烏頭堿誘發(fā)大鼠心律失常的研究

田　真,馬丕勇,楊春燕,張　研,孫雪峰

(吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院 1.心血管內(nèi)科；2.重癥監(jiān)護(hù)病房；3.內(nèi)分泌科；4.心血管外科，吉林 長(zhǎng)春130033)

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烏頭堿誘發(fā)大鼠心律失常的研究

田真1,馬丕勇2,楊春燕1,張研3,孫雪峰4*

(吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院 1.心血管內(nèi)科；2.重癥監(jiān)護(hù)病房；3.內(nèi)分泌科；4.心血管外科，吉林 長(zhǎng)春130033)

烏頭是毛茛科烏頭屬植物的塊根，其中，四川種植者因其個(gè)大、藥效好，稱為川烏，其他地方種植者稱為草烏。在我國(guó)，廣泛應(yīng)用于風(fēng)濕、關(guān)節(jié)骨病的治療。國(guó)外則大多作為外用鎮(zhèn)痛藥使用。生的川烏、草烏具有心臟毒性和神經(jīng)毒性，需要確切炮制后方可適量口服。如果服用不當(dāng)，患者會(huì)出現(xiàn)嚴(yán)重的心律失常，甚至死亡。傳統(tǒng)的觀念認(rèn)為，烏頭堿中毒的機(jī)制主要是強(qiáng)烈興奮迷走神經(jīng)，因此建議使用阿托品作為急救藥[1]。但是筆者在臨床工作中發(fā)現(xiàn)，β受體阻滯劑艾司洛爾對(duì)此類患者的搶救也具有比較確切的療效。本研究旨在探討艾司洛爾對(duì)烏頭堿導(dǎo)致的心律失常的療效和機(jī)制。

1　材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選用健康雄性wistar大鼠32只，體重250-300g。購(gòu)自吉林大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。飼養(yǎng)溫度20-25℃，濕度65%，自由進(jìn)食、進(jìn)水。

1.2藥物和試劑艾司洛爾(齊魯制藥有限公司)、阿托品(天津藥業(yè)集團(tuán)新鄭股份有限公司)、烏頭堿(美國(guó)Sigma公司)、乙酰膽堿試劑盒(Bioassaysystems公司)、兒茶酚胺ELISA試劑盒(Bioassaysystems公司)。

1.3實(shí)驗(yàn)方法將大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)7d。7d后隨機(jī)將動(dòng)物分為四組：空白對(duì)照組、模型組、艾司洛爾組和阿托品組，每組8只。所有大鼠眼眶后靜脈叢采血，離心、取血漿備用，查基線兒茶酚胺、乙酰膽堿水平。繼續(xù)飼養(yǎng)7d，制備心律失常大鼠模型，用水合氯醛(30mg/kg)腹腔注射麻醉后,用針狀電極刺入兩前肢皮下,從麻醉開(kāi)始監(jiān)測(cè)心電圖。經(jīng)股靜脈給藥,除空白組外，其余三組都注射烏頭堿,15μg/kg(5s內(nèi)注完)[2]，空白組同樣時(shí)間注入1ml生理鹽水。5min后，艾司洛爾組微量泵緩慢靜脈泵入艾司洛爾0.25mg/kg·min(共5min)，阿托品組微量泵緩慢靜脈泵入阿托品10μg/kg·min(共5min)，模型組和空白組注射生理鹽水1ml(共5min)。并分別于靜脈注射烏頭堿后2.5、5、7.5、10和12.5min時(shí)，采用Curtis-Walker法對(duì)心律失常進(jìn)行評(píng)分，在每段觀察時(shí)間內(nèi)取其最嚴(yán)重的一種心律失常相對(duì)應(yīng)的分?jǐn)?shù)作為其心律失常評(píng)分[3]。0分:無(wú)心律失常;1 分:房性心律失常，偶發(fā)室性期前收縮;2 分:室性期前收縮二聯(lián)律、三聯(lián)律，頻發(fā)室性期前收縮，二度房室傳導(dǎo)阻滯;3 分:短陣室性心動(dòng)過(guò)速，多源室性期前收縮;4分:室性心動(dòng)過(guò)速，三度房室傳導(dǎo)阻滯;5 分:心室顫動(dòng)，死亡。靜脈注射烏頭堿15min后，所有大鼠取腹主動(dòng)脈血，離心取血漿，復(fù)查兒茶酚胺、乙酰膽堿。

2　結(jié)果

2.1各組大鼠心律失常評(píng)分比較結(jié)果見(jiàn)表1。靜脈注射烏頭堿后2.5min內(nèi)，模型、艾司洛爾、阿托品組均出現(xiàn)了明顯的心律失常，但是3組大鼠心律失常評(píng)分差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P>0.05);2.5至5min時(shí)間段，這3組心律失常均較上一個(gè)時(shí)間段更加嚴(yán)重，但是，3組間心律失常得分仍無(wú)顯著差異( P>0.05)。5min時(shí)，治療組分別給予艾司洛爾和阿托品微量泵持續(xù)泵入，模型組僅給予了生理鹽水，在7.5、10、12.5min的時(shí)間段里面，模型組的心律失常評(píng)分逐漸增高，至實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，8只大鼠有7只發(fā)生了室顫。在7.5min時(shí)間段，阿托品組的心律失常傾向出現(xiàn)了好轉(zhuǎn)的傾向(與上一個(gè)時(shí)間段比較P<0.05)，而艾司洛爾組尚無(wú)明顯改善。10min和12.5min，阿托品組的心律失常評(píng)分進(jìn)一步降低，12.5min與5min相比明顯好轉(zhuǎn)(P<0.05)。而艾司洛爾組，10min時(shí)段也顯示出了好轉(zhuǎn)傾向，至12.5min時(shí)，心律失常較5min時(shí)明顯減少(P<0.05)。12.5min艾司洛爾組與阿托品組比較，差異無(wú)顯著性(P>0.05)。

