全自動(dòng)血液分析儀外周血細(xì)胞計(jì)數(shù)的影響因素探討

王宇

中國民航飛行學(xué)院醫(yī)院檢驗(yàn)科，四川廣漢618307

全自動(dòng)血液分析儀外周血細(xì)胞計(jì)數(shù)的影響因素探討

王宇

中國民航飛行學(xué)院醫(yī)院檢驗(yàn)科，四川廣漢618307

目的探討全自動(dòng)血液分析儀外周血細(xì)胞計(jì)數(shù)的影響因素。方法選擇中國民航飛行學(xué)院醫(yī)院健康體檢人群120例，在不同抗凝劑、不同溫度和檢測(cè)時(shí)間采用Sysmex XT-1800i全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀檢測(cè)紅細(xì)胞（RBC）、白細(xì)胞（WBC）和血小板（PLT）。結(jié)果肝素鈉、枸櫞酸鈉和EDTA-K2抗凝劑檢測(cè)WBC和RBC差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），肝素鈉和枸櫞酸鈉抗凝的血標(biāo)本PLT計(jì)數(shù)顯著低于EDTA-K2抗凝血標(biāo)本（P＜0.05）。25℃室溫保存下血標(biāo)本W(wǎng)BC、RBC和PLT在30 min、2、4、6 h的測(cè)定結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。在4℃低溫保存下血標(biāo)本W(wǎng)BC、RBC在30 min、2 h、4 h、6 h的測(cè)定結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。而PLT在30 min、2 h、4 h、6 h的測(cè)定結(jié)果差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論抗凝劑、溫度和檢測(cè)時(shí)間是影響外周血計(jì)數(shù)的重要因素，外周血細(xì)胞計(jì)數(shù)應(yīng)該選擇EDTA-K2抗凝劑、25℃、6h小時(shí)內(nèi)完成檢測(cè)。

外周血；細(xì)胞計(jì)數(shù)；影響因素

［Abstract］Objective To study the influence factors of peripheral blood cells counts of the fully automatic hematology analyzer.Methods 120 cases of healthy persons with physical examination in the Hospital of Civil Aviation Flight University of China were selected，and the red cells，white cells and blood platelets were tested by the Sysmex XT-1800i fully automatic hematology analyzer under different anticoagulant agents，temperatures and test time.Results The difference in detecting the white cells and red cells between the heparin sodium，sodium citrate and EDTA-K2 anticoagulant agent had no statistical significance（P＞0.05），the blood platelet count of blood specimen of heparin sodium and sodium citrate anticoagulation was obviously lower than that of the EDTA-K2 anticoagulation blood specimen（P＜0.05），the differences in the measurement results of the red cells，white cells and blood platelets of the blood specimens stored at a room temperature of 25℃after 30 min，2 h，4 h and 6 h（P＞0.05），and the differences in the measurement results of blood platelet after 30 min，2 h，4 h and 6 h had statistical significance（P＜0.05）.Conclusion The anticoagulant agent，temperature and test time are the important influence factors of peripheral blood count，and the peripheral blood cell count should choose EDTA-K2 anticoagulant agent，and the test should be finished within 6 h at 25℃.

［Key words］Peripheral blood；Cell count；Influence factor

血液常規(guī)分析是臨床診斷炎癥、感染，以及血液系統(tǒng)疾病的重要輔助指標(biāo)。血液常規(guī)分析組合項(xiàng)目包括外周全血細(xì)胞計(jì)數(shù)和白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)、以及各指標(biāo)衍生參數(shù)等。其中，紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板計(jì)數(shù)是血液常規(guī)分析的重要關(guān)鍵指標(biāo)［1-2］。然而由于血液成分復(fù)雜多樣，且存在個(gè)體差異性，影響外周靜脈全血細(xì)胞計(jì)數(shù)的因素較多［3-5］。該研究從抗凝劑的類型、標(biāo)本保存時(shí)間、保存溫度3個(gè)方面對(duì)外周靜脈全血細(xì)胞計(jì)數(shù)的影響進(jìn)行探討，以指導(dǎo)臨床檢驗(yàn)技術(shù)人員科學(xué)制定質(zhì)量控制和保證措施，促進(jìn)血液常規(guī)分析質(zhì)量的提高，報(bào)道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料

