豬瘟及大腸桿菌混合感染的診斷與防治

孫福南（廣西南寧市良慶區(qū)農(nóng)業(yè)服務(wù)中心，廣西 南寧 530219）

豬瘟及大腸桿菌混合感染的診斷與防治

孫福南
（廣西南寧市良慶區(qū)農(nóng)業(yè)服務(wù)中心，廣西 南寧 530219）

豬瘟作為一種急性、熱性和高度接觸性傳染病一直嚴(yán)重地危害著我國的養(yǎng)豬行業(yè)，而且常常會繼發(fā)或者是混合感染別的疾病，最為常見的便是和大腸桿菌的混合感染。本文筆者將對該病的臨床癥狀、病理變化、診斷的方法和防制措施作出相應(yīng)詳細(xì)的報(bào)告，希望對同行專業(yè)技術(shù)人員有所幫助。

豬瘟；大腸桿菌；混合感染；診斷；防治措施

豬瘟是一種危害性極強(qiáng)的動(dòng)物疫病，一旦豬場有豬瘟的出現(xiàn)，就很難控制這場災(zāi)難，尤其是豬瘟與大腸桿菌的混合感染極難治愈和控制，從而導(dǎo)致大批量的豬病變死亡，大量的散戶、私人養(yǎng)豬場面臨倒閉，對我國的生豬產(chǎn)業(yè)帶來不可估量的影響。

1　病例介紹

本文以某私人養(yǎng)豬場為例，該豬場離人群比較遠(yuǎn)，地理位置比較偏僻，有效地抑制了外來病原的入侵，在2015年年底存欄有生豬加上母豬總計(jì)500頭的數(shù)量，2016年的4月份大部分的豬都出現(xiàn)了體溫?zé)_(dá)41 ℃，用藥無明顯效果，高燒不退，后面相繼出現(xiàn)精神狀態(tài)極度不佳、食欲非常差、消瘦的問題，而仔豬全部87頭都出現(xiàn)嚴(yán)重腹瀉現(xiàn)象，接著出現(xiàn)仔豬死亡，死狀呈劃水狀。仔豬死亡率超過了95%，母豬抵抗力較好，僅僅出現(xiàn)3頭的死亡，肉豬也相繼出現(xiàn)死亡，死亡率約30%［1］。

2　臨床癥狀

在發(fā)病的初期，豬的食欲開始下降，精神狀態(tài)差，常伴隨著腹瀉，在病發(fā)2 d左右，就開始出現(xiàn)高燒癥狀，一直不會消退，不吃食，喜歡飲用水，在其后肢內(nèi)側(cè)、腹下、耳背等部位會出現(xiàn)紫斑或黃豆大的紫點(diǎn)，逐漸消瘦，行走時(shí)呈現(xiàn)乏力與搖晃狀態(tài)，病發(fā)后無法站立，呼吸困難，至終衰竭而亡，死亡時(shí)呈四肢劃水狀。

3　病理變化

通過病豬的解剖，可以明顯看見其心肌、膀胱出現(xiàn)斑點(diǎn)狀態(tài)的出血，皮下組織包括脂肪與肌肉等普遍出血，肝臟出血且存在發(fā)黑的淤血；在脾臟的周邊已經(jīng)出現(xiàn)梗死并且呈現(xiàn)暗紅色，而且脾臟有水腫；腎臟呈現(xiàn)土黃色，并有針孔般大小的血點(diǎn)浮現(xiàn)于表面；頜下淋巴結(jié)、肺門淋巴結(jié)以及腸系膜淋巴結(jié)均出現(xiàn)了出血和腫大，其切面呈現(xiàn)紅白條紋；喉頭和氣管部位也出現(xiàn)了出血，而腸黏膜出現(xiàn)脫落，并且腸壁逐漸變薄，腸內(nèi)物發(fā)出腥臭味并呈現(xiàn)紅色，說明腸壁也有出血的現(xiàn)象，還有一些腸壁出現(xiàn)了水腫［2］。

4　診斷的方法

4.1豬瘟實(shí)驗(yàn)室診斷方法

4.1.1兔體交叉試驗(yàn) 選取健康兔6只，分成兩組，試驗(yàn)組接種被檢材料乳劑1 ml，對照組不接種。經(jīng)5～10 d，兩組家兔全部接種豬瘟兔化弱毒苗，靜脈注射1 ml，連續(xù)3 d測溫，試驗(yàn)組體溫不變，對照組1 d后體溫升0.5 ℃以上，即可確診此材料為豬瘟病毒材料。

