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    不孕癥和自然流產(chǎn)患者染色體核型異常分析

    2016-10-14 05:32:40郭彥偉溫莉娟趙顯杰趙慧敏
    中外醫(yī)療 2016年24期
    關(guān)鍵詞:檢測

    郭彥偉,溫莉娟,趙顯杰,趙慧敏

    1.內(nèi)蒙古包鋼醫(yī)院檢驗(yàn)科,內(nèi)蒙古包頭 014010;

    2.內(nèi)蒙古包鋼醫(yī)院心血管內(nèi)科,內(nèi)蒙古包頭 014010

    不孕癥和自然流產(chǎn)患者染色體核型異常分析

    郭彥偉1,溫莉娟1,趙顯杰2,趙慧敏1

    1.內(nèi)蒙古包鋼醫(yī)院檢驗(yàn)科,內(nèi)蒙古包頭014010;

    2.內(nèi)蒙古包鋼醫(yī)院心血管內(nèi)科,內(nèi)蒙古包頭014010

    目的 分析評價不孕癥和自然流產(chǎn)患者染色體核型分布的關(guān)系。方法 整群收集該院2012年1月—2015年12月行外周血染色體檢查的不孕癥和自然流產(chǎn)患者416例進(jìn)行G顯帶染色體核型分析,發(fā)現(xiàn)異染色區(qū)異常病例進(jìn)行C顯帶確認(rèn),發(fā)現(xiàn)隨體及隨體柄異常進(jìn)行N顯帶確認(rèn)。結(jié)果在對該院就診的不孕癥和自然流產(chǎn)患者核型分析檢查的416例樣品中,共檢出的51例染色體異常核型和2例性發(fā)育異常病例,總異常率為12.26%。51例染色體異常核型中常染色體結(jié)構(gòu)異常有34例;異染色區(qū)多態(tài)性9例;性染色體結(jié)構(gòu)異常4例。染色體數(shù)目異常4例,其中1例為嵌合型數(shù)目異常。結(jié)論染色體核型異常與不孕癥和自然流產(chǎn)密切相關(guān),也是出生異常胎兒的重要原因,為達(dá)到降低出生人口缺陷率優(yōu)生優(yōu)育的目標(biāo)應(yīng)進(jìn)行必要的遺傳學(xué)咨詢、產(chǎn)前篩查、產(chǎn)前診斷。

    不孕癥;自然流產(chǎn);染色體核型

    [Abstract]Objective Analysis and evaluation of the relationship between infertility and spontaneous abortion karyotype distribution.Methods Group selection 416 cases of natural infertility and abortion cases collected in our hospital from January 2012 to December 2015 were peripheral blood chromosome G-banding karyotype,abnormal cases heterochromatin zones C banding confirmed the body was found with the body and handle exceptions with the N-banding confirmation.Results In 416 cases of infertility and spontaneous abortion samples karyotyping examination of our hospital,a total of 51 cases of detected abnormal karyotypes and two cases of dysplasia cases,the total abnormal rate was 12.26%.51 cases of abnormal karyotypes often chromosome structural abnormalities in 34 cases;heterochromatin polymorphism 9 cases;sex chromosome structural abnormalities in 4 cases.The number of chromosome abnormalities in 4 cases,1 case of abnormal number of chimeric.Conclusion Karyotype abnormality associated with infertility and spontaneous abortion,birth is an important reason for abnormal fetus,to achieve the goal of reducing the rate of prenatal and postnatal care of Birth Defects should undertake the necessary genetic counseling,prenatal screening,prenatal diagnosis.

    [Key words]Infertility;Spontaneous abortion;Chromosome karyotype

    染色體異常是染色體病中患者表現(xiàn)正常的一類,是不孕癥和自然流產(chǎn)患者重要的遺傳原因,據(jù)人類遺傳學(xué)家夏家輝等人統(tǒng)計每106~107對夫婦中就有1位染色體異常攜帶者,也有報道中國一般人群中染色體異常率為0.5%~1.0%[1],在不孕與流產(chǎn)夫婦中,染色體異常攜帶者占3%~6%[2]。染色體異常中的異染色區(qū)多態(tài)性與不孕和流產(chǎn)的相關(guān)性在目前的相關(guān)研究報道中存在不同的觀點(diǎn)。該研究對該院2012年1月—2015年12月行外周血染色體檢查的不孕癥和自然流產(chǎn)患者416例進(jìn)行染色體核型分析檢查,以探討染色體核型異?;颊呷旧w核型分布、染色體異常與不孕癥和自然流產(chǎn)的相關(guān)性以及異染色區(qū)多態(tài)性與不孕癥和自然流產(chǎn)的相關(guān)性,為遺傳咨詢提供參考,以達(dá)到降低出生人口缺陷率優(yōu)生優(yōu)育的目標(biāo),現(xiàn)報道如下。

