苯甲醛L-半胱氨酸席夫堿聯(lián)合柞木木醋液的殺蟲活性

賈玉龍,鄭　靜,陳振雄,南秀杰,孫　悅,陳清西*

(1.廈門大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,福建廈門361102;2.遼寧省撫順市新?lián)釁^(qū)環(huán)保局,遼寧撫順113000;3.遼寧清遠(yuǎn)環(huán)境能源科技有限公司,遼寧撫順113006)

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苯甲醛L-半胱氨酸席夫堿聯(lián)合柞木木醋液的殺蟲活性

賈玉龍1,鄭靜1,陳振雄1,南秀杰2,孫悅3,陳清西1*

(1.廈門大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,福建廈門361102;2.遼寧省撫順市新?lián)釁^(qū)環(huán)保局,遼寧撫順113000;3.遼寧清遠(yuǎn)環(huán)境能源科技有限公司,遼寧撫順113006)

木醋堿殺蟲劑是一種基于木炭副產(chǎn)物木醋液的綠色殺蟲劑,是將精餾木醋液、苯甲醛L-半胱氨酸席夫堿、水楊酸按照一定比例配制而成的.以酪氨酸酶篩選模型研究了苯甲醛L-半胱氨酸席夫堿、精餾木醋液、木醋堿殺蟲劑對酪氨酸酶的抑制作用,其導(dǎo)致酪氨酸酶活性的半抑制質(zhì)量濃度(IC50)分別為15,2.53,0.53 mg/mL.探討了木醋堿殺蟲劑對小菜蛾(Plutellaxylostella)、棉鈴蟲(Helicoverpaarmigera)、玉米螟(Pyraustanubilalis)幼蟲的殺蟲活性,結(jié)果表明木醋堿殺蟲劑中苯甲醛L-半胱氨酸席夫堿質(zhì)量濃度達(dá)到15 mg/mL時即可對小菜蛾、棉鈴蟲、玉米螟二齡幼蟲達(dá)到很好的殺滅效果.急性毒理實驗表明木醋堿殺蟲劑實際無毒.慢性毒理研究按照3 g/kg給藥量連續(xù)灌胃3個月,昆明小鼠的肝臟和腎臟并不存在毒理性變化,表明木醋堿殺蟲劑沒有慢性毒性.綜上所述,木醋堿殺蟲劑不僅對酪氨酸酶有很好的抑制作用,還對小菜蛾、棉鈴蟲、玉米螟等常見農(nóng)業(yè)害蟲具有較強的毒殺活性,且實際無毒,具有良好的農(nóng)業(yè)應(yīng)用前景.

L-半胱氨酸席夫堿;木醋液;酪氨酸酶;殺蟲劑;毒理學(xué)

木醋液是在木材、竹材或其他植物炭材的干餾過程中導(dǎo)出的蒸汽氣體混合物經(jīng)過冷凝分離后得到的液體產(chǎn)物,在以往的工業(yè)生產(chǎn)過程中往往作為工業(yè)廢料被棄用[1].

木醋液在農(nóng)業(yè)上可以作為土壤改良劑、作物生長調(diào)節(jié)劑、殺菌劑、驅(qū)蟲劑、葉面肥以及農(nóng)藥增效劑[2-4].申鳳善等[5]發(fā)現(xiàn)木醋液對水稻發(fā)芽及幼苗期生長具有明顯促進(jìn)作用,且其毒性較低,對人體安全,對環(huán)境無污染,對施藥對象無殘留,因此其在有機農(nóng)業(yè)方面具有廣泛的應(yīng)用前景.李維蛟等[6]的研究表明,木醋液能推遲害蟲的侵染期,其特殊氣味可驅(qū)趕害蟲,并發(fā)現(xiàn)害蟲在施用木醋液后降低了生長和繁殖能力,從而減輕害蟲對作物的危害.李小龍等[7]的研究表明,木醋液中許多物質(zhì)本身具有防治病蟲害作用,與常規(guī)農(nóng)藥、生物農(nóng)藥、農(nóng)藥助劑混合使用能有效提高農(nóng)藥的防治效果,對部分有機磷類、氨基甲酸酯類以及擬除蟲菊酯類農(nóng)藥的增效可達(dá)100%.孫劍華等[8]的研究表明,在防治蔬菜害蟲方面,相同藥量的前提下加入300～400倍稀釋度的木醋液,可以增效30%.

