響應(yīng)面法優(yōu)化檸條錦雞兒總黃酮超聲提取工藝及其體外抗氧化性研究

寇　亮,李　璐,陸麗娜,康淑荷,*

(1.西北民族大學(xué)化工學(xué)院,甘肅蘭州 730030;2.環(huán)境友好復(fù)合材料及生物質(zhì)利用甘肅省高校重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,甘肅蘭州 730030)

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響應(yīng)面法優(yōu)化檸條錦雞兒總黃酮超聲提取工藝及其體外抗氧化性研究

寇亮1,2,李璐1,2,陸麗娜1,2,康淑荷1,2,*

(1.西北民族大學(xué)化工學(xué)院,甘肅蘭州 730030;2.環(huán)境友好復(fù)合材料及生物質(zhì)利用甘肅省高校重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,甘肅蘭州 730030)

檸條錦雞兒,總黃酮,響應(yīng)面法,超聲輔助提取,抗氧化活性

檸條錦雞兒(Caraganakorshinskiikom)又稱檸條、大白檸條、毛條等,為多年生錦雞兒屬(CaraganaFabr.)灌木,根系龐大,入土深,具有獨(dú)特的形態(tài)變化和生態(tài)適應(yīng)性,抗干旱、抗寒冷,是我國西北干旱、半干旱地區(qū)一種重要的控制荒漠化的多年生灌木,主要分布于甘肅、寧夏、內(nèi)蒙古、山西、陜西等地[1-4]。檸條錦雞兒的根、莖、葉皆可入藥,有滋陰養(yǎng)血、通經(jīng)、鎮(zhèn)靜和止癢等功效,用于治療發(fā)熱、頭暈頭痛、炎癥和婦科疾病,在傳統(tǒng)中醫(yī)藥中應(yīng)用歷史悠久[5]。它還是高蛋白植物,可作為備選的食品添加劑原料,同時(shí)也是荒漠及荒漠草原地帶的優(yōu)良動(dòng)物飼料[6]。

錦雞兒屬植物富含黃酮類化合物[7],該類化合物具有調(diào)脂、清除自由基、抗菌、抗腫瘤等藥理活性[8],還是一種天然的抗氧化劑,在食品、藥品、化妝品中都有廣泛應(yīng)用[9]。目前,對(duì)檸條錦雞兒的研究大多聚焦于生物分類學(xué)、遺傳多樣性和生態(tài)價(jià)值[10],對(duì)其中的黃酮類化合物的提取及生物活性研究卻鮮有報(bào)道。張華等[11]比較超聲波-水浴提取法、微波提取法和液氮-乙醇提取法提取檸條錦雞兒中總黃酮得率,發(fā)現(xiàn)得率由高到低依次為:超聲波-水浴提取法、微波提取法、液氮-乙醇提取法。本論文運(yùn)用超聲輔助提取法、通過Box-Behnken設(shè)計(jì)-響應(yīng)面法優(yōu)化檸條錦雞兒總黃酮的提取工藝,并對(duì)其體外抗氧化性進(jìn)行研究,以期為進(jìn)一步開發(fā)利用該植物提供理論依據(jù)。響應(yīng)面曲線法優(yōu)化檸條錦雞兒總黃酮提取工藝及其體外抗氧化性研究筆者未見文獻(xiàn)報(bào)道。

1　材料與方法

1.1材料與儀器

檸條錦雞兒采摘自甘肅省蘭州市五泉山麓,經(jīng)西北民族大學(xué)化工學(xué)院制藥工程教研室主任師永清教授鑒定為錦雞兒屬植物檸條錦雞兒Caraganakorshinskiikom。選取檸條錦雞兒地上部分葉及細(xì)枝條,室內(nèi)陰干后,備用。蘆丁對(duì)照品購自上海士鋒科技有限公司。其他試劑均為市售商品級(jí)分析純?cè)噭?/p>

SP-2100型紫外-可見分光光度計(jì)上海光譜儀器有限公司;UX620H型電子分析天平日本島津公司;AB204-S型電子天平瑞士梅特勒公司;SB25-12DT型超聲波清洗機(jī)寧波新芝生物科技股份有限公司;DHG-9023A型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱上海森信實(shí)驗(yàn)儀器有限公司;DFT-200型高速中藥粉碎機(jī)溫嶺市林大機(jī)械有限公司。

