大鼠肝纖維化和肝硬化MR-PWI參數(shù)與CD34和a-SMA的相關(guān)性

孟令平， 王國光， 胡明秀， 張洪， 官兵， 洪玉萍

?

·實(shí)驗(yàn)研究·

大鼠肝纖維化和肝硬化MR-PWI參數(shù)與CD34和a-SMA的相關(guān)性

孟令平， 王國光， 胡明秀， 張洪， 官兵， 洪玉萍

目的：探討大鼠肝纖維化、肝硬化模型磁共振灌注成像(MR-PWI)參數(shù)的意義及其與CD34、a-SMA的相關(guān)性。方法：清潔級SD大鼠隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組(n=84)和對照組(n=16)。實(shí)驗(yàn)組采用硫代乙酰胺(TAA)腹腔定點(diǎn)注射，每次200 mg/kg，3次/周，對照組同期腹腔注射同劑量的生理鹽水。建模第6～30周后實(shí)驗(yàn)租和對照組分批次行肝臟磁共振常規(guī)掃描及灌注成像。病理上將鼠肝損傷分為肝纖維化0期、Ⅰ～Ⅱ期和Ⅲ～Ⅳ期、肝硬化結(jié)節(jié)期，并與灌注參數(shù)TTP、WIR、WOR和免疫組化指標(biāo)CD34、a-SMA表達(dá)作對照。結(jié)果：共有69只大鼠(實(shí)驗(yàn)組57只，對照組14只)成功獲取MR-PWI參數(shù)，成功率69%(69/100)。實(shí)驗(yàn)組門靜脈和肝實(shí)質(zhì)的TTP隨著肝纖維化及肝硬化進(jìn)展而延長，而門靜脈WIR、WOR在肝纖維化Ⅰ～Ⅱ期和Ⅲ～Ⅳ期下降不明顯，肝硬化結(jié)節(jié)期則明顯下降；肝實(shí)質(zhì)WIR、WOR則隨著肝纖維化、肝硬化進(jìn)展而逐漸下降，各期之間差異有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)；各灌注參數(shù)與肝纖維化病理分期之間有較好相關(guān)性(P<0.05)。CD34和a-SMA表達(dá)在肝纖維化Ⅰ～Ⅱ期不明顯，肝纖維化Ⅲ～Ⅳ期和肝硬化結(jié)節(jié)期則明顯表達(dá)，與對照組比較，實(shí)驗(yàn)組肝纖維化Ⅲ～Ⅳ期和肝硬化期CD34、SMA表達(dá)均顯著增加(P<0.01)。門靜脈及肝實(shí)質(zhì)灌注參數(shù)TTP、WIR、WOR和CD34、a-SMA表達(dá)有相關(guān)性(P<0.05)。結(jié)論：門靜脈和肝實(shí)質(zhì)TTP、WIR、WOR與大鼠肝纖維化、肝硬化不同分期之間有相關(guān)性，與CD34、a-SMA表達(dá)有相關(guān)性。

磁共振成像； 灌注加權(quán)成像； 肝纖維化； 肝硬化； 動物模型； 病理； 免疫組化

材料與方法

1.實(shí)驗(yàn)動物與分組

選用清潔級SD大鼠100只(上海睿太莫斯生物科技有限公司提供)，雄性，鼠齡6～7周，體質(zhì)量180～200 g，在上海農(nóng)林職業(yè)技術(shù)學(xué)院動物實(shí)驗(yàn)中心按標(biāo)準(zhǔn)方法飼養(yǎng)。大鼠隨機(jī)分為兩組：實(shí)驗(yàn)組(n=84)，硫代乙酰胺 (上海凌峰化學(xué)試劑有限公司)200 mg/kg，腹腔注射，3次/周，連續(xù)8周；第9周開始，增加20%，連續(xù)至第25周；第26周開始，再增加20%，連續(xù)至第30周。對照組(n=16)，正常喂飼，與實(shí)驗(yàn)組同樣時間于腹腔內(nèi)注射同量生理鹽水。