木醋液能很好地溶解農(nóng)藥的藥性成分,是一種優(yōu)良的農(nóng)藥溶劑.木醋液中酚類、醛類、酮類等物質(zhì),能很好地滲透到作物的葉等組織中,從而增強藥效,減少農(nóng)藥使用量.木醋液是由植物性原料獲得的綠色產(chǎn)品,原料來源廣泛,生產(chǎn)工藝簡單,可大規(guī)模收集,避免作為副產(chǎn)物隨意丟棄,減少資源浪費,減輕環(huán)境污染[9].

L-半胱氨酸席夫堿類化合物是由L-半胱氨酸與相應(yīng)的醛或酮縮合形成的席夫堿類化合物,具有一定的生物活性,在化學(xué)領(lǐng)域備受關(guān)注.解先業(yè)等[10]設(shè)計合成了部分取代苯甲醛縮氨基硫脲,并研究了其對昆蟲酚氧化酶的抑制活性,實驗結(jié)果表明,L-半胱氨酸席夫堿類化合物對酚氧化酶有良好的抑制活性.

酪氨酸酶(tyrosinase,EC.1.14.18.1)是存在于昆蟲體內(nèi)的一種含銅的金屬酶,是生物體內(nèi)合成黑色素的關(guān)鍵酶類，對昆蟲的生長和發(fā)育起著重要作用.酪氨酸酶催化L-酪氨酸羥化轉(zhuǎn)變?yōu)長-多巴(L-DOPA)，再氧化L-DOPA形成多巴醌,多巴醌經(jīng)一系列反應(yīng)后形成保護性黑色素.同時,該酶也與昆蟲蛻皮過程中的鞣化作用有關(guān),是昆蟲賴以生存的一種重要的酶[11].已有研究結(jié)果[12]表明,酪氨酸酶抑制劑可以通過抑制酶活力來阻礙昆蟲在蛻皮時的鞣化作用,從而達(dá)到其殺蟲作用.以酪氨酸酶作為生物農(nóng)藥的靶點開發(fā)新型高效殺蟲劑,可以大大減少生物農(nóng)藥的使用量,既能使農(nóng)藥的殘留減至最低,又能獲得很高的經(jīng)濟效益.因此,研究設(shè)計高效的酪氨酸酶抑制劑,不僅具有重要的理論意義,同時可以作為“環(huán)境友好”的新型農(nóng)藥而具有重要的實踐意義和應(yīng)用前景[13].

本研究選用精餾木醋液和合成的苯甲醛L-半胱氨酸席夫堿為原料配制了木醋堿殺蟲劑,考察了其對蘑菇酪氨酸酶的抑制作用,以及對小菜蛾(Plutellaxylostella)、玉米螟(Pyraustanubilalis)和棉鈴蟲(Helicoverpaarmigera)幼蟲的毒殺效果;并以昆明小鼠為實驗對象,對木醋堿殺蟲劑的生物安全性進(jìn)行初步評估．

1　材料與方法

1.1材料

小菜蛾幼蟲、玉米螟幼蟲、棉鈴蟲幼蟲,購自湖北省農(nóng)科院國家生物農(nóng)藥工程中心；粗純木醋液由世紀(jì)東方生物質(zhì)綜合技術(shù)開發(fā)有限公司提供；蘑菇酪氨酸酶、L-DOPA、苯甲醛均購自Sigma公司；康寬(20%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))氯蟲苯甲酰胺懸浮劑)為杜邦公司產(chǎn)品；其他試劑為國藥集團化學(xué)試劑有限公司分析純試劑,使用的蒸餾水為去離子重蒸水.

1.2方法

1.2.1樣品制備

精餾木醋液的制備方法:1) 將粗純木醋液沉淀36～72 h 后,加入活性炭吸附18～24 h;2) 35～45 ℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā),蒸騰壓力為-0.3～-0.4 kPa,蒸發(fā)至剩余體積為原體積的30%～40%;3) 使用0.1 μm的有機濾膜過濾旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)后的液體2次,得到澄清透明的黃色液體;4) 25 ℃旋轉(zhuǎn)真空蒸發(fā)1 h,35 ℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)1 h,待乙醇含量不再增加,真空抽取以去除乙醇,0.45 μm膜過濾后,真空濃縮,待用.

苯甲醛L-半胱氨酸席夫堿制備方法:按照摩爾比1∶1稱取苯甲醛與L-半胱氨酸在95%(體積分?jǐn)?shù))乙醇溶液中121 ℃加熱回流1.5 h,將反應(yīng)物抽濾,使用無水乙醇漂洗3次,30 ℃烘干,稱量,計算產(chǎn)率,待用.

