多囊卵巢綜合征內(nèi)分泌異常與CD8+CD28+/CD8+CD28-T細(xì)胞平衡的關(guān)系*

胡艷紅徐忠芳

多囊卵巢綜合征內(nèi)分泌異常與CD8+CD28+/CD8+CD28-T細(xì)胞平衡的關(guān)系*

胡艷紅①徐忠芳①

目的：研究多囊卵巢綜合癥內(nèi)分泌異常與CD8+CD28+/CD8+CD28-T細(xì)胞平衡的關(guān)系。方法：將在本院就診的60例多囊卵巢綜合征患者分為胰島素抵抗組和非胰島素抵抗組，并選取30例健康女性為對(duì)照組，分別檢測(cè)T細(xì)胞及其細(xì)胞內(nèi)因子、性激素及胰島素水平并做出比較。結(jié)果：三組患者CD8+CD28+T細(xì)胞與IFN-γ含量比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；三組患者CD8+CD28-T細(xì)胞及IL-4含量比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；三組患者的FSH水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；三組患者LH、Insulin和HOMA-IR水平比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論：多囊卵巢綜合征患者的免疫平衡表現(xiàn)為對(duì)CD8+CD28-T細(xì)胞的過(guò)度抑制，因此該細(xì)胞數(shù)量的升高與內(nèi)分泌紊亂及胰島素抵抗密切相關(guān)。

多囊卵巢綜合征； 胰島素抵抗； CD8+CD28+/CD8+CD28-T細(xì)胞； 性激素

First-author’s address：The Maternity and Child Care Hospital of Pingxiang City，Pingxiang 337055，China

多囊卵巢綜合征是一種生殖功能障礙與糖代謝異常并存的內(nèi)分泌紊亂綜合征。因排卵障礙而致不孕則是多囊卵巢綜合征的主要臨床表現(xiàn)，多囊卵巢綜合征的確切病因不詳，目前認(rèn)為是卵巢產(chǎn)生過(guò)多雄激素，而雄激素的過(guò)量產(chǎn)生是由于體內(nèi)多種內(nèi)分泌系統(tǒng)功能異常協(xié)同作用的結(jié)果，其主要癥狀有：肥胖、月經(jīng)失調(diào)、雙側(cè)卵巢增大、多毛、不孕等。也有研究表明部分患者是因?yàn)檫z傳因素導(dǎo)致的多囊卵巢，且多囊卵巢綜合癥發(fā)病呈年輕化傾向，而多囊患者的CD8+T細(xì)胞亞群數(shù)量明顯升高。在本研究中，筆者基于胰島素抵抗的多囊卵巢綜合癥動(dòng)物模型與CD8+T細(xì)胞的相關(guān)性，具體研究CD8+CD28+與CD8+CD28-T細(xì)胞兩個(gè)亞群與多囊卵巢綜合癥患者內(nèi)分泌代謝的關(guān)系［1-2］?，F(xiàn)匯報(bào)如下。

1　資料與方法

1.1一般資料 選取2014年10月-2015年10月在本院婦產(chǎn)科就診的多囊卵巢綜合征患者60例，入組診斷標(biāo)準(zhǔn)為：（1）排卵或者不排卵，表現(xiàn)在月經(jīng)走勢(shì)不正常；（2）超聲檢查卵巢有多囊性改變；（3）雄激素過(guò)高、多毛、痤瘡，或激素水平高。根據(jù)胰島素抵抗指數(shù)（HOMA-IR）進(jìn)行分組（HOMAIR=空腹血胰島素×空腹血糖/22.5），分為胰島素抵抗組（insulin resistance，IR）和胰島素非抵抗組（non insulin resistance，Non-IR），兩組患者各30例，另選取30例體檢健康、體重指數(shù)正常、無(wú)其他內(nèi)分泌疾病的女性為對(duì)照組。IR組年齡20～37歲，平均（32.12±8.23）歲；Non-IR組年齡19～35歲，平均（31.45±7.45）歲；對(duì)照組年齡20～38歲，平均（32.25±8.57）歲，三組觀察對(duì)象一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2檢測(cè)方法

