胰腺癌患者外周血中黏附分子水平檢測(cè)及其臨床意義

胡力，李傳斌

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·論著 基礎(chǔ)研究·

胰腺癌患者外周血中黏附分子水平檢測(cè)及其臨床意義

胡力，李傳斌

（湖北省松滋市人民醫(yī)院 普外二科，湖北 荊州 434200）

目的 探討胰腺癌患者外周血中內(nèi)皮細(xì)胞選擇素（E-selectin）、血小板選擇蛋白（P-selection）、細(xì)胞間黏附分子-1（ICAM）、血管細(xì)胞間黏附分子-1（VCAM）、活化白細(xì)胞細(xì)胞黏附分子（ALCAM）的檢測(cè)水平及其臨床意義。方法 選擇2014年4月至2015年8月期間我院普外科收治的40例胰腺癌患者（胰腺癌組）作為研究對(duì)象，其中淋巴結(jié)浸潤(rùn)14例，伴肝轉(zhuǎn)移11例；臨床分期I～I(xiàn) I期24例，I I I～I(xiàn)V期16例。選擇同期胰腺炎患者40例（胰腺炎組）、健康體檢者40例（對(duì)照組）進(jìn)行比較。采用ELISA法檢測(cè)ICAM、VCAM、E-selectin、P-selection、ALCAM水平。結(jié)果 胰腺癌組ICAM、VCAM、E-selectin、ALCAM水平高于胰腺炎組和對(duì)照組，胰腺炎組高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；胰腺癌組P-selection水平低于胰腺炎組和對(duì)照組，胰腺炎組低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。I I I～I(xiàn)V期胰腺癌患者ICAM、VCAM、E-selectin、ALCAM水平高于I～I(xiàn) I期者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；I I I～I(xiàn)V期胰腺癌患者P-selection水平低于I～I(xiàn) I期者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。胰腺癌伴淋巴結(jié)浸潤(rùn)患者ICAM、VCAM、E-selectin、ALCAM水平高于不伴淋巴結(jié)浸潤(rùn)者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；胰腺癌伴淋巴結(jié)浸潤(rùn)患者P-selection水平低于不伴淋巴結(jié)浸潤(rùn)者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。胰腺癌伴肝轉(zhuǎn)移患者ICAM、VCAM、E-selectin、ALCAM水平高于不伴肝轉(zhuǎn)移者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；胰腺癌伴肝轉(zhuǎn)移患者P-selection水平低于不伴肝轉(zhuǎn)移者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論 胰腺癌患者存在血管內(nèi)皮功能的紊亂，且血管內(nèi)皮功能紊亂與胰腺癌的臨床病理有關(guān)。

胰腺癌；黏附分子；內(nèi)皮功能；臨床病理

胰腺癌為常見(jiàn)惡性腫瘤，五年生存率在5％以下，相關(guān)數(shù)據(jù)顯示，由于生活習(xí)慣及飲食衛(wèi)生的關(guān)系，近年來(lái)胰腺癌發(fā)病率呈現(xiàn)上升趨勢(shì)，給患者及社會(huì)帶來(lái)嚴(yán)重不良影響，并致病死率明顯增高［1-3］。胰腺癌發(fā)病與諸多因素有關(guān)，其中炎性反應(yīng)、血管內(nèi)皮功能紊亂及免疫功能失衡均為胰腺癌的重要危險(xiǎn)因素［4-6］。

內(nèi)皮細(xì)胞選擇素（E-selectin）、血小板選擇蛋白（P-selection）、細(xì)胞間黏附分子-1（ICAM）、血管細(xì)胞間黏附分子-1（VCAM）、活化白細(xì)胞細(xì)胞黏附分子（ALCAM）等指標(biāo)均是黏附分子家族的成員，與內(nèi)皮功能、炎癥反應(yīng)及免疫反應(yīng)關(guān)系密切［7-8］。近年來(lái)研究顯示，ICAM、VCAM、E-selectin、P-selection、ALCAM的異常表達(dá)與胰腺癌的發(fā)病及進(jìn)展密切相關(guān)，在其發(fā)病中起一定的作用［9-10］。本研究通過(guò)檢測(cè)胰腺癌患者外周血中ICAM、VCAM、E-selectin、P-selection、ALCAM等指標(biāo)的水平，旨在探討血管內(nèi)皮功能紊亂與胰腺癌的關(guān)系及其臨床意義。