2.磁共振檢查

Philips Achive 1.5T超導(dǎo)型MR儀，小動物專用線圈。腹腔內(nèi)注射10%水合氯醛(2 mg/kg)麻醉大鼠，棉紗布輕裹動物腹部后，頭先進(jìn)，俯臥置于線圈中央，試驗(yàn)組大鼠(6±1)～(30±1)周后批次(1～5只/次)、對照組同期(1～2只/次)行磁共振常規(guī)橫軸面T1WI、抑脂T2WI檢查。

灌注成像技術(shù)：抑脂THRIVE(3D T1-TFE)序列，TR 7.5 ms，TE 3.7 ms，翻轉(zhuǎn)角10°，采集次數(shù)1，矩陣128×128，層厚2.0 mm，層間隔0 mm。全肝掃描層數(shù)10層，共55個時相，掃描時間120 s。由鼠尾靜脈經(jīng)留置針團(tuán)注對比劑Gd-DTPA(0.5 mmol/mL；北陸藥業(yè))0.1 mL，隨后續(xù)注0.5 mL生理鹽水沖管，注射對比劑同時開始PWI掃描。原始灌注圖像傳入后處理工作站，采用“Basic T1 Perfusion”軟件包，分別選擇腹主動脈、門靜脈和肝實(shí)質(zhì)作為興趣區(qū)(ROI)，自動繪制時間-信號強(qiáng)度曲線(time-signal intensity curve，TIC)。觀察并記錄：峰值時間(time to peak，TTP)，T0和峰值強(qiáng)度時間(T1)之間的時間；流入速率(wash in rate，WIR)，T0和峰值強(qiáng)度時間T1之間的最大斜率。流出速率(wash out rate，WOR)，峰值強(qiáng)度時間T1和測量末端之間的最大斜率。

3.病理學(xué)檢查

所有大鼠均于全麻下切下肝組織，經(jīng)10%甲醛固定后石蠟切片，行HE染色和Masson染色，2位病理醫(yī)師鏡下觀察肝匯管區(qū)、肝竇壁及中央靜脈等處膠原纖維增生情況。按文獻(xiàn)[6]判斷肝纖維化程度：0級為無成纖維細(xì)胞增生，膠原纖維量正常；Ⅰ級為匯管區(qū)擴(kuò)大，少量成纖維細(xì)胞增生，膠原纖維輕度增生；Ⅱ級為匯管區(qū)內(nèi)成纖維細(xì)胞增生，膠原纖維呈條狀延伸；Ⅲ級為匯管區(qū)內(nèi)成纖維細(xì)胞大量增生，膠原纖維形成小葉纖維隔；Ⅳ級為伴肝硬化假小葉形成。肝硬化結(jié)節(jié)期：大體觀彌漫肝結(jié)節(jié)(直徑≥2 mm)及鏡下增生結(jié)節(jié)。

圖5為Activiti引擎的系統(tǒng)服務(wù)結(jié)構(gòu)圖，給出了引擎提供的所有功能組件。ProcessEngineConfiguration是配置管理類，管理的對象包括ProcessEngine、XXservice和數(shù)據(jù)庫session等。對于ProcessEngineConfiguration的配置，Activiti默認(rèn)從activiti.cfg.xml中讀取，也可從Spring的配置文件中讀取。ProcessEngine提供有很多工作流方法的服務(wù)，都是線程安全的，下面對各服務(wù)的功能進(jìn)行介紹。

4.免疫組化方法

SP法進(jìn)行CD34、a-SMA免疫組化染色。鏡下按每張切片陽性細(xì)胞比例及著色深淺計分，進(jìn)行半定量分析。陽性細(xì)胞著色判定(A) ：低于5%為0分，5%～25%為1分，26%～50%為2 分，51%～75%為3分，高于75%為4分；陽性強(qiáng)度判定(B)：無著色或與背景均勻一致的呈淡黃色為0分，淺棕黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分。根據(jù)兩項(xiàng)指標(biāo)的積分?jǐn)?shù)(積分= A×B)進(jìn)行結(jié)果判定。結(jié)果由2名病理醫(yī)師雙盲判定，意見不一致時，由資深病理醫(yī)師最終確定。

