利金顆粒的制備工藝及質(zhì)量研究※

陳斯寧　陳舒茵　梁國(guó)成　馮　原　潘　玲

（廣西中醫(yī)藥大學(xué)附屬瑞康醫(yī)院呼吸內(nèi)科、藥物研發(fā)中心，南寧530011）

實(shí)驗(yàn)研究

利金顆粒的制備工藝及質(zhì)量研究※

陳斯寧陳舒茵梁國(guó)成*馮原潘玲

（廣西中醫(yī)藥大學(xué)附屬瑞康醫(yī)院呼吸內(nèi)科、藥物研發(fā)中心，南寧530011）

目的優(yōu)選利金顆粒的制備工藝并進(jìn)行相關(guān)質(zhì)量研究。方法以軟材性狀、顆粒成型率等為指標(biāo)，進(jìn)行混合輔料的篩選；考察顆粒的性狀、溶化性以及相關(guān)含量測(cè)定等，對(duì)制劑進(jìn)行質(zhì)量研究。結(jié)果優(yōu)選的最佳輔料為浸膏粉∶甘露醇∶乳糖=33.3∶13.42∶53.28，以75%乙醇制軟材，所得顆粒質(zhì)量穩(wěn)定，黃芪甲苷平均含量0.036%，RSD為2.08%。結(jié)論優(yōu)選出的制備工藝以及質(zhì)量研究簡(jiǎn)單合理，工藝穩(wěn)定，可操作性強(qiáng)，結(jié)果滿(mǎn)意。

利金顆粒；制備工藝；質(zhì)量研究

利金方是廣西中醫(yī)藥大學(xué)附屬瑞康醫(yī)院呼吸內(nèi)科陳斯寧主任醫(yī)師多年來(lái)用于治療COPD肺氣虛證的有效經(jīng)驗(yàn)方，由黨參、黃芪、麥冬、白術(shù)等組成，具有補(bǔ)肺固衛(wèi)、健脾化痰的功效。原方為湯劑，現(xiàn)為擴(kuò)大臨床應(yīng)用，適用廣大患者包括糖尿病患者，將其制備成為無(wú)糖型顆粒劑。本研究?jī)?yōu)選出了利金顆粒的最佳制備工藝，以軟材性狀、顆粒的成型率等為指標(biāo)進(jìn)行研究。現(xiàn)報(bào)道如下。

1　儀器與材料

DT-100電子天平（北京光學(xué)儀器廠），YK-160搖擺式顆粒機(jī)（湖南省衡陽(yáng)市金一帆制藥設(shè)備實(shí)業(yè)有限公司），CT-C-11熱風(fēng)循環(huán)烘箱（湖南省衡陽(yáng)市金一帆制藥設(shè)備實(shí)業(yè)有限公司），F(xiàn)S-0.8方形振動(dòng)篩（湖南省衡陽(yáng)市金一帆制藥設(shè)備實(shí)業(yè)有限公司），XF-20B型箱式沸騰干燥機(jī)（常州市震華干燥設(shè)備有限公司），（江蘇華輝干燥設(shè)備工程有限公司），ZK-32真空干燥箱（湖南省衡陽(yáng)市金一帆制藥設(shè)備實(shí)業(yè)有限公司），HB顆粒包裝機(jī)（湖南省衡陽(yáng)市金一帆制藥設(shè)備實(shí)業(yè)有限公司），101-38數(shù)顯式電熱恒溫干燥箱（滬越科學(xué)儀器廠），LC-20AT高效液相色譜儀（島津）。

甘露醇（國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司），糊精（廣州利源食品添加劑有限公司），乳糖（國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司），微晶纖維素（安徽山河藥用輔料有限公司），可溶性淀粉（西安藻露堂藥業(yè)集團(tuán)康復(fù)醫(yī)藥有限公司），硬脂酸鎂（西安天正藥用輔料有限公司），色譜乙腈（賽墨飛爾科技（中國(guó)）有限公司），乙醇（國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司），純化水（自制）。

2　方法與結(jié)果

2.1浸膏粉的制備取黨參、黃芪等藥材，加10倍量水浸泡1 h，煎煮2次，第一次煎煮2 h；第二次8倍量水，煎煮1 h；合并藥液，濾過(guò)，濃縮，真空干燥成干膏，粉碎，過(guò)100目篩，即得。

