淺談醫(yī)學(xué)院校生物化學(xué)的實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備工作

梁斌 謝琦 李康智 梁成欽 周先麗

摘要：生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)課是培養(yǎng)醫(yī)學(xué)生的重要課程之一，其中實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備工作是否充分，不僅影響了實(shí)驗(yàn)結(jié)果，而且直接影響了生物化學(xué)這門(mén)課程的教學(xué)質(zhì)量。因此，本文以生物化學(xué)課程的實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備為例，從多方面探索了如何做好實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備工作。

關(guān)鍵詞：實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備;生物化學(xué);醫(yī)學(xué)院校

中圖分類(lèi)號(hào)：G642.0 ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A ? ? 文章編號(hào)：1674-9324（2016）36-0277-02

隨著生命科學(xué)領(lǐng)域的快速發(fā)展，生物化學(xué)這門(mén)學(xué)科已經(jīng)滲透醫(yī)學(xué)的各個(gè)領(lǐng)域，生物化學(xué)課程已經(jīng)成為醫(yī)學(xué)院校的基礎(chǔ)必修課[1]。生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)可以培養(yǎng)學(xué)生敏銳細(xì)致的觀察能力、動(dòng)手能力和分析能力，是培養(yǎng)高素質(zhì)應(yīng)用型醫(yī)學(xué)人才的重要途徑[2]。實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備是實(shí)驗(yàn)教學(xué)的重要環(huán)節(jié)，同時(shí)也是實(shí)驗(yàn)教學(xué)順利進(jìn)行的前提條件，實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備工作的好壞直接影響到實(shí)驗(yàn)教學(xué)的質(zhì)量。由于生物化學(xué)是本校的基礎(chǔ)必修課，臨床醫(yī)學(xué)、藥學(xué)、檢驗(yàn)學(xué)、預(yù)防醫(yī)學(xué)、口腔醫(yī)學(xué)、生物技術(shù)、護(hù)理學(xué)等專(zhuān)業(yè)均有涉及，因?qū)W生多，課時(shí)多，內(nèi)容雜，實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備工作尤其煩瑣，實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員任務(wù)更加繁重。作者在本校從事了多年的生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備工作，下面從幾個(gè)方面對(duì)醫(yī)學(xué)院校生物化學(xué)的實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備工作進(jìn)行具體的闡述。

一、實(shí)驗(yàn)室的規(guī)范管理

實(shí)驗(yàn)室是實(shí)驗(yàn)教學(xué)的場(chǎng)所，實(shí)驗(yàn)室的管理是否完善直接影響到實(shí)驗(yàn)教學(xué)的效果，因此必須加強(qiáng)管理使實(shí)驗(yàn)室規(guī)范化。我院生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)室主要有常規(guī)教學(xué)實(shí)驗(yàn)室與開(kāi)放性實(shí)驗(yàn)室，如何加強(qiáng)管理使實(shí)驗(yàn)室規(guī)范化呢？常規(guī)教學(xué)實(shí)驗(yàn)室主要根據(jù)授課計(jì)劃內(nèi)容配套全部設(shè)施，包括上課所需要的冰箱、通風(fēng)櫥、紫外分光光度計(jì)、高速離心機(jī)、低速離心機(jī)、水浴鍋、電泳儀以及PCR儀等。除此之外，還有實(shí)驗(yàn)基本的耗材例如試管架、玻璃試管、玻璃滴管、離心管、洗耳球、移液管、玻璃棒、EP管架等。開(kāi)放性實(shí)驗(yàn)室則相當(dāng)于一個(gè)小型研究場(chǎng)所，除了配置常規(guī)的基本設(shè)施外，還需配套一些比較昂貴的儀器、常規(guī)使用的試劑與耗材，以及實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備過(guò)程中需要用到的儀器例如電子天平、微波爐等。除了上述用品外，每個(gè)實(shí)驗(yàn)室都需要及時(shí)補(bǔ)充試管刷、洗衣粉、掃帚、拖把、抹布等日雜耗材。為了實(shí)驗(yàn)課能順利進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員上課前要檢查清點(diǎn)，下課后要清理收拾并且監(jiān)督學(xué)生做好衛(wèi)生工作，日常工作中要查漏補(bǔ)缺，尤其要注意水電安全問(wèn)題。實(shí)驗(yàn)室管理工作盡管煩瑣，也必須引起重視，應(yīng)加強(qiáng)管理使其規(guī)范化。下面舉例說(shuō)明實(shí)驗(yàn)室管理不規(guī)范的后果。假如上課需要使用水浴鍋，而課前檢查時(shí)未發(fā)現(xiàn)水浴鍋沒(méi)有水，那么上課過(guò)程中就會(huì)出現(xiàn)水浴鍋干燒事件。常規(guī)教學(xué)實(shí)驗(yàn)室由于實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員的努力極少可能出現(xiàn)這樣的事件，而開(kāi)放性實(shí)驗(yàn)室主要是學(xué)生課后使用，就更加要加強(qiáng)管理使實(shí)驗(yàn)室規(guī)范化，例如入室前培訓(xùn)、入室登記、實(shí)驗(yàn)結(jié)束后需經(jīng)嚴(yán)查才能離場(chǎng)。