5.統(tǒng)計學(xué)處理

結(jié)　果

1．MR-PWI成功率及病理結(jié)果

建模過程中，55只實(shí)驗(yàn)組大鼠和14只對照組大鼠成功完成肝臟MR-PWI檢查，成功率分別為65%(55/84)和87%(14/16)。55只實(shí)驗(yàn)組大鼠肝臟病理學(xué)分期：肝纖維化0期14只，肝纖維化Ⅰ～Ⅱ期19只，肝纖維化Ⅲ～Ⅳ期22只，肝硬化結(jié)節(jié)期14只。

2．MR-PWI表現(xiàn)

共69只大鼠獲較滿意肝灌注圖像。注射對比劑后PWI圖像上腔靜脈、腹主動脈、門靜脈顯影，對照組肝實(shí)質(zhì)灌注較均勻(圖1)。肝纖維化期大鼠門靜脈灌注曲線呈速升緩降型，峰值出現(xiàn)時間較主動脈晚，幅度較??；肝實(shí)質(zhì)灌注曲線穩(wěn)定，波動小，動脈期上升緩慢(圖2)。肝硬化結(jié)節(jié)期門靜脈灌注曲線上升較快并達(dá)峰值，下降慢略呈鋸齒峰；肝實(shí)質(zhì)灌注曲線上升緩慢；肝硬化結(jié)節(jié)曲線上升較快，曲線穩(wěn)定(圖3)。

3.門靜脈灌注參數(shù)變化

注：經(jīng)t檢驗(yàn)，肝纖維化各期與對照組比較有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)。

門靜脈TTP隨肝纖維化分期逐漸增加而增加，肝纖維化Ⅰ～Ⅱ期、Ⅲ～Ⅳ期、肝硬化結(jié)節(jié)期分別為(75.10±18.71)s、(83.79±23.24)s、(142.76±73.35)，與對照組(50.92±15.21)s相比，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01，表1)。隨著肝纖維化分期逐漸增加，門靜脈灌注曲線最大上升斜率和最大下降斜率逐漸降低，對照組為(202.94±58.60)s和(51.64±18.10)/s；肝纖維化Ⅰ～Ⅱ期均值為(181.27±59.77)和(34.89±12.05)/s，肝纖維化Ⅲ～Ⅳ期為(162.96±91.15)和(43.52±26.32)/s，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。而在肝硬化結(jié)節(jié)期，門靜脈灌注曲線最大上升斜率和最大下降斜率為(41.10±35.68)和(10.84±7.33)/s，與對照組相比，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。

4.肝實(shí)質(zhì)灌注參數(shù)變化

肝實(shí)質(zhì)TTP隨肝纖維化分期逐漸增加而增加，肝纖維化Ⅰ～Ⅱ期、Ⅲ～Ⅳ期、肝硬化結(jié)節(jié)期分別為(88.27±13.91)s、(82.82±23.81)s、(183.54±84.19)，與對照組(41.81±21.19)s相比，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01，表2)。而WIR和WOR則隨肝纖維化分期逐漸增加而遞減，在肝硬化結(jié)節(jié)期遞減最明顯，對照組為(126.11±44.54)和(42.95±17.02)L/s；肝纖維化Ⅰ～Ⅱ期為(87.82±30.26)和(20.08±9.30) L/s，肝纖維化Ⅲ～Ⅳ期為(91.95±40.04)和(18.82±10.29) L/s，肝硬化結(jié)節(jié)期為(26.06±15.68)和(4.76±2.93)L/s，與對照組相比，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。

注：經(jīng)t檢驗(yàn)，肝纖維化各期與對照組比較有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)。

5．MR-PWI灌注參數(shù)與肝纖維化病理分期的相關(guān)性

門靜脈和肝實(shí)質(zhì)TTP與肝纖維化分期呈正相關(guān)(r=0.686、0.681，P<0.01)，門靜脈WIR、WOR和肝實(shí)質(zhì)WIR、WOR與肝纖維化分期呈負(fù)相關(guān)(r=-0.506、-0.507、-0.551、-0.758，P<0.01)。