1.2.2精餾木醋液的成分分析

將制備得到的精餾木醋液進(jìn)行高效氣相色譜分析,分析條件為:CP WAX52CB毛細(xì)管柱(30 m×0.25 mm,內(nèi)徑0.25 μm);進(jìn)樣口溫度220 ℃,柱溫60 ℃,恒溫2 min后以6 ℃/min速度升溫至240 ℃,恒溫8 min;分流進(jìn)樣80∶1,載氣流速1.0 mL/min,進(jìn)樣量1 μL.質(zhì)譜條件:EI源,電子能量70 eV,離子源溫度250 ℃,質(zhì)量掃描范圍30～450原子質(zhì)量單位(atomic mass unit,簡稱amu);與質(zhì)譜標(biāo)準(zhǔn)庫(NIST庫)進(jìn)行比對和成分分析.

1.2.3木醋堿殺蟲劑的配置

將一定量的苯甲醛L-半胱氨酸席夫堿加入1 L精餾木醋液,25 ℃水浴攪拌溶解;加入0.05 g/L的水楊酸作為穩(wěn)定劑,冷卻,制成淡黃色澄清液體,即為木醋堿殺蟲劑.

1.2.4蘑菇酪氨酸酶活力的測定

按照參考文獻(xiàn)[14]方法稍作修改：在磷酸鹽緩沖液(PBS,pH 6.8)中,以L-DOPA為底物測定蘑菇酪氨酸酶的活力.先加入0.1 mL含不同濃度的精餾木醋液于比色杯中,再加入2.8 mL預(yù)先在30 ℃恒溫水浴保溫的底物溶液(含PBS和L-DOPA),然后加入0.1 mL蘑菇酪氨酸酶水溶液,即刻充分混勻,在30 ℃恒溫條件下檢測波長475 nm處的吸光度隨時間的變化,從直線的斜率計算出酶的活力,產(chǎn)物的消光系數(shù)按3 700 L/(mol·cm)計算.

1.2.5對鱗翅目幼蟲殺蟲活性的測定

選擇小菜蛾、玉米螟、棉鈴蟲二齡幼蟲為靶標(biāo)害蟲,采用平板飼喂法研究木醋堿殺蟲劑對靶標(biāo)害蟲的影響．將人工飼料平鋪于12孔板內(nèi),自然晾干．稱取一定量的苯甲醛L-半胱氨酸席夫堿溶解于100 mL精餾木醋液(已加入5 mg的水楊酸)中,平鋪在人工培養(yǎng)基表面,自然晾干．不同板每孔分別加入10只健康的小菜蛾二齡幼蟲、3只健康的玉米螟二齡幼蟲和1只健康的棉鈴蟲二齡幼蟲,于72 h 后統(tǒng)計死亡率,實驗重復(fù)3次；選用甲醇作為陰性對照組,按照高明等[15]的方法計算校正死亡率,通過SPSS 19.0 統(tǒng)計軟件,采用單因素方差分析對結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計分析．

1.2.6對小鼠急性毒性與慢性毒性的測定

按照黃厚今等[16]的方法進(jìn)行適當(dāng)修改,選取體質(zhì)量(24±1) g、周齡為6周的雌性昆明小鼠各20只,按10 g/kg給藥量對昆明小鼠進(jìn)行急性毒理實驗,觀察4周,對昆明小鼠的正常飲食、生活狀態(tài)進(jìn)行觀察記錄.按3 g/kg劑量對昆明小鼠進(jìn)行灌胃,對照組以相同體積的無菌水作為對照灌胃,灌胃期間對昆明小鼠的正常飲食、生活狀態(tài)進(jìn)行觀察記錄,連續(xù)灌胃3個月后,頸椎脫臼法處死昆明小鼠,取肝臟、腎臟等主要臟器進(jìn)行石蠟包埋,0.2 μm厚度切片,使用蘇木精-伊紅(HE)染色法對肝臟、腎臟切片進(jìn)行染色,通過顯微鏡觀察拍照,進(jìn)行慢性毒理學(xué)鑒定.

