日糧中添加β-胡蘿卜素和胡蘿卜渣對(duì)海蘭褐雛雞免疫指標(biāo)和血液生化指標(biāo)的影響

吉昱斌，劉海艷，王玉璘，楊繼武，吳旻，黃羽盛，崔煥忠，張曉音，鄭鑫*

（1.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，吉林長(zhǎng)春130118；2.遼寧禾豐牧業(yè)股份有限公司，遼寧沈陽110164）

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日糧中添加β-胡蘿卜素和胡蘿卜渣對(duì)海蘭褐雛雞免疫指標(biāo)和血液生化指標(biāo)的影響

吉昱斌1，劉海艷1，王玉璘2，楊繼武2，吳旻1，黃羽盛1，崔煥忠1，張曉音1，鄭鑫1*

（1.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，吉林長(zhǎng)春130118；2.遼寧禾豐牧業(yè)股份有限公司，遼寧沈陽110164）

本試驗(yàn)選用1日齡海蘭褐雞729只，隨機(jī)分為3個(gè)組，每組設(shè)定3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)81只雛雞。對(duì)照組飼喂雛雞基礎(chǔ)日糧，其余兩組為試驗(yàn)組，在基礎(chǔ)日糧的基礎(chǔ)上分別添加60 mg/kg β-胡蘿卜素和2%胡蘿卜渣，試驗(yàn)期為8周。結(jié)果表明，飼喂21 d，β-胡蘿卜素組和胡蘿卜渣組血清中IgA含量與對(duì)照組相比分別提高20.02%和13.13%（P＜0.05）。飼喂42 d，β-胡蘿卜素組的血清IgA的含量較對(duì)照組和胡蘿卜渣組分別提高了22.94%和24.71%（P＜0.05）。添加β-胡蘿卜素和胡蘿卜渣對(duì)雛雞部分血液生化指標(biāo)具有一定改善作用，但效果不顯著（P＞0.05）。由此可見，添加這兩種物質(zhì)對(duì)雞的免疫和生化指標(biāo)均有改善作用，β-胡蘿卜素對(duì)雛雞的生長(zhǎng)發(fā)育有重要作用，也為胡蘿卜渣作為功能性飼料研發(fā)提供了輔助證明。

類胡蘿卜素；β-胡蘿卜素；免疫指標(biāo)；血液生化指標(biāo)

β-胡蘿卜素廣泛存在于各類果蔬中，是維生素A的重要來源，能起到治療維生素A缺乏癥、抗衰老、增強(qiáng)免疫力等重要的生理作用。在實(shí)際生產(chǎn)實(shí)踐中，雛雞存在代謝生長(zhǎng)迅速，消化吸收能力差以及自身免疫力差等諸多問題，其免疫系統(tǒng)具有獨(dú)特的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。大量的免疫細(xì)胞和免疫分子存在于黏膜上皮及黏膜下或由淋巴濾泡構(gòu)成濾泡結(jié)節(jié)，同時(shí)具有特異的免疫分子介導(dǎo)免疫反應(yīng)，最主要的免疫因子有IgA（沙永剛等，2003）。通過增強(qiáng)黏膜免疫的辦法來提升雛雞免疫能力，提高雛雞的成活率，結(jié)合雛雞免疫特點(diǎn)來避免這些不利的生理特點(diǎn)。本試驗(yàn)旨在探討在飼料中添加β-胡蘿卜素和胡蘿卜渣對(duì)雛雞免疫性能和血液生化指標(biāo)的影響。

1　材料和方法

1.1試驗(yàn)材料供試材料為1日齡的海蘭褐蛋用雛雞，由扶余禾豐禽業(yè)提供。雛雞用基礎(chǔ)日糧配方見表1，由扶余禾豐飼料公司提供。胡蘿卜渣，購于山東省某公司。β-胡蘿卜素，購于武漢星辰生物科技有限公司。ELISA試劑盒，購于上海朗頓生物技術(shù)有限公司。