    1 資料與方法

    1.1一般資料

    整群收集在該院就診并進(jìn)行外周血染色體檢查的不孕癥和自然流產(chǎn)患者病例,同時對患者進(jìn)行孕產(chǎn)史、接觸史、家族史等可能引起染色體改變的相關(guān)信息詳細(xì)采集。

    1.2方法

    1.2.1 G顯帶無菌操作抽取肘靜脈血2~3 mL,在超凈工作臺中種植于10 mL培養(yǎng)基中,放置37℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)每日混勻1次,培養(yǎng)70~72 h后加入20 ug/mL秋水仙素100 uL混勻后,再繼續(xù)培養(yǎng)2.5 h,1 500 r/min離心10 min吸取掉上清,培養(yǎng)物中加入0.075%KC1溶液10 mL低滲處理30 min,加入2 mL固定液預(yù)固定10 min離心去上清,加入10 mL固定液固定3次,42℃烤片1 h,隔日進(jìn)行顯帶和染色。核型分析:每例至少計數(shù)20個核型,分析5個核型,異常者加大計數(shù)到60個核型,嵌合型病例計數(shù)到100個核型。

    1.2.2 C顯帶新滴玻片42烤片1 h。隔日,60℃的1~5%(過飽和)氫氧化鋇液10~15 min,在60℃的2×SSC液中處理90min時,用自來水沖洗干凈,5%Giemsa染液染色10min。

    1.2.3 N顯帶新滴玻片42烤片1 h。隔日,玻片用4層干凈擦鏡紙(略小于玻片大?。┥w好,置于一干燥培養(yǎng)皿漂于60℃水浴箱水面上,新鮮配制的AgNO3溶液慢慢滴于玻片紙上,直至擦鏡紙呈棕黃色(黑色)為止,輕輕啟開擦鏡紙,將玻片用自來水沖干凈,6%Giemsa染色液染色5 min。發(fā)現(xiàn)異染色區(qū)、著絲粒和隨體異常時進(jìn)行C顯帶或N顯帶分析,根據(jù)ISCN 2013人類細(xì)胞遺傳學(xué)國際命名體制進(jìn)行核型命名。

    2 結(jié)果

    不孕癥和自然流產(chǎn)患者416例病例核型分析,共檢出51例染色體異常核型和2例性腺發(fā)育異常病例,異常率為12.26%。

    51例染色體異常核型中常染色體結(jié)構(gòu)異常有34例,占66.67%,其中平衡易位25例,占總異常率的49.02%;倒位6例,占總異常率的11.76%,其中9號染色體倒位3例。異染色區(qū)多態(tài)性例,占總異常率的,其中1 qh+,2例;9 qh+,2例;16 qh+,1例,Yqh+,1例;Yqh-,3例。性染色體結(jié)構(gòu)異常4例,占總異常率的7.84%,其中X染色體臂間倒位2例,X長臂等臂1例;環(huán)狀X染色體1例。染色體數(shù)目異常4例,占總異常率的7.84%,均為性染色體數(shù)目異常,其中46,XXY,2例;46,XYY,1例;1例核型為45,X[17]/46,XX[83]的嵌合體。染色體結(jié)構(gòu)異常核型包括性染色體結(jié)構(gòu)異常共38例占到總異常率的74.5%。