表1　精餾木醋液的成分

Tab.1　The comparison of wood vinegar after rectification

化合物 相對分子質(zhì)量質(zhì)量分?jǐn)?shù)/%化合物相對分子質(zhì)量質(zhì)量分?jǐn)?shù)/%水1890.2446乙酸604.7558苯酚940.5244丙酸740.47592-呋喃甲醛960.46233-甲基-1,2環(huán)戊二酮1120.33762-呋喃甲醇980.29092,6-二甲氧基苯酚1540.28682-甲基丁酸880.27253-甲基苯酚1080.2514羥基丙酮740.15952-甲氧基苯酚1240.1377環(huán)戊烯酮820.12361,2,3-三甲氧基苯1680.1180對苯二酚1100.1160四氫化-2-呋喃甲醇1020.10941-羥基-2-丁酮880.10022-甲基丙酸酐1580.09383-甲基-環(huán)戊烯酮960.08452-甲基丙酸880.08432,3-戊二酮1000.08332-甲基-環(huán)戊烯酮960.07182-甲氧基-4-甲基苯酚1380.0694鄰苯二酚1100.06711-呋喃基乙酮1100.06523-己基-2-羥基-2-環(huán)戊烯-1-酮1260.05772-甲基-1,4-苯二酚1240.05365-甲基-2-呋喃甲醛1100.04814-酮基戊酸1160.04701,2-環(huán)戊二酮980.0435巴豆酸860.04191-(2,4,6-三羥苯基)-2-戊酮2100.0411戊二酸單甲酯1440.03962,5-二甲基-3,5-二氫呋喃1120.03735-叔丁基焦棓酚1820.0343戊二酸單甲酯1460.03091-(4-羥基-3-甲氧基苯)-2-丙酮1800.03065-羥甲基-2-呋喃甲醛1260.03011-甲氧基-2-丙酮880.0276麥芽酚1260.0254環(huán)戊酮840.0253

2　結(jié)果與分析

2.1精餾木醋液的成分分析結(jié)果

如表1所示,精餾木醋液(密度為1.01 g/mL)共含有41種成分,根據(jù)信號豐度和強度計算各成分的質(zhì)量分?jǐn)?shù),并以此排序．精餾木醋液中水的質(zhì)量分?jǐn)?shù)最高,達(dá)90.244 6%;質(zhì)量分?jǐn)?shù)超過0.2%的有機成分按照質(zhì)量分?jǐn)?shù)高低排序依次為乙酸、苯酚、丙酸、2-呋喃甲醛、3-甲基-1,2-環(huán)戊二酮、2-呋喃甲醇、2,6-二甲氧基苯酚、2-甲基丁酸、3-甲基苯酚,其中乙酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù)達(dá)4.755 8%.

2.2苯甲醛L-半胱氨酸席夫堿的結(jié)構(gòu)鑒定

圖1　合成的苯甲醛L-半胱氨酸席夫堿高分辨率質(zhì)譜圖Fig.1The high resolution mass spectra of benzaldehyde L-cysteine Schiff base

2.3木醋堿殺蟲劑及其組分對蘑菇酪氨酸酶的抑制作用

木醋堿殺蟲劑各組分對蘑菇酪氨酸酶的抑制結(jié)果如圖2所示,從圖中可以獲得精餾木醋液、苯甲醛L-半胱氨酸席夫堿、木醋堿殺蟲劑對蘑菇酪氨酸酶的半抑制質(zhì)量濃度(IC50)分別為15,2.53,0.53 mg/mL.可見,木醋堿殺蟲劑相比于其主要組分精餾木醋液和苯甲醛L-半胱氨酸席夫堿，在測量濃度區(qū)間內(nèi),其抑制效果分別提高了27倍和3.8倍.

圖2　精餾木醋液(a)、苯甲醛L-半胱氨酸席夫堿(b)、木醋堿殺蟲劑(c)對蘑菇酪氨酸酶二酚酶活力的抑制作用Fig.2Inhibitory activity on mushroom tyrosinase monophenolase of rectificated wood vinegar (a),benzaldehyde L-cysteine Schiff base (b), and wood vinegar base insecticide (c)

本研究結(jié)果表明配制的木醋堿殺蟲劑具有很好的抑制蘑菇酪氨酸酶活力的作用,這是由于精餾木醋液中含有一些活性酸類物質(zhì)能夠和苯甲醛L-半胱氨酸席夫堿形成有活性的絡(luò)合物.木醋液、苯甲醛L-半胱氨酸席夫堿、木醋堿殺蟲劑對蘑菇酪氨酸酶的IC50分別為15,2.53,0.53 mg/mL,表明木醋堿殺蟲劑中對蘑菇酪氨酸酶的抑制作用不僅是席夫堿和絡(luò)合物的作用.