表1　日糧組成及營養(yǎng)水平

1.2試驗(yàn)方法

1.2.1試驗(yàn)分組試驗(yàn)設(shè)計(jì)三個(gè)組，空白對(duì)照組飼喂雛雞基礎(chǔ)日糧；其余兩組為β-胡蘿卜素組和胡蘿卜渣組，分別在基礎(chǔ)日糧中添加60 mg/kg β-胡蘿卜素和2%胡蘿卜渣。每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)81只雛雞，共計(jì)729只。

1.2.2血液中IgA含量測(cè)定分別采集21日齡和42日齡雛雞血液，3000 r/min離心后取血清，用于測(cè)定血清IgA含量。按照ELISA試劑盒說明書方法檢測(cè)血清IgA的濃度。

1.2.3血液生化指標(biāo)測(cè)定分別采集21日齡和42日齡的雛雞血液，3000 r/min離心后取血清，使用全自動(dòng)血液生化分析儀，分別檢測(cè)21日齡和42日齡雛雞血清中白蛋白、總蛋白、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶的含量。

1.3飼養(yǎng)管理試驗(yàn)用雛雞于育雛舍內(nèi)飼養(yǎng)，采用3層式籠養(yǎng)，自由飲水、采食。日常雞舍管理方案完全依照扶余禾豐公司育雛雞場(chǎng)的養(yǎng)殖管理規(guī)范實(shí)行。相關(guān)免疫程序按照扶余禾豐公司的育雛雞免疫規(guī)范實(shí)行。

1.4數(shù)據(jù)分析試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行單因素方差分析、繪圖。

2　結(jié)果與分析

2.1血清中IgA含量由圖1可知，第21日齡時(shí)，添加β-胡蘿卜素組和胡蘿卜渣組血清中IgA含量與對(duì)照組相比分別提高20.02%和13.13%（P＜0.05），飼喂β-胡蘿卜素組和飼喂胡蘿卜渣組差異不顯著（P＞0.05）。前期飼料中添加β-胡蘿卜素和胡蘿卜渣能顯著提升血清IgA含量。早期添加β-胡蘿卜素和胡蘿卜渣效果基本一致。42日齡時(shí)，β-胡蘿卜素組血清IgA含量較對(duì)照組和胡蘿卜渣組分別提高22.94%和24.71%（P＜0.05），胡蘿卜渣組的血清IgA含量與對(duì)照組基本持平。可以看出隨著時(shí)間的推移日糧中添加β-胡蘿卜素的優(yōu)勢(shì)逐漸體現(xiàn)出來，其能對(duì)雛雞形成持久的免疫保護(hù)作用。

圖1　血清中IgA含量

2.2血液生化指標(biāo)測(cè)定結(jié)果

2.2.1白蛋白含量由圖2可知，21日齡時(shí)，β-胡蘿卜素組的白蛋白含量高于對(duì)照組和胡蘿卜渣組，但效果不顯著（P＞0.05），對(duì)照組白蛋白含量略高于胡蘿卜渣組，但差異不顯著（P＞0.05）。這表明，前期飼喂添加了β-胡蘿卜素的日糧效果較好。42日齡時(shí)，胡蘿卜渣組白蛋白含量高于對(duì)照組和β-胡蘿卜素組（P＞0.05）。這說明后期飼喂添加胡蘿卜渣的日糧效果較好。

圖2　白蛋白含量

2.2.2總蛋白含量由圖3可知，21日齡時(shí)，β-胡蘿卜素組中的總蛋白含量高于對(duì)照組高于胡蘿卜渣組，但差異不顯著（P＞0.05），這說明前期飼喂含有β-胡蘿卜素的日糧有一定的作用效果。42日齡時(shí)，胡蘿卜渣組的白蛋白含量最高，對(duì)照組和β-胡蘿卜素組含量基本持平，這表明添加胡蘿卜渣組的日糧在飼喂后期效果較好。

