彭達(dá)平,盧小明,謝柱彬,陳錦其,張險(xiǎn)朋(.東莞市虎門(mén)鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)技術(shù)服務(wù)中心,廣東 東莞 5900;.東莞市東坑鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)技術(shù)服務(wù)中心,廣東 東莞 5900;.東莞市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,廣東 東莞 5086)
東莞市屠宰場(chǎng)豬旋毛蟲(chóng)血清學(xué)調(diào)查
彭達(dá)平1,盧小明2,謝柱彬2,陳錦其1,張險(xiǎn)朋3
(1.東莞市虎門(mén)鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)技術(shù)服務(wù)中心,廣東 東莞 523900;2.東莞市東坑鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)技術(shù)服務(wù)中心,廣東 東莞 523900;3.東莞市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,廣東 東莞 523086)
為了解東莞市豬旋毛蟲(chóng)的感染情況,2015年在東莞市15個(gè)鎮(zhèn)(街)屠宰場(chǎng)采集225份血清,應(yīng)用ELISA方法進(jìn)行旋毛蟲(chóng)檢測(cè),結(jié)果在一個(gè)屠宰場(chǎng)中檢出一份豬旋毛蟲(chóng)抗體陽(yáng)性,陽(yáng)性率為0.44%,結(jié)果表明東莞市屠宰場(chǎng)的豬可能存在豬旋毛蟲(chóng)的感染,建議采取綜合防控措施防止人感染豬旋毛蟲(chóng)。
旋毛蟲(chóng);豬;ELISA;血清學(xué)
旋毛蟲(chóng)病(trichinellosis)是由旋毛蟲(chóng)引起的一種嚴(yán)重的人獸共患寄生蟲(chóng)病。人類感染旋毛蟲(chóng)主要是通過(guò)食用含有旋毛蟲(chóng)幼蟲(chóng)的生肉或半生肉。旋毛蟲(chóng)病呈世界性分布,在歐洲和北美洲發(fā)病率比較高。我國(guó)在1964年首次在西藏的林芝地區(qū)發(fā)現(xiàn)人感染旋毛蟲(chóng),此后在云南、四川、廣西,河南、湖北、遼寧、吉林、黑龍江等省發(fā)生了多起暴發(fā),近年來(lái)在少數(shù)民族地區(qū)時(shí)有發(fā)生。旋毛蟲(chóng)病不僅嚴(yán)重威脅到人類的公共衛(wèi)生安全,還對(duì)豬的養(yǎng)殖造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。在屠宰檢疫中,旋毛蟲(chóng)是首檢寄生蟲(chóng),為肉類和肉制品的必檢項(xiàng)目。在屠宰檢疫中主要采取壓片鏡檢法和免疫膠體金檢測(cè)相結(jié)合的方式,根據(jù)了解豬的旋毛蟲(chóng)的檢出率比較低。為了掌握東莞市屠宰場(chǎng)豬旋毛蟲(chóng)感染的情況,2015年在東莞市15個(gè)鎮(zhèn)(街)的屠宰場(chǎng)采集了225份血清,進(jìn)行了豬旋毛蟲(chóng)抗體檢測(cè),現(xiàn)報(bào)告如下。
1.1被檢血清
2015年,在東莞市15個(gè)鎮(zhèn)(街)屠宰場(chǎng)采集225份血清。采集的血清-20℃保存,集中檢測(cè)。
1.2試劑和儀器
豬旋毛蟲(chóng)抗體ELISA試劑盒:購(gòu)自法國(guó)IDvet公司,批號(hào)為814。SUNRISE酶標(biāo)儀購(gòu)自TECAN公司。
1.3ELISA方法
