抑郁焦慮情緒對(duì)復(fù)發(fā)性尖銳濕疣患者外周血調(diào)節(jié)性T細(xì)胞水平的影響

程　芳趙學(xué)良陶書(shū)杰王秀佳王　輝趙紅英房黎亞于　新王金超李　惠

抑郁焦慮情緒對(duì)復(fù)發(fā)性尖銳濕疣患者外周血調(diào)節(jié)性T細(xì)胞水平的影響

程芳1趙學(xué)良2陶書(shū)杰2王秀佳1王輝2趙紅英1房黎亞1于新1王金超1李惠1

目的： 確定抑郁焦慮情緒對(duì)CA復(fù)發(fā)和細(xì)胞免疫的影響。方法： 采用抑郁自評(píng)量表（SDS）和焦慮自評(píng)量表（SAS）對(duì)100例初診CA進(jìn)行問(wèn)卷調(diào)查，評(píng)估其情緒狀態(tài)。SDS＞50和/或SAS＞50為抑郁焦慮者，其余患者為非抑郁焦慮者。選擇健康體檢32人為對(duì)照。流式細(xì)胞技術(shù)測(cè)定外周血Treg細(xì)胞水平。隨后觀察兩組CA治療后的復(fù)發(fā)率。結(jié)果： CA組外周血Treg細(xì)胞水平為（8.03± 2.14）%，顯著高于正常對(duì)照組（5.28±1.21）%（P＜0.05）；抑郁焦慮組外周血Treg細(xì)胞水平為（8.64± 2.12）%，顯著高于無(wú)抑郁焦慮組（7.55±2.05）%（P＜0.05）。治療后抑郁焦慮組第1、2、3、6個(gè)月的復(fù)發(fā)率均高于無(wú)抑郁焦慮組。結(jié)論： 抑郁和/或焦慮情緒可加劇CA患者細(xì)胞免疫功能的抑制，導(dǎo)致CA更易復(fù)發(fā)。

抑郁； 焦慮； 尖銳濕疣； CD4+CD25+Foxp3+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞

良好的情緒有利于人體的健康，嚴(yán)重抑郁焦慮可致機(jī)體免疫功能下降［1］。尖銳濕疣（CA）的發(fā)病與復(fù)發(fā)與機(jī)體免疫功能低下有密切關(guān)系。CD4+CD25+Foxp3+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Treg細(xì)胞）的細(xì)胞數(shù)量和功能異常與病毒感染性疾病的發(fā)生、發(fā)展關(guān)系密切［2］。研究證明Treg細(xì)胞與CA的發(fā)病與復(fù)發(fā)密切相關(guān)［3］。本文檢測(cè)了44例伴抑郁和焦慮情緒的CA患者的外周血Treg細(xì)胞水平的變化，并觀察其病情變化，探討抑郁和焦慮情緒對(duì)CA患者細(xì)胞免疫功能的影響。

1　資料與方法

1.1臨床資料 選取2011年7月至2015年7月來(lái)濰坊市人民醫(yī)院皮膚科門(mén)診首次就診未治療的CA患者100例，其中男56例，女44例，年齡17～40歲，病程（2.34±0.83）個(gè)月。男患者皮損主要位于龜頭、包皮處，女患者主要位于大小陰唇、后聯(lián)合處，皮損直徑0.2～1.0 cm，數(shù)目均為1～10個(gè)。根據(jù)有無(wú)抑郁和焦慮情緒分為抑郁焦慮組和無(wú)抑郁焦慮組，選擇同期健康體檢者32例作為正常對(duì)照，其中男18例，女14例，年齡19～43歲。三組受檢者既往無(wú)精神病史，無(wú)認(rèn)知障礙，無(wú)藥物和酒精依賴(lài)史。

1.2抑郁和焦慮情緒評(píng)定 采用抑郁自評(píng)量表（SDS）和焦慮自評(píng)量表（SAS）評(píng)估患者情緒狀態(tài)［4］。這兩個(gè)量表各包括20個(gè)條目，每個(gè)條目根據(jù)癥狀出現(xiàn)頻度分4個(gè)等級(jí):（1）沒(méi)有或很少時(shí)間；（2）少部分時(shí)間；（3）相當(dāng)多時(shí)間；（4）絕大部分時(shí)間或全部時(shí)間。其中第2、5、6、11、12、14、16、17、18和20題為反向記分。自評(píng)結(jié)束后20個(gè)條目各個(gè)得分相加，即得出總分，總分乘以1.25，四舍五入取整數(shù)即得到標(biāo)準(zhǔn)分。SDS＞50分為抑郁狀態(tài)，SAS＞50分為焦慮狀態(tài)。兩個(gè)量表均在專(zhuān)業(yè)人員指導(dǎo)下，在安靜環(huán)境中由受試對(duì)象自行填寫(xiě)，在自評(píng)前受試者應(yīng)弄懂每個(gè)量表中每個(gè)問(wèn)題的涵義，然后再做出獨(dú)立的自我評(píng)定，測(cè)試時(shí)間在治療前進(jìn)行。