6.CD34和a-SMA在肝纖維化分期中的表達(dá)

CD34在正常大鼠肝竇小血管內(nèi)皮細(xì)胞呈棕黃色陽性表達(dá)(圖4)：隨著肝纖維化程度加重，陽性表達(dá)范圍逐漸擴(kuò)大，呈多量棕褐色、竇壁連續(xù)陽性表達(dá)(圖5)。肝硬化結(jié)節(jié)期， CD34也呈較明顯陽性表達(dá)(圖6)；a-SMA 在對照組僅表達(dá)于小血管(圖7)；在肝纖維化期呈長梭形陽性表達(dá)(圖8)，肝硬化結(jié)節(jié)期的a-SMA肝內(nèi)表達(dá)明顯(圖9)。與對照組比較，肝纖維化組和肝硬化組的CD34、a-SMA之間的陽性表達(dá)差異見表3。

7.灌注參數(shù)與CD34、a-SMA表達(dá)的相關(guān)性

門靜脈和肝實(shí)質(zhì)TTP與CD34、a-SMA呈正相關(guān)(P<0.05，表4)；門靜脈和肝實(shí)質(zhì)WIR、WOR與CD34、a-SMA呈負(fù)相關(guān)(P<0.05，表4)。

討　論

灌注加權(quán)成像(perfusion weighted imaging，PWI)能夠觀察肝臟微循環(huán)血流動力學(xué)變化，并對組織活性和功能進(jìn)行評價[1-2]，本研究以TAA藥物誘導(dǎo)大鼠肝纖維化、肝硬化模型為實(shí)驗(yàn)對象，采用對比劑團(tuán)注示蹤法進(jìn)行檢查，該方法能夠反映組織血液灌注情況，從而間接評價組織微血管分布情況[3-5]；免疫組化指標(biāo)CD34、a-SMA也能夠反映組織微血管密度和竇性毛細(xì)血管化，因此，本研究結(jié)合對肝纖維化、肝硬化CD34、a-SMA的觀察，從而探討PWI參數(shù)及免疫組化指標(biāo)對肝病損害程度的診斷效能。

表3　肝纖維化各期a-SMA、CD34表達(dá)與對照組比較

注：經(jīng)t檢驗(yàn)，肝纖維化各期與對照組比較有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)。

表4　門靜脈和肝實(shí)質(zhì)灌注參數(shù)與CD34、a-SMA的相關(guān)性

正常肝組織主要為門靜脈供血，肝臟TIC曲線呈緩升緩降的特點(diǎn)，隨著肝纖維化、肝硬化發(fā)展，TIC曲線也逐漸出現(xiàn)速升緩降變化。灌注參數(shù)從不同角度反映了肝組織血流灌注情況，MTT代表對比劑通過組織所用時間，正常肝組織對比劑通過時間短，而肝纖維化、肝硬化期則使通過時間逐漸延長，其機(jī)理可能是肝纖維組織增生，假小葉形成造成肝血流異常，肝竇毛細(xì)血管化，不成對小動脈增多，竇后阻塞等，導(dǎo)致血管狹窄、閉塞，血流減慢，從而導(dǎo)致MTT時間延長；WIR代表由血管增強(qiáng)開始到增強(qiáng)峰值的斜率，WOR代表由血管增強(qiáng)峰值到第一循環(huán)結(jié)束時的斜率，兩者都是單位時間內(nèi)對比劑流入或流出引起組織信號升高或降低幅度和速度的改變，其變化程度受組織內(nèi)對比劑濃度的高低、血管通透性及血流速度等多項(xiàng)因素影響[6-11]，因此，肝纖維化、肝硬化不同時期的斜率參數(shù)變化均低于正常肝組織。本實(shí)驗(yàn)顯示TTP、WIR、WOR參數(shù)隨著肝纖維化程度加重呈較為明顯的相關(guān)性，其中，TTP為正相關(guān)，WIR、WOR為負(fù)相關(guān)，與文獻(xiàn)報道一致[7，9]；但由于檢查設(shè)備不同，灌注參數(shù)的表達(dá)也不盡相同，肝臟為雙重血供，其灌注參數(shù)包括肝動脈和門靜脈系統(tǒng)，肝動脈、門靜脈灌注量以及肝的總灌注量等，其應(yīng)用范圍和定量分析不盡相同，對肝纖維化的診斷價值也不盡一致[12]。本實(shí)驗(yàn)受到檢查設(shè)備軟件限制，僅僅半定量分析了灌注參數(shù)TTP、WIR、WOR在不同時期肝纖維化、肝硬化中的數(shù)值變化，有其局限性，仍需進(jìn)一步深入研究。