1 資料和方法

1.1一般資料

選擇2014年4月至2015年8月期間我院普外科收治的40例胰腺癌患者為研究對(duì)象（胰腺癌組），患者年齡40～70歲，平均年齡為（49.6±6.6）歲，體質(zhì)量指數(shù)為（21.72±3.52）kg/m2；40例胰腺癌患者中，淋巴結(jié)浸潤(rùn)14例，伴肝轉(zhuǎn)移11例；按照臨床分期的不同分為，I～I(xiàn) I期24例，I I I～I(xiàn)V期16例。選擇同期我院收治的胰腺炎患者40例（胰腺炎組），平均年齡（49.6±6.6）歲，體質(zhì)量指數(shù)為（21.8±2.9）kg/m2；選擇同期在我院體檢的健康者40名為對(duì)照組，平均年齡為（47.9±5.4）歲，體質(zhì)量指數(shù)為（22.7±2.4）kg/m2。胰腺癌組、胰腺炎組、對(duì)照組三組基本資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。本研究經(jīng)入組者簽署知情同意書(shū)，并獲我院倫理委員會(huì)審批通過(guò)。

納入標(biāo)準(zhǔn)：符合胰腺癌及胰腺炎的診斷標(biāo)準(zhǔn)［3-4］，無(wú)全身系統(tǒng)疾病，知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：嚴(yán)重肝腎功能不全者；腦血管疾??；近期急性感染；孕婦；炎癥性腸??；有精神疾病史；有酒精藥物濫用史；未完成隨訪者。

1.3研究方法

1.3.1標(biāo)本采集：用真空干燥管抽取空腹靜脈血4 mL；上述標(biāo)本以1 500 r/min離心10 min后取上清液。

1.3.2黏附分子的檢測(cè)：采用雙抗夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測(cè)ICAM、VCAM、E-selectin、P-selection、ALCAM等指標(biāo)，試劑由卡邁舒（上海）生物科技有限公司提供，用芬蘭Labsystems公司的Muhiskan MK 3酶標(biāo)儀，檢測(cè)指標(biāo)的吸光度值，并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算ICAM、VCAM、E-selectin、P-selection、ALCAM的濃度。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

使用SPSS 18.0軟件，三組間計(jì)量資料采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用SNK（q）法；胰腺癌組內(nèi)計(jì)量資料比較采用成組t檢驗(yàn)；P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1胰腺癌組、胰腺炎組、對(duì)照組血清黏附分子水平比較

胰腺癌組ICAM、VCAM、E-selectin、ALCAM水平高于胰腺炎組和對(duì)照組，胰腺炎組ICAM、VCAM、E-selectin、ALCAM水平高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；胰腺癌組P-selection水平低于胰腺炎組和對(duì)照組，胰腺炎組P-selection水平低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表1。

2.2不同臨床分期胰腺癌患者血清黏附分子水平比較

金為礦石中主要有益組分[11-12]，礦石中銀與硫呈次要伴生組分存在。工業(yè)礦平均金品位5.27×10-6，平均銀品位5.00×10-6，平均硫品位2.55%，銀、硫可作為伴生有益組分加以綜合回收利用。伴生的有害組分中砷含量(6.89×10-6)遠(yuǎn)小于0.2%，達(dá)不到規(guī)范要求的最低含量，對(duì)選礦無(wú)影響(表3)。

I I I～I(xiàn)V期胰腺癌患者ICAM、VCAM、E-selectin、ALCAM水平高于I～I(xiàn) I期者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；I I I～I(xiàn)V期胰腺癌患者P-selection水平低于I～I(xiàn) I期者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表2。