1.2實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作準(zhǔn)確稱取于105 ℃干燥的蘆丁對(duì)照品10 mg,80%乙醇定容至10 mL,混合均勻,靜置,得到1 mg/mL蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液,備用。從上述配制的蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液中吸取0.0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 mL分別加入6個(gè)干燥的25 mL的容量瓶中,各加入80%乙醇至8 mL,加入1 mL 5%的NaNO2溶液搖勻后靜置6 min,再加入1 mL 10% Al(NO3)3溶液,搖勻,靜置5 min后加入4% NaOH溶液10 mL,最后再用80%乙醇定容并搖勻后靜置15 min。以未加蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品的溶液作為空白對(duì)照,分別于510 nm處測(cè)定6個(gè)容量瓶中標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度值[12]。

1.2.2檸條錦雞兒中總黃酮的提取檸條錦雞兒地上部分葉及細(xì)枝條室內(nèi)陰干后粉碎過24目篩,準(zhǔn)確稱取3.00 g,置于100 mL錐形瓶中,用乙醇浸泡,在50 ℃水溫下,50 kHz超聲提取,過濾。濾渣再以相同的條件重復(fù)以上步驟超聲、過濾,合并兩次濾液至100 mL容量瓶中并用乙醇定容,從中精密量取1 mL溶液至25 mL的容量瓶中,用“1.2.1”中所述方法配制溶液。以波長(zhǎng)510 nm處測(cè)量得到的吸光度值來計(jì)算總黃酮的得率方程為:

式中:C為待測(cè)溶液中總黃酮濃度(mg/mL),Y為總黃酮得率(%)。

1.2.3單因素實(shí)驗(yàn)以超聲時(shí)間、料液比、乙醇濃度和提取次數(shù)四個(gè)因素為研究對(duì)象,以檸條錦雞兒總黃酮得率為指標(biāo)進(jìn)行單因素實(shí)驗(yàn)。

1.2.3.1超聲時(shí)間對(duì)總黃酮得率的影響以檸條錦雞兒中的總黃酮得率為指標(biāo),在固定料液比1∶30 g/mL、乙醇濃度70%、提取2次的條件下,考察不同超聲時(shí)間(20、30、40、50、60 min)對(duì)總黃酮得率的影響。

1.2.3.2料液比對(duì)總黃酮得率的影響以檸條錦雞兒中的總黃酮得率為指標(biāo),在固定超聲時(shí)間40 min、乙醇濃度70%、提取2次的條件下,考察不同料液比(1∶10、1∶20、1∶30、1∶40、1∶50 g/mL)對(duì)總黃酮得率的影響。

1.2.3.3乙醇濃度對(duì)總黃酮得率的影響以檸條錦雞兒中的總黃酮得率為指標(biāo),在固定料液比1∶30 g/mL、超聲時(shí)間為40 min、提取2次的條件下,考察不同乙醇濃度(50%、60%、70%、80%、90%)對(duì)總黃酮得率的影響。

1.2.3.4提取次數(shù)對(duì)總黃酮得率的影響以檸條錦雞兒中的總黃酮得率為指標(biāo),在固定料液比1∶30 g/mL、超聲時(shí)間為40 min、乙醇濃度為70%的條件下,考察不同提取次數(shù)(1次、2次、3次)對(duì)總黃酮得率的影響。

1.2.4響應(yīng)面法優(yōu)化檸條錦雞兒總黃酮提取工藝在單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果基礎(chǔ)上,按照Box-Benhnken 中心組合實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)原理,采用Design-Expert 8.05b軟件設(shè)計(jì)響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)。本實(shí)驗(yàn)選擇超聲時(shí)間(A)、料液比(B)、乙醇濃度(C)三個(gè)因素為考察因素,因素水平見表1。