選擇中國民航飛行學(xué)院醫(yī)院健康體檢人群120例，包括男性60例和女性60例，年齡分布在12～65歲之間，平均年齡為（36.2±10.8）歲。

1.2儀器和試劑

Sysmex XT-1800i全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀及配套試劑，肝素抗凝管，EDTA-K2抗凝管，奧林巴斯顯微鏡，瑞氏-吉姆薩染色液。

1.3研究方法

所有120例研究對(duì)象于早晨8∶00-9∶00空腹采集3 mL的肝素鈉抗凝血、枸櫞酸鈉和EDTA-K2抗凝血。EDTA-K2抗凝的全血標(biāo)本再分裝成等體積的兩份，一份在室溫下保存，分別于采血后0 min、30 min、2 h、4 h、6 h檢測(cè)WBC、RBC和PLT三個(gè)計(jì)數(shù)參數(shù)；另一份標(biāo)本保存在4℃，分別于0 min、30 min、2 h、4 h、6 h檢測(cè)BC、RBC和PLT3個(gè)計(jì)數(shù)參數(shù)。

1.4統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS 13.0系統(tǒng)檢測(cè)，計(jì)量資料用均值±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，多組間均值比較，采用F檢驗(yàn)，兩組間均值比較采用t檢驗(yàn)。

2　結(jié)果

2.1不同抗凝劑血常規(guī)參數(shù)計(jì)數(shù)測(cè)定結(jié)果

結(jié)果如表1所示，肝素鈉、枸櫞酸鈉和EDTA-K2抗凝劑檢測(cè)WBC和RBC差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），而三種抗凝劑檢測(cè)血小板差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且與EDTA-K2抗凝劑比較，肝素鈉和枸櫞酸鈉抗凝的血標(biāo)本PLT計(jì)數(shù)顯著低于EDTA-K2抗凝血標(biāo)本，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

表1　不同抗凝劑血常規(guī)參數(shù)測(cè)定結(jié)果［（s），n=120］

表1　不同抗凝劑血常規(guī)參數(shù)測(cè)定結(jié)果［（s），n=120］

檢測(cè)項(xiàng)目肝素鈉枸櫞酸鈉E D T A -K2P值R B C（× 1 012/ L）W B C（× 1 09/ L）P L T（× 1 09/ L）4 . 3 2 ± 0 . 7 9 8 . 0 7 ± 1 . 6 3 1 5 2 . 9 ± 3 9 . 5 4 . 1 9 ± 0 . 8 5 7 . 9 8 ± 1 . 6 7 1 5 5 . 6 ± 4 1 . 4 4 . 2 5 ± 0 . 7 3 8 . 1 1 ± 1 . 5 9 2 1 6 . 4 ± 4 5 . 8＞0 . 0 5＞0 . 0 5＜0 . 0 5

2.2室溫下不同時(shí)間血細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果

25℃室溫保存下血標(biāo)本W(wǎng)BC、RBC和PLT在30 min、2 h、4 h、6 h的測(cè)定結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見表2。

表2　室溫保存（25℃）不同時(shí)間血細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果［n=120，（±s）］

表2　室溫保存（25℃）不同時(shí)間血細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果［n=120，（±s）］

項(xiàng)目3 0 m i n 2 h 4 h 6 h P值R B C（1 012/ L）W B C（1 09/ L）P L T（1 011/ L）4 . 2 5 ± 0 . 7 3 8 . 1 1 ± 1 . 5 9 2 1 6 . 4 ± 4 5 . 8 4 . 2 1 ± 0 . 6 5 8 . 3 0 ± 1 . 6 6 2 2 1 . 5 ± 4 1 . 6 4 . 5 2 ± 0 . 7 3 8 . 0 5 ± 1 . 3 9 2 1 8 . 5 ± 4 9 . 0 4 . 1 7 ± 0 . 5 1 8 . 2 7 ± 1 . 5 3 2 1 9 . 7 ± 4 5 . 0＞0 . 0 5＞0 . 0 5＞0 . 0 5

2.3低溫保存下不同時(shí)間血細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果

在4℃低溫保存下血標(biāo)本W(wǎng)BC、RBC在30 min、2 h、4 h、6 h的測(cè)定結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。而PLT在30 min、2 h、4 h、6 h的測(cè)定結(jié)果差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表3。