圖3　總蛋白含量

2.2.3谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶含量由圖4可知，第21日齡時(shí)，血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶含量，對(duì)照組與β-胡蘿卜素組基本持平，胡蘿卜渣組含量與其他兩組相比較低，但差異不顯著（P＞0.05）；第42日齡時(shí)，三組含量基本持平（P＞0.05）。由圖5可知，第21日齡時(shí)，血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶含量，β-胡蘿卜素組略高于對(duì)照組和胡蘿卜渣組，但差異不顯著（P＞0.05）；第42日齡時(shí)對(duì)照組含量略高于β-胡蘿卜素組和胡蘿卜渣組（P＞0.05）。谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶是衡量代謝水平的指標(biāo)。本試驗(yàn)結(jié)果表明，日糧中添加β-胡蘿卜素和胡蘿卜渣這兩種物質(zhì)不會(huì)影響到機(jī)體的正常代謝功能。

圖4　谷丙轉(zhuǎn)氨酶含量

圖5　谷草轉(zhuǎn)氨酶含量

3　討論

3.1免疫方面的影響?zhàn)つっ庖呤菣C(jī)體免疫系統(tǒng)預(yù)防病原體的主要屏障，一旦黏膜出現(xiàn)病理變化就會(huì)使得病原微生物侵入機(jī)體，產(chǎn)生有害影響。研究證實(shí)，機(jī)體95%以上的感染發(fā)生在黏膜或由黏膜入侵機(jī)體（高英杰，2000）。在黏膜免疫中IgA是主要的效應(yīng)因子。出殼4日齡時(shí)，十二指腸內(nèi)淀粉酶、胰蛋白酶和脂肪酶活性最低，而到21日齡時(shí)分別增加了100倍、50倍和20倍；在第42日齡時(shí)雛雞體重增長(zhǎng)達(dá)到峰值（辜新貴和王啟軍，2010）。綜合雛雞生理特性本試驗(yàn)選取在21日齡和42日齡這兩個(gè)時(shí)間節(jié)點(diǎn)取樣。

研究表明，β-胡蘿卜素作為維生素A的前體，在肝臟中蓄積，相關(guān)轉(zhuǎn)化酶能在體內(nèi)維生素A缺乏時(shí)將β-胡蘿卜素轉(zhuǎn)化為維生素A，以補(bǔ)充維生素A不足（吳翠栓等，2008）。同時(shí)，β-胡蘿卜素還具有抗氧化作用。主要表現(xiàn)在具有清除自由基的能力，生物體中存在大量的脂質(zhì)過氧化和自由基反應(yīng)，可導(dǎo)致細(xì)胞功能下降，機(jī)體的衰老以及疾病的發(fā)生，β-胡蘿卜素的存在可減少脂質(zhì)過氧化（朱秀靈等，2006）。相關(guān)研究還表明，免疫抑制下的小鼠體內(nèi)β-胡蘿卜素可以提高體內(nèi)細(xì)胞因子和免疫球蛋白含量，從而增強(qiáng)小鼠免疫功能（馬思慧等，2014）。本試驗(yàn)將β-胡蘿卜素和胡蘿卜渣這兩種物質(zhì)添加于雛雞飼料中，通過日糧攝取起到在育雛初期就增加雛雞免疫功效的作用。同時(shí)可以觀測(cè)其作用效果，也為胡蘿卜渣作為功能性飼料研發(fā)提供了輔助證明。通過采集21、42日齡雛雞血清，進(jìn)行ELISA試驗(yàn)，測(cè)定21、42日齡雛雞血清中IgA濃度。21日齡時(shí)，β-胡蘿卜素組和胡蘿卜渣組血清中IgA含量與對(duì)照組相比分別提高了20.02%和13.13%（P＜0.05）。42日齡時(shí)，β-胡蘿卜素組的血清IgA含量分別較對(duì)照組和胡蘿卜渣組提高22.94%和24.71%（P＜0.05）。前期通過添加β-胡蘿卜素和胡蘿卜渣來提升雛雞免疫力的效果較好，隨著時(shí)間的推移，后期添加β-胡蘿卜素的效果優(yōu)于胡蘿卜渣，能持續(xù)對(duì)雛雞提供免疫保護(hù)，增強(qiáng)雛雞免疫能力，降低雛雞在育雛階段的死亡率。