本研究中制備的精餾木醋液中含有2-呋喃甲醛,由于連苯基甲醛類物質(zhì)對蘑菇酪氨酸酶具有很好的抑制作用[17],據(jù)此推測木醋堿殺蟲劑對蘑菇酪氨酸酶的抑制作用可能為其中的絡(luò)合物與2-呋喃甲醛共同作用的結(jié)果.

2.4木醋堿殺蟲劑對3種鱗翅目幼蟲的毒殺作用

小菜蛾、玉米螟、棉鈴蟲均屬于鱗翅目害蟲,市場上針對鱗翅目害蟲最常用的殺蟲劑是杜邦公司生產(chǎn)的康寬[18],其有效成分為氯蟲苯甲酰胺,微毒性．本研究選取康寬作為陽性對照,以評價木醋堿殺蟲劑的殺蟲效果.木醋堿殺蟲劑對小菜蛾二齡幼蟲的毒殺作用如圖3(A)所示,當(dāng)苯甲醛L-半胱氨酸席夫堿的質(zhì)量濃度為5,10,15,20 mg/mL時,小菜蛾幼蟲喂食72 h的校正死亡率分別為26.67%,46.67%,53.33%和80.00%,相對于空白組的3.33%,存在顯著差異(p<0.05)．結(jié)果表明小菜蛾幼蟲的校正死亡率隨木醋堿殺蟲劑中苯甲醛L-半胱氨酸席夫堿的質(zhì)量濃度增大而增加.

木醋堿殺蟲劑對玉米螟二齡幼蟲的毒殺作用如圖3(B)所示,當(dāng)苯甲醛L-半胱氨酸席夫堿的質(zhì)量濃度為5,10,15,20 mg/mL時,玉米螟幼蟲喂食72 h的校正死亡率分別為44.44%,50.00%,70.00%和77.78%,相對于空白組的3.33%,存在顯著差異(p<0.05).結(jié)果表明當(dāng)木醋堿殺蟲劑中苯甲醛L-半胱氨酸席夫堿質(zhì)量濃度增加時,對玉米螟幼蟲的毒性隨之增加.

木醋堿殺蟲劑對棉鈴蟲二齡幼蟲的毒殺作用如圖3(C)所示,當(dāng)苯甲醛L-半胱氨酸席夫堿的質(zhì)量濃度為5,10,15,20 mg/mL時,棉鈴蟲幼蟲喂食72 h的校正死亡率分別為0%,55.55%,100%和100%,10，15，20 mg/mL處理組相對于空白組存在顯著差異(p<0.05).結(jié)果表明當(dāng)木醋堿殺蟲劑中苯甲醛L-半胱氨酸席夫堿質(zhì)量濃度高于15 mg/mL時,對棉鈴蟲幼蟲具有良好的毒殺活性.

(A)～(C)中不同字母表示結(jié)果有顯著性差異(p<0.05)，PC為康寬.圖3　含不同濃度苯甲醛L-半胱氨酸席夫堿的木醋堿殺蟲劑對于小菜蛾(A)、玉米螟(B) 、棉鈴蟲(C)幼蟲毒殺效果Fig.3The effect of wood vinegar base insecticide contained different concentration of benzaldehyde L-cysteine Schiff base on P. xylostella(A), P. nubilalis(B), H. armigera(C)

由上述結(jié)果可得,當(dāng)木醋堿殺蟲劑中苯甲醛L-半胱氨酸席夫堿質(zhì)量濃度為15 mg/mL時,能夠同時對小菜蛾、玉米螟和棉鈴蟲這3種鱗翅目幼蟲產(chǎn)生良好的毒殺活性,確定最優(yōu)木醋堿殺蟲劑．

2.5木醋堿殺蟲劑對昆明小鼠的毒性影響

以木醋堿殺蟲劑為效應(yīng)物,蒸餾水為陰性對照,分別研究其對昆明小鼠灌胃急性毒理條件及慢性毒理條件下,木醋堿殺蟲劑的生物安全性.使用10 g/kg給藥量對昆明小鼠進(jìn)行急性毒理實驗,觀察4周,無明顯不良反應(yīng),昆明小鼠生長正常.按照國家對于急性毒性實驗的標(biāo)準(zhǔn)(GB 15193.3—2014)[19]規(guī)定,大于5 g/kg區(qū)間范圍內(nèi)半致死濃度對應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)為實際無毒,而實驗中使用劑量為10 g/kg 未出現(xiàn)半致死現(xiàn)象,急性毒性屬于實際無毒.

