IL-17、IL-8、IL-10水平與早期糖尿病腎病的關(guān)系

王衛(wèi)娜

（南陽醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校 河南南陽 473000）

IL-17、IL-8、IL-10水平與早期糖尿病腎病的關(guān)系

王衛(wèi)娜

（南陽醫(yī)學(xué)高等專科學(xué)校 河南南陽 473000）

目的 觀察糖尿病大鼠腎臟早期IL-17、IL-8、IL-10水平的變化，并分析糖尿病大鼠腎臟早期IL-17、IL-8、IL-10水平與糖尿病腎病的關(guān)系。方法 健康雄性SD大鼠被隨機(jī)分為正常對照組和糖尿病模型組，模型組以一次性腹腔注射STZ誘導(dǎo)糖尿病模型；造模成功后在1周、2周、4周、6周，12周時間點分別取兩腎，稱量兩腎的重量及大鼠體重，常規(guī)方法檢測血清生化指標(biāo)和尿蛋白含量，ELISA檢測IL-17、IL-8、IL-10水平。分析IL-17、IL-8、IL-10水平與糖尿病腎病的關(guān)系。結(jié)果 糖尿病各組大鼠IL-17、IL-8隨時間逐漸升高，IL-10隨時間逐漸降低，IL-17、IL-8與血糖、CRP、腎臟肥大指數(shù)、24小時尿蛋白、肌酐、血尿素氮呈正相關(guān)，IL-10與血糖、CRP、腎臟肥大指數(shù)、24小時尿蛋白、肌酐、血尿素氮呈負(fù)相關(guān)，IL-17、IL-8與IL-10呈負(fù)相關(guān)。結(jié)論IL-17、IL-8可能促進(jìn)糖尿病大鼠腎病的發(fā)展，IL-10可能抑制糖尿病大鼠腎病的進(jìn)展。

糖尿病 IL-17 IL-8 IL-10

糖尿病腎病（Diabetic nephropathy，DN）是糖尿病特發(fā)性全身微血管病變的腎臟表現(xiàn)，是導(dǎo)致終末腎病的原因之一，糖尿病腎病早期出現(xiàn)微量白蛋白尿，但可以逆轉(zhuǎn)，后逐漸發(fā)展為不可逆大量蛋白尿、腎臟纖維化，最后發(fā)展為終末期腎病。最近研究認(rèn)為細(xì)胞因子介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)參與了糖尿病腎病的發(fā)生發(fā)展。我們通過測定糖尿病大鼠早期IL-17、IL-8、IL-10水平，探討這三種細(xì)胞因子在糖尿病腎病的發(fā)生發(fā)展中的作用機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

健康成年雄性SD大鼠：清潔級，200g±15g/只，SPF級，購于鄭州大學(xué)動物實驗中心，標(biāo)準(zhǔn)飲食，自由飲水，日常光照。

1.2 模型與分組

喂養(yǎng)1周后，隨機(jī)分為糖尿病大鼠組和正常對照組，禁食12小時后一次性腹腔注射鏈脲佐菌素STZ 60mg/kg。正常對照組注射等體積檸檬酸緩沖液。4 8 h后葡萄糖氧化酶法測血糖，血糖≥1 6. 65mmol/L為糖尿病大鼠。不成?；蛩劳龅牟挥嬋虢y(tǒng)計。大鼠隨機(jī)分為正常對照組、糖尿病1周組、糖尿病2周組、糖尿病4周組、糖尿病6周組、糖尿病12周組，每組6只。

1.3 方法

每個時間點，稱體質(zhì)量，麻醉，心臟取血，離心取血清；取出雙側(cè)腎臟稱重；血肌酐、血糖、尿素氮用全自動生化分析儀測定； ELISA測定尿微量白蛋白、IL-17、IL-8。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析

采用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析，計量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，多組間比較采用方差分析，兩兩組間比較采用LSD-t檢驗，p＜0.05認(rèn)為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。Spearson作相關(guān)性分析。