表1　因素水平編碼

1.2.5.1對(duì)羥基自由基(·OH)的清除實(shí)驗(yàn)測(cè)定方法參考相關(guān)文獻(xiàn)[13-14],取一支10 mL容量瓶,依次加入1 mL 6 mmol/L H2O2溶液、2 mL 2 mmol/L FeSO4溶液、4 mL 6 mmol/L水楊酸乙醇溶液,蒸餾水定容,混合均勻,在37 ℃水浴環(huán)境下靜置20 min,于510 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收波長(zhǎng)A0。取5支10 mL量瓶依次編號(hào)為1～5,依次加入濃度為0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mg/mL的檸條錦雞兒總黃酮提取液,然后嚴(yán)格按照測(cè)定A0的操作步驟分別加入同劑量相同試劑,蒸餾水定容至10 mL,置于37 ℃水浴環(huán)境下保溫20 min,在510 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收波長(zhǎng)Ax。另取5支10 mL容量瓶按照測(cè)定Ax操作分別加入檸條錦雞兒總黃酮提取液,以蒸餾水代替上述混合溶液做為對(duì)照實(shí)驗(yàn)組,嚴(yán)格按照測(cè)定A0操作進(jìn)行實(shí)驗(yàn),于510 nm測(cè)定吸收波長(zhǎng)Ax0。

樣品溶液對(duì)(·OH)清除率計(jì)算公式:[1-(Ax-Ax0)/A0]×100%

式中:A0-空白組溶液的吸光度值;Ax-樣品組吸光度值;Ax0-對(duì)照組吸光度值。

式中:A0-空白組溶液的吸光度值;Ax-樣品組吸光度值;Ax0-對(duì)照組吸光度值。

1.2.5.3對(duì)DPPH·自由基的清除實(shí)驗(yàn)測(cè)定方法參考相關(guān)文獻(xiàn)[13,16-17]。DPPH·儲(chǔ)備液的準(zhǔn)備:稱取1,1-二苯基-2-三硝基苯肼5.0 mg,加無水乙醇進(jìn)行溶解后定容于50 mL量瓶中,混合均勻。取六支10 mL量瓶按照1～6進(jìn)行編號(hào),均加入5.0 mL DPPH·儲(chǔ)備液,加入自0.0～2.0 mg/mL以0.4 mg/mL為單位濃度梯度的檸條錦雞兒總黃酮溶液,無水乙醇溶液定容,于暗處放置30 min,在517 nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸收波長(zhǎng)A0及Ax。另取5支10mL容量瓶,嚴(yán)格按照測(cè)定Ax步驟,用無水乙醇溶液代替DPPH·儲(chǔ)備液做對(duì)照實(shí)驗(yàn)組,測(cè)定Ax0。

樣品溶液對(duì)DPPH·清除率按以下公式計(jì)算:[1-(Ax-Ax0)/A0]×100%

式中:A0-空白組溶液的吸光度值;Ax-樣品組吸光度值;Ax0-對(duì)照組吸光度值。

1.2.5.4對(duì)ABTS+自由基的清除實(shí)驗(yàn)測(cè)定方法參考相關(guān)文獻(xiàn)[18-19]。ABTS+儲(chǔ)備液的配制:2.45 mmol/L過硫酸鉀與7.00 mmol/L ABTS溶液等量均勻混合,黑暗放置反應(yīng)15 h。向生成的ABTS+溶液中加入無水乙醇,以期于734 nm獲得值為0.70±0.02的吸收值。取六支10 mL量瓶并編號(hào)1～6,均加入8.0 mL ABTS+儲(chǔ)備液,再分別加入濃度為0.0 mg/mL至1.0 mg/mL以0.2 mg/mL為濃度梯度的檸條錦雞兒總黃酮溶液,加無水乙醇進(jìn)行定容,在30 ℃室溫靜置10 min,于734 nm處測(cè)定吸收波長(zhǎng)A0及Ax。另取5支10 mL容量瓶嚴(yán)格按照測(cè)定Ax步驟,用無水乙醇代替ABTS+儲(chǔ)備液做對(duì)照實(shí)驗(yàn)組,測(cè)定Ax0。

樣品溶液對(duì)ABTS+清除率按照以下公式計(jì)算:[1-(Ax-Ax0)/A0]×100%

式中:A0-空白組溶液的吸光度值;Ax-樣品組吸光度值;Ax0-對(duì)照組吸光度值。

1.3數(shù)據(jù)處理

運(yùn)用Microsoft Excel(Office 2010)及Design-Expert 8.05b軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)整理及分析。