CD34、a-SMA均代表微血管密度和血管形成，文獻(xiàn)認(rèn)為肝纖維化、肝硬化發(fā)生、發(fā)展過程與血供改變和肝竇毛細(xì)血管化有較為明顯的一致性[13-16]，本研究選擇免疫組化指標(biāo)CD34、a-SMA，便于觀察肝纖維化、肝硬化時期的血供及血流變化情況，從而分析判斷肝纖維化、肝硬化進(jìn)展程度。肝纖維化主要病理改變是肝內(nèi)細(xì)胞外間質(zhì)(extracellular matrix，ECM)過度合成和異常沉積，從而導(dǎo)致肝纖維化，而肝星狀細(xì)胞(hepatic stellate cell，HSC)是ECM 的主要來源，當(dāng)HSC 被激活并轉(zhuǎn)化為肌成纖維細(xì)胞即表達(dá)a-SMA，并合成大量ECM，因此HSC 活化增殖被認(rèn)為是肝纖維化形成的中心環(huán)節(jié)，其中a-SMA是活化HSC的特異性標(biāo)志物，其表達(dá)強(qiáng)度與肝纖維化分期呈正相關(guān)[16-17]，因此，將a-SMA表達(dá)可客觀反映肝纖維化、肝硬化嚴(yán)重程度。肝纖維化早期，a-SMA表達(dá)主要發(fā)生在擴(kuò)大的匯管區(qū)以及肝竇周隙細(xì)胞區(qū)域；隨著肝纖維化程度加重，a-SMA表達(dá)也逐漸明顯，肝硬化晚期出現(xiàn)新生及不成對的血管，形成較多閉塞血管及膽管纖維瘢痕，其纖維隔內(nèi)的a-SMA表達(dá)呈強(qiáng)陽性，動物實(shí)驗(yàn)表明，隨著造模時間延長，a-SMA表達(dá)與肝纖維化、肝硬化嚴(yán)重程度呈正相關(guān)，與文獻(xiàn)報道一致[16]。正常肝臟血竇不表達(dá)血管相關(guān)抗原，但隨著肝纖維化及肝硬化甚至癌變，各種血管相關(guān)性抗原表達(dá)逐漸明顯，一般認(rèn)為這種變化與肝竇毛細(xì)血管化有關(guān)。本研究結(jié)果也證實(shí)隨著肝損傷的進(jìn)展，肝竇中各種血管相關(guān)性抗原表達(dá)逐漸明顯，CD34在肝纖維化、肝硬化血竇中表達(dá)逐漸增加，其陽性表達(dá)與微血管密度范圍有關(guān)，正常肝實(shí)質(zhì)為陰性或僅呈弱陽性，隨著肝纖維化、肝硬化進(jìn)展，肝竇CD34陽性表達(dá)明顯增加，肝硬化結(jié)節(jié)晚期表現(xiàn)為彌漫分布的強(qiáng)陽性表達(dá)，反映了CD34的陽性表達(dá)與肝纖維化、肝硬化嚴(yán)重程度的相關(guān)性，本實(shí)驗(yàn)結(jié)果與文獻(xiàn)報道一致[18-19]。