表1 各組大鼠血、尿等指標(biāo)（±s，n=6）

表1 各組大鼠血、尿等指標(biāo)（±s，n=6）

注：與NC比較，* p＜0.05；** p＜0.01

組別 　n 　F P G（m m o l / L） 　C R P（m g / L） 　　腎肥大指數(shù)（%） 　2 4 h U p r o（m g） 　B U N（m m o l / L） 　S C r（μ m o l / L）N C 　6 　5 . 6 7 ± 1 . 2 3 　4 . 0 1 ± 2 . 0 7 　0 . 3 5 6 ± 0 . 2 7 　7 . 3 ± 1 . 7 　7 . 0 ± 0 . 8 　4 1 . 2 ± 4 . 1 1 W 　6 　1 8 . 5 6 ± 4 . 8 7 * * 　6 . 7 1 ± 3 . 2 0 　0 . 3 6 2 ± 0 . 1 3 　9 . 1 ± 1 . 8 　7 . 2 ± 0 . 9 　4 2 . 7 ± 3 . 9 2 W 　6 　2 2 . 1 5 ± 5 . 0 9 * * 　1 0 . 1 0 ± 3 . 1 2 * * 　0 . 5 6 7 ± 0 . 4 1 　1 3 . 8 ± 2 . 1 * * 　7 . 8 ± 1 . 0 　4 4 . 8 ± 4 . 3 4 W 　6 　3 3 . 4 7 ± 5 . 3 6 * * 　1 5 . 3 3 ± 3 . 8 0 * * 　0 . 7 1 6 ± 0 . 4 6 * 　1 7 . 2 ± 1 . 9 * * 　9 . 2 ± 0 . 7 * 　4 9 . 8 ± 3 . 7 * 6 W 　6 　2 6 . 5 1 ± 5 . 7 2 * * 　1 9 . 4 2 ± 4 . 0 2 * * 　0 . 7 6 8 ± 0 . 5 1 * 　2 0 . 3 ± 2 . 0 * * 　1 2 . 8 ± 0 . 8 * * 　5 2 . 4 ± 4 . 2 * * 1 2 W 　6 　2 5 . 0 1 ± 6 . 1 7 * * 　2 9 . 7 6 ± 4 . 2 1 * * 　0 . 7 6 9 ± 0 . 4 7 * 　2 5 . 6 ± 2 . 7 * * 　1 7 . 2 ± 1 . 1 * 8 　5 9 . 8 ± 5 . 1 *

表2 各組IL-17、IL-8、IL-10水平比較（±s，n=6）

表2 各組IL-17、IL-8、IL-10水平比較（±s，n=6）

注：與NC比較，* p＜0.05；** p＜0.01

組別 　n 　　血I L -1 7（n g / L） 　　血I L -8（n g / L） 　　血I L -1 0（n g / L）N C 　6 　8 . 9 1 ± 3 . 1 2 　1 2 . 5 4 ± 2 . 1 3 　4 1 . 0 7 ± 2 . 6 1 1 W 　6 　9 . 3 0 ± 3 . 2 1 　1 5 . 4 2 ± 1 . 7 9 　3 9 . 0 2 ± 3 . 2 1 2 W 　6 　1 0 . 7 3 ± 3 . 0 5 　1 8 . 7 1 ± 2 . 9 8 * 　3 3 . 3 4 ± 4 . 2 5 * * 4 W 　6 　1 1 . 8 7 ± 4 . 2 0 * 　2 2 . 1 8 ± 2 . 1 8 * * 　2 7 . 8 7 ± 3 . 9 1 * * 6 W 　6 　1 3 . 7 8 ± 4 . 5 2 * 　2 6 . 7 2 ± 2 . 3 1 * * 　2 2 . 1 9 ± 3 . 0 8 * * 1 2 W 　6 　2 4 . 0 8 ± 5 . 1 3 * * 　5 7 . 6 8 ± 3 . 2 0 * * 　1 8 . 9 0 ± 3 . 1 7 * *

2 結(jié)果

2.1 各組大鼠血、尿等指標(biāo)變化

與正常對照組相比，各糖尿病模型組大鼠血糖顯著升高，模型組間血糖有差異，4周組糖尿病血糖水平最高，6周和12周組稍下降，但仍高于正常水平。CRP、腎臟肥大指數(shù)、24小時尿微量白蛋白、血肌酐、尿素氮隨時間逐步升高，均高于正常對照組。見表1。