4.1.2豬體免疫試驗(yàn) 這是診斷豬瘟的可靠方法，用未免疫的健康豬4頭，2頭用豬瘟兔化弱毒苗（5～10頭份）免疫，另2頭不免疫。12～14 d后將待檢病料（1∶5脾乳劑），經(jīng)細(xì)菌濾器過濾或加抗生素處理后，接種于上述4頭豬，每頭豬肌肉注射1 ml，接種后隔離觀察兩周，如免疫豬不發(fā)病，未免疫豬發(fā)病死亡，即可診斷為豬瘟。

4.1.3豬瘟熒光抗體診斷 首先需要取出病死豬的扁桃體與腎組織樣本，使用Bright冰凍切片機(jī)把兩種樣本進(jìn)行冷凍，并且切片。其次，把已經(jīng)處理過的扁桃體與腎組織依附在載玻片上，使用丙酮進(jìn)行固定，大概需要15 min的時(shí)間，在其自然干燥的基礎(chǔ)上，將豬瘟熒光抗體滴落于載玻片上。最后，將載玻片放入濕盒里面，在37 ℃的環(huán)境溫度下作用半個(gè)小時(shí)，使用PBS進(jìn)行三次浸洗，每次浸洗時(shí)間約5 min，待其自然干燥，通過熒光顯微鏡對其進(jìn)行觀察。若發(fā)現(xiàn)亮綠與黃綠的熒光，則可說明豬瘟病毒存在。

4.2細(xì)菌分離鑒定

將病死豬的肺、肝、脾與淋巴結(jié)等取出，并在無菌操作的技術(shù)下，把其接種到一般瓊脂培養(yǎng)基之中，再放置于恒溫箱進(jìn)行培養(yǎng)，溫度設(shè)定為37 ℃，時(shí)間為24 h，可以看見在培養(yǎng)基中出現(xiàn)具有如下特征的菌落：顏色為灰黃色，且不透明；呈圓形，凸起，而且邊緣不平整；菌落較大，而且比較濕潤。任意采取某一菌落進(jìn)行革蘭氏染色，通過顯微鏡檢查可以發(fā)現(xiàn)長與寬分別為3 μm、0.4 μm的革蘭氏陰性短粗的桿菌。

取兩只小鼠作為菌液腹腔接種的生化實(shí)驗(yàn)對象，這兩只小鼠都注射0.15 ml的菌液，再使用一只身體狀況健康的小鼠，對其注射0.15 ml的無菌生理鹽水，過了18 h之后其中一只接種菌液的小鼠出現(xiàn)死亡，20 h之后另一只接種菌液的小鼠也出現(xiàn)死亡，而注射無菌生理鹽水的小鼠身體狀況依舊健康。對這兩只死亡小鼠進(jìn)行解剖分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果，剖檢發(fā)現(xiàn)它們的肺臟、肝臟、脾臟均出現(xiàn)出血現(xiàn)象。

使用普通瓊脂菌落與濃度為0.5%的Nacl溶液進(jìn)行均勻混合，形成一種新的菌懸液。對病原性大腸桿菌進(jìn)行分組，一組為OK多價(jià)血清，另一組為O分型血清，將兩組進(jìn)行玻片凝集，結(jié)果發(fā)現(xiàn)該菌懸液會和第一組OK分型血清發(fā)生凝集現(xiàn)象，和第二組O分型血清卻不會出現(xiàn)凝集現(xiàn)象。對OK與O分型血清進(jìn)行檢查，結(jié)合食品病原微生物檢驗(yàn)技術(shù)手冊中的相關(guān)內(nèi)容，可知該菌為O101型。

用試管吸取2.0 ml的0.45%Nacl溶液，然后將其滴進(jìn)基物安培管，將基物安培管置于Vitek比濁儀中，并且調(diào)零。使用鉑金耳選取單個(gè)菌落，將其與基物安培管的稀釋液進(jìn)行均勻的混和，制作每毫升含菌有3×108個(gè)的MCFARLAND菌懸液，將其吸附到GNI+ 和Gns-120藥敏鑒定卡上，再將其插入生化鑒定儀之中進(jìn)行反應(yīng)，時(shí)間大概為2～12 h，根據(jù)觀察可知與大腸埃希氏菌的相關(guān)生化特征相符合。最后根據(jù)藥敏實(shí)驗(yàn)結(jié)果（見表1），診斷該病為豬瘟疾病與大腸桿菌病原體的混合感染。