門靜脈與肝實(shí)質(zhì)灌注參數(shù)以及免疫組化指標(biāo)均能夠反映肝纖維化、肝硬化發(fā)展的嚴(yán)重程度，二者在肝纖維化、肝硬化分期判斷方面有一定的相關(guān)性，本組實(shí)驗(yàn)得出灌注參數(shù)與CD34、a-SMA之間也有一定相關(guān)性。因此，兩種不同檢測指標(biāo)均能反映肝纖維化、肝硬化的發(fā)展嚴(yán)重程度，為臨床判斷病情提供了較為可靠的依據(jù)。本研究存在不足之處：兩種指標(biāo)均為半定量數(shù)據(jù)，有一定的主觀偏差，并且，受測量方法及設(shè)備參數(shù)限制，其遠(yuǎn)期判斷效果仍有待于進(jìn)一步驗(yàn)證。

[1]De Robertis R，D'Onofrio M，Noninvasive ED，et al.Diagnosis of cirrhosis:a review of different imaging modalities[J].World J Gastroenterol,2014,20(23):7231-7241.

[2]Fischer MA，Donati OF，Reiner CS，et al.Feasibility of semiquantitative liver perfusion assessment by ferucarbotran bolus injection in double-contrast hepatic MRI[J].J Magn Reson Imaging，2012，36(1):168-176.

[3]華曉萍，張莉，黃利，等.兩種實(shí)驗(yàn)性肝纖維化大鼠模型肝臟組織學(xué)特點(diǎn)的比較研究[J].中國臨床藥理學(xué)與治療學(xué)，2014，19(7)：741-751.

[4]Liu Y，Meyer C，Xu CF，et al.Animal models of chronic liver diseases[J].Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol，2013，304(5)：G449-G468.

[5]薛改，劉建芳，閆成，等.硫代乙酰胺誘導(dǎo)大鼠持久性肝纖維化模型的制備[J].世界華人消化雜志，2015，23(12)：1937-1942.

[6]Kanematsu M，Goshima S，Watanabe，et al.Difusion/perfusion MR imaging of the liver：practice，challenges，and future[J].Magn Reson Med Sci，2012，11(3):151-161.

[7]劉鑫，郭啟勇，廖偉，等.肝纖維化磁共振灌注成像的初步實(shí)驗(yàn)研究[J].中國臨床醫(yī)學(xué)影像雜志,2009,20(6):442-450.

[8]Lee JH，Park MJ，Kim YC，et al.Assessment of angiogenesis of hepatocellular carcinoma using dynamic contrast enhanced MR and histopathologic correlation in an experimental rat model[J].Hepatogastroenterology，2014，61(130):447-452.

[9]黎鋼，沈比先，譚四平，等.全肝MR容積動態(tài)增強(qiáng)掃描診斷肝纖維化的初步研究[J].中國CT和MRI雜志，2015，13(4)：59-62.

[10]Guan S，Zhao WD，Zhou KR，et al.Assessment of emodynamics in precancerous lesion of hepatocellular carcinoma:Evaluation with MR perfusion[J].World J Gastroenterol，2007，13(8):1182-1186.

[11]梁堅豪，趙繼泉，曾惠良，等.磁共振灌注成像對肝硬化增生性結(jié)節(jié)與小肝癌的鑒別診斷[J].臨床醫(yī)學(xué)工程，2012，19(11)：1863-1865.

[12]胡曉峰，劉斌，錢銀鋒，等.磁共振灌注成像對肝纖維化的實(shí)驗(yàn)性研究[J].放射學(xué)實(shí)踐，2008，23(10)：1071-1075.

[13]Elpek GO.Angiogenesis and liver fibrosis[J].World J Hepatol，2015，7(3)：377-391.

[14]Vanheule E，Geerts AM，Huysse JV，et al.An intravital microscopic study of the hepatic microcirculation in cirrhotic mice models:relationship between fibrosis and angiogenesis[J].Int J Exp Pathol，2008，89(6):419-432.

[15]Lee SJ，Kim KH，Park KK.Mechanisms of fibrogenesis in liver cirrhosis:the molecular aspects of epithelial-mesenchymal transition[J].World J Hepatol，2014，6(4):207-216.

[16]李龑杼，林楠，盧逸，等.活化態(tài)肝星狀細(xì)胞調(diào)控肝細(xì)胞癌微血管形成的機(jī)制[J].中華肝臟外科手術(shù)學(xué)電子雜志，2014，3(3):178-182.

