藏藥婦潔搽劑薄層鑒別方法研究

劉凱，祝清燦

[國(guó)藥集團(tuán)同濟(jì)堂(貴州)制藥有限公司，貴州 貴陽(yáng) 550200]

·中藥工業(yè)·

藏藥婦潔搽劑薄層鑒別方法研究

劉凱，祝清燦*

[國(guó)藥集團(tuán)同濟(jì)堂(貴州)制藥有限公司，貴州 貴陽(yáng) 550200]

目的：提高婦潔搽劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。方法：采用薄層色譜法對(duì)婦潔搽劑中烈香杜鵑精油、豬毛蒿精油、苦參進(jìn)行鑒別。結(jié)果：薄層色譜斑點(diǎn)清晰，陰性對(duì)照無(wú)干擾。結(jié)論：建立的方法專屬性強(qiáng)，重現(xiàn)性好，可作為婦潔搽劑中烈香杜鵑精油、豬毛蒿精油、苦參的定性鑒別方法。

婦潔搽劑；薄層色譜；烈香杜鵑精油；豬毛蒿精油；苦參

婦潔搽劑收載于《國(guó)家中成藥標(biāo)準(zhǔn)匯編》外科婦科分冊(cè)，由烈香杜鵑精油、豬毛蒿精油、苦參組成，具有解毒殺蟲、除濕止癢的作用。在現(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)(WS-11184(ZD1184)-2002-2012Z)中，烈香杜鵑精油和豬毛蒿精油的鑒別方法專屬性不強(qiáng)，未對(duì)苦參進(jìn)行鑒別。為了有效地控制產(chǎn)品質(zhì)量，本實(shí)驗(yàn)根據(jù)烈香杜鵑油[1-4]和豬毛蒿油[5-7]的化學(xué)成分研究結(jié)果，改進(jìn)現(xiàn)有鑒別方法，并研究建立了苦參的薄層色譜鑒別方法。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

電子分析天平AB104-N型[梅特勒-托利多儀器(上海有限公司)]；暗箱式紫外分析儀ZF-2C型(上海安亭電子儀器廠)；恒溫水浴鍋DZKW-C型(金壇市大地自動(dòng)化儀器廠)。

1.2 試藥

烈香杜鵑精油對(duì)照提取物、豬毛蒿精油對(duì)照提取物、苦參堿對(duì)照品、槐定堿對(duì)照品、苦參對(duì)照藥材(中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)分別為610008-201501，610007-201501，110805-200508，110784-201405，121019-201407)；硅膠G預(yù)制板(青島海洋化工廠分廠，批號(hào)：20120622；德國(guó)默克公司，批號(hào)：HX377558)；化學(xué)試劑均為分析純；水為純化水；婦潔搽劑樣品(青海普蘭特藥業(yè)有限公司，批號(hào)分別為140115，140508，140709)。

2 方法與結(jié)果

2.1 烈香杜鵑精油的鑒別

2.1.1 供試品溶液的制備 取婦潔搽劑溶液20 mL，加入乙醇20 mL，搖勻，用石油醚(30～60 ℃)40 mL振搖提取，提取液溫水浴揮盡石油醚，殘?jiān)右宜嵋阴? mL使溶解，作為供試品溶液。

2.1.2 對(duì)照提取物溶液的制備 取烈香杜鵑精油0.1 mL，加乙酸乙酯2 mL使溶解，作為烈香杜鵑精油對(duì)照提取物溶液。

2.1.3 陰性對(duì)照溶液的制備 按照處方配比，取除烈香杜鵑油外的其他藥味，按婦潔搽劑工藝制成樣品，按2.1.1項(xiàng)下供試品溶液制備的方法制成缺烈香杜鵑精油陰性對(duì)照溶液。

2.1.4 薄層鑒別方法及結(jié)果 吸取供試品溶液、對(duì)照提取物溶液、陰性對(duì)照溶液各1～2 μL，分別點(diǎn)于同一用5%硝酸銀乙醇溶液(取硝酸銀5 g，加水20 mL使溶解，再加乙醇80 mL，搖勻，即得)潤(rùn)濕改性的硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-乙酸乙酯(20∶3)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液。在日光下觀察，供試品色譜中，在與烈香杜鵑精油色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性樣品無(wú)干擾。見圖1