2.2樣品的制備將利金顆粒浸膏粉與輔料按1∶2比例混合均勻，以75%乙醇為潤(rùn)濕劑，制粒，70℃干燥2 h，整粒，即得。

2.3成型性考察成型性用顆粒的成型率來(lái)測(cè)定。取樣品顆粒稱(chēng)重，按《中國(guó)藥典》2010年版一部附錄I C中顆粒劑粒度的考察方法進(jìn)行成型性評(píng)價(jià)，考察制粒的成型情況［1］。按公式計(jì)算成型率：成型率（%）=通過(guò)一號(hào)篩而不能通過(guò)四號(hào)篩的顆粒重/樣品顆粒重×100%。得到的合格顆粒＞90%者為成型性好；得率在80%～90%者為成型性一般；收率＜80%者為成型性差［2-3］。

輔料的選擇為制劑成型的關(guān)鍵之一，考慮需同時(shí)滿(mǎn)足成形性和抗?jié)裥缘囊?，根?jù)無(wú)糖型顆粒輔料的特性，我們初步選取了甘露醇、糊精、微晶纖維素、可溶性淀粉、乳糖等輔料進(jìn)行混合比較，依“2.2樣品制備”法制備，觀察中間體軟材情況以及顆粒成型率，處方方案及結(jié)果見(jiàn)表1。

表1　混合輔料的篩選

由試驗(yàn)結(jié)果可知，各制劑處方軟材情況均較疏松，且容易制粒，但處方8、9所得顆粒細(xì)粉較多，顆粒成型較差；處方2、3、5、6、10顆粒成型率一般，處方1及處方4顆粒成型率均較好，故綜合考慮，處方4為最佳，即選處方中浸膏粉∶甘露醇∶乳糖的百分比為33.3∶13.42∶53.28作為本制劑的輔料。

2.3驗(yàn)證試驗(yàn)按上述試驗(yàn)篩選結(jié)果，采用處方為浸膏粉∶甘露醇∶乳糖=33.3∶13.42∶53.28，以75%乙醇制軟材，制粒，70℃干燥，整粒，顆粒合格率達(dá)94.2%。平行操作三批，顆粒平均合格率92.8%。結(jié)果表明，工藝穩(wěn)定，重復(fù)性好。

2.4質(zhì)量研究

2.4.1粒度檢查照《中國(guó)藥典》2010年版一部附錄XI B粒度測(cè)定第二法雙篩分法，取本品顆粒30 g，稱(chēng)定重量，置規(guī)定的藥篩中，保持水平狀態(tài)過(guò)篩，左右往返，邊篩動(dòng)邊輕叩3 min。取不能通過(guò)一號(hào)篩和能通過(guò)五號(hào)篩的顆粒及粉末，稱(chēng)定重量，分別檢查三批，所占百分比平均為11.3%［1］。

2.4.2溶化性檢查取本品顆粒10 g，加熱水200 ml，攪拌5分鐘，立即觀察，顆粒全部溶化，有少量混懸物；平行檢查三批，結(jié)果一致［1］。

2.4.3休止角的測(cè)定在一潔凈的平板玻璃上中央部位高約5 cm的位置上，將顆粒用漏斗慢慢注入，至顆粒自動(dòng)流出邊緣，并形成穩(wěn)定的錐形狀粉體堆為止。測(cè)定粉體高度，根據(jù)公式tanθ=h/r計(jì)算休止角θ。平行測(cè)定三次，顆粒平均休止角為38.2°。

2.4.4吸濕性試驗(yàn)將稱(chēng)量瓶烘至恒重，冷卻后準(zhǔn)確稱(chēng)重，分別加入1.0 g左右的顆粒，平鋪于瓶底，稱(chēng)重并干燥至恒重，精密稱(chēng)重后，放入有KNO3過(guò)飽和溶液的干燥器內(nèi)（RH=92.5%），將稱(chēng)量瓶打開(kāi)，24 h后稱(chēng)重并計(jì)算吸濕百分率。吸濕率（%）=［（吸濕后顆粒重-吸濕前顆粒重）/吸濕前顆粒重］×100%。平行測(cè)定三批，顆粒平均吸濕率為19.7%。

2.4.5黃芪甲苷的含量測(cè)定［4］

2.4.5.1色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-水（36∶64）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為203 nm。理論板數(shù)按黃芪甲苷峰計(jì)算應(yīng)不低于4000。

2.4.5.2對(duì)照品溶液的制備取黃芪甲苷對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加流動(dòng)相制成每1 ml含0.2 mg的溶液，即得。

