海洋枝頂孢霉BH0531對黃瓜根結(jié)線蟲防治的微生態(tài)效應(yīng)

黃　敏，劉曉霞，申佩娟，蔡　爽，馮　欣，2，孟慶恒，2*，孫建華，2

（1.天津師范大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院，天津 300387；2.天津市動植物抗性重點實驗室，天津 300387）

海洋枝頂孢霉BH0531對黃瓜根結(jié)線蟲防治的微生態(tài)效應(yīng)

黃敏1，劉曉霞1，申佩娟1，蔡爽1，馮欣1，2，孟慶恒1，2*，孫建華1，2

（1.天津師范大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院，天津 300387；2.天津市動植物抗性重點實驗室，天津 300387）

測定了海洋枝頂孢霉BH0531發(fā)酵液在室內(nèi)離體條件下對根結(jié)線蟲的殺線效果，分析了盆栽試驗條件下對黃瓜根結(jié)線蟲指數(shù)、減退率及對土壤中微生物數(shù)量的影響。結(jié)果表明，發(fā)酵原液濃縮1倍時，其對根結(jié)線蟲的校正死亡率高達96.2%；蟲口減退率達到71.21%；發(fā)酵液對土壤中細菌和放線菌數(shù)量均有促進作用，細菌和放線菌數(shù)量分別最高達到1.24×108CFU/mL及1.56×106CFU/mL，而對真菌則表現(xiàn)出高濃度時的抑制作用，高濃度組真菌由原來的3.12×104CFU/mL減少至8.67×103CFU/mL；隨著時間的延長，促進作用減弱，但對真菌的抑制作用未減弱。菌株BH0531發(fā)酵液可通過殺線作用、促進細菌和放線菌生長、以及降低土壤真菌化程度等微生態(tài)效應(yīng)來實現(xiàn)對黃瓜根結(jié)線蟲病的防治作用。

海洋枝頂孢霉；黃瓜根結(jié)線蟲；線蟲減退率；土壤微生物；微生態(tài)效應(yīng)

植物寄生線蟲是一類重要的植物病原物，其所造成的經(jīng)濟損失可高達1 570億美元每年［1］。其中的根結(jié)線蟲（Meloidogynespp.），因其分布廣、寄主多，危害也最為嚴重，對植物根結(jié)線蟲病害的防治也更受重視［2］。由于化學(xué)農(nóng)藥殘留時間長、毒性大，且與環(huán)境友好的要求相悖，所以逐漸受到限制。生物防治也就成為關(guān)注的熱點，并且已經(jīng)取得一定的研究成果，如已經(jīng)上市并得到應(yīng)用的淡紫擬青霉（Paecilomyces lilacinus）生防制劑和阿維菌素等［3-4］。區(qū)別于上述菌種，海洋來源的枝頂孢霉（Acremoniumsp.）BH0531是一株具有殺線蟲活性的絲狀海洋真菌［5］，研究表明，其代謝物產(chǎn)物具有水溶性好、分子質(zhì)量小、熱穩(wěn)定性好等特點［5-6］；該菌在實驗室條件下對人工培養(yǎng)的松材線蟲和根結(jié)線蟲均顯示出較好的殺線活性［7］。

土壤中的根結(jié)線蟲指數(shù)和土壤微生物是植物根結(jié)線蟲病害發(fā)生過程中兩個重要的微生態(tài)生物要素。土壤微生物可以代表土壤中物質(zhì)代謝的旺盛程度，是土壤肥力的一個重要指標(biāo)，能反映植物和微生物對土壤物質(zhì)積累的貢獻，但又土壤各方面因素的影響［8］。在有機質(zhì)的礦化、腐殖質(zhì)的形成和分解、植物營養(yǎng)元素的轉(zhuǎn)化等過程中起著不可替代的作用［9］。張婷等［10］將枯草芽孢桿菌Bacillus sub-tilisB006與淡紫擬青霉（P.lilacinus）Str.NH-PL-03施用于設(shè)施黃瓜連作土壤中，發(fā)現(xiàn)根際土壤由“真菌型”病土向“細菌型”健康土轉(zhuǎn)變。尹淑麗等［11］通過施用不同生防菌研究了黃瓜不同生育時期根際土壤中微生物數(shù)量的動態(tài)變化，結(jié)果表明，接種細菌D和放線菌317的處理可提高根際土壤中細菌的數(shù)量，降低真菌的數(shù)量，對放線菌數(shù)量的影響不明顯。這些證據(jù)表明運用菌株發(fā)酵液來影響植物根系土壤微生態(tài)環(huán)境是可行的。因此，本實驗設(shè)計并實施了以根結(jié)線蟲和微生物為檢測對象的黃瓜盆栽試驗，采用傳統(tǒng)的稀釋平板法計數(shù)土壤中三大類微生物，淘洗-過篩-蔗糖離心法分離土壤根結(jié)線蟲并計算蟲口減退率，旨在探明海洋枝頂孢霉BH0531對土壤根結(jié)線蟲指數(shù)和土壤微生物的微生態(tài)效應(yīng)，為進一步的應(yīng)用研究提供實驗依據(jù)，并為開發(fā)具有自主知識產(chǎn)權(quán)的新型安全殺線蟲生物制劑提供依據(jù)。