注：1.樣品(批號(hào)：140115)；2.樣品(批號(hào)：140508)；3.樣品(批號(hào)：140709)；4.烈香杜鵑精油對(duì)照提取物；5.缺烈香杜鵑精油陰性對(duì)照品。圖1 烈香杜鵑精油薄層色譜圖

2.2 豬毛蒿精油的鑒別

2.2.1 供試品溶液的制備 按2.1.1項(xiàng)下的方法制備供試品溶液。

2.2.2 對(duì)照提取物溶液的制備 取豬毛蒿精油0.1 mL，加乙酸乙酯2 mL使溶解，作為豬毛蒿精油對(duì)照提取物溶液。

2.2.3 陰性對(duì)照溶液的制備 按照處方配比，取除豬毛蒿油外的其他藥味，按婦潔搽劑工藝制成樣品，按2.1.1項(xiàng)下供試品溶液制備的方法制成豬毛蒿精油陰性對(duì)照溶液。

2.2.4 薄層鑒別方法及結(jié)果 吸取供試品溶液、對(duì)照提取物溶液、陰性對(duì)照溶液各1～2 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-乙酸乙酯(20∶3)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%硝酸銀乙醇溶液，在105 ℃加熱至斑點(diǎn)清晰。供試品色譜中，在與豬毛蒿精油色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性樣品無(wú)干擾，見圖2。

注：1.豬毛蒿精油對(duì)照提取物；2.樣品(批號(hào)：140115)；3.樣品(批號(hào)：140508)；4.樣品(批號(hào)：140709)；5.陰性對(duì)照樣品。圖2 豬毛蒿精油薄層色譜圖

2.3 苦參的鑒別

2.3.1 供試品溶液的制備 取婦潔搽劑溶液20 mL，加濃氨試液1 mL，搖勻，并置分液漏斗中，用三氯甲烷30 mL振搖提取，提取液蒸干，殘?jiān)靡掖? mL使溶解，作為供試品溶液。

2.3.2 對(duì)照藥材溶液的制備 取苦參對(duì)照藥材粉末0.5 g，加稀乙醇40 mL，回流提取2 h，過(guò)濾，濾液加濃氨試液1 mL，用三氯甲烷30 mL振搖提取，提取液蒸干，殘?jiān)靡掖? mL使溶解，作為對(duì)照藥材溶液。

2.3.3 對(duì)照品溶液的制備 取苦參堿對(duì)照品、槐定堿對(duì)照品，加乙醇制成質(zhì)量濃度為0.2 mg·mL-1的溶液，作為對(duì)照品溶液。

2.3.4 陰性對(duì)照溶液的制備 照處方配比，除去苦參，按婦潔搽劑工藝制成不含苦參的陰性樣品。取陰性樣品20 mL，按供試品溶液的制備方法制備苦參陰性對(duì)照品溶液。

2.3.5 薄層鑒別方法及結(jié)果 吸取供試品溶液、對(duì)照藥材溶液、對(duì)照品溶液、陰性對(duì)照溶液各2～5 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-丙酮-氨水(6∶8∶3)上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以碘化鉍鉀試液。在日光下觀察，供試品色譜中，在苦參色譜相應(yīng)位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性樣品無(wú)相應(yīng)斑點(diǎn)，見圖3。

注：1.苦參堿、槐定堿混合對(duì)照品；2.苦參對(duì)照藥材；3.樣品(批號(hào)：140115)；4.樣品(批號(hào)：140508)；5.樣品(批號(hào)：140709)；6.陰性對(duì)照品。圖3 苦參薄層色譜圖

3 討論

由于揮發(fā)油在本品中以O(shè)/W形式存在，采用石油醚(30～60 ℃)、乙醚、三氯甲烷萃取，乳化嚴(yán)重，故在樣品處理過(guò)程中用乙醇破乳，提高萃取效率。用石油醚(30～60 ℃)萃取的樣品揮發(fā)溫度低，便于保留揮發(fā)油的成分，顯色明顯。