2.3胰腺癌伴淋巴結(jié)浸潤(rùn)患者血清黏附水平

胰腺癌伴淋巴結(jié)浸潤(rùn)患者ICAM、VCAM、E-selectin、ALCAM水平高于不伴淋巴結(jié)浸潤(rùn)者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；胰腺癌伴淋巴結(jié)浸潤(rùn)患者P-selection水平低于不伴淋巴結(jié)浸潤(rùn)者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表3。

表1　胰腺癌組、胰腺炎組、對(duì)照組血清ICAM、VCAM、E-selectin、P-selection、ALCAM水平比較（±s）

表2　不同臨床分期胰腺癌患者血清ICAM、VCAM、E-selectin、P-selection、ALCAM水平比較（±s）

2.4胰腺癌伴肝轉(zhuǎn)移患者血清黏附分子水平

胰腺癌伴肝轉(zhuǎn)移患者ICAM、VCAM、E-selectin、 ALCAM水平高于不伴肝轉(zhuǎn)移者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；胰腺癌伴肝轉(zhuǎn)移患者P-selection水平低于不伴肝轉(zhuǎn)移者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表4。

表3　胰腺癌伴淋巴結(jié)浸潤(rùn)患者血清ICAM、VCAM、E-selectin、P-selection、ALCAM水平（±s）

表4　胰腺癌伴肝轉(zhuǎn)移患者血清ICAM、VCAM、E-selectin、P-selection、ALCAM水平（±s）

3 討論

胰腺癌為常見(jiàn)消化系統(tǒng)惡性疾病，近年來(lái)其發(fā)病呈現(xiàn)逐年上升的趨勢(shì)［7-10］。胰腺癌的發(fā)病可由諸多因素引起，其中，炎癥反應(yīng)的加重、血管內(nèi)皮功能紊亂、免疫異常在其中占重要作用［11-12］。本研究通過(guò)ELISA方法檢測(cè)胰腺癌患者外周血中ICAM、VCAM、E-selectin、P-selection、ALCAM等指標(biāo)的表達(dá)情況，旨在探討?zhàn)じ椒肿优c胰腺癌的關(guān)系，并探討血管內(nèi)皮功能紊亂在胰腺癌發(fā)病中的作用及其與胰腺癌臨床病理的關(guān)系。

細(xì)胞黏附分子家族在血管內(nèi)皮功能的平衡中起重要作用［13］，該分子家族包括ICAM、VCAM、E-selectin、P-selection、ALCAM等［14］，它們?cè)诩?xì)胞之間的作用、炎癥介質(zhì)的遷移及黏附分子介導(dǎo)的免疫反應(yīng)中發(fā)揮重要作用［15］。本研究顯示，胰腺癌患者外周血中ICAM、VCAM、E-selectin、P-selection、ALCAM等指標(biāo)水平相較胰腺炎患者及健康人群均存在異常。胰腺癌患者血清ICAM、VCAM、E-selectin、ALCAM異常升高，而P-selection水平異常下調(diào)。結(jié)果表明胰腺癌患者存在一定程度的內(nèi)皮功能紊亂，這與Gasiorowska等［16］的研究結(jié)果一致；他們亦指出，內(nèi)皮功能與腫瘤患者的炎癥反應(yīng)及免疫反應(yīng)有關(guān)，內(nèi)皮功能紊亂可促進(jìn)腫瘤患者炎癥反應(yīng)程度的加重及免疫功能的紊亂。因此推測(cè)，ICAM、VCAM、E-selectin、P-selection、ALCAM等生化指標(biāo)通過(guò)引起內(nèi)皮功能紊亂進(jìn)而導(dǎo)致患者炎癥程度加重及免疫功能失調(diào)，并最終參與了胰腺癌的發(fā)病。

本研究亦顯示，ICAM、VCAM、E-selectin、P-selection、ALCAM等生化指標(biāo)水平的異常與胰腺癌的臨床病理有關(guān)。I I I～I(xiàn)V期胰腺癌患者ICAM、VCAM、E-selectin、ALCAM水平異常上升，P-selection水平則呈現(xiàn)相反趨勢(shì)。黏附分子家族與胰腺癌是否出現(xiàn)淋巴結(jié)浸潤(rùn)及是否出現(xiàn)肝轉(zhuǎn)移也同樣有關(guān)。隨著胰腺癌病情的加重及預(yù)后的惡化，ICAM、VCAM、E-selectin、P-selection、ALCAM等指標(biāo)出現(xiàn)異常升高或下降，表明黏附分子的異常表達(dá)即內(nèi)皮功能紊亂與胰腺癌的臨床病理關(guān)系密切。