1.2.1T細(xì)胞及其細(xì)胞內(nèi)因子檢測(cè) 三組觀察對(duì)象均在月經(jīng)周期或者黃體酮撤退后出血的第2～3天（閉經(jīng)患者無(wú)時(shí)間限制）空腹?fàn)顟B(tài)下采取肘靜脈血不少于2 mL，保存于2 ℃冰箱，并于24 h內(nèi)進(jìn)行染色檢測(cè)。儀器采用Beckman cuulter cell多色式細(xì)胞檢測(cè)儀，分別檢測(cè)CD8+CD28+殺傷性T細(xì)胞和CD8+CD28-抑制性T細(xì)胞的百分含量。同時(shí)測(cè)量以上兩種T細(xì)胞細(xì)胞內(nèi)因子γ干擾素（interferon-γ，IFN-γ）及白細(xì)胞介素（interleukin-4，IL-4）的百分含量。

1.2.2性激素及胰島素水平的檢測(cè) 使用放射免疫法檢測(cè)外周血清卵泡刺激素（follicle-stimulating hormone，F(xiàn)SH）、黃體生成素（luteinizing hormone，LH）及胰島素（insulin）水平。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料以（）表示，比較采用t檢驗(yàn)或方差分析，計(jì)數(shù)資料采用 χ2檢測(cè)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1CD8+CD28+/CD8+CD28-T細(xì)胞及其細(xì)胞因子比較 三組CD8+CD28+/CD8+CD28-T細(xì)胞及其細(xì)胞因子呈階梯型變化，其中，對(duì)照組的CD8+CD28+T細(xì)胞與IFN-γ含量最高，其次為Non-IR組及IR組，三組之間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；同時(shí)，Non-IR組及IR組CD8+CD28+T細(xì)胞與對(duì)照組比較明顯降低（P＜0.05），且IR組低于Non-IR組（P＜0.05）；Non-IR組及IR組IFN-γ含量均低于對(duì)照組，且IR組低于Non-IR組（P＜0.05）；對(duì)照組CD8+CD28-T細(xì)胞及IL-4含量最低，IR組最高，三組之間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），Non-IR組及IR組含量均高于對(duì)照組，IR組高于Non-IR組（P＜0.05），見(jiàn)表1。

表1　三組CD8+CD28+/CD8+CD28-T細(xì)胞及其細(xì)胞因子比較（）

表1　三組CD8+CD28+/CD8+CD28-T細(xì)胞及其細(xì)胞因子比較（）

組別　CD8+CD28+T細(xì)胞　CD8+CD28-T細(xì)胞　IFN-γ（ng/mL）　IL-4（ng/mL）對(duì)照組（n=30）　13.13±4.19　16.25±6.14　9.84±4.87　15.37±5.45 Non-IR組（n=30）　10.14±3.78　20.26±7.45　6.25±3.26　19.78±7.16 IR組（n=30）　7.96±1.69　23.91±9.89　4.10±2.76　 26.70±10.87

2.2性激素及胰島素水平比較 三組FSH水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），三組間LH、Insulin和HOMA-IR水平比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。Non-IR組及IR組LH水平與對(duì)照組比較均明顯升高（P＜0.05），但Non-IR組與IR組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。Non-IR組患者的血清Insulin水平與對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），IR組患者血清Insulin水平明顯低于Non-IR組及對(duì)照組。IR組及Non-IR組HOMA-IR指數(shù)與對(duì)照組比較明顯升高（P＜0.05），見(jiàn)表2。

表2　三組性激素水平比較和胰島素水平比較（）

表2　三組性激素水平比較和胰島素水平比較（）

組別　FSH（IU/L）LH（IU/L）Insulin（U/L）HOMA-IR對(duì)照組（n=30） 6.58±2.89　9.37±3.87　11.25±4.67 1.37±0.50 Non-IR組（n=30）7.07±3.17 16.17±5.69 10.15±3.96 2.86±0.67 IR組（n=30）　7.56±3.16 18.27±7.26　7.29±2.07　4.28±0.43