烈香杜鵑精油鑒別試驗(yàn)中，采用傳統(tǒng)的硅膠G薄層板以及香草醛硫酸溶液顯色時(shí)干擾較嚴(yán)重。以硝酸銀作為固定相成分，屬絡(luò)合薄層，用于分離含有不飽和烴的物質(zhì)。根據(jù)不飽和度及其結(jié)構(gòu)，有不同的Rf值[9]；在本實(shí)驗(yàn)中，采用硝酸銀改性的薄層板，能夠鑒別出桃紅色主斑點(diǎn)，為單萜和倍半萜[10]。采用硝酸銀改性G板時(shí)，不同濃度的硝酸銀保留能力不同，硝酸銀濃度在5%以上時(shí)，色譜分離度較高，比移值適中；活化過(guò)程中應(yīng)當(dāng)控制試驗(yàn)條件，時(shí)間過(guò)短，水分干擾色譜分離，分離度較低；活化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，硝酸銀分解，薄層板變?yōu)榛疑?，分離效果降低。制備硝酸銀改性G板時(shí)，應(yīng)當(dāng)避光操作，活化溫度為80 ℃，時(shí)間為5 min。

在豬毛蒿精油的鑒別實(shí)驗(yàn)中，硝酸銀作為顯色劑，由于不同物質(zhì)的還原性不同，硝酸銀被還原成銀而在薄層板顯示不同化學(xué)成分的斑點(diǎn)。

苦參鑒別中，選用苦參堿對(duì)照品、槐定堿對(duì)照品和氧化苦參堿對(duì)照品進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，陰性對(duì)照有干擾。進(jìn)一步對(duì)處方中的原料及輔料進(jìn)行考察發(fā)現(xiàn)，干擾物質(zhì)為聚山梨酯-80，聚山梨酯-80的薄層圖譜與氧化苦參堿對(duì)照品相同位置上顯相同顏色斑點(diǎn)，對(duì)苦參堿對(duì)照品和槐定堿對(duì)照品無(wú)干擾。因此，選用苦參堿對(duì)照品和槐定堿對(duì)照品進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。關(guān)于方法耐用性的考察，烈香杜鵑油、豬毛蒿油和苦參的鑒別分別對(duì)不同的展開溫度(8、30 ℃)、濕度(47%、92.5%)、不同廠家薄層板(青島海洋化工廠分廠、德國(guó)默克公司)及不同展開劑比例(±10%)進(jìn)行考察，結(jié)果表明，在不同的溫濕度條件下，使用不同品牌的層析板對(duì)分析結(jié)果無(wú)影響。

本實(shí)驗(yàn)研究表明，烈香杜鵑油、豬毛蒿油和苦參的薄層色譜鑒別方法專屬性強(qiáng)，陰性樣品無(wú)干擾，得到的TLC圖譜斑點(diǎn)清晰，分離度符合要求，Rf值適中，方法穩(wěn)定、重現(xiàn)性好，可用于婦潔搽劑的質(zhì)量控制。

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StudiesonQualityStandardofFUJIELiniment

LIUKai，ZHUQingcan*

[SinopharmTongjitang(Guizhou)PharmaceuticalCo.Ltd.,guizhou550200,China]

Objective：To improve the quality standard of FUJIE Liniment.Methods：The TLC method was used to qualitatively identifyRhododendronanthopogonoideoil，Artemisiascopariaoil and Sophorae Flavescentis Radix.Results：The spots on the TLC plate were clear and the negative control sample didn't disturb.Conclusion：The established methods were accurate，reliable，reproducible，and can be used for the quality control of FUJIE Liniment.

FUJIE Liniment；TLC；RhododendronRhododendronanthopogonoideoil；Artemisiascopariaoil；Sophorae Flavescentis Radix.

10.13313/j.issn.1673-4890.2016.11.023

2016-01-21)

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祝清燦，高級(jí)工程師，研究方向：中藥成藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)；E-mail：657662046@qq.com