1　材料與方法

1.1材料與試劑

1.1.1供試菌株和材料

海洋枝頂孢霉（Acremoniumsp.）BH0531，菌種保藏號CGMCC-5445，由天津師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院微生物實驗室提供；黃瓜根結(jié)線蟲（Meloidogynespp.）二齡幼蟲J2：取自天津市寶坻區(qū)黃瓜大棚基地；供試黃瓜品種為新津春四號：天津市黃瓜研究所。

1.1.2培養(yǎng)基

（1）活化培養(yǎng)基：去皮馬鈴薯200 g/L煮汁，20 g/L葡萄糖，20 g/L瓊脂。

（2）發(fā)酵培養(yǎng)基：去皮馬鈴薯200 g/L煮汁，20 g/L葡萄糖，pH值自然。

（3）大麥仁培養(yǎng)基：10 g大麥仁，8 mL去離子水，浸泡3～6 h，滅菌。

（4）牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基：3g/L牛肉膏，10g/L蛋白胨，5 g/L NaCl，20 g/L瓊脂，pH 7.4～7.6。

（5）馬丁孟加拉紅培養(yǎng)基：5g/L蛋白胨，10g/L葡萄糖，1g/LKH2PO4，0.5g/LMgSO4·7H2O，3.3g/L孟加拉紅，20g/L瓊脂，pH值自然。

（6）改良高氏一號培養(yǎng)基：20 g/L可溶性淀粉，0.5 g/L NaCl，1 g/L KNO3，0.5 g/L K2HPO4，0.5 g/L MgSO4·7H2O，0.01 g/L FeSO4·7H2O，20 g/L瓊脂，pH 7.2～7.4。

1.1.3化學(xué)試劑

葡萄糖：天津市鳳傳化學(xué)試劑有限公司；瓊脂：天津市珠海衛(wèi)生材料廠；孟加拉紅、牛肉膏、可溶性淀粉：天津市化學(xué)試劑一廠；蛋白胨：浙江玉環(huán)紅星生化制品廠；NaCl：天津市塘沽化學(xué)試劑廠；KH2PO4：天津市化學(xué)試劑六廠；FeSO4·7H2O、MgSO4·7H2O：西安化學(xué)試劑廠；KNO3：天津市化學(xué)試劑三廠。實驗所用主要化學(xué)試劑均為國產(chǎn)分析純。

1.2儀器與設(shè)備

SW-CJ-1F超凈工作臺：蘇州凈化設(shè)備廠；Leica DME光學(xué)顯微鏡：上海徠卡顯微系統(tǒng)有限公司；SPX-250B-Z生化培養(yǎng)箱：上海博迅實業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠；HZ-2010K控溫搖瓶柜：上海欣蕊自動化設(shè)備有限公司；YXQG02型電熱式滅菌鍋：山東新華醫(yī)療器械廠；LDS-10離心機：北京醫(yī)用離心機廠。

1.3試驗方法

1.3.1發(fā)酵濾液的制備

BH0531菌株的活化：將保藏的BH0531菌種接種至活化培養(yǎng)基斜面試管，26℃培養(yǎng)5～7 d。

種子液的制備：取新培養(yǎng)的菌株斜面，加入無菌水洗下孢子，制備成106個/mL的孢子懸液。

發(fā)酵液的制備：以2%接種量接入裝有100 mL液體發(fā)酵培養(yǎng)基的500 mL三角瓶中。26℃、120 r/min培養(yǎng)4 d。將培養(yǎng)好的菌液1 000 r/min離心去菌體，再經(jīng)孔徑為0.22 μm微孔濾膜真空抽濾，即為發(fā)酵濾液。