2.2 各組大鼠IL-17、IL-8、IL-10結(jié)果比較

糖尿病各組大鼠IL-17、IL-8隨時間逐漸升高，IL-17從4周開始、IL-8從2周開始與正常對照組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。糖尿病各組大鼠IL-10隨時間逐漸降低，從2周開始與正常對照組比較有統(tǒng)計學(xué)意義。

2.3 相關(guān)性分析

IL-17、IL-8與血糖、CRP、腎臟肥大指數(shù)、24小時尿蛋白、肌酐、血尿素氮呈正相關(guān)（P＜0.01），IL-10與血糖、CRP、腎臟肥大指數(shù)、24小時尿蛋白、肌酐、血尿素氮呈負(fù)相關(guān)（P＜0.01），IL-17、IL-8與IL-10呈負(fù)相關(guān)（P＜0.01）。

3 討論

糖尿病腎病發(fā)生機(jī)制目前仍未完全清楚，近年研究認(rèn)為糖尿病腎病中存在炎癥反應(yīng)，糖尿病腎病被認(rèn)為是一個炎癥進(jìn)展過程，細(xì)胞因子介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)可能單獨或作為多種發(fā)病機(jī)制的下游環(huán)節(jié)在糖尿病腎病的發(fā)病機(jī)制中起關(guān)鍵作用［1］。在病變部位，常有大量的單核-巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等的浸潤，隨后浸潤細(xì)胞分泌炎癥性細(xì)胞因子和纖維化形成細(xì)胞因子，使病變部位纖維化，導(dǎo)致結(jié)構(gòu)改變和功能的喪失。

IL-17是由Th17細(xì)胞分泌的主要細(xì)胞因子，已被證明在多種疾病，包括器官移植、自身免疫性疾病、腫瘤中發(fā)揮重要作用［2］。 本研究結(jié)果顯示，糖尿病各組大鼠IL-17水平隨時間逐漸升高，從4周開始與正常對照組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。而且IL-17水平與血糖、腎臟肥大指數(shù)等指標(biāo)呈正相關(guān)，這充分說明IL-17在糖尿病腎病的發(fā)生發(fā)展中起到一定作用。

IL-8是趨化因子CXC超家族的典型代表。其作用主要是趨化中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞，脫粒，產(chǎn)生超氧陰離子，加強(qiáng)炎癥防護(hù)和免疫反應(yīng)等。本研究結(jié)果充分說明IL-8在糖尿病腎病的發(fā)生發(fā)展中起到一定作用。原因是IL-8激活中性粒細(xì)胞，引起炎癥反應(yīng)；刺激平滑肌細(xì)胞移動和增殖，導(dǎo)致內(nèi)皮促凝能力增加，使血流調(diào)節(jié)異常；刺激血管內(nèi)皮因子的釋放，增大血管通透性，導(dǎo)致蛋白尿的發(fā)生和發(fā)展，使腎系膜細(xì)胞增生，促進(jìn)腎小球硬化，導(dǎo)致糖尿病腎病的發(fā)展［3、4］。

研究發(fā)現(xiàn)糖尿病各組大鼠IL-10水平隨時間逐漸降低，從2周開始與正常對照組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。而且IL-10水平與血糖、腎臟肥大指數(shù)、24小時尿蛋白、肌酐、血尿素氮呈負(fù)相關(guān)，與其余致炎因子CRP、IL-8、IL-17也呈負(fù)相關(guān)，這充分說明IL-10在糖尿病腎病的發(fā)生發(fā)展中一定的保護(hù)作用。

相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，血清IL-8、IL-10及IL-17水平與疾病進(jìn)展、CRP、腎臟肥大指數(shù)、24小時尿蛋白、肌酐、血尿素氮等存在一定的相關(guān)性，而三者之間也存在相關(guān)性：提示IL-8、IL-10及IL-17可能參與了糖尿病腎病的發(fā)生發(fā)展，也說明炎癥反應(yīng)在糖尿病腎病的發(fā)生機(jī)制中起一定的作用。

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［4］孫永波.糖尿病腎病發(fā)生與發(fā)展相關(guān)危險因素的研究進(jìn)展［J］.醫(yī)學(xué)綜述，2011，17（10）：1531-1534.

R-0

A

1674-2060（2016）02-0116-02

南陽市科技局科技攻關(guān)項目 2012GG069；南陽醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校自然科學(xué)項目 12NYYZ2004