3　討論

多囊卵巢綜合征由Stern-Leventhal于1235年首次報(bào)告，其主要表現(xiàn)為因排卵障礙導(dǎo)致不孕，癥狀有月經(jīng)紊亂、閉經(jīng)、多毛、肥胖等，B超可見(jiàn)雙側(cè)卵巢呈多囊改變［3］。多囊卵巢綜合征的治療方案分為有生育要求和無(wú)生育要求兩兩種，對(duì)于無(wú)生育要求的患者可以單獨(dú)使用孕激素和/或與雌激素聯(lián)合使用治療，以誘發(fā)正常的月經(jīng)周期，降低子宮內(nèi)膜不典型增生或內(nèi)膜腺癌的風(fēng)險(xiǎn)。對(duì)于有生育要求的患者治療方向主要為在妊娠試驗(yàn)陰性的基礎(chǔ)上促排和治療基礎(chǔ)性疾病為主。其確切發(fā)病原因不詳，有學(xué)者認(rèn)為與患者體內(nèi)多種內(nèi)分泌系統(tǒng)功能異常造成的雄激素過(guò)高有關(guān)，也有研究表明多囊卵巢綜合征與胰島素抵抗有一定的關(guān)系，胰島素作為體內(nèi)唯一的降血糖的激素，胰島素抵抗可直接導(dǎo)致血糖的代謝紊亂，與其相關(guān)的血脂代謝異常則成為心血管疾病的危險(xiǎn)因素。近年來(lái)，有研究表明CD8+CD28-抑制性T細(xì)胞可能與多囊卵巢綜合征有關(guān)。本文就多囊卵巢綜合征內(nèi)分泌異常與CD8+CD28+/CD8+CD28-T細(xì)胞平衡的關(guān)系展開(kāi)研究［4-6］。

T細(xì)胞作為一個(gè)不均一的細(xì)胞群體，分類(lèi)方法有多種。其中，CD8+T細(xì)胞是體內(nèi)重要的T細(xì)胞亞群之一，根據(jù)CD8+T細(xì)胞表面是否表達(dá)CD28共刺激分子，可將CD8+T細(xì)胞分為CD8+CD28+殺傷性T細(xì)胞及CD8+CD28+抑制性T細(xì)胞，即CD8+CD28+/ CD8+CD28-T細(xì)胞是屬于同一細(xì)胞族具有不同表型的兩個(gè)細(xì)胞亞群，且CD8+CD28+抑制性T細(xì)胞可以在抗原的刺激下轉(zhuǎn)化為CD8+CD28+殺傷性T細(xì)胞，從而形成一對(duì)平衡體，健康個(gè)體CD8+CD28+/ CD8+CD28-T細(xì)胞的百分率對(duì)外周血CD8-T細(xì)胞的升高具有相同功能，然而在一些感染性疾病和慢性疾病患者則并非如此［7］。很多疾病的免疫學(xué)機(jī)制都涉及CD8+CD28+/CD8+CD28-T細(xì)胞，在疾病的發(fā)生和發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮著重要作用，這些疾病包括某些腫瘤、心血管疾病和部分婦科疾病，多囊卵巢綜合征包括其中。德國(guó)的Sterner等用戊酸酯誘發(fā)多囊卵巢綜合征形成大鼠模型，多囊卵巢綜合癥大鼠模型的CD8+T細(xì)胞含量較正常組降低，并發(fā)現(xiàn)經(jīng)過(guò)電刺激干預(yù)后，CD8+T細(xì)胞數(shù)量可增加。

對(duì)于多囊卵巢綜合癥性激素代謝方面的研究較多，涉及的觀察指標(biāo)也多，本文中選取血清卵泡刺激素（follicle-stimulating hormone，F(xiàn)SH）、黃體生成素（luteinizing hormone，LH）作為性激素的代表進(jìn)行研究。在本研究中，IR組患者與Non-IR組患者FSH含量比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)意義（P＞0.05），但LH含量比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），宋青等［8-9］對(duì)多囊卵巢綜合征的研究結(jié)果大體一致。研究表明LH與CD8+CD28+/CD8+CD28-T細(xì)胞存在相關(guān)性，這說(shuō)明LH與IR的關(guān)系更為密切，對(duì)于多囊卵巢綜合征來(lái)說(shuō)LH的臨床意義更大。在后續(xù)的胰島素增敏治療中可以通過(guò)重點(diǎn)觀察LH的水平變化而檢測(cè)評(píng)價(jià)療效。