二、實(shí)驗(yàn)儀器管理

生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)涉及到的大部分儀器如上所述，現(xiàn)在詳細(xì)講述如何規(guī)范管理儀器。（1）所有的儀器都要做好使用登記，具體包括使用時(shí)間、使用前與使用后儀器的狀況、使用人姓名等;（2）部分開(kāi)放性實(shí)驗(yàn)需要用到的儀器，例如高壓滅菌鍋，不允許學(xué)生單獨(dú)操作，必須在教師的指導(dǎo)下進(jìn)行操作;（3）學(xué)生上課過(guò)程中經(jīng)常使用到的儀器，例如紫外分光光度計(jì)、水浴鍋、離心機(jī)等必須按照實(shí)驗(yàn)室儀器操作步驟進(jìn)行，帶教教師要檢查與監(jiān)督;（4）儀器非人為損壞需要及時(shí)報(bào)修處理，不能影響后面的課程，人為損壞則需要賠償損失;（5）實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員要經(jīng)常檢查儀器的使用情況，尤其是開(kāi)學(xué)與期末這兩個(gè)時(shí)間段，開(kāi)學(xué)后要檢查所有儀器是否完好并且做好使用前處理，期末后要及時(shí)整理好儀器，例如水浴鍋的清洗與排水，儀器電源是否都已關(guān)閉并且拔掉電源線等。

三、低值易耗品的請(qǐng)購(gòu)與管理

生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)課課時(shí)多，損耗大，因此每個(gè)學(xué)期都必須進(jìn)行實(shí)驗(yàn)試劑與耗材的請(qǐng)購(gòu)。低值易耗品的請(qǐng)購(gòu)是每個(gè)學(xué)期末提前為下一學(xué)期做準(zhǔn)備的。低值易耗品請(qǐng)購(gòu)計(jì)劃要嚴(yán)格把握請(qǐng)購(gòu)量，既不能浪費(fèi)也不能漏買(mǎi)。要做好低值易耗品請(qǐng)購(gòu)工作，需要做到以下幾點(diǎn)：（1）對(duì)下學(xué)期的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容熟悉，具體到每個(gè)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，例如血糖測(cè)定實(shí)驗(yàn)需要哪些試劑與耗材;（2）對(duì)下學(xué)期做這個(gè)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的學(xué)生人數(shù)有個(gè)大概的數(shù)量估計(jì);（3）在不浪費(fèi)的前提下多做一些預(yù)備，以防意外;（4）對(duì)庫(kù)房存貨做到心中有數(shù)，本學(xué)期剩余的試劑與耗材數(shù)量要清楚，預(yù)計(jì)下學(xué)期還需要請(qǐng)購(gòu)多少比較合適等。