3.2血液生化指標(biāo)方面的影響血清中白蛋白和總蛋白兩項(xiàng)指標(biāo)均可反映機(jī)體合成蛋白的能力。采集21、42日齡雛雞血液，3000 r/min離心后取血清，采用全自動(dòng)血液生化分析儀檢測(cè)總蛋白、白蛋白含量。21日齡時(shí)，β-胡蘿卜素組的白蛋白含量高于對(duì)照組和胡蘿卜渣組，但效果不明顯（P＞0.05）。同樣，21日齡時(shí)，β-胡蘿卜素組中的總蛋白含量高于對(duì)照組高于胡蘿卜渣組，效果也不顯著（P＞0.05）。42日齡時(shí)，胡蘿卜渣組白蛋白、總蛋白含量均高與對(duì)照組和β-胡蘿卜素組，表明持續(xù)飼喂胡蘿卜渣效果較好。

谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶在動(dòng)物體內(nèi)分布廣、活性大，在氨基酸的代謝過程中起到催化的作用（沈國春等，2005）。21、42日齡時(shí)谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶均保持相同變化趨勢(shì)，但差異不顯著（P＞0.05）。表明飼喂含有這兩種物質(zhì)的日糧均不會(huì)引起代謝功能的異常。

4　結(jié)論

試驗(yàn)結(jié)果表明，用添加了β-胡蘿卜素和胡蘿卜渣的日糧飼喂雛雞，雛雞血清中IgA含量顯著提高（P＜0.05）。這表明β-胡蘿卜素在育雛前期能夠起到提高雛雞免疫力的作用。同時(shí)，白蛋白、總蛋白含量也均有提升的趨勢(shì)。而谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶含量均未受顯著影響，因此不會(huì)影響肝臟正常代謝。綜上所述，在育雛前期添加含有β-胡蘿卜素的物質(zhì)確實(shí)能夠提高雛雞的身體機(jī)能。同時(shí)表明，通過日糧中添加胡蘿卜渣也能起到直接添加β-胡蘿卜素的效果，為胡蘿卜渣作為功能性飼料研發(fā)提供了輔助證明。

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A total of 729 one-day-old female chicken were randomly divided into 3 groups with three replicates of 81 each group.The control group was fed with basal diet，the other two groups were fed with the basal diets added with 60 mg/kg β-carotene and 2%carrot pomace，respectively.After 56 days of feeding，the immune indexes and serum biochemical indexes were determined.The content of IgA in the serum of the β-carotene group and carrot pomace group was significantly different from that of the control group（P＜0.05），which was significantly increased by 20.02%and 13.13%at the 21 days of feeding.Compared with the control group and carrot pomace group，the content of IgA in serum of β-carotene group was increased by 22.94%and 24.71%at the 42 days of feeding，respectively.Adding β-carotene and carrot pomace could improve part of blood biochemical indexed，but the difference wasn’t significant（P＞0.05）.The results showed that adding these two substances had the effect of improving the chicken immunity and serum biochemical indexes.It showed significant increasing trend that β-carotene had great significance for growth and development of chicks.Carrot pomace was also provided to be used as a new sources of functional feed additive.

carotenoids；β-carotene；immune indexes；blood biochemical indexes

S816.7

A

1004-3314（2016）06-0014-04

10.15906/j.cnki.cn11-2975/s.20160604

吉林省科技支撐重點(diǎn)項(xiàng)目（20110224）；吉林省科技發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目（2013413037GH）