1.3.2黃瓜根結(jié)線蟲二齡幼蟲（J2）懸浮液的制備

將大田取得的黃瓜病根剪成1 cm小段；在1%次氯酸鈉溶液中漂洗4min，再在勻漿機里攪拌2min；利用100目、300目和500目的網(wǎng)篩沖洗并收集蟲卵。再將卵收集到的離心管中，在底部加入40%蔗糖溶液，3 500 r/min密度梯度離心5 min。之后吸取界面溶液過500目網(wǎng)篩，反復(fù)沖洗收集卵。將上述收集得到的卵置于已消毒的培養(yǎng)皿中，墊上濕潤濾紙，25℃條件下孵化4 d。

1.3.3發(fā)酵液處理對黃瓜栽培土壤中根結(jié)線蟲指數(shù)和減退率的影響實驗

將黃瓜籽消毒催芽后，在穴盤中育苗，待黃瓜苗長至兩葉一心期時定植。所用土壤為大田土∶泥炭土∶沙子=4∶4∶1。移栽后每盆使用發(fā)酵液40 mL灌根處理，1 d后接入配制好的線蟲懸浮液。將所獲發(fā)酵液配制成以下3個濃度梯度：原液稀釋一倍、原液、原液濃縮一倍（對應(yīng)干物質(zhì)含量分別為5 mg/mL、10 mg/mL、20 mg/mL），并按表1處理進行實驗，每個處理重復(fù)3次，共24盆，隨機排列。分別于處理15 d后計算線蟲減退率。

表1 試驗設(shè)計與處理Table 1 Design and treatment of experiments

1.3.4分析測定方法

（1）殺線率的測定

將所獲發(fā)酵原液分別稀釋和濃縮1倍，以無菌水為對照，以黃瓜根結(jié)線蟲（J2）為靶標(biāo)，進行殺線蟲活性測定。取96孔板，每孔加入靶標(biāo)線蟲懸液20 μL（約200條），再分別加入200 μL發(fā)酵液的原液、1倍稀釋液、1倍濃縮液，每個處理3次重復(fù)，25℃條件下培養(yǎng)，分別于3 d和5 d后于顯微鏡下觀測線蟲死亡情況，線蟲校正死亡率計算公式如下：

（2）線蟲減退率

土壤根結(jié)線蟲分離采用淘洗-過篩-蔗糖離心法［12-13］。線蟲減退率計算公式如下［14-15］：

（3）不同處理土壤中可培養(yǎng)微生物的測定

采用傳統(tǒng)的稀釋平板法測定可培養(yǎng)微生物數(shù)量，細菌培養(yǎng)采用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，真菌培養(yǎng)采用馬丁孟加拉紅培養(yǎng)基（臨用前每300 mL加入25%的乳酸3～4滴），放線菌培養(yǎng)采用改良高氏一號培養(yǎng)基（臨用前每100 mL加入1%重鉻酸鉀1 mL）。微生物計數(shù)均計3個重復(fù)。每毫升樣品中菌落形成單位數(shù)=同一稀釋度3次重復(fù)的平均菌落數(shù)×稀釋倍數(shù)×5［16］。

1.3.5數(shù)據(jù)處理

應(yīng)用Origin8.0軟件對結(jié)果進行統(tǒng)計分析。

2　結(jié)果與分析

2.1發(fā)酵液殺線活性的測定

以無菌水作為對照（CK），對不同濃度的BH0531菌株發(fā)酵液進行了殺線蟲活性的測定，結(jié)果見表2。由表2可知，在給定質(zhì)量濃度范圍內(nèi)，發(fā)酵液對根結(jié)線蟲二齡幼蟲都具有明確的殺線活性，其作與濃度呈正相關(guān)；其中濃縮一倍的發(fā)酵液殺線率最高，3 d和5 d的校正死亡率分別達到93.7%和96.2%，均在A級（殺線率≥90%）以上。結(jié)果表明，3 d和5 d之間的殺線活性并無顯著差異，但線蟲死亡率呈現(xiàn)出持續(xù)升高的現(xiàn)象，表明發(fā)酵液的殺線活性具有時間延續(xù)性，并維持在較高的水平。