    表1 染色體異常分布比例情況

    3 討論

    染色體異常無論是男方或女方都可能導(dǎo)致不孕癥及流產(chǎn),不孕癥及流產(chǎn)染色體異常常見得結(jié)構(gòu)異常主要有平衡易位、羅氏易位 、倒位等。染色體數(shù)目異常導(dǎo)致不孕癥及流產(chǎn)常見于性染色體數(shù)目異常常見類型如:45,X;47,XXY;47,XYY以及一些嵌合型病例。常染色體數(shù)目異常導(dǎo)致不孕癥及流產(chǎn)可見于嵌合型染色體核型患者[3]。該文416例患者中共檢出51例異常核型,檢出率為12.26%,與李亞麗等報道檢出率12.6%一致[4]。從檢測結(jié)果可以看到結(jié)構(gòu)異常病例包括性染色體異常共38例占到74.5%說明染色體結(jié)構(gòu)是引起流產(chǎn)、不孕癥的主要細(xì)胞遺傳學(xué)因素,與相關(guān)報道結(jié)果一致[5],這是由于染色體結(jié)構(gòu)異?;颊咴谏臣?xì)胞減數(shù)分裂過程中染色體聯(lián)會時產(chǎn)生異常聯(lián)會結(jié)構(gòu),平衡易位染色體在聯(lián)會時可形成4射體能夠產(chǎn)生18種配子,其中只有1種配子核型正常,1種平衡易位攜帶配子,還有16種染色體結(jié)構(gòu)異常配子,這16種異常配子都可導(dǎo)致流產(chǎn);而倒位核型在聯(lián)會時可形成倒位環(huán)可產(chǎn)生4種配子其中只有1種配子核型正常。由于染色體結(jié)構(gòu)異?;颊弋a(chǎn)生異常配子幾率較大,所以可能發(fā)生不孕和自然流產(chǎn)的概率增大。檢測結(jié)果中發(fā)現(xiàn)9例異染色區(qū)多態(tài)性,占到異常的17.6%,異染色區(qū)多態(tài)性是指在正常人群中超過1%攜帶這類異常,多態(tài)性與不孕癥及流產(chǎn)的相關(guān)性在業(yè)內(nèi)存在2種不同的觀點(diǎn),從報道中也可看出[6-8]。該文認(rèn)為這與染色體檢測的分辨率相關(guān),染色體檢測在320~400條帶階段分辨率在5~10 MB,即染色體檢測是檢測不出小于5 MB變異,甚至一些特殊病例由于缺失或重復(fù)的染色體帶紋處于淺帶區(qū),可能超過10 MB的變異也無法檢測出來。所以染色體檢測中發(fā)現(xiàn)的異染色區(qū)多態(tài)性病例中可能一部分存在微小結(jié)構(gòu)異常,需要更進(jìn)一步進(jìn)行分子水平的檢測如芯片或高通量測序。隨著技術(shù)發(fā)展染色體檢測的優(yōu)勢轉(zhuǎn)變?yōu)闄z測分子技術(shù)無法檢測的染色體結(jié)構(gòu)異常如倒位和易位。而染色體檢測未發(fā)現(xiàn)異?;颊哂峙懦渌?qū)е碌牟辉胁挥颊邞?yīng)建議行分子水平的遺傳學(xué)檢測。

    綜上所述,染色體核型異常與不孕癥和自然流產(chǎn)密切相關(guān),也是出生異常胎兒的重要原因。對不孕癥及流產(chǎn)患者進(jìn)行遺傳咨詢和染色體核型分析是必不可少的,而攜帶有染色體多態(tài)性的患者需要得到足夠的重視,應(yīng)建議進(jìn)行分子水平的檢測。為達(dá)到降低出生人口缺陷率優(yōu)生優(yōu)育的目標(biāo)應(yīng)進(jìn)行必要的遺傳學(xué)咨詢、產(chǎn)前篩查、產(chǎn)前診斷。

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    Infertility And Spontaneous Abortion Abnormal Karyotype Analysis

    GUO Yan-wei1,WEN Li-juan1,ZHAO Xian-jie2,ZHAO Hui-min1
    1.Clinical Laboratory,Baogang Hospital,Baotou,Inner Mongolia,014010 China;2 Department of Cardiology,Baogang Hospital,Baotou,Inner Mongolia,014010 China

    R711

    A

    1674-0742(2016)08(c)-0085-03

    10.16662/j.cnki.1674-0742.2016.24.085

    2016-05-27)

    郭彥偉(1978.1-),男,內(nèi)蒙古商都人,碩士,主管檢驗(yàn)師,研究方向:細(xì)胞遺傳學(xué)。

    溫莉娟(1962.7-),女,內(nèi)蒙古包頭人,本科,副主任技師,研究方向:細(xì)胞遺傳學(xué),E-mail:875499399@qq.com。

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