子癇前期患者血清LCN—2的表達

白穎+盧群+李巧平+任利容

[摘要]目的探討子癇前期患者血清LCN-2的表達及其與病情的相關性進行研究分析。方法選取2013年1月～2015年6月深圳寶安區(qū)婦幼保健院接收的子癇前期患者100例，其中輕度子癇前期患者50例，作為輕度觀察組，重度子癇前期患者50例，為重度觀察組，同時選取健康正常孕婦50例，作為對照組，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗法ELISA檢測所有患者及健康對照組的血清LCN一2濃度并進行組間對比研究。結果輕度觀察組的LCN-2濃度為（52.37±12.98）ng/mL，重度觀察組患者的LCN一2濃度為（74.25±15.73）ng/mL，均明顯高于健康對照組的（22.13±6.94）ng/mL，且各組之間進行比較差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。結論所有子癇前期患者的血清LCN-2濃度隨著病情的嚴重程度均有不同程度的升高，病情越重，血清LCN-2濃度的升高程度越大，可作為子癇患者檢測及判斷病情的重要標志物，值得在臨床上進行廣泛推廣應用。

[關鍵詞]子癇前期；血清LCN-2；病情相關性；研究分析

子癇前期（preeclampsia，PE）是婦女妊娠期常見的嚴重并發(fā)癥，以孕期出現(xiàn)高血壓和蛋白尿為主要特征的疾病，此病一般進展較迅速，且往往會導致患者重要的內(nèi)臟器官受損，對母嬰的健康造成嚴重危害，而且此病發(fā)病越早患者病情越重，對母嬰造成的危害也就越重，然而臨床上對此病的發(fā)病機制仍未作出具體解釋，因此對此病的早診斷早治療具有極其重要的意義。脂質(zhì)運載蛋白2（1ipocalin-2，LCN-2）是一種最新發(fā)現(xiàn)的分泌型糖蛋白，又稱嗜中性粒細胞明膠酶相關性脂質(zhì)運載蛋白（neulrophilgelatinase-associatedlipocalin，NGAL），是一種主要由活化嗜中性粒細胞分泌的脂肪細胞因子。近幾年的研究表明，子癇前期的主要表現(xiàn)是血管內(nèi)皮功能受損，而LCN-2是反映血管內(nèi)皮功能損傷的重要標志物。本研究就血清LCN-2的表達對子癇前期患者病情的影響進行了研究分析，現(xiàn)報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

選取我院接收的子癇前期患者100例，其中輕度子癇前期患者50例，作為輕度觀察組，重度子癇前期患者50例，為重度觀察組，同時選取健康正常的孕婦50例，作為健康對照組，其中，對照組孕婦年齡（34.3±12.4）歲，身高（151.0±36.4）em，體重（44.6±36.5）kg；輕度觀察組患者年齡（35.3±13.5）歲，身高（152.0±37.8）cm，體重（45.4±37.8）kg；重度觀察組患者年齡（36.5±12.8）歲，身高（154.0±34.4）em，體重（42.8±44.7）kg，三組妊娠女性均無其他嚴重臟器疾病及腫瘤疾病，且在年齡、身高、體重等一般資料方面比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），具有可比性，本研究經(jīng)過所有患者、孕婦及其家屬的知情同意以及醫(yī)院相關部門的批準后實施。

1.2方法

1.2.1標本采集于早晨在所有孕婦空腹狀態(tài)下抽取外周靜脈血5mL，靜置30min后以3500r/min離心10min，取上清液與-70℃進行低溫保存待測。

1.2.2檢測方法采用酶聯(lián)免疫吸附試驗法ELISA，準備好必要的3種試劑：（1）固相的抗原或抗體（免疫吸附劑）；（2）酶標記的抗原或抗體（標記物）；（3）酶作用的底物（顯色劑）。先將LCN-2與酶連接，再將抗原（或抗體）吸附在固相載體表面，保留其免疫活性，然后加入抗體（或抗原）與酶結合成的偶聯(lián)物（標記物），此偶聯(lián)物仍保留其原免疫活性與酶活性，當偶聯(lián)物與固相載體上的抗原（抗體）反應結合后，再加上酶的相應底物，即起氧化還原或催化水解反應而顯色，有色產(chǎn)物可用肉眼、光學顯微鏡、電子顯微鏡觀察，也可以用分光光度計（酶標儀）加以測定，然后將測定的所有患者及健康對照組的血清LCN-2濃度進行組間對比研究，具有簡便、靈敏、快速、載體易于標準化等優(yōu)點。

1.3觀察指標

觀察統(tǒng)計三組的血清LCN-2水平，并對相關指標進行相關性分析。

1.4統(tǒng)計學處理

使用SPSS14.0軟件對檢測結果進行統(tǒng)計學分析處理，計量資料采用（x±s）表示，采用t檢驗，計數(shù)資料采用x2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2結果