2　結(jié)果與分析

2.1蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

以蘆丁對(duì)照品溶液濃度(mg/mL)(C)為橫坐標(biāo)、吸光度值(A)為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。得到回歸方程為:A=6.0228C-0.0128,r=0.9997,線性范圍為 0.0044～0.0222 mg/mL,線性關(guān)系良好。

2.2單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.2.1超聲時(shí)間的選擇圖1表明,20～40 min內(nèi)得率隨超聲時(shí)間的增加而增大,在超聲時(shí)間40 min時(shí),檸條錦雞兒總黃酮的得率出現(xiàn)最優(yōu)值;當(dāng)繼續(xù)增加超聲提取時(shí)間,得率略有下降,可能是由于增加超聲時(shí)間黃酮類化合物已漸達(dá)飽和、不再明顯溶出,并且隨著超聲時(shí)間的延長(zhǎng),植物細(xì)胞膜逐漸被破壞,其中的粘液等雜質(zhì)溶出使提取液粘度增大,影響了提取效果[20]。因此,選擇超聲提取時(shí)間為30～50 min進(jìn)行Box-Behnken實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。

圖1　超聲時(shí)間對(duì)檸條錦雞兒總黃酮得率的影響Fig.1　The effect of times of extraction on the yield of total flavonoids

2.2.2料液比的選擇圖2可見,料液比對(duì)檸條錦雞兒總黃酮得率的影響較大,隨溶劑量的增加總黃酮的得率也增加,當(dāng)料液比達(dá)到1∶30 g/mL時(shí)得率最大,繼續(xù)增加溶劑量后得率反而有所降低,原因有可能是:料液比過小,黃酮溶解不充分;料液比過大,則樣品中一些非黃酮類的化合物溶解度增大,與黃酮類化合物競(jìng)爭(zhēng)性溶出,從而干擾黃酮的提取使其得率減小[13]。故選擇料液比為1∶20～1∶40 g/mL進(jìn)行Box-Behnken實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。

圖2　料液比對(duì)檸條錦雞兒總黃酮得率的影響Fig.2　The effect of solid/liquid ratio on the yield of total flavonoids

2.2.3乙醇濃度的選擇圖3表明,當(dāng)乙醇濃度在50%～80%之間,檸條錦雞兒總黃酮的得率隨濃度增加而增大;當(dāng)乙醇濃度為80%時(shí)總黃酮得率達(dá)到最大,繼續(xù)增加乙醇濃度,總黃酮得率呈現(xiàn)下降趨勢(shì)。原因可能是由于隨著乙醇濃度增大,黃酮類化合物達(dá)到飽和,同時(shí)一些親脂性強(qiáng)的色素、雜質(zhì)等成分溶出量增加,這些成分與黃酮類化合物競(jìng)爭(zhēng)性溶出,從而導(dǎo)致黃酮類化合物得率下降[21]。本實(shí)驗(yàn)選取乙醇濃度為70%～90%進(jìn)行Box-Behnken實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。

圖3　乙醇溶液濃度對(duì)檸條錦雞兒總黃酮得率的影響Fig.3　The effect of ethanol concentration on the yield of total flavonoids

2.2.4提取次數(shù)的選擇圖4表明,提取次數(shù)為3次時(shí),檸條錦雞兒總黃酮的得率有最大值,但提取2次與提取3次的差別不大,而且能耗大大增加,從實(shí)驗(yàn)時(shí)間和試劑成本方面考慮,選擇提取次數(shù)2次較為合適。

圖4　提取次數(shù)對(duì)檸條錦雞兒總黃酮得率的影響Fig.4　The effect of times of extraction on the yield of total flavonoids

2.3響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)與結(jié)果

2.3.1響應(yīng)面法確定檸條錦雞兒總黃酮的較優(yōu)提取條件以A:超聲時(shí)間(min)、B:料液比(g/mL)、C:乙醇濃度(%)作為自變量,以檸條錦雞兒總黃酮得率Y(%)作為其響應(yīng)值,響應(yīng)面分析實(shí)驗(yàn)方案及結(jié)果見表2。

