性，旨在為藏西北絨山羊的健康養(yǎng)殖提供參考。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及其分布地區(qū)概況 選取日土縣原種場γ-GT指標(biāo)偏高、隔夜空腹的成年日土白絨山羊25只。日土白絨山羊中心產(chǎn)區(qū)主要分布于阿里地區(qū)日土縣的各個(gè)鄉(xiāng)村。日土縣屬半農(nóng)半牧縣，地處東經(jīng) 78°7′～82°4′，北緯 32°7′～35°4′，平均海拔4500m左右，被稱為“世界屋脊的屋脊”。日土縣土壤屬山地灌叢草原土壤區(qū)，主要分布在海拔4000 m左右的灌叢草原上，在4200～4700m高山草原土比重較大，土壤的發(fā)育有落葉灌叢和草本植物參與，山地灌叢草原土和高山草原土部分開辟為耕地。日土縣地處高原亞寒帶季風(fēng)半干旱氣候區(qū)，具有氣壓低、輻射強(qiáng)、寒冷干燥、降水稀少等氣候特點(diǎn)。最冷月平均氣溫-22.1℃，最熱月平均氣溫13.6℃，無霜期95d，年日照時(shí)數(shù)3370.9h，日照百分率76%，年降水量73.4mm，年蒸發(fā)量2456.3mm，年平均風(fēng)速3.2 m/s。

1.2 主要試劑 乙型肝炎病毒ccc DNA （HBV-cccDNA）核酸檢測(cè)試劑盒，購自上海江萊生物科技有限公司；羊戊型肝炎病毒IgG（HEV-IgG）ELISA試劑盒，購自卡邁舒（上海）生物科技有限公司；羊棘球蚴（包蟲）間接ELISA檢測(cè)試劑盒購自重慶澳龍生物制品有限公司。

1.3 儀器設(shè)備 Sysmax XE-2100全自動(dòng)血液分析儀，由成都貝斯達(dá)儀器有限公司提供；TG16-W臺(tái)式微量高速離心機(jī)，購于湘儀離心機(jī)儀器有限公司；KR-1288V動(dòng)物B超機(jī)，購于徐州市凱爾醫(yī)學(xué)儀器有限公司；歐姆龍HEM-6121電子血壓計(jì)，歐姆龍（大連）有限公司生產(chǎn)。

1.4 實(shí)驗(yàn)羊只的篩選 利用全自動(dòng)血液自動(dòng)分析儀測(cè)定羊只的血清γ-GT指標(biāo)，以篩選血清γ-GT指標(biāo)偏高的羊只。

1.5 血壓測(cè)量 將篩選的實(shí)驗(yàn)羊只于自然站立條件下保定，安靜20min以上，利用電子血壓計(jì)測(cè)定其血壓。

1.6 戊型肝炎病毒 （HEV）IgG、乙型肝炎病毒（HBV）ccc DNA及肝棘球蚴 （包蟲）抗體的測(cè)定采集隔夜空腹的實(shí)驗(yàn)羊頸靜脈非抗凝血樣5mL，溫室下傾斜放置30min，3500 r/min離心20min，分離血清，參照羊戊型肝炎病毒（HEV）IgG ELISA試劑盒說明書，測(cè)定實(shí)驗(yàn)羊只血清HEV-IgG含量。按照乙型肝炎病毒 （HBV-cccDNA）DNA核酸檢測(cè)試劑盒說明書檢測(cè)實(shí)驗(yàn)羊只血清HBV抗原。在腹腔鏡的監(jiān)視下直接穿刺，獲取肝臟標(biāo)本2 mg，參照羊棘球蚴（包蟲）間接ELISA檢測(cè)試劑盒說明書測(cè)定肝包蟲抗體。

1.7 膽結(jié)石檢查 利用動(dòng)物B超機(jī)檢查實(shí)驗(yàn)羊只膽管和膽囊內(nèi)是否有強(qiáng)回聲團(tuán)，是否隨體位改變而移動(dòng)以及其后是否有聲影。

1.8 應(yīng)激試驗(yàn) 給予隔夜空腹的實(shí)驗(yàn)羊驚恐刺激后，立即采集其頸靜脈非抗凝血樣5mL，溫室下傾斜放置30min，3500 r/min離心20min，分離血清于-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>

2 結(jié)果與分析

由表1可知，在血清γ-GT指標(biāo)偏高的25只實(shí)驗(yàn)羊中，有4只血壓高，有11只呈HEV-IgG陽性，無HBV抗原陽性羊只，有12只呈肝棘球蚴（包蟲）抗體陽性，有3只膽囊膽管結(jié)石，應(yīng)激因素刺激后有7只羊血清γ-GT指標(biāo)偏高。應(yīng)激反應(yīng)引起血清γ-GT指標(biāo)偏高的7只羊中，有4只為高血壓個(gè)體，有2只呈HEV-IgG陽性，有1只呈肝棘球蚴（包蟲）抗體陽性。有5只羊同時(shí)呈HEV-IgG陽性和肝棘球蚴（包蟲）抗體陽性。