低值易耗品的請(qǐng)購(gòu)需要經(jīng)驗(yàn)，而管理方面則需要用心，主要需要做好出入庫(kù)記錄工作。對(duì)于耗材管理而言，要分門(mén)別類(lèi)放置并且貼好標(biāo)簽，還要熟悉耗材的具體位置。而試劑的管理需要更加謹(jǐn)慎，例如酸堿腐蝕性試劑、有毒有害試劑、易燃易爆試劑等。要做好試劑管理工作，主要遵循如下幾點(diǎn)原則：（1）試劑庫(kù)房專(zhuān)人專(zhuān)管，責(zé)任到人，劇毒試劑要保險(xiǎn)柜存放，兩人以上保管;（2）試劑庫(kù)房要遠(yuǎn)離明火、干燥通風(fēng);（3）普通試劑與毒麻試劑分開(kāi)放置;（4）易揮發(fā)試劑如乙醚、鹽酸等放置于通風(fēng)柜;（5）固液試劑分開(kāi)放置;（6）酸堿試劑分開(kāi)放置;（7）特殊試劑需要冰凍保存的放于專(zhuān)門(mén)冰箱保存;（8）容易見(jiàn)光分解的試劑要避光保存;（9）統(tǒng)一編號(hào)所有試劑柜，在門(mén)上貼好標(biāo)簽例;（10）做電子版試劑匯總表，試劑出入庫(kù)都需要在登記本登記后再在電子表匯總。

四、試劑的配制與分裝

生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容比較多，涉及到的試劑種類(lèi)繁多，不同性質(zhì)的試劑配制需要考慮許多因素：（1）根據(jù)實(shí)驗(yàn)試劑單位的要求，選擇的稱(chēng)量與測(cè)量?jī)x器與耗材不同，精確度要求比較高的選擇帶四位小數(shù)點(diǎn)的電子天平與合適的容量瓶，其他可以選擇一位小數(shù)點(diǎn)的電子天平與合適量程的量筒即可;（2）根據(jù)需要配制的試劑的性質(zhì)選擇合適溶劑;（3）易揮發(fā)試劑的配制需要到通風(fēng)櫥操作，例如涉及到濃鹽酸、乙醚、濃氨水等溶液的配置;（4）易燃易爆或者危害性比較大的試劑必須小心操作，例如濃硫酸的稀釋順序;（5）根據(jù)試劑酸堿性的問(wèn)題需要考慮存放試劑的瓶子的性質(zhì)，例如玻璃試劑瓶或者塑料試劑瓶;（6）見(jiàn)光易分解或者變性的試劑需要避光保存，分裝時(shí)使用棕色瓶;（7）用于配制試劑的耗材例如燒杯、量筒、玻璃棒等需要清洗干凈，以免污染試劑;（8）每次試劑的配制時(shí)都需要做好原始記錄以便復(fù)查。