表2　菌株BH0531不同濃度發(fā)酵液對根結(jié)線蟲二齡幼蟲的殺線活性Table 2 The nematicidal activity of strain BH0531 different concentration fermentation liquid on root-knot nematodes J2

2.2發(fā)酵液對土壤中根結(jié)線蟲指數(shù)的影響

以無菌水作為對照（CK），土壤中根結(jié)指數(shù)和線蟲減退率于處理后第15天進行了測定，結(jié)果見表3。由表3可知，施藥15 d后，3個濃度梯度處理條件下土壤線蟲數(shù)明顯減退，尤其是2個較高濃度條件下的線蟲減退率＞50%，分別達到66.67%和71.21%。這一結(jié)果同表2結(jié)果有一致性，即殺線活性與發(fā)酵液的質(zhì)量濃度呈正相關(guān)。相對而言，對照實驗的線蟲數(shù)不但沒有減退，反而略有增加，說明土壤中根結(jié)線蟲的減退是發(fā)酵液作用的結(jié)果，進一步明確了BH0531菌株發(fā)酵液對根結(jié)線蟲的防治作用。

表3　生物殺線劑對土壤根結(jié)線蟲二齡幼蟲的防治效果Table 3 Control effect of bio-nematicide on root-knot nematode J2

2.3BH0531發(fā)酵液對土壤中可培養(yǎng)微生物數(shù)量的影響

2.3.1對根際土壤中可培養(yǎng)細菌數(shù)量的影響

圖1　發(fā)酵液處理20 d（A）及50 d（B）對土壤細菌數(shù)量的影響Fig.1 Effect of fermentation liquid treatment 20 d（A）and 50 d（B）on amount of bacteria in soli

由圖1（A）可知，處理20 d后的土壤中未加線蟲組土壤中的細菌數(shù)量整體上呈現(xiàn)遞增趨勢，表明發(fā)酵液對細菌數(shù)量有一定的促進作用。與未加線蟲組相比，加線蟲組細菌數(shù)量明顯減少，說明線蟲的存在與細菌數(shù)量之間存一定的負相關(guān)性。由圖1（B）可知，處理50 d后的土壤中細菌數(shù)量整體少于處理20 d后數(shù)量，其中1倍濃縮液處理50 d時加線蟲組的細菌數(shù)量較處理20 d土壤細菌數(shù)量減少了41.44%。此外，加線蟲組土壤細菌數(shù)量雖然整體上低于未加線蟲組，但在組內(nèi)（與對照相比）仍然呈現(xiàn)出隨著發(fā)酵液濃度的提高而增加的趨勢，特別是20 d的測定結(jié)果更加明顯，且加線蟲組與未加線蟲組組內(nèi)均存在顯著性差異（P＜0.05）。盡管發(fā)酵液處理50 d后，高濃度（1倍濃縮液）處理的細菌數(shù)量有所降低，但仍較同組對照高出43.37%。這種時間上的減退效應(yīng)可能與營養(yǎng)物的消耗和高濃度條件下導(dǎo)致線蟲高死亡率所產(chǎn)生的物質(zhì)有關(guān)。因此，發(fā)酵液在整體上對土壤中細菌的數(shù)量具有促進作用。

2.3.2對根際土壤中可培養(yǎng)放線菌數(shù)量的影響

由圖2可知，未加線蟲組土壤中的放線菌數(shù)量均比加線蟲組數(shù)量多，50 d時加線蟲組與未加線蟲組細菌數(shù)量存在差異顯著性（P＜0.05）。這一結(jié)果與細菌的測定結(jié)果相一致，在對照組中，未加線蟲組土壤比加線蟲組土壤放線菌數(shù)量分別增加為52.78%和53.27%。處理50d和20d后的土壤放線菌數(shù)量加線蟲組合未加線蟲組差異不顯著（P＜0.05）。值得注意的是發(fā)酵液對放線菌的促進作用未表現(xiàn)出明確的濃度梯度相關(guān)性。同時，發(fā)酵液對放線菌數(shù)量的影響同樣存在著時間上的減退效應(yīng)。