表1　各組大鼠心律失常Curtis-Walker評(píng)分比較

2.2各組血漿中去甲腎上腺素和乙酰膽堿水平的測(cè)量結(jié)果見(jiàn)表2。心律失常實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前1周，4組大鼠的平均去甲腎上腺素和乙酰膽堿水平均無(wú)顯著性差異(P>0.05)。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，空白組的NE和Ach水平較實(shí)驗(yàn)前無(wú)明顯變化。而模型組的NE和Ach水平均顯著高于基線(P<0.01)。艾司洛爾組和阿托品組的最終NE和Ach水平位于空白組和模型組之間，與模型組相比，兩組的NE和Ach水平均顯著降低(P<0.05)，但是艾司洛爾組和阿托品組的組間差異不顯著。

表2　初始和實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)各組血漿中去甲腎上腺體素和乙酰膽堿的水平

注：NE各組P值均>0.05，Ach各組P值均>0.05。

3　討論

在本實(shí)驗(yàn)中，烏頭堿誘發(fā)心律失常模型組大鼠血中乙酰膽堿水平遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于空白組，證實(shí)了上述傳統(tǒng)觀念，即烏頭堿可以強(qiáng)烈興奮迷走神經(jīng)。但是同時(shí)我們看到，實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，所有給予烏頭堿的大鼠不僅乙酰膽堿水平升高，而且去甲腎上腺水平亦明顯升高，提示我們?yōu)躅^堿誘發(fā)的心律失常大鼠存在著交感神經(jīng)的極度激活，甚至是交感電風(fēng)暴。交感電風(fēng)暴是心臟猝死的重要原因[4]。

同時(shí)，我們注意到：艾司洛爾的治療效果在早期沒(méi)有阿托品明顯，7.5min時(shí)間段內(nèi)尚未見(jiàn)心律失常指數(shù)下降，但是10min和12.5min之后的階段，艾司洛爾發(fā)揮了不錯(cuò)的抗心律失常的效果。提示了交感神經(jīng)的異常激活可能發(fā)生于迷走神經(jīng)激活之后，有可能是迷走神經(jīng)激活之后的繼發(fā)反應(yīng)。

交感神經(jīng)的極度激活考慮可能和以下因素有關(guān)：烏頭堿興奮迷走神經(jīng)初期，心率可能變慢，血壓降低；同時(shí)烏頭堿直接作用于心肌促使鈉通道開(kāi)放，加速離子內(nèi)流，使細(xì)胞膜去極化，提高心房傳導(dǎo)組織和房室束-浦肯野纖維系統(tǒng)等快反應(yīng)細(xì)胞的自律性，形成一源性或多源性異位節(jié)律。嚴(yán)重心律失常的出現(xiàn)會(huì)激活交感神經(jīng)，同時(shí)，迷走神經(jīng)興奮引起的低血壓反射亦可導(dǎo)致心率增快，交感神經(jīng)興奮。因此我們?cè)诒緦?shí)驗(yàn)中看到，大多數(shù)心律失常大鼠早期(2.5min)出現(xiàn)心率減慢，而晚期(5min以后)為快速型心律失常。

艾司洛爾是一種超短效選擇性β1受體阻滯藥物，可以通過(guò)阻滯β腎上腺素受體，降低交感神經(jīng)的效應(yīng)，能明顯降低竇房結(jié)心肌細(xì)胞及心室肌細(xì)胞L-型鈣通道電流(ICa-L) 峰值電流，顯著降低心室肌細(xì)胞鈣、鈉離子內(nèi)流，這種作用可能與其能有效終止室顫室速發(fā)作有關(guān)[5]。

我們的實(shí)驗(yàn)證實(shí)，烏頭堿致嚴(yán)重心律失常的過(guò)程中，不僅存在著迷走神經(jīng)的激活，也存在著交感神經(jīng)的極度興奮，甚至是交感風(fēng)暴。而應(yīng)用抑制迷走神經(jīng)的藥物阿托品和抑制交感神經(jīng)β1受體的藥物艾司洛爾均可以減輕烏頭堿導(dǎo)致的心律失常反應(yīng)。而兩者的療效在心律失常早期，尤其是心率偏慢階段，阿托品更有優(yōu)勢(shì)，而遠(yuǎn)期二者的療效差異無(wú)顯著性。這也解釋了，我們?cè)谂R床工作中的體會(huì)——艾司洛爾對(duì)于烏頭堿中毒的快速型心律失?；颊哂胁诲e(cuò)的療效。

[1]黃韻清，周玉淑，劉仁樹(shù) .現(xiàn)代急性中毒診斷治療學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2002：357-358.

[2]李儀奎．中藥藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M]．2版．上海:上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，2006:386-387.

[3]CurtisMJ，WalkerMJ．Quantificationofarrhythmiasusingscoringsystems:anexaminationofsevenscoresinaninvivomodelofregionalmyocardialischaemia[J]．CardiovascRes，1988，22:656．

[4]張萍．交感風(fēng)暴[J]．臨床心電學(xué)雜志，2007，16:74.

[5]郭繼鴻．β受體阻滯劑應(yīng)當(dāng)成為快速心律失常治療的基礎(chǔ)用藥[J]．中國(guó)心臟起搏與心電生理雜志，2005，29(5):331.

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