除了以上因素外，生物化學(xué)的大部分實(shí)驗(yàn)試劑由于需要分裝使用，以及部分學(xué)生操作失誤等原因，配制試劑時(shí)一般需要按照實(shí)際需求量的1.5～2倍來(lái)配制，以免試劑量不夠影響實(shí)驗(yàn)教學(xué)效果或者造成不必要的浪費(fèi)。例如雙縮脲法測(cè)定蛋白質(zhì)的實(shí)驗(yàn)中，每一組學(xué)生需要雙縮脲試劑的量為30mL，一個(gè)本科班有60人即分為30個(gè)組，那么我們實(shí)際需要配制的試劑至少應(yīng)該為30mL/組×30組×1.5=1350mL。而試劑分裝問(wèn)題也與試劑本身性質(zhì)與使用量相關(guān)。上述的例子中的雙縮脲試劑應(yīng)該配套實(shí)驗(yàn)室分裝為8套，用200mL的棕色瓶分裝。另外，由于一些實(shí)驗(yàn)試劑的配制需要?jiǎng)游锏慕M織或者雞蛋等，例如蛋白質(zhì)的沉淀與變性實(shí)驗(yàn)中的卵清蛋白試劑需要新鮮雞蛋，酮體的生成與鑒定實(shí)驗(yàn)需要新鮮的瘦豬肉與豬肝等，因此實(shí)驗(yàn)技術(shù)員需要根據(jù)授課內(nèi)容提前寫(xiě)好動(dòng)物計(jì)劃請(qǐng)購(gòu)表。技術(shù)員要根據(jù)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的要求，提前做好一個(gè)學(xué)期的動(dòng)物計(jì)劃總表，并且在相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)課前一周寫(xiě)一份具體的動(dòng)物計(jì)劃交到教務(wù)處。

五、預(yù)實(shí)驗(yàn)的重要性

所謂預(yù)實(shí)驗(yàn)是指在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)教學(xué)或者科學(xué)研究時(shí)，經(jīng)常需要在正式實(shí)驗(yàn)前先做一次實(shí)驗(yàn)，簡(jiǎn)稱(chēng)預(yù)實(shí)驗(yàn)[3]。由于每次實(shí)驗(yàn)都會(huì)因?yàn)闀r(shí)間、溫度、試劑批號(hào)、濃度與儀器等的改變而出現(xiàn)不同的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，所以每一次實(shí)驗(yàn)之前都要認(rèn)真地做好預(yù)實(shí)驗(yàn)[4]。預(yù)實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行不僅僅是實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員的事情，而應(yīng)該是實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員與授課教師共同進(jìn)行。如果預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果正常，那么說(shuō)明這批試劑可以用于學(xué)生實(shí)驗(yàn)教學(xué)，如果預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果不理想，那么實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員與授課教師要共同分析具體原因，一直到做出理想的結(jié)果為止。為了保證能有足夠的時(shí)間解決預(yù)實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)的問(wèn)題，預(yù)實(shí)驗(yàn)需要安排在正式上課前一周進(jìn)行比較合適。

六、實(shí)驗(yàn)的更新

隨著科技的發(fā)展，很多實(shí)驗(yàn)向著更加簡(jiǎn)便、安全的方向發(fā)展。實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員要緊跟科學(xué)技術(shù)發(fā)展，不斷提高自身專(zhuān)業(yè)知識(shí)，通過(guò)不斷的實(shí)驗(yàn)嘗試使實(shí)驗(yàn)更簡(jiǎn)單、更安全、結(jié)果更明顯。例如，PCR實(shí)驗(yàn)中凝膠的觀察，以前都是用EB顯色，而EB是致癌物，對(duì)人體有害。通過(guò)學(xué)習(xí)與實(shí)踐，我們發(fā)現(xiàn)用核酸染料GeneFinder可以代替EB，而且相對(duì)EB安全許多，100mL凝膠加入1μL的核酸染料即可得到比較理想的圖像。另外，酮體的生成與鑒定實(shí)驗(yàn)，以往都是用小鼠作為材料，但是經(jīng)過(guò)我們的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)采用新鮮的瘦豬肉與豬肝作為材料，實(shí)驗(yàn)結(jié)果更加明顯，而且實(shí)驗(yàn)過(guò)程更加簡(jiǎn)便等。

綜上所述，生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)是培養(yǎng)學(xué)生動(dòng)手能力和創(chuàng)新意識(shí)的重要基礎(chǔ)課程，做好生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備工作意義重大。因此，實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員要在思想上高度重視實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備工作，努力提高業(yè)務(wù)水平，才能適應(yīng)不斷發(fā)展的教育事業(yè)，勝任實(shí)驗(yàn)教學(xué)的工作，進(jìn)一步提高教學(xué)質(zhì)量。

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