表2　Box-Behnken實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果

采用Design-Expert 8.05b軟件對(duì)表2中數(shù)據(jù)進(jìn)行多項(xiàng)式擬合回歸,建立多元二次響應(yīng)面回歸模型:Y(%)=3.72+0.081A+1.875×10-3B-0.12C+0.077AB+0.059AC+2.000×10-3BC-0.10A2-0.11B2-0.11C2,實(shí)驗(yàn)因素對(duì)響應(yīng)值的影響不是簡(jiǎn)單的線性關(guān)系,A、C、AB、AC、A2、B2、C2對(duì)得率Y 的影響非常顯著。表3回歸統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果表明:模型的F=60.92,p<0.0001,表明實(shí)驗(yàn)的二次模型是非常顯著的,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。失擬項(xiàng)p值=0.0802>0.05,相關(guān)系數(shù)R2=0.9874,說明所得方程與實(shí)際擬合中非正常誤差所占比例小,即失擬項(xiàng)是不顯著的。結(jié)果顯示此模型與實(shí)際實(shí)驗(yàn)擬合較好,可以很好地描述所得實(shí)驗(yàn)結(jié)果,真實(shí)的實(shí)驗(yàn)點(diǎn)用該方程代替進(jìn)行分析是具有可行性的。通過F值可知,各單因素對(duì)檸條錦雞兒總黃酮得率的影響程度大小依次為:乙醇濃度>超聲時(shí)間>料液比;每?jī)梢蛩亟换プ饔脤?duì)檸條錦雞兒總黃酮得率的影響因素大小依次為:超聲時(shí)間和料液比>超聲時(shí)間和乙醇濃度>料液比和乙醇濃度。

表3　響應(yīng)面設(shè)計(jì)回歸方程的方差分析

注:*表示顯著性差異,p<0.05;**為極顯著性差異,p<0.01。根據(jù)該模型繪制出各交互因素響應(yīng)曲面圖見圖5。從圖5a可看出,響應(yīng)面坡度較陡,響應(yīng)值隨超聲時(shí)間的變化率大于料液比的變化率,說明二者在交互作用中超聲時(shí)間對(duì)總黃酮得率的影響大于料液比。同理,從圖5b中可知乙醇濃度對(duì)總黃酮得率的影響大于超聲時(shí)間;從圖5c中可知乙醇濃度對(duì)總黃酮得率的影響大于料液比。觀察對(duì)比圖5a、圖5b和圖5c中響應(yīng)面的坡度和等高線,圖5a中響應(yīng)面的坡度最陡,其等高線也更趨向于橢圓形,說明超聲時(shí)間和液料比的交互作用最為顯著;圖5b中響應(yīng)面的坡度較緩,其等高線也較圓,說明超聲時(shí)間和乙醇濃度有較顯著的交互作用但弱于超聲時(shí)間和液料比;圖5c中響應(yīng)面最為平緩,其等高線也更趨向于圓形,說明料液比和乙醇濃度的交互作用較不顯著。總之,此結(jié)果與模型中F值分析結(jié)果一致。

Design-Expert程序模擬出來的RSM結(jié)果顯示,檸條錦雞兒總黃酮的較優(yōu)提取工藝為:超聲時(shí)間42.61 min、料液比1∶30.98 g/mL、乙醇濃度75.12%;總黃酮得率的預(yù)測(cè)值為3.762%。

圖5　各提取因素之間的交互作用影響響應(yīng)面圖Fig.5　Response surface plots showing the mutual effects of different factors on the yield of total flavonoids

2.3.2驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)根據(jù)實(shí)驗(yàn)實(shí)際操作情況,將實(shí)驗(yàn)條件設(shè)置為:超聲提取時(shí)間43 min、料液比1∶30 g/mL、乙醇濃度75%,進(jìn)行3次重復(fù)實(shí)驗(yàn)(見表4)。計(jì)算得總黃酮得率的平均值為3.743%,RSD為0.94%,與模型總黃酮得率的預(yù)測(cè)值3.762%相比,誤差僅0.5%,說明響應(yīng)面優(yōu)化得到的提取工藝條件可靠性高,可預(yù)測(cè)性好。