[17]李亞萍，黨雙鎖，翟嵩，等.NF-κB、α-SMA 及TGFβ1 在實(shí)驗(yàn)性肝損傷中的表達(dá)[J].臨床肝膽病雜志，2011，27(11)：1207-1210.

[18]Sharma M，Rao PN，Sasikala M，et al.Autologous mobilized peripheral blood CD34+ cell infusion in non-viral decompensated liver cirrhosis[J].World J Gastroenterol，2015，21(23):7264-7271.

[19]Gligorijevi J，Djordjevi B，Petrovi A，et al.Expression of CD34 in cirrhotic liver-reliance to dedifferentiation[J].Vojnosanit Pregl，2010，67(6):459-462.

The correlation of magnetic resonance perfusion parameters and CD34、 a-SMA of liver fibrosis and cirrhosis in rats

MENG Ling-ping,WANG Guo-guang,HU Ming-xiu,et al.

Department of Radiology,Jinshan Branch,Shanghai Sixth People's Hospital,Shanghai 201599,China

Objective:To study the value of magnetic resonance perfusion-weighted imaging (PWI) parameters in rat models with liver fibrosis and cirrhosis,as well as their correlation with CD34,a-SMA expression.Methods:One hundred clear Sprague-Dawley (SD) male rats were randomly divided into experimental group (n=84) and control group (n=16).Thioacetamide (TAA) intraperitoneal injection,200mg/kg,3 times per week were performed in experimental group;while,0.9% sodium chloride solution of the same volume was injected into the abdominal cavity in control group.The rats both in experimental and control groups underwent conventional MRI and PWI on the 6～30th weekend after the modeling.Liver damage was divided into liver fibrosis stage 0,stage Ⅰ～Ⅱ,stage Ⅲ～Ⅳ,nodular cirrhosis pathologically.Correlation of time to peak (TTP),wash-in rate (WIR),wash-out rate (WOR) and CD34、 a-SMA expression in different stages of liver lesion were analyzed.Results:Totally sixty-nine rats including experimental group (n=57) and control group (n=14) had MR perfusion study performed successfully，with the success rate as 69% (69/100).In experimental group,TTP of portal vein and liver parenchyma prolonged along with the progress of liver fibrosis and cirrhosis，while WIR，WOR of portal vein were not decreased obviously in liver fibrosis stage Ⅰ～Ⅱ and Ⅲ～ Ⅳ,however,which decreased significantly in cirrhosis.The WIR,WOR of liver parenchyma declined gradually with the progress of liver fibrosis and cirrhosis,with significant statistic difference in different stages (P<0.05).The perfusion parameters showed correlation with the pathologic stages of liver fibrosis (P<0.05).CD34 and a-SMA expression were not obvious in liver fibrosis stage Ⅰ～Ⅱ,while which were significantly expressed in liver fibrosis stage Ⅲ～ Ⅳ and cirrhosis.Compared with the control group,CD34,SMA expression of experimental group stage Ⅲ～Ⅳ and cirrhosis increased significantly,with statistic difference (P<0.05).TTP,WIR,WOR and CD34,a - SMA expression in portal vein and liver parenchyma had significant correlation (P< 0.01).Conclusion:The TTP,WIR,WOR of portal vein and hepatic parenchymal showed good correlation in different stages of liver fibrosis and cirrhosis in rats as well as showing,correlation with CD34,a-SMA expression.

Magnetic resonance imaging； Perfusion weighted imaging； Liver fibrosis； Liver cirrhosis； Animal models； Pathology； Immunohistochemical

201599上海，上海市第六人民醫(yī)院金山分院放射科(孟令平、王國光、胡明秀、張洪)，病理科(官兵、洪玉萍)

孟令平(1963-)，男，湖北十堰人，碩士，主任醫(yī)師，主要從事腹部影像診斷和介入治療工作。

上海市科委醫(yī)學(xué)引導(dǎo)類項(xiàng)目基金(12119b1400)

R445.2； R575.2

A

1000-0313(2016)07-0580-06

10.13609/j.cnki.1000-0313.2016.07.002

2015-12-28)