表1　藥敏試驗(yàn)結(jié)果

5　防治措施

眾所周知，豬瘟病毒與大腸桿菌發(fā)生混合感染后治療是極其困難的，所以建議養(yǎng)殖戶平時(shí)就防止該病的發(fā)生。若一旦出現(xiàn)了該病，也應(yīng)該立即使用相對應(yīng)的方法及時(shí)處理，有效地進(jìn)行綜合性治療。下面是筆者的一些防治建議：

5.1自繁自養(yǎng)

可以有效防止外來的病原進(jìn)入豬場，若需要引進(jìn)種豬，也必須把隔離、檢疫及防疫工作做到十分嚴(yán)密。平時(shí)需要保持豬舍衛(wèi)生，及時(shí)通風(fēng)換氣，定期消毒，為豬提供衛(wèi)生、舒適而且具有安全性的生活環(huán)境，同時(shí)防止病原微生物的傳播。另外，夏季高溫時(shí)進(jìn)行降溫，潮濕天氣要注意防潮，低溫天氣則需要采取保暖措施。一個(gè)良好的養(yǎng)豬環(huán)境可以減少疫情的傳播，做好預(yù)防，讓潛在威脅降到最低。

5.2對病死豬進(jìn)行無害化處理，比如深埋或病豬尸體高溫處理等，以便有效地遏制該病的傳播

對于與病豬隔離開來的健康豬群，可以對其開展進(jìn)一步的健康檢查，用豬瘟兔化弱毒疫苗進(jìn)行緊急預(yù)防接種，同時(shí)對尚未死亡的病豬使用豬瘟免疫血清進(jìn)行肌肉注射，然后根據(jù)藥物敏感試驗(yàn)來選擇治療方案。

5.3定期進(jìn)行豬瘟疫苗接種才是最有效的防治方法，從最根本上消滅病菌的源頭

在定期進(jìn)行豬瘟疫苗預(yù)防豬瘟病毒時(shí)，時(shí)間的選擇非常重要，每個(gè)豬場的消毒規(guī)律是不一樣的，用的飼料等也不一樣，所以豬場都應(yīng)該根據(jù)自身情況來選擇豬瘟疫苗接種的時(shí)間。

5.4豬場的飼料管理 夏季高溫高濕的天氣導(dǎo)致飼料極其容易變質(zhì)，導(dǎo)致豬體的抵抗力水平下降，易感染疾病。管理人員可以對飼料進(jìn)行一些投藥性計(jì)劃，比如氟苯尼考、土霉素等藥物和飼料可以混合在一起給豬食用，檢查2～3個(gè)星期，降低豬瘟與大腸桿菌混合感染的機(jī)率，也可以對別的病菌產(chǎn)生有效的防護(hù)作用，進(jìn)而降低病豬死亡率。

6　總結(jié)

豬瘟嚴(yán)重影響著我國生豬產(chǎn)業(yè)的發(fā)展與生豬的健康，每個(gè)豬場都應(yīng)對生豬進(jìn)行定期的豬瘟疫苗接種，把控制生豬染上豬瘟的危險(xiǎn)程度降到最低。豬場可以采取“自繁自養(yǎng)”的方式，避免外面的病原進(jìn)入豬場，防止豬瘟和其他病原體混合感染的發(fā)生，尤其是豬瘟疾病與大腸桿菌病原體的混合感染。在豬場的消毒和衛(wèi)生方面也要做到嚴(yán)謹(jǐn)并始終堅(jiān)持，減少病原微生物的存在和傳播，保持舒適衛(wèi)生的豬場環(huán)境。另外，及時(shí)發(fā)現(xiàn)豬場內(nèi)的病豬，從而及時(shí)隔離，甚至展開有效治療。在對病豬用藥前，需要進(jìn)行藥物敏感實(shí)驗(yàn)，有利于在豬產(chǎn)生耐藥性前使用最好最合理的藥品來進(jìn)行治療。

［1］龍冬梅，韋冠東，湯德元，等.貴州省某規(guī)?；i場豬瘟、豬偽狂犬病和大腸桿菌病混合感染的診斷［J］.黑龍江畜牧獸醫(yī)，2016，（2）.

［2］何競銘.中小豬場豬瘟與大腸桿菌的診斷與防治［J］.現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，2014，（24）.

（編輯：尹 云）

S858.28

B

1006-799X（2016）12-0066-02

孫福南（1971-），男，廣西南寧人，助理獸醫(yī)師，主要從事動(dòng)物防疫，檢疫及動(dòng)物診療工作等。