表4　工藝驗(yàn)證結(jié)果

2.4抗氧化性實(shí)驗(yàn)的結(jié)果分析

2.4.1對(duì)羥基自由基(·OH)的清除實(shí)驗(yàn)結(jié)果根據(jù)圖6能夠得知,檸條錦雞兒總黃酮對(duì)羥基自由基(·OH)有顯著的清除效果。在受測(cè)濃度范圍內(nèi),其清除羥基自由基(·OH)的作用比相同濃度的VC要略強(qiáng),且隨著檸條錦雞兒總黃酮溶液濃度的增加,清除率不斷增加,檸條錦雞兒總黃酮濃度為1.0 mg/mL時(shí)清除率不再有明顯的增加,清除率達(dá)90%。

圖6　檸條錦雞兒總黃酮對(duì)羥基自由基清除Fig.6　Scavenging effects of total flavonoids on ·OH

圖7　檸條錦雞兒總黃酮對(duì)超氧自由基清除Fig.7　Scavenging effects of total flavonoids on ·

2.4.3對(duì)DPPH·的清除實(shí)驗(yàn)結(jié)果根據(jù)圖8能夠得知,在受測(cè)濃度范圍內(nèi),VC對(duì)DPPH·始終保持很明顯的清除作用,都能達(dá)到95%以上;檸條錦雞兒總黃酮對(duì)DPPH·的清除效果也較顯著,但明顯弱于VC,其清除率隨總黃酮濃度增大不斷增加,檸條錦雞兒總黃酮濃度接近于0.8 mg/mL時(shí)清除率不再有明顯的增加,濃度為1.0 mg/mL時(shí)清除率達(dá)40%以上。

圖8　檸條錦雞兒總黃酮對(duì)DPPH·的清除Fig.8　Scavenging effects of total flavonoids on DPPH·

2.4.4對(duì)ABTS+自由基的清除實(shí)驗(yàn)的結(jié)果按照“1.2.5.4”中所述方法計(jì)算出ABTS+自由基得清除率,結(jié)果如圖9。圖9顯示,在受測(cè)濃度范圍內(nèi),VC對(duì)ABTS+自由基有很強(qiáng)的清除作用,0.6 mg/mL以后清除率就保持在90%以上;檸條錦雞兒總黃酮對(duì)ABTS+自由基的清除作用相對(duì)弱于VC,但依然有著較為明顯的清除作用,在濃度達(dá)到0.8 mg/mL時(shí)清除效果最佳,清除率達(dá)到76%。隨著總黃酮濃度進(jìn)一步增大,對(duì)ABTS+自由基清除率又有所降低,這種情況分析認(rèn)為與“2.4.2”中的情況原因類似,但具體原因仍待進(jìn)一步求證。

圖9　檸條錦雞兒總黃酮對(duì)ABTS+自由基清除Fig.9　Scavenging effects of total flavonoids on ABTS+

3　結(jié)論

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Optimization of extraction of total flavonoids fromCaraganakorshinskiikom with ultrasound technology by response surface analysis and evaluation of its antioxidant activityinvitro

KOU Liang1,2,LI Lu1,2,LU Li-na1,2,KANG Shu-he1,2,*

(1.Chemical Engineering College of Northwest University for Nationalities,Lanzhou 730030,China; 2.Key Laboratory for Utility of Environment-friendly Composite Materials and Biomass in Universities of Gansu Province,Lanzhou 730030,China)

Caraganakorshinskiikom;flavonoids;response surface methodology;ultrasonic-assisted extraction;antioxidant activity

2016-03-03

寇亮(1983-)，男，碩士，實(shí)驗(yàn)師，研究方向：藥物化學(xué)及天然有機(jī)化學(xué)，E-mail：kouliang83@163.com。

康淑荷(1972-)，女，碩士，副教授，主要從事天然藥物的研究與開發(fā)，E-mail:523429214@163.com。

中央高?；究蒲袠I(yè)務(wù)費(fèi)專項(xiàng)資金項(xiàng)目(31920160049)。

TS201.2

B

1002-0306(2016)17-0225-07

10.13386/j.issn1002-0306.2016.17.036