有關(guān)ICAM、VCAM、E-selectin、P-selection、ALCAM等介導(dǎo)內(nèi)皮功能的生化指標(biāo)血清中表達(dá)情況與胰腺癌發(fā)病及進(jìn)展的國(guó)內(nèi)外研究較少，因此本研究具有一定新意。本研究結(jié)果與Gasiorowska等［16］研究結(jié)論一致，但他們的研究并未對(duì)胰腺癌患者不同臨床病理情況下（即是否伴肝轉(zhuǎn)移、是否伴淋巴結(jié)浸潤(rùn)、是否進(jìn)展）ICAM、VCAM、E-selectin、P-selection、ALCAM等指標(biāo)表達(dá)情況做進(jìn)一步探討。本研究不足之處在于，病例規(guī)模較小，且未對(duì)ICAM、VCAM、E-selectin、P-selection、ALCAM等指標(biāo)在胰腺癌發(fā)病及進(jìn)展過(guò)程中的具體信號(hào)通路進(jìn)行深入探討，因此本研究組將進(jìn)行后續(xù)深入研究。

［1］ 秦仁義. 指導(dǎo)手術(shù)方式選擇的胰腺癌分型及其與TNM分期相關(guān)性的探討 [J]. 中華外科雜志, 2015, 53(7): 488-491.

［2］ LANDAHL P， ANSARI D， ANDERSSON R， et al. Severe acute pancreatitis: gut barrier failure， systemic inflammatory response， acute lung injury， and the role of the mesenteric lymph ［J］. Surg Infect （Larchmt）， 2015， 16（6）: 651-656.

［3］ 中華醫(yī)學(xué)會(huì)外科學(xué)分會(huì)胰腺外科學(xué)組. 胰腺癌診治指南(2014版) [J]. 中華消化外科雜志, 2014, 13(11): 831-837.

［4］ 王春友, 趙玉沛. 重癥急性胰腺炎診治進(jìn)展及國(guó)內(nèi)外指南解讀 [J]. 中華外科雜志, 2013, 51(3): 198-200.

［5］ 溫斌, 徐明麗, 李雙齊, 等. 腦膠質(zhì)瘤相關(guān)癌基因-1及CD105在胰腺癌中的表達(dá)及其臨床意義 [J]. 中華實(shí)驗(yàn)外科雜志, 2015, 32(7): 1710-1712.

［6］ 郭欣, 呂行, 謝嬌貴, 等. 趨化因子配體18表達(dá)水平對(duì)胰腺癌患者的預(yù)后價(jià)值 [J]. 中華肝膽外科雜志, 2015, 21(7): 474-477.

［7］ B?OGOWSKI W， DESKUR A， BUDKOWSKA M， et al. Selected cytokines in patients with pancreatic cancer: a preliminary report ［J］. PLoS One， 2014， 9（5）: e97613.

［8］ GROTE V A， ROHRMANN S， DOSSUS L， et al. The asso-ciation of circulating adiponectin levels with pancreatic cancer risk: a study within the prospective EPIC cohort ［J］. Int J Cancer， 2012， 130（10）: 2428-2437.

［9］ 錢(qián)劍, 陳瑤, 齊樂(lè)龍, 等. 組織內(nèi)及外周血細(xì)胞間粘附分子-1與血管細(xì)胞間粘附分子-1在胰腺癌患者中的變化研究 [J].中國(guó)生化藥物雜志, 2015, 35(6): 80-82.

［10］ 于威, 柳長(zhǎng)明, 張凱葉飛, 等. 胰腺癌相關(guān)蛋白質(zhì)的篩選及信號(hào)通路 [J]. 中國(guó)老年學(xué)雜志, 2015, 35(15): 4133-4134.