1.3病例排除 ①近3個(gè)月用過(guò)任何免疫調(diào)節(jié)劑；②伴有淋病、梅毒及其他性傳播疾病和自身免疫性疾病、糖尿病、腫瘤及其他感染性疾病、應(yīng)激狀態(tài)（如妊娠、哺乳及長(zhǎng)期服用避孕藥）；③有酗酒、吸煙不良生活習(xí)慣者；④在觀察期間服用催眠藥物者；⑤未能按時(shí)完成隨訪或復(fù)診的患者。

1.4治療方法 所有的患者確診為CA后根據(jù)病情嚴(yán)重程度采用冷凍、電灼治療或電灼聯(lián)合光動(dòng)力治療，隨訪6個(gè)月，前2個(gè)月每2周復(fù)診1次，第3、4、5、6個(gè)月每月復(fù)診1次，并分別統(tǒng)計(jì)第1個(gè)月、第2個(gè)月、第3個(gè)月、第6個(gè)月兩組的復(fù)發(fā)例數(shù)。

1.5試劑與儀器 熒光標(biāo)記單克隆抗體CD4-FITC、CD25-APC、Foxp3-PE及同型對(duì)照小鼠IgG1-FITC、IgG1-PE、IgG1-APC。熒光標(biāo)準(zhǔn)微球及破膜固定液均購(gòu)自美國(guó)Beeton Dickinsml公司，淋巴細(xì)胞分離液購(gòu)自中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院生物醫(yī)學(xué)工程研究所，流式細(xì)胞儀型號(hào)為FACSCalibur為美國(guó)Beeton Dickinsml公司產(chǎn)品。

1.6實(shí)驗(yàn)方法 抽取靜脈血4 mL，肝素抗凝。Ficoll密度梯度離心法用淋巴細(xì)胞分離液常規(guī)分離單一核細(xì)胞，調(diào)整細(xì)胞數(shù)為10×106/mL，取兩支試管，分別加入100 μL細(xì)胞懸液（1×106），分為同型對(duì)照管和檢測(cè)管。同型對(duì)照管加小鼠IgG1-FITC及IgG1-APC 10 μL，檢測(cè)管加CD4-FITC及CD25-APC 10 μL熒光標(biāo)記單抗，室溫避光孵育30 min；PBS洗滌后，固定破膜，然后同型對(duì)照管加IgG1-PE、檢測(cè)管加Foxp3-PE抗體各10 μL，室溫避光孵育30 min。PBS洗滌后，重懸細(xì)胞，上機(jī)測(cè)定。以 CD4+CD25+Foxp3+T細(xì)胞/ CD4+T細(xì)胞比值表示Treg細(xì)胞。

1.7統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行分析，計(jì)量資料以（ˉx±s）表示，計(jì)數(shù)資料比較采用卡方檢驗(yàn)，兩組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，多組比較采用單因素方差分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1CA患者抑郁和（或）焦慮發(fā)病率 100例CA患者44例（44.00%）有抑郁或焦慮或同時(shí)有抑郁和焦慮，被列入抑郁焦慮組，年齡為（26.43±8.60）歲，病程為（2.33±0.87）個(gè)月，其余56例列入非抑郁焦慮組年齡為（26.27±5.20）歲，病程為（2.34±0.70）個(gè)月，正常對(duì)照組的年齡為（27.06±5.91）歲，三組年齡、性別無(wú)顯著性差異。

2.2治療后隨訪情況 見(jiàn)表1。治療后第1、2、3、6個(gè)月抑郁焦慮組復(fù)發(fā)率高于無(wú)抑郁焦慮組（P＜0.05）。

表1　兩組CA患者病情復(fù)發(fā)情況比較 %

2.3三組Treg細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果 見(jiàn)表2。CA患者外周血Treg細(xì)胞水平高于正常對(duì)照組（P＜0.05），CA患者抑郁焦慮組外周血Treg細(xì)胞水平高于無(wú)抑郁焦慮組（P＜0.05）。

表2　CA患者和健康對(duì)照組外周血Treg細(xì)胞占CD4+T細(xì)胞的比值

表2　CA患者和健康對(duì)照組外周血Treg細(xì)胞占CD4+T細(xì)胞的比值

注:a:CA組與健康對(duì)照組比較，P＜0.05；b:抑郁焦慮組與健康對(duì)照組比較，P＜0.05；c:無(wú)抑郁焦慮組與健康對(duì)照組比較，P＜0.05；d:抑郁焦慮組與無(wú)抑郁焦慮組比較，P＜0.05

組 別　　例數(shù)　Treg cell ratio CA組 　100　8.03±2.14a抑郁焦慮組 　44　8.64±2.12b，d無(wú)抑郁焦慮組　56　7.55±2.05c健康對(duì)照組 　32　5.28±1.21