表3　低溫保存（4℃）不同時(shí)間檢測(cè)血細(xì)胞計(jì)數(shù)的結(jié)果［n=120，（±s）］

表3　低溫保存（4℃）不同時(shí)間檢測(cè)血細(xì)胞計(jì)數(shù)的結(jié)果［n=120，（±s）］

項(xiàng)目3 0 m i n 2 h 4 h 6 h P值R B C（1 012/ L）W B C（1 09/ L）P L T（1 011/ L）4 . 2 5 ± 0 . 7 3 8 . 1 1 ± 1 . 5 9 2 1 6 . 4 ± 4 5 . 8 4 . 3 1 ± 0 . 6 2 8 . 1 5 ± 1 . 6 6 1 8 8 . 6 ± 4 4 . 5 4 . 0 1 ± 0 . 2 1 8 . 3 2 ± 1 . 2 9 1 5 6 . 0 ± 4 0 . 3 3 . 9 9 ± 0 . 3 1 7 . 9 5 ± 1 . 3 0 1 0 9 . 3 ± 3 8 . 0＞0 . 0 5＞0 . 0 5＜0 . 0 5

3　討論

隨著醫(yī)療科技的發(fā)展和檢測(cè)手段的不斷進(jìn)步，全自動(dòng)血液分析儀在臨床實(shí)驗(yàn)室得到了廣泛應(yīng)用。全自動(dòng)血液分析儀通常采用電阻抗技術(shù)、半導(dǎo)體流式細(xì)胞分析系統(tǒng)、細(xì)胞化學(xué)染色技術(shù)和熒光檢測(cè)技術(shù)，實(shí)現(xiàn)對(duì)正常細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)和分類的功能。但是全自動(dòng)血液分析儀仍不可代替手工計(jì)數(shù)，在外周血液出現(xiàn)血小板聚集、有核紅細(xì)胞、異常淋巴細(xì)胞、原始幼稚細(xì)胞等情況下，檢測(cè)結(jié)果需要涂片染色后用顯微鏡法進(jìn)行人工識(shí)別并確認(rèn)［6-7］。同時(shí)，外周血細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí)還受到體外多種因素的影響［8-9］。

選擇合適的抗凝劑是影響血細(xì)胞準(zhǔn)確計(jì)數(shù)的關(guān)鍵因素之一。目前，血液檢驗(yàn)中常用的抗凝劑有EDTA鹽、肝素、枸櫞酸鹽等。肝素抗凝機(jī)制主要是由于其具有抗凝血酶Ⅲ活性，可抑制凝血活酶與凝血酶形成，并激活纖溶酶而發(fā)揮作用。EDTA鹽和枸櫞酸鹽的抗凝作用是通過絡(luò)合凝血因子Ⅳ（Ca2+），從而阻止血液凝固。肝素鈉、枸櫞酸鈉和EDTA-K2抗凝劑檢測(cè)WBC和RBC差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），而3種抗凝劑檢測(cè)血小板差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且與EDTA-K2抗凝劑比較，肝素鈉和枸櫞酸鈉抗凝的血標(biāo)本PLT計(jì)數(shù)顯著低于EDTA-K2（P＜0.05）。肝素導(dǎo)致血液分析儀計(jì)數(shù)PLT降低的原因可能是肝素能引起PLT聚集和發(fā)生腫脹，并且過量的肝素還可導(dǎo)致PLT被破壞［10］。而枸櫞酸鈉是堿性物質(zhì)，也可引起PLT聚集。PLT一旦發(fā)生聚集，通過儀器檢測(cè)微孔時(shí)，由于體積較大，不易被準(zhǔn)確識(shí)別，往往被誤認(rèn)為是紅細(xì)胞或淋巴細(xì)胞，這與文獻(xiàn)報(bào)道相符［11-12］。故國際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)推薦使用EDTA-K2作為血細(xì)胞計(jì)數(shù)的抗凝劑。