圖2　發(fā)酵液處理20 d（A）及50 d（B）對土壤放線菌數(shù)量的影響Fig.2 Effect of fermentation liquid treatment 20 d（A）and 50 d（B）on amount of actinomycetes in soli

2.3.3對根際土壤中可培養(yǎng)真菌數(shù)量的影響

由圖3可知，發(fā)酵液處理50 d后的土壤中真菌數(shù)量顯著少于處理20 d后真菌數(shù)量并且同樣觀察到時間效應(yīng)。不同的是發(fā)酵液對土壤真菌數(shù)量顯示出高濃度抑制效應(yīng)。發(fā)酵液處理20 d后，隨著發(fā)酵液濃度的提高，加線蟲組土壤真菌數(shù)量也隨之增加；而未加線蟲組的土壤真菌數(shù)量在高濃度時卻出現(xiàn)了負增長（-33.72%），明顯不同于細菌和放線菌的結(jié)果。發(fā)酵液處理50 d后，高濃度發(fā)酵液表現(xiàn)出對真菌的抑制作用。尤其是未加線蟲組在整體上低于加線蟲組真菌數(shù)量，明確表現(xiàn)出對土壤真菌數(shù)量的抑制作用，且未加線蟲組處理20 d和50 d之間存在差異顯著性（P＜0.05）。

圖3　發(fā)酵液處理20 d（A）及50 d（B）對土壤真菌數(shù)量的影響Fig.3 Effect of fermentation liquid treatment 20 d（A）and 50 d（B）on amount of fungus in soli

3　結(jié)論

海洋來源的枝頂孢霉（Acremniumsp.）BH0531是一株以松材線蟲為靶標(biāo)篩選出的生防菌，其一倍濃縮液對根結(jié)線蟲的殺線率也達到了A級以上，具有較高的殺線活性。研究結(jié)果表明，菌株BH0531發(fā)酵液在室內(nèi)離體條件下，對根結(jié)線蟲的殺線作用拿到對土壤中的微生物數(shù)量和類群有明顯的影響，表現(xiàn)出對細菌和放線菌的促進作用，以及對土壤真菌的抑制作用。因此，菌株BH0531發(fā)酵液可以通過使根際土壤由“真菌型”病土向“細菌型”健康土轉(zhuǎn)變，以實現(xiàn)對植物“促長、防病”的作用。雖然可培養(yǎng)微生物占土壤微生物總量的比例不足1%［17］，但土壤中可培養(yǎng)微生物可能是對土壤生態(tài)系統(tǒng)貢獻最大的類群。

此外，菌株BH0531發(fā)酵液對土壤根結(jié)線蟲指數(shù)有明顯的控制效應(yīng)，在兩個較高濃度條下的線蟲減退率分別達到66.67%和71.21%，可以有效提高線蟲減退率，降低蟲口密度，拮抗因線蟲的存在導(dǎo)致的土壤微生物數(shù)量降低，從而實現(xiàn)對黃瓜根結(jié)病的防治作用。充分表明該菌株是很有發(fā)展前途的線蟲生防因子，為防治黃瓜根結(jié)線蟲病、發(fā)展無公害蔬菜開辟一條新道路。當(dāng)然，菌株BH0531發(fā)酵液能否從根本上改善連作土壤中微生物群落結(jié)構(gòu)變化，使連作土壤中有益微生物增多，有效控制線蟲指數(shù)，以及在規(guī)模栽培條件下防效如何還需要進一步探究驗證。

［1］金娜，劉倩，簡恒，等.植物寄生線蟲生物防治研究新進展［J］.中國生物防治學(xué)報，2015，31（5）：789-800.

［2］劉維志.植物病原線蟲學(xué)［M］.北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2000.

［3］高淋淋，劉志明.植物根結(jié)線蟲生物防治研究進展［J］.廣西植保，2015，28（1）：32-35.

［4］王磊.阿維菌素面臨的機遇與挑戰(zhàn)［J］.生物技術(shù)世界，2015（2）：62-64.

［5］MENG Q H，SHI X X.Isolation of anAcremoniumsp.from a screening of 52 seawater fungal isolates and preliminary characterization of its growth conditions and nematicidal activity［J］.Biotechnol Lett，2012，34（10）：1847-1850.

［6］蒙春蕾，王勇勇，黃敏，等.不同氮源對海洋真菌BH0531發(fā)酵液殺線蟲活性的影響［J］.江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2015，43（5）：121-123.