肝臟：(A)對照組；(B)處理組.腎臟：(C)對照組；(D)處理組.放大20倍.圖4　木醋堿殺蟲劑在慢性毒理研究條件下小鼠的肝臟和腎臟HE染色石蠟切片F(xiàn)ig.4The HE staining paraffin sections of liver and kidney in chronic toxicity research by wood vinegar base insecticide in Kunming mouse

本研究中進(jìn)一步使用3 g/kg的灌胃劑量初步探究了木醋堿殺蟲劑的慢性毒性．在整個飼喂過程中,對昆明小鼠的行為進(jìn)行仔細(xì)觀察記錄,灌胃期間昆明小鼠飲食正常,活動活躍,對照組和木醋堿殺蟲劑處理組無明顯差異.通過對肝臟和腎臟的HE染色石蠟切片進(jìn)行比較(圖4),發(fā)現(xiàn)木醋堿殺蟲劑處理組并無明顯毒理變化.

3　結(jié)　論

本研究中木醋堿殺蟲劑對蘑菇酪氨酸酶有較強的抑制作用,其IC50為0.53 mg/mL,對小菜蛾、玉米螟、棉鈴蟲這3種鱗翅目二齡幼蟲具有較好的毒殺效果,同時其急性毒性和慢性毒性均符合國家食品標(biāo)準(zhǔn)中實際無毒的計量標(biāo)準(zhǔn),在農(nóng)業(yè)領(lǐng)域具有良好的應(yīng)用前景．本研究應(yīng)用酪氨酸酶抑制劑篩選模型開發(fā)新穎殺蟲劑也為殺蟲劑篩選提供了新的思路.

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Insecticidal Activity for Benzaldehyde L-Cysteine Schiff Base Combined with Xylosma Wood Vinegar

JIA Yulong1,ZHENG Jing1,CHEN Zhenxiong1,NAN Xiujie2,SUN Yue3,CHEN Qingxi1*

(1.School of Life Sciences,Xiamen University,Xiamen 361102,China;2.Environmental Bureau of Xinfu District in Fushun of Liaoning Province,Fushun 113000,China;3.Qingyuan Environment Energy Technology Co.,Ltd. of Liaoning Province,Fushun 113006,China)

The wood vinegar was based on by-product in the process of firingXylosmacharcoal.The wood vinegar base insecticide was a new green type insecticide.We mixed the rectificated wood vinegar,benzaldehydeL-cysteine Schiff base and salicylic acid to make the wood vinegar base insecticide proportionally.The inhibition on tyrosinase in screening model of benzaldehydeL-cysteine Schiff base,rectificated wood vinegar and the wood vinegar base insecticide were determined.The half maximal inhibitory concentration (IC50) were 15,2.53,0.53 mg/mL,respectively.Additionally,the insecticidal effects onPlutellaxylostella,PyraustanubilalisandHelicoverpaarmigeraof wood vinegar base insecticide were investigated.The results showed that the wood vinegar base insecticide could effectively kill the second-stage juveniles ofP.xylostella,P.nubilalisandH.armigera. The results showed that the wood vinegar base insecticide had insecticidal effect.The acute toxicological results showed that the wood vinegar base insecticide had no toxicity.In the chronic toxicological experiment,the group was given a gavage of 3 g/kg with the wood vinegar base insecticide in 3 months.We took the liver and kidney in paraffin section and HE staining after executing the Kunming mouse with cervical dislocation method.The results showed that the wood vinegar base insecticide had no chronic toxicity.In conclusion,the wood vinegar base insecticide could not only inhibit the tyrosinase acitivity,but also show good insecticidal effects onP.xylostella,P.nubilalisandH.armigerawith low toxicity.The wood vinegar base insecticide had shown good application prospects in agricultural areas.

L-cysteine Schiff base;wood vinegar;tyrosinase;insecticide;toxicology

10.6043/j.issn.0438-0479.201602101農(nóng)業(yè)生產(chǎn)專題

2016-02-26錄用日期：2016-07-06

國家自然科學(xué)基金(31371857)

chenqx@xmu.edu.cn

賈玉龍,鄭靜,陳振雄，等.苯甲醛L-半胱氨酸席夫堿聯(lián)合柞木木醋液的殺蟲活性[J].廈門大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版)，2016,55(5)：769-774.

JIA Y L,ZHENG J,CHEN Z X,et al．Insecticidal activity for benzaldehydeL-cysteine Schiff base combined withXylosmawood vinegar[J].Journal of Xiamen University(Natural Science)，2016,55(5)：769-774．(in Chinese)

S 435.6

A

0438-0479(2016)05-0769-06