3　討論

已有研究顯示40%～50%的CA患者有嚴(yán)重的心理問(wèn)題，以抑郁情緒較為突出［5-7］。本文100例 CA患者中44例有抑郁和（或）焦慮，發(fā)生率為44.00%。抑郁焦慮患者治療后第1、2、3、6個(gè)月的復(fù)發(fā)率明顯高于無(wú)抑郁焦慮的患者，說(shuō)明有抑郁焦慮情緒的CA患者復(fù)發(fā)時(shí)間早，復(fù)發(fā)率更高。

CA復(fù)發(fā)與患者機(jī)體免疫力低下等因素有關(guān)［8］。負(fù)性情緒如焦慮和抑郁可影響人體的免疫功能，嚴(yán)重的心理應(yīng)激可以使CD4+/CD8+比值下降，NK細(xì)胞數(shù)量減少，細(xì)胞免疫功能的低下［9，10］。

本實(shí)驗(yàn)顯示CA患者Treg細(xì)胞水平明顯高于正常人，細(xì)胞免疫受抑制，與國(guó)內(nèi)相關(guān)報(bào)道一致［11］。Treg細(xì)胞分泌TGF-β在促進(jìn)自身增殖分化同時(shí)抑制Th1和Th2分化，從而反向調(diào)節(jié)Th1和Th2介導(dǎo)的細(xì)胞毒性T細(xì)胞活化、免疫應(yīng)答及炎癥反應(yīng)，使感染持續(xù)［12］。

伴有抑郁和（或）焦慮情緒的CA患者血清Treg水平增高更明顯，說(shuō)明抑郁和（或）焦慮情緒加劇了CA患者的細(xì)胞免疫功能的抑制，在臨床上CA更容易復(fù)發(fā)。國(guó)內(nèi)報(bào)告有抑郁情緒CA患者單一核細(xì)胞（PBMC）產(chǎn)生IL-2的能力和NK細(xì)胞活性顯著降低［7］。焦慮抑郁可導(dǎo)致婦科腫瘤患者的細(xì)胞免疫能力降低，表現(xiàn)為CD4+/CD8+比值失衡，NK細(xì)胞降低，IL-2下降，IL-6上升［13］。抑郁和焦慮情緒也是影響大腸癌患者免疫功能下降的主要危險(xiǎn)因素之一［14］。我們認(rèn)為:CA患者存在細(xì)胞免疫受抑制，外周血Treg細(xì)胞比值增高，但由于每例患者的情緒狀態(tài)，心理承受能力不同，其細(xì)胞免疫受抑制程度有明顯差異；抑郁和焦慮情緒加劇CA患者的細(xì)胞免疫功能的抑制，更易導(dǎo)致CA復(fù)發(fā)。因此，臨床上對(duì)CA患者除規(guī)范化治療外，加強(qiáng)患者健康教育和心理干預(yù)，預(yù)防抑郁和（或）焦慮對(duì)提高細(xì)胞免疫功能，預(yù)防CA的復(fù)發(fā)有積極意義。

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（收稿:2016-04-15 修回:2016-05-07）

Impact of depression and anxiety on the level of peripheral blood Treg cells in the patients with recurrent condyloma acuminatum

CHENG Fang1，ZHAO Xueliang2，TAO Shujie2，WANG Xiujia1，WANG Hui2，ZHAO Hongying1，F(xiàn)ANG Liya1，YU Xin1，WANG Jinchao1，LI Hui1.
1.Weifang Medical University，Shandong Weifang 261042，China；2.Weifang People's Hospital，Shandong Weifang 261000，China Corresponding author:TAO Shujie，E-mail:zhxl5801@163.com

Objective:To determine the impact of depression and anxiety on the immunological status and recurrence in the patients with condyloma acuminatum（CA）.Methods:The emotional state of 100 CA patients was evaluated with Self-rating Depression Scale（SDS）and Self-rating Anxiety Scale（SAS）.If SDS＞50 and/or SAS＞50，the patient was judged as having depression and anxiety，otherwise，as having no depression and anxiety.The level of peripheral blood regulatory T cells were assayed by flow cytometry.Results:The level of peripheral blood regulatory T cells was significantly higher in CA patients（8.64±2.12）%than in the normal control group（5.28±1.21）%.The level of peripheral blood regulatory T cells among the patients with depression and anxiety（8.64±2.12）%was significantly higher than that among the patients without depression and anxiety（7.55±2.05）%.The recurrence rate of CA after treatment was higher in the patients with depression and anxiety than in the patients without depression and anxiety at month 1，2，3 and 6.Conclusion:Depression and anxiety may increase inhibition of cellular immune function in CA patients，resulting in higher likelihood for CA relapse.

depression；anxiety；condyloma acuminatum；CD4+CD25+Foxp3+regulatory T cells

山東省濰坊市科學(xué)技術(shù)發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目（編號(hào):201302029）

1濰坊醫(yī)學(xué)院，山東濰坊，261042

2濰坊市人民醫(yī)院皮膚科，山東濰坊，261000

陶書(shū)杰，E-mail:zhx15801@163.com