輕度觀察組的IEN-2濃度為（52.37±12.98）ng/mL，重度觀察組患者的IEN-2濃度為（74.25±15.73）ng/mL，均明顯高于健康對照組的（22.13±6.94）wCmL，輕度觀察組與重度觀察組患者的脂質(zhì)運載蛋白2（LCN-2）檢測水平明顯高于健康對照組，且兩組分別與健康對照組相比，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。由于內(nèi)皮細胞功能障礙是子癇前期發(fā)病的核心機制，血管內(nèi)皮細胞受損越嚴重，脂質(zhì)運載蛋白2的濃度也就越高，子癇的疾病程度也就越嚴重，所有子癇前期患者的血清LCN-2濃度隨著病情的嚴重程度均有不同程度的升高，病情越重，血清LCN-2濃度的升高程度越大：重度觀察組患者的脂質(zhì)運載蛋白2（LCN-2）檢測水平明顯高于輕度觀察組，兩組比較差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。見表1。由此得出血清LCN-2的水平的增加與疾病的嚴重程度是成正比的，在子癇的發(fā)病及發(fā)展過程中起著重要作用可作為子癇患者檢測及判斷病情的重要標志物。

3討論

子癇前期（preeclampsia，PE）是妊娠婦女妊娠期特發(fā)性常見的嚴重并發(fā)癥，以孕期出現(xiàn)高血壓和蛋白尿為主要特征的疾病，發(fā)病率一般為3%～14%，是母體對妊娠的一種過度性炎癥反應，血管內(nèi)皮功能障礙是這種反應在PE的主要表現(xiàn)，子癇前期的發(fā)生可能與母體、胎兒和胎盤等多種因素有關，包括內(nèi)皮細胞損傷、免疫調(diào)節(jié)功能異常、滋養(yǎng)細胞侵襲異常、遺傳和營養(yǎng)因素等，但是任何一種單一因素都不能夠解釋所有子癇前期發(fā)病的病因和機制?；旧聿±碜兓ㄈ硇用}痙攣，甚至很容易發(fā)展為急性左心功能衰竭，內(nèi)皮細胞功能障礙是子癇前期發(fā)病的核心機制，全身各系統(tǒng)靶器官血流灌注減少導致組織缺血壞死、出血和其他器官損害表現(xiàn)。此病一般進展較迅速，不僅是導致孕產(chǎn)婦死亡的主要原因，還是導致因醫(yī)源性治療而引起早產(chǎn)的最常見原因，并導致胎兒生長受限、胎盤早剝和圍生期死亡等，對母嬰的健康造成嚴重危害，而且此病發(fā)病越早患者病情越重，對母嬰造成的危害也就越重，然而臨床上對此病的發(fā)病機制仍未作出具體解釋，目前較為公認的子癇前期（PE）學說主要包括以下幾個：免疫失衡學說、氧化應激學說、胎盤缺血缺氧學說、遺傳因素學說以及炎癥學說等，因此對此病的早診斷早治療具有極其重要的意義。目前產(chǎn)科領域熱點研究認為胰島素抵抗（insulin resistance，IR）與子癇前期發(fā)生發(fā)展關系密切，可使交感神經(jīng)系統(tǒng)亢進、血管舒張功能障礙、水鈉潴留和陽離子轉運增加而導致血壓升高等，導致多樣性臨床表現(xiàn)和病理的進展，但是IR的機制仍做出未詳盡解釋，而且近年也有研究顯示，炎癥與PE也存在密切關系，在PE的發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮著十分重要的作用，因此，及早的發(fā)現(xiàn)有效標志物是此病早期確診并治療的根本方法。

脂質(zhì)運載蛋白2（lipocalin-2，LCN-2）是1993年L.Kjeldsen等首先從人中性粒細胞中分離出來的由178個氨基酸殘基組成的相對分子質(zhì)量為25000的分泌型糖蛋白，在脂肪組織炎癥反應的調(diào)節(jié)機制中存在重要的作用，可以通過增加脂肪細胞中的過氧化物酶增殖物激活受體Y（PeroxisomeProliferator-Activated Receptor PPAR-y），從而拮抗腫瘤壞死因子-a（TNF-a）在炎癥反應和代謝基因表達過程中的作用，調(diào)控巨噬細胞和脂肪細胞的活性。且LCN-2可與基質(zhì)金屬蛋白酶9（MMP-9）結合形成金屬蛋白酶異源二聚體一活化基質(zhì)金屬蛋白酶9，而活化基質(zhì)金屬蛋白酶9可在血管內(nèi)皮細胞受損時促進血管平滑肌移動和組織內(nèi)蛋白水解及膠原的降解，使血管壁修復重建、血管內(nèi)膜增厚，從而使血管內(nèi)皮細胞損傷加重及血管硬化，因此，血管內(nèi)皮細胞受損越嚴重，血漿中脂質(zhì)運載蛋白2的濃度也就越高，子癇的疾病程度也就越高。有研究發(fā)現(xiàn)，血清及胎盤組織中LCN-2在子癇前期表達增高，可能是參與了子癇前期的病理生理過程。

本研究顯示，子癇前期患者的血清LCN-2檢測水平明顯高于健康對照組，輕度觀察組血清LCN-2水平明顯高于健康對照組，而輕度觀察組與重度觀察組比較，重度觀察組的血清LCN-2檢測水平又明顯高于輕度觀察組，由于內(nèi)皮細胞功能障礙是子癇前期發(fā)病的核心機制，血管內(nèi)皮細胞受損越嚴重，脂質(zhì)運載蛋白2的濃度也就越高，子癇的疾病程度也就越嚴重，因此提示血清LCN-2的水平的增加與疾病的嚴重程度是成正比的，血清LCN-2在子癇的發(fā)病及發(fā)展過程中起著重要作用。

綜上所述，血清LCN-2的濃度與子癇的疾病嚴重程度呈正相關，血清LCN-2的濃度越高子癇越重，因此，血清IEN-2可作為此病診斷、治療的重要指標。