3 討論

該研究結(jié)果表明，有4只血壓高的實(shí)驗(yàn)羊其血清γ-GT指標(biāo)偏高，但目前γ-GT參與血壓調(diào)節(jié)的機(jī)制尚不完全清楚，因此該研究不能推斷血壓高與血清γ-GT指標(biāo)偏高之間的必然聯(lián)系。結(jié)合羊群死亡個(gè)體較少的情況，推測(cè)該研究中HEV-IgG陽性的個(gè)體患有慢性肝炎，慢性肝炎可逐步引起肝細(xì)胞壞死，壞死區(qū)鄰近的肝細(xì)胞γ-GT合成亢進(jìn)，進(jìn)而引起血清γ-GT升高。若壞死區(qū)和肝棘球蚴（包蟲）囊引起肝內(nèi)或肝外膽管梗阻，可引起γ-GT排泄受阻，隨膽汁返流入血，導(dǎo)使血清γ-GT上升。由于條件所限，無法診斷25只血清γ-GT指標(biāo)偏高的絨山羊是否患有肝癌和糖尿病。

該研究發(fā)現(xiàn)，血清γ-GT偏高的個(gè)體中有一定數(shù)量的羊只呈HEV抗體和肝棘球蚴（包蟲）抗體陽性。HEV和肝包蟲病為人獸共患病，羊可能作為HEV和肝棘球蚴（包蟲）的貯存宿主，在人類病毒性 肝 炎［6-7］和 肝 包 蟲 病［8-9］流 行 病 學(xué) 中 具 有 重 要 地位，對(duì)于公共衛(wèi)生和食品安全等構(gòu)成潛在威脅。為減少HEV和肝包蟲的感染、發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，降低這兩種疾病對(duì)人類健康的危害，在今后的生產(chǎn)中應(yīng)對(duì)HEV感染和肝包蟲病進(jìn)行及時(shí)的檢測(cè)并且采取有效的防控措施。

［1］劉存飛，劉承云.谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶與代謝綜合征的關(guān)系研究進(jìn)展［J］.臨床心血管病雜志，2011，27（4）：246-248.

［2］荀志金，賀忠，張征，等.γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶及其應(yīng)用［J］.南京工業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào) （自然科學(xué)版），2004，26 （4）：106-110.

［3］王小平，李利華，姚超永，等.γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶與血壓的相關(guān)性分析［J］.中國動(dòng)脈硬化雜志，2012，20（9）：802-804.

［4］陳煥永，姜宏齊，邵鳳娟，等.γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶與各種肝病關(guān)系初探 ［J］. 哈爾濱醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2013，37（4）：346-347.

［5］劉超.γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶與糖尿病周圍神經(jīng)病變的關(guān)系及可能機(jī)制［D］.太原：山西醫(yī)科大學(xué)，2014.

［6］王永霞，郝成武，馬勛.戊型肝炎病毒流行病學(xué)研究進(jìn)展［J］.中國畜牧獸醫(yī)，2010，37（4）：216-220.

［7］孫鵬.陜西省部分地區(qū)人、畜禽戊型肝炎病毒抗體的檢測(cè)［D］.楊凌：西北農(nóng)林科技大學(xué)，2013.

［8］吐爾干艾力.肝包蟲病診斷與治療［D］.烏魯木齊：新疆醫(yī)科大學(xué)，2006.

［9］王洪波，儲(chǔ)芳，曹君貴，等.西藏地區(qū)273例肝包蟲病臨床分析［J］.臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2012，11（5）：339-340.

Investigation of Etiology of High Content γ-GT in Blood in Northwest Tibet Cashmere Goat

SONG Tian-zeng1，Qujiu2，REN Zi-li3，Bagui1，Suolanggelie2，Zhuduo2，Yixiduoji1
（1.Institute of Animal Husbandry and Veterinary Medicine，Tibet Academy of Agricultural and Animal Husbandry Sciences，Lhasa 850009，China；2.Rutog County Original Breeding Farm， Rutog 859700，China；3.College of Animal Science， Tibet Agricultural and Animal Husbandry College，Nyingchi 860000，China）

The aim of the present study was to understand the etiology of high content γ-GT in blood in northwest Tibet Cashmere Goat.In order to assess the association of the blood pressure,related diseases and stress factor with the high content γ-GT in blood in northwest Tibet Cashmere Goat,the goat individuals with high content γ-GT in blood were selected;the electronic sphygmomanometer was used to determine their blood pressure;the diseases of hepatitis B,hepatitis E,hepatic echinococcosis and cholelithiasis were diagnosed by ELISA kit method and liver biopsy;the stress test was carried out to observe the effect of the stress on the blood content of γ-GT.The results revealed that amongst the 25 selected goats with high content γ-GT in blood,4 of them had high blood pressure,11 of them were HEV-IgG positive,none of them were HBV antigen positive,12 of them were Echinococcos granulsus antibody positive,3 of them were subjected to cholelithiasis and choledocholithiasis,and 7 goats had high content γ-GT in blood after the stimulation of stress factor.The results suggest that the hepatitis and cholelithiasis caused by infections of hepatitis E virus and Echinococcos granulsus as well as the stress factor are the main etiology of high content γ-GT in blood in northwest Tibet Cashmere Goat.

cashmere goat；γ-GT；echinococcosis；hepatitis E

S858.276.5

A文章順序編號(hào)：1672-5190（2016）08-0013-02

2016－07－20

項(xiàng)目來源：現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(xiàng)資金資助（CARS-40-31）；西藏自治區(qū)“十三五”農(nóng)牧業(yè)重大專項(xiàng)“西藏特色家畜選育與健康養(yǎng)殖”。

宋天增（1980—），男，助理研究員，碩士，主要研究方向?yàn)閯?dòng)物繁殖營養(yǎng)調(diào)控與動(dòng)物遺傳。

（責(zé)任編輯：趙俊利）