血清樣品1:20稀釋,每孔加入190μL樣品稀釋液,孔A1和B1加入10μL陰性對(duì)照,孔C1和D1加入10μL陽(yáng)性對(duì)照,其余孔加入10μL稀釋后的待檢測(cè)樣品,21℃(± 5℃)下孵育45min±4min。用300μL左右的洗滌液洗滌每個(gè)板孔3次。加入100μL1:10稀釋的酶標(biāo)記結(jié)合物,21℃(± 5℃)下孵育30min±3min。用300μL洗滌液每孔洗滌3次。每孔加入100μL的底物溶液,21℃(±5℃)下暗室內(nèi)孵育15min±2min。每孔加入100μL的終止液終止顯色反應(yīng)。在酶標(biāo)儀的450nm波長(zhǎng)讀結(jié)果。陽(yáng)性對(duì)照的平均OD>0.350,陽(yáng)性對(duì)照與陰性對(duì)照平均OD值比值>3.5結(jié)果成立。S/P≤50%判為陰性,S/P>50%<60%判為可疑,S/P≥60%判為陽(yáng)性。
共檢測(cè)15個(gè)鎮(zhèn)(街)的屠宰場(chǎng),血清225份,在其中一個(gè)屠宰場(chǎng)中檢出豬旋毛蟲(chóng)抗體陽(yáng)性1份,抗體陽(yáng)性率為0.44%,表明屠宰場(chǎng)的豬可能存在豬旋毛蟲(chóng)的感染,結(jié)果見(jiàn)表1。
表1 東莞市屠宰場(chǎng)豬戊型肝炎抗體檢測(cè)結(jié)果
3.1根據(jù)血清學(xué)的檢測(cè)結(jié)果,只在其中的一個(gè)屠宰場(chǎng)中檢出一份旋毛蟲(chóng)抗體陽(yáng)性,抗體陽(yáng)性率為0.44%,表明東莞市屠宰場(chǎng)的豬可能存在旋毛蟲(chóng)的感染,但感染率比較低。張?jiān)虑宓仍?993年用目測(cè)快速雙抗體夾心ELISA法,在河南檢測(cè)了258份屠宰豬血清,抗體陽(yáng)性15份,抗體陽(yáng)性率為5.8%,其中有7份血清抗體的隔肌壓片鏡檢也為陽(yáng)性。
3.2目前,豬旋毛蟲(chóng)的檢測(cè)方法包括肌肉壓片鏡檢法、集樣消化法和血清學(xué)方法。肌肉壓片鏡檢法在感染不是很?chē)?yán)重時(shí)容易漏檢,集樣消化法是國(guó)際旋毛蟲(chóng)病委員會(huì)推薦的方法,是旋毛蟲(chóng)檢疫的“金標(biāo)準(zhǔn)”,但是集樣消化法操作復(fù)雜而且時(shí)間長(zhǎng),不適合屠宰場(chǎng)的大規(guī)模的檢疫。血清學(xué)方法包括免疫膠體金方法和ELISA方法,免疫膠體金方法操作簡(jiǎn)便、時(shí)間短,而且不需要儀器設(shè)備,目前在屠宰場(chǎng)檢疫中應(yīng)用很廣泛應(yīng)用,但是容易產(chǎn)生假陽(yáng)性和假陰性的問(wèn)題。ELISA廣泛應(yīng)用于旋毛蟲(chóng)的血清學(xué)診斷和血清流行病學(xué)調(diào)查,敏感性比較高,結(jié)果比較準(zhǔn)確,但是只能用血清樣品,對(duì)于屠宰后肉品無(wú)法檢測(cè)。
3.3人類感染旋毛蟲(chóng)主要是通過(guò)食用生的或半生的肉感染,為了有效控制旋毛蟲(chóng)的感染,首先要加強(qiáng)人畜共患病知識(shí)宣傳,提高人們的自我保護(hù)意識(shí),提倡科學(xué)的飲食習(xí)慣,加強(qiáng)飲食行業(yè)的管理,做到生、熟分離。二是應(yīng)加強(qiáng)豬只的屠宰檢疫,把好檢疫管,嚴(yán)禁私宰。三是加強(qiáng)豬旋毛蟲(chóng)的監(jiān)測(cè),發(fā)現(xiàn)有問(wèn)題的豬肉及時(shí)無(wú)害化處理。
[1]金寧一,等.新編人獸共患病學(xué)[M].北京:科學(xué)出版社,2007:844.
[2]歐陽(yáng)兆克,等.中國(guó)旋毛蟲(chóng)病流行病學(xué)和血清學(xué)研究概況[J].中國(guó)熱帶醫(yī)學(xué),2015,15(4):513-516.
[3]王中全,等.肉類及肉制品中旋毛蟲(chóng)檢疫的現(xiàn)狀與展望[J].熱帶病與寄生蟲(chóng)學(xué),2003,1(3):180-183.
[4]張?jiān)虑澹?以SPA-ELISA檢測(cè)感染旋毛蟲(chóng)豬血清中特異性抗體[J].中國(guó)獸醫(yī)科技,1993,23(8):28.
[5]來(lái)利紅,等.ELISA檢測(cè)小鼠肉汁中旋毛蟲(chóng)抗體實(shí)驗(yàn)條件的研究[J].國(guó)際醫(yī)學(xué)寄生蟲(chóng)病雜志,2006,33(6):288-291.
10.3969/J.ISSN.1671-6027.2016.08.024
彭達(dá)平(1978~),廣東省興寧市人,獸醫(yī)師,從事動(dòng)物疫病和人畜共患病防控工作