近年來(lái)很多學(xué)者從免疫學(xué)角度對(duì)IR進(jìn)行探討，如Elia等［10］在多囊卵巢綜合征的BALB/c小鼠模型也發(fā)現(xiàn)CD8+T細(xì)胞亞群數(shù)量下降，并且這種下降狀態(tài)在脫氫表雄酮的誘導(dǎo)下得以持續(xù)，而具有IR的患者服用二甲雙胍在改善內(nèi)分泌代謝紊亂的同時(shí)可以使CD8+T細(xì)胞亞群數(shù)量回升，因此可見(jiàn)，IR 與CD8+呈一定的相關(guān)性，從T細(xì)胞免疫學(xué)入手討論IR對(duì)多囊卵巢綜合征的影響有意義［11-15］。在研究中發(fā)現(xiàn)CD8+T細(xì)胞及其細(xì)胞內(nèi)因子呈現(xiàn)特征性變化——CD8+CD28+T細(xì)胞及IFN-γ相對(duì)多囊卵巢綜合征患者而言可能是一個(gè)保護(hù)性因素，當(dāng)患者的CD8+CD28+殺傷T細(xì)胞越高，其IR程度越低；相反，CD8+CD28-抑制性T細(xì)胞含量越高，多囊卵巢綜合征患者的征患者的免疫調(diào)節(jié)治療提供一定的依據(jù)。IR程度亦越高。這說(shuō)明CD8+CD28-抑制性T細(xì)胞及其細(xì)胞因子IL-4相對(duì)多囊卵巢綜合征尤其是合并IR的患者一個(gè)致病性因素［16-20］。

在本研究中筆者發(fā)現(xiàn)，多囊卵巢綜合征患者尤其是合并IR患者的免疫平衡向CD8+CD28-抑制性T細(xì)胞傾斜，該細(xì)胞數(shù)量及其胞內(nèi)細(xì)胞因子IFN-γ升高，主要表現(xiàn)為抑制效應(yīng)，這證明多囊卵巢綜合征的合并IR的病理生理過(guò)程有CD8+CD28-抑制性T細(xì)胞的參與。

綜上所述，本研究從免疫學(xué)角度在一定方面闡述了免疫失衡與性激素代謝紊亂的關(guān)系，啟發(fā)CD8+CD28+T細(xì)胞可能是多囊卵巢綜合征患者治療的一個(gè)靶細(xì)胞，這可為多囊卵巢綜合治療提供相關(guān)依據(jù)。

［1］施曉波，張金風(fēng)，符書(shū)馨.多囊卵巢綜合征患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群的測(cè)定及與甾體激素相關(guān)性的研究［J］.中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志，2008，18（16）：2363-2365.

［2］王增杰，周敏.多囊卵巢綜合征的病因研究進(jìn)展［J］.中國(guó)計(jì)劃生育學(xué)雜志，2009，16（7）：440-442.

［3］李美芝.多囊卵巢綜合癥的診斷與治療［J］.中華婦產(chǎn)科雜志，2002，15（7）：444-446.

［4］ Stener-Victorin E，Lindholm C.Immunity and beta-endorphin concentrations in hypothalamus and plasma in rats with steroid-induced polycystic ovaries：effect of low-frequency electroacupuncture［J］.Biology of Reproduction，2004，70（2）：329-333.

［5］林金芳，李昕，蘇椿淋.多囊卵巢綜合征患者胰島素抵抗的診斷方法及治療策略［J］.中國(guó)實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志，2007，7 （9）：663-667.

［6］林忠.多囊卵巢綜合征與細(xì)胞因子的相關(guān)性研究［J］.中國(guó)婦產(chǎn)科臨床雜志，2006，7（5）：391-393.

［7］韓琳，裴毅.腫瘤患者CD+T細(xì)胞中CD28表達(dá)的研究進(jìn)展［J］.現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2007，7（9）：1402-1404.

［8］宋青，茍文麗.吡格列酮對(duì)胰島素抵抗型多囊卵巢綜合征患者脂肪細(xì)胞因子的影響［J］.西安交通大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版），2010，31（2）：227-230.

［9］王麗，呂淑蘭，曹纘孫.青春期與育齡期多囊卵巢綜合征患者的臨床對(duì)照研究［J］.西安交通大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版），2010，45（11）：745-748.