2.4.5.3供試品溶液的制備取本品顆粒，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇30 ml，稱(chēng)定重量，超聲處理40 min，放冷，再稱(chēng)定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0 ml，分次溶解，用水飽和正丁醇提取4次，每次20 ml，棄去水液，合并正丁醇液，加氨試液提取3次，初次隔夜放置，每次20 ml，棄去氨液，將正丁醇水浴蒸干，殘?jiān)昧鲃?dòng)相溶解，轉(zhuǎn)移至10 ml量瓶中，并用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.4.5.4陰性樣品溶液的制備取缺黃芪藥材，照“2.4.5.3供試品溶液的制備”法，制備陰性樣品溶液。

圖1　黃芪甲苷HPLC圖

2.4.5.5線性關(guān)系考察精密吸取0.2，0.4，0.6，0.8，1 ml分別置于1 ml容量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，制得濃度分別為0.04，0.08，0.12，0.16，0.2 mg/ml的對(duì)照品溶液，分別吸取20 μl，注入液相色譜儀中，測(cè)定不同濃度下的黃芪甲苷吸收峰面積。以黃芪甲苷濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程：Y=496091x+90173，R2=0.9994，黃芪甲苷在0.04～0.2 mg/ml范圍內(nèi)呈良好線性。

2.4.5.6專(zhuān)屬性考察在選定的色譜條件下，分別吸取對(duì)照品溶液、供試品溶液和陰性樣品溶液各20 μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。結(jié)果陰性樣品溶液在黃芪甲苷色譜峰處無(wú)相應(yīng)峰出現(xiàn)，對(duì)測(cè)定無(wú)干擾。見(jiàn)圖1。

2.4.5.7精密度試驗(yàn)精密吸取黃芪甲苷對(duì)照品溶液20 μl，重復(fù)進(jìn)樣6次，測(cè)得對(duì)照品峰面積積分值RSD為0.81%，表明精密度良好。

2.4.5.8穩(wěn)定性試驗(yàn)取供試品溶液按上述色譜條件分別于0，2，4，8，12 h測(cè)定，峰面積積分值的RSD為1.67%，表明供試品液在12 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.4.5.9重復(fù)性試驗(yàn)按“2.4.5.3供試品溶液的制備”法重復(fù)制備樣品6份，依法測(cè)定，結(jié)果測(cè)得樣品黃芪甲苷含量的RSD為1.38%，表明重復(fù)性好。

2.4.5.10回收率試驗(yàn)取已知含量的樣品9份，精密稱(chēng)定，分別精密加入黃芪甲苷對(duì)照品溶液（1.26 mg/ml）1 ml，揮干溶劑，按“2.4.5.3供試品溶液的制備”法制備樣品溶液，測(cè)定，計(jì)算，結(jié)果見(jiàn)表2。

表2　回收率試驗(yàn)結(jié)果

2.4.5.11樣品含量測(cè)定精密稱(chēng)取本品顆粒，按上述2.4.5.3供試品溶液的制備”法制備樣品，也依法測(cè)定黃芪甲苷含量，平行測(cè)定三批，結(jié)果平均含量為0.036%，RSD為2.08%。表明結(jié)果穩(wěn)定，重復(fù)性好，方法簡(jiǎn)便。

3　討論

本制劑臨床主治COPD肺氣虛證，制備成無(wú)糖型的顆粒劑，適用于廣大患者，糖尿病患者也可應(yīng)用。中藥浸膏粉通常具有較強(qiáng)的吸濕性，因此，直接制粒以及成品的保存皆有一定難度。為降低制劑吸濕性且便于制粒，保證制劑的性質(zhì)，我們采用了混合輔料的方法進(jìn)行制粒。無(wú)糖型的顆粒劑輔料應(yīng)用較廣泛的有可溶性淀粉、糊精、乳糖、甘露醇和微晶纖維素，而乳糖由于各方面的性質(zhì)較為優(yōu)越，且乳糖具有良好的沖溶性和抗?jié)裥裕?］，故本試驗(yàn)篩選出了最佳處方配比（浸膏粉∶甘露醇∶乳糖=33.3∶13.42∶53.28），并進(jìn)行了粒度、溶化性、流動(dòng)性以及吸濕性等的考察，結(jié)果均比較理想，各項(xiàng)均符合《中國(guó)藥典》2010年版一部附錄顆粒劑項(xiàng)下規(guī)定，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定，為今后大批量生產(chǎn)提供了依據(jù)。

[1]國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典[S].北京:化學(xué)工業(yè)出版社，2010.