［11］ LIU L T， LI Y， FAN L Q， et al. Effect of vascular bradykinin on pancreatic microcirculation and hemorheology in rats with severe acute pancreatitis ［J］. Eur Rev Med Pharmacol Sci，2015， 19（14）: 2646-2650.

［12］ MACK N A， GEORGIOU M. The interdependence of the Rho gtpases and apicobasal cell polarity ［J］. Small GTPases， 2014，5（2）: 1-16.

［13］ CHO H J， PARK S M， KIM I K， et al. RhoGDI2 promotes epithelial-mesenchymal transition via induction of snail in gastric cancer cells ［J］. Oncotarget， 2014， 5（6）: 1554-1564.

［14］ DIMA S O， TANASE C， ALBULESCU R， et al. An exploratory study of inflammatory cytokines as prognostic biomarkers in patients with ductal pancreatic adenocarcinoma ［J］. Pancreas， 2012， 41（7）: 1001-1007.

［15］ CHEN W， WANG X， ZHANG J， et al. Left scrotal swelling caused by severe acute pancreatitis in a 38-year-old Chinese male ［J］. Int J Clin Exp Med， 2015， 8（5）: 8194-8196.

［16］ GASIOROWSKA A， TALAR-WOJNAROWSKA R， KACZKA A， et al. Subclinical inflammation and endothelial dysfunction in patients with chronic pancreatitis and newly diagnosed pancreatic cancer ［J］. Dig Dis Sci， 2016， 61（4）: 1121-1129.

（本文編輯：魯翠濤）

Detection of adhension molecules in peripheral blood and their clinical significance for patients with pancreatic cancer

HU Li， LI Chuan-bin. The 2ndDepartment of General Surgery， Songzi People’s Hospital， Jinzhou， Hubei 434200， China

Objective To study the levels of ICAM， VCAM， E-selectin P-selection， ALCAM in peripheral blood and their clinical significance in patients with pancreatic cancer. Methods Forty patients with pancreatic cancer admitted in our hospital between Apr. 2014 and Aug. 2015 were selected as pancreatic cancer group. Of the 40 cases， 14 with lymph node invasion， 11 with liver metastases； 24 cases with clinical stage I～I(xiàn)I， 16 with III～I(xiàn)V. 40 pancreatitis patients （pancreatitis group） and 40 healthy physical examination objects （control group）were selected at the same time. The levels of ICAM， VCAM， E-selectin， P-selection， ALCAM were detected by ELISA method. Results ICAM， VCAM， E-selectin， ALCAM levels in pancreatic cancer group were higher than those in pancreatitis group and control group， and those in pancreatitis group were higher than in control group （all P＜0.05）； P-selection levels in the pancreatic cancer group were lower than those in pancreatitis group and control group， and those in pancreatitis group were lower than in control group （all P＜0.05）. For pancreatic cancer patients with stage III～I(xiàn)V， the ICAM， VCAM， E-selectin， ALCAM levels were higher than in those patients with stage I～I(xiàn)I （P＜0.05）； and the P-selection levels in patients with stage III～I(xiàn)V pancreatic were lower than in those patients with I～I(xiàn)I （P＜0.05）. ICAM， VCAM， E-selectin， ALCAM levels in pancreatic cancer patients with lymph node invasion were higher than those in patients without lymph node invasion （P＜0.05）； and the P-selection levels in patients with lymph node invasion were lower than those in patients without lymph node invasion （P＜0.05）. ICAM， VCAM， E-selectin， ALCAM levels in pancreatic cancer patients with liver metastasis werehigher than those in patients without liver metastasis （P＜0.05）； and the P-selection levels in pancreatic cancer patients with liver metastasis were lower than those in patients without liver metastasis （P＜0.05）. Conclusion The endothelial function disorder is found in patients with pancreatic cancer， and the endothelial dysfunction may be associated with the clinical pathology of pancreatic cancer.

pancreatic cancer； adhesion molecules； endothelial function； clinical pathology

R735.9

A DOI:10.11952/j.issn.1007-1954.2016.05.012

2016-01-18

胡力（1972-），男，湖北松滋人，副主任醫(yī)師。