［10］ Elia E M，Belgorosky D，F(xiàn)aut M，et al.The effects of metformin on uterine tissue of hyperandrogenized BALB/c mice［J］.Molecular Human Reproduction，2009，15（15）：421-432.

［11］余碧雅.C反應(yīng)蛋白濃度與多囊卵巢綜合征胰島素抵抗相關(guān)性分析［J］.當(dāng)代醫(yī)學(xué)，2011，17（24）：123-124.

［12］裘宇容，楊春莉，陳煉波，等.原發(fā)性原發(fā)性肝癌患者CD8+CD28-和CD8+CD28+細(xì)胞亞群的分析［J］.第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)，2002，13（1）：45-46.

［13］陳必，郭賽群，楊佩嫻.原發(fā)性垂體促性腺功能低下閉經(jīng)患者CD8+CD28+與CD8+CD28-T細(xì)胞平衡及其與性激素的關(guān)系［J］.現(xiàn)代醫(yī)院，2014，14（7）：25-29.

［14］江洪，陳夢(mèng)坤，何必勤.多囊卵巢綜合征患者C反應(yīng)蛋白與胰島素抵抗的相關(guān)性研究［J］.海峽醫(yī)學(xué)，2015，27（6）：147-149.

［15］李旻，邱紅玉，孫永玉.多囊卵巢綜合征的免疫學(xué)因素研究進(jìn)展［J］.國(guó)外醫(yī)學(xué)婦產(chǎn)科學(xué)分冊(cè)，2003，30（1）：29-32.

［16］ Brimnes J，Allez M， Dotan I，et al.Defects in CD8+regulatory T cells in the lamina propria of patients with inflammatory bowel disease［J］.Journal of Immunology，2005，174（9）：5814-5822.

［17］張翠蓮，張少娣，李杭生，等.多囊卵巢綜合征患者胰島素抵抗與肥胖的研究和分析［J］.中華實(shí)用診斷與治療雜志，2012，30（9）：807-809

［18］ Ovalle F，Azziz R.Insulin resistance，polycystic ovary syndrome，and type 2 diabetes mellitus［J］.Fertility & Sterility，2002，77（6）：1095-1105.

［19］宋洋，劉永.多囊卵巢綜合征進(jìn)展［J］.海南醫(yī)學(xué)，2008，18 （5）：137-139.

［20］李儉，羅宇迪.減重訓(xùn)練及口服二甲雙胍對(duì)肥胖型多囊卵巢綜合征的療效［J］.中國(guó)醫(yī)藥指南，2013，25（11）：558-559.

Polycystic Ovary Syndrome Endocrine Abnormalities and CD8+CD28+/CD8+CD28-T Cells Balanced Relations/

HU Yan-hong，XU Zhong-fang.//Medical Innovation of China，2016，13（26）：032-035

Objective：To study the polycystic ovary syndrome endocrine abnormalities and CD8+CD28+/ CD8+CD28-T cells in balanced relationship.Method：The 60 patients in our hospital with polycystic ovary syndrome patients were divided into groups of insulin resistance and non-insulin resistant group，and 30 cases of healthy women as a control group，T cells and cytokines，hormone and insulin level were detected and compared. Result：The differences of CD8+CD28+T cells and IFN-γ content in three groups were statistically significant （P＜0.05），CD8+CD28-T cells and IL-4 content differences between the three groups were statistically significant （P＜0.05）.The difference of FSH level between the three groups was not statistically significant（P＞0.05）. The difference of LH，Insulin and HOMA-IR levels in three groups were statistically significant（P＜0.05）. Conclusion：The immune balance performance in patients with polycystic ovary syndrome for the CD8+CD28-T cells suppress excessive，so the increase in the number of cells is closely related to endocrine disorders and insulin resistance.

Polycystic ovary syndrome； Insulin resistance； CD8+CD28+/CD8+CD28-T cells； Sex hormones

10.3969/j.issn.1674-4985.2016.26.009

2016-01-22） （本文編輯：蔡元元）

江西省萍鄉(xiāng)市科技局社會(huì)發(fā)展科技計(jì)劃項(xiàng)目（20150051）

①江西省萍鄉(xiāng)市婦幼保健院 江西 萍鄉(xiāng) 337055

胡艷紅