該結(jié)果顯示，25℃室溫保存下血標(biāo)本W(wǎng)BC、RBC和PLT在30 min、2 h、4 h、6 h的測(cè)定結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在4℃低溫保存下血標(biāo)本W(wǎng)BC、RBC在30 min、2 h、4 h、6 h的測(cè)定結(jié)果之間比較無顯著性差異。而PLT在30 min、2 h、4 h、6 h的測(cè)定結(jié)果之間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。這說明血標(biāo)本保存溫度對(duì)PLT計(jì)數(shù)也有一定影響?？赡艿脑蚴情L(zhǎng)時(shí)間低溫條件下，PLT容易發(fā)生粘附和聚集，使得儀器檢測(cè)PLT計(jì)數(shù)偏低［12-14］。而且隨著保存時(shí)間的延長(zhǎng)，血小板計(jì)數(shù)下降越來越明顯。

綜上可知，抗凝劑、溫度和檢測(cè)時(shí)間均是影響外周血細(xì)胞計(jì)數(shù)的重要影響因素。此外，還有其他一些因素，包括儀器狀態(tài)、患者準(zhǔn)備、溶血和脂血標(biāo)本也可對(duì)血液分析產(chǎn)生影響。一般情況下，選擇EDTA-K2作為抗凝劑、室溫保存6 h內(nèi)的血細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果不會(huì)發(fā)生明顯影響。

［1］王蘭蘭.血常規(guī)的臨床檢驗(yàn)分析［J］.中國醫(yī)藥指南，2016，14（2）：162.

［2］李露.血液分析檢驗(yàn)急慢性白血病的臨床觀察分析［J］.中國療養(yǎng)醫(yī)學(xué)，2016，25（6）：624-626.

［3］杜之濤.淺析血常規(guī)檢驗(yàn)的影響因素［J］.中外醫(yī)學(xué)研究，2011，9（1）：52-53.

［4］劉學(xué)斌，鄒雪松，黃冬梅，等.兩種抗凝劑對(duì)血小板的影響因素臨床分析［J］．河北醫(yī)學(xué)，2013，19（10）：1595-1597.

［5］楊曉丹，陳雪蓮.血常規(guī)標(biāo)本采集過程對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響［J］.中國民族民間醫(yī)藥，2010（7）：66.

［6］宋曉冬，左軍，徐建華.LH780全自動(dòng)血液分析儀分類不準(zhǔn)確原因的探討［J］.中國實(shí)用醫(yī)藥，2016，1（4）：270-271.

［7］張謙，劉娜，肖云峰.良好實(shí)驗(yàn)室規(guī)范體系下全自動(dòng)血液分析儀的3Q驗(yàn)證［J］.中國醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2016，13（14）：170-172.

［8］孫巽華，畢蘭香.影響血常規(guī)化驗(yàn)的因素臨床分析［J］.中國實(shí)用醫(yī)藥，2015，10（3）：239-240.

［9］沈聰，董理.影響血常規(guī)結(jié)果因素分析［J］.微量元素與健康研究，2016，33（1）：17-18.

［10］馬雨東.血細(xì)胞分析儀測(cè)定血小板時(shí)抗凝劑等影響因素分析［J］.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2010，7（11）：189-191.

［11］聶鳳英，焦曉寧.不同抗凝劑對(duì)血液分析儀測(cè)定參數(shù)的影響［J］.中國當(dāng)代醫(yī)藥，2012，19（23）：140-141.

［12］劉艷紅，劉鋒.靜脈血的檢測(cè)時(shí)間對(duì)血液分析結(jié)果的影響［J］.職業(yè)與健康，2011，27（13）：1491-1492.

［13］劉曉燕，周靈玲，胡曉蕾.溫度與抗凝劑對(duì)假性血小板減少的影響［J］.浙江實(shí)用醫(yī)學(xué)，2015，20（5）：369-370.

［14］黃亮，梁瑜金.抗凝劑對(duì)血小板計(jì)數(shù)結(jié)果的影響分析［J］.國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志2015，36（8）：1104-1105.

Study on Influence Factors of Peripheral Blood Cells Counts of the Fully Automatic Hematology Analyzer

WANG Yu
Department of Clinical Laboratory，Hospital of Civil Aviation Flight University of China，Guanghan，Sichuan Province，618307 China

R44

A

1672-5654（2016）09（b）-0089-03

10.16659/j.cnki.1672-5654.2016.26.089

2016-06-16）

王宇（1975-），女，四川廣漢人，本科，主管檢驗(yàn)技師，主要從事臨床檢驗(yàn)及實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制管理工作。