[2]梁海寧，劉效栓，沈濤.天茂降糖顆粒制備工藝優(yōu)選[J].西部中醫(yī)藥，2014，27(10):28-30.

[3]牛陽(yáng)，張霞，王榮，等.八珍益智顆粒制備上藝優(yōu)選[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2012，18(7):34-37.

[4]孫聰，韓業(yè)超，吳強(qiáng).高效液相色譜法測(cè)定保元清血顆粒中黃芪甲苷含量方法的建立及評(píng)價(jià)[J].吉林大學(xué)學(xué)報(bào)，2012，38(4):805-808.

[5]王佩，劉曉星，徐紅.復(fù)方芪苓無(wú)糖顆粒劑成型工藝的研究[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2014，32(2):354-356.

丹參的鑒別要點(diǎn)

藥材丹參藥材根莖粗短，頂端有時(shí)殘留莖基。根數(shù)條或呈單條，長(zhǎng)圓柱形，略彎曲，有的分枝并具須狀細(xì)根，長(zhǎng)1O～25 cm，直徑O.3～1 cm。表面棕紅色或暗棕紅色，粗糙，具縱皺紋。老根外皮疏松，多顯紫棕色，常呈鱗片狀剝落。質(zhì)硬而脆，斷面疏松，有裂隙或略平整而致密，皮部棕紅色，木部灰黃色或紫褐色，導(dǎo)管束黃白色，呈放射狀排列。氣微，味微苦澀。

栽培品丹參，根較粗壯，直徑可達(dá)O.5～1.5 cm。表面紅棕色，具縱皺紋，外皮緊貼不易剝落。質(zhì)堅(jiān)實(shí)，斷面較平整，少有裂隙，略呈角質(zhì)樣。

飲片飲片呈類(lèi)圓形或橢圓形厚片，直徑O.3～1 cm。外表皮棕紅色至暗棕紅色，粗糙，具縱皺紋。切面有裂隙，或略平整而致密，有的呈角質(zhì)樣；皮部棕紅色，木部灰黃色至紫褐色，有黃白色放射狀紋理。氣微，味微苦澀。

丹參常見(jiàn)偽品藥材

唇形科植物甘肅丹參Salvia przewalskii Maxim.藥材呈圓錐形，上粗下細(xì)，直徑1～4 cm。飲片質(zhì)地松脆，斷面極不平坦，切面多數(shù)異型維管束呈黃色小點(diǎn)狀，飲片直徑2 cm以上。主產(chǎn)于云南。

唇形科植物大丹參Salvia przewalskii Maxim.var mandarinorum（Diels.）Stib.的根和根莖本品為甘肅丹參變種，特別粗壯，直徑達(dá)2～6 cm，分枝較多，表面粗糙，飲片直徑1～5 cm。橫斷面淡黃白色。

唇形科植物擬丹參Salvia sinica Migo.的根本品極似正品丹參，斷面（飲片）皮部與木部易分離。

——摘自祝之友《解讀神農(nóng)本草經(jīng)》

The Preparation Technology and Quality Research of Lijin Granules

CHEN Sining，CHEN Shuyin，LIANG Guocheng，F(xiàn)ENG Yuan，PAN Ling
（Respiratory Department&Drug Research and Development Center，Ruikang Hospital affiliated to Guangxi University of Chinese Medicine，Nanning，530011，China）

Objective To Preferred the PreParation technology and quality research of the Lijin granules.Methods Taking soft material traits and Particles Pass rate as the index，the mixed materials were selected.The formulations quality with studying the Particles traits，melting and the determination of the granules were studied.Results The Preferred out the best materials was extract Powder: mannitol:lactose=33.3:13.42:53.28，and made the soft material with 75%ethanol，which the method of the resulting Particles quality and stability，the average content of Astragaloside was 0.036%and with the RSD was 2.08%.Conclusion The Preferred PreParation Process and the quality standards was simPle and reasonable，and the Process had stability and oPerability.

Likin granules；PreParation technology；quality research

10.3969/j.issn.1672-2779.2016.17.059

1672-2779（2016）-17-0135-03

（本文編輯：張文娟本文校對(duì)：馮原2016-03-11）

國(guó)家中醫(yī)藥管理局第三批全國(guó)優(yōu)秀中醫(yī)臨床人才研修項(xiàng)目；廣西中醫(yī)藥管理局中醫(yī)藥科技專(zhuān)項(xiàng)（No：GZYZ1205）

liangguocheng611@126.com