［7］杜海霞，蒙春蕾，王勇勇，等.海洋枝頂孢霉BH0531代謝產(chǎn)物對松材線蟲形態(tài)和酶活的影響［J］.中國釀造，2014，33（6）：23-26.

［8］張成娥，劉國彬，陳小利.坡地不同利用方式下土壤微生物和酶活性以及生物量特征［J］.土壤通報，1999，30（3）：101-103.

［9］龐新，張福鎖，王敬國.不同供氮水平對根際微生物量及微生物活度的影響［J］.植物營養(yǎng)與肥料學(xué)報，2000，6（4）：321-327.

［10］張婷，李世東，廖作清.“秸稈降解生防菌強化技術(shù)”對黃瓜連作土壤微生物區(qū)系的影響［J］.中國生態(tài)農(nóng)業(yè)學(xué)報，2013，21（11）：1416-1425.

［11］尹淑麗，麻耀華，張麗萍，等.不同生防菌對黃瓜根際土壤微生物數(shù)量及土壤酶活性的影響［J］.北方園藝，2012（1）：10-14.

［12］毛曉芳，李輝信，陳小云，等.土壤線蟲三種分離方法比較［J］.生態(tài)學(xué)雜志，2004，23（3）：149-151.

［13］LIU W Z.Plant nematology［M］.Beijing：China Agricultural Press，2000.

［14］孫建華，宇克莉，陳宏，等.Sr18真菌代謝物防治根結(jié)線蟲病研究［J］.華北農(nóng)學(xué)報，2002，17（1）：119-123.

［15］孫建華，齊軍山，馮欣，等.Sr18生物殺線蟲制劑防治黃瓜根結(jié)線蟲病研究［J］.華北農(nóng)學(xué)報，2005，20（4）：74-78.

［16］沈萍，陳向東.微生物學(xué)實驗［M］.北京：高等教育出版社，2007.

［17］ELLIS R J，MORGAN P，WEIGHTMAN A J，et al.Cultivation-dependent and-independent approaches for determining bacterial diversity in heavy-metal-contaminated soil［J］.Appl Environ Microbiol，2003，69（6）：3223-3230.

Micro-ecological effects of marine-derivedAcremoniumsp.BH0531 on control of cucumber root-knot nematode

HUANG Min1，LIU Xiaoxia1，SHEN Peijuan1，CAI Shuang1，F(xiàn)ENG Xin1，2，MENG Qingheng1，2*，SUN Jianhua1，2
（1.College of Life Science，Tianjin Normal University，Tianjin 300387，China；2.Tianjin Key Laboratory of Animal and Plant Resistance，Tianjin 300387，China）

Thein vitronematicidal efficiency of fermentation liquid of marine-derivedAcremoniumsp.BH0531 on root-knot nematode was determined.The effects of potting experimental conditions on the index and decreasing rate of nematodes and microorganism amount in soli were analyzed.The results showed that when the fermentation liquid was concentrate 1 time，the corrected death rate of the root-knot nematode was up to 96.2%，and the decreasing rate of nematodes was 71.21%.The fermentation liquid had promoting effect of bacteria and actinomycetes count in the soil，and bacteria and actinomycetes count were 1.24×108CFU/ml and 1.56×106CFU/ml，respectively.But it had inhibiting effect on fungus at high concentration，and the amount of fungus was decreased from 3.12×104CFU/ml to 8.67×103CFU/ml.However，the promoting effect decreased as time went by，but the inhibiting effect was undiminished.The control effect of strain BH0531 fermentation broth on cucumber root-knot nematode was effective by micro-ecological effects，such as nematicidal effect，promoting the growth of bacteria and actinomycetes，decreasing amount of fungus in soli and so on.

marine-derivedAcremoniumsp.；cucumber root-knot nematode；decreasing rate of nematode；soil microorganism；micro-ecological effects

Q939.9；S432.4+5

0254-5071（2016）03-0052-05

10.11882/j.issn.0254-5071.2016.03.012

2016-01-05

國家自然科學(xué)基金資助項目（31272019）；天津市自然基金聯(lián)合項目（15JCYBJC51400）

黃敏（1990-），女，碩士研究生，研究方向為微生物的活性物質(zhì)。

孟慶恒（1963-），男，副教授，研究方向為應(yīng)用微生物。