CLIA技術(shù)在新生兒TORCH感染檢測中的應用研究

王俊育，王元白，張　娜，黃寶加

(福建醫(yī)科大學教學醫(yī)院泉州市婦幼保健院產(chǎn)前診斷中心　362000)

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CLIA技術(shù)在新生兒TORCH感染檢測中的應用研究

王俊育，王元白，張娜，黃寶加

(福建醫(yī)科大學教學醫(yī)院泉州市婦幼保健院產(chǎn)前診斷中心362000)

目的探討化學發(fā)光免疫分析(CLIA)技術(shù)檢測新生兒TORCH特異性抗體的臨床意義，為相關(guān)疾病預防和臨床診斷提供參考依據(jù)。 方法采用CLIA技術(shù)檢測5 506例新生兒血清中TORCH特異性IgM抗體。結(jié)果受檢新生兒 TORCH-IgM 總陽性率為7.3%，其中弓形體(TOX)、風疹病毒(RUB)、巨細胞病毒(CMV)、單純皰疹病毒(HSV)感染率分別為0.18%、1.43%、5.41%、0.54%；不同疾病在402例TORCH-IgM陽性的新生兒中所占構(gòu)成比不同，其中以高膽紅素血癥所占構(gòu)成比最高，為48.51%。結(jié)論在新生兒感染性疾病中TORCH感染不容忽視，其中以CMV感染最為普遍，主要癥狀為高膽紅素血癥。由于TORCH病原體感染多缺乏典型癥狀，應采用CLIA技術(shù)對新生兒開展全面的TORCH特異性抗體檢測，對治療或保健有重大意義。

TORCH感染；化學發(fā)光免疫分析；新生兒

“TORCH”是Nahmias于1971年提出的，是一組易引起胎兒、新生兒和嬰幼兒急慢性感染和小兒致畸、致殘的重要病原體。其中T代表弓形體(TOX)，R代表風疹病毒(RUB)，C代表巨細胞病毒(CMV)，H代表單純皰疹病毒(HSV)，O為其他病原體(others)，如EB病毒、人類免疫缺陷病毒(HIV)和人細小病毒B19等。因為新生兒TORCH感染早期臨床表現(xiàn)不典型，易引起誤診而延誤治療，所以實驗室檢測TORCH具有重要價值[1]。為探討化學發(fā)光免疫分析法(CLIA)檢測TORCH特異性IgM抗體的應用價值和臨床意義，本研究采用CLIA技術(shù)檢測5 506例新生兒血清中TORCH特異性IgM抗體，現(xiàn)將本次實驗室數(shù)據(jù)分析如下。

1　資料與方法

1.1一般資料選擇泉州市婦幼保健院2015年1～12月收治入院的新生兒5 506例為研究對象。

1．2儀器與試劑意大利DiaSorin公司LIAISON全自動化學發(fā)光免疫分析儀及相應配套TORCH-IgM檢測試劑及質(zhì)控品。

1．3方法對所有研究對象取樣采集靜脈血3 mL于非抗凝真空管內(nèi)，待完全凝集后，3 000 r/min離心10 min分離血清待檢，試驗從采集全血到測出數(shù)據(jù)需在3 d內(nèi)進行，以保證數(shù)據(jù)的準確性。采用CLIA檢測血清中TOX、RUB、CMV、HSV(1+2型)特異性IgM抗體，操作步驟嚴格遵照儀器操作規(guī)程和試劑盒說明書進行，所有試劑均在有效期內(nèi)使用，試劑的定標和質(zhì)控均符合要求。

1.4結(jié)果判定標準陽性結(jié)果判定：TOX-IgM>8 AU/mL；RUB-IgM>25 AU/mL； CMV-IgM>22 U/mL；HSV(1+2型)-IgM>1.1 Index者為陽性。

1．5統(tǒng)計學處理 采用統(tǒng)計軟件SPSS17.0對實驗數(shù)據(jù)進行分析，計數(shù)資料以率表示，組間比較采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2　結(jié)　　果

2．1新生兒TORCH特異性抗體IgM檢測結(jié)果5 506例受檢新生兒中TORCH特異性IgM抗體陽性402例，總的陽性率是7.3%。402例陽性病例中有15例患兒同時感染2種病原體，1例同時感染3種病原體。TOX、RUB、CMV、HSV(1+2型)特異性IgM抗體陽性率依次為0.18%、1.43%、5.41%、0.54%，CMV的特異性IgM陽性率遠高于TOX、RUB、HSV(1+2型)，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，見表1。

表1　　新生兒TORCH特異性IgM抗體檢測結(jié)果

注：*陽性病例中有15例患兒同時感染2種病原體，1例同時感染3種病原體。

2.2402例TORCH感染新生兒疾病構(gòu)成情況不同疾病在402例TORCH-IgM陽性的新生兒中的構(gòu)成比不同，其中以高膽紅素血癥所占比例最高，為48.51%，其次是心功能異常。新生兒高膽紅素血癥與其他疾病相比，檢出率差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，見表2。

表2　　402例新生兒TORCH病毒感染中不同疾病構(gòu)成情況

3　討　　論

TORCH感染在世界范圍內(nèi)流行，感染率因當?shù)亟?jīng)濟、文化、環(huán)境不同而有所差別[2]。新生兒相關(guān)臨床癥狀的輕重、感染范圍的大小，與宮內(nèi)接觸病原體的時間及接觸量的多少密切相關(guān)[3]。

新生兒TORCH感染后可引起急性病毒感染，嚴重時可發(fā)生多器官功能受損[4]。主要為聽力異常、高膽紅素血癥、肝功能異常、神經(jīng)系統(tǒng)損傷、心肌損傷、血小板減少、先天性心臟病等[5]。因此TORCH特異性抗體的檢測在臨床中越來越受到人們的重視。

本研究表明TORCH是在本院就診的患兒中感染性疾病重要的病原體，約占7.3%(其中CMV-IgM 5.41%，RUB-IgM 1.43%，HSV-IgM 0.54%，TOX-IgM 0.18%)。4種病原體中，CMV-IgM陽性率顯著高于其他幾種病原體，說明新生兒中TORCH感染最常見的是CMV感染，其次是RUB。TORCH感染分布情況是從高到低依次是CMV>RUB>HSV>TOX，與其他地區(qū)的情況有所不同[6]，說明TORCH感染有區(qū)域差異。

TOX病是一種常見的胎兒宮內(nèi)感染性疾病，TOX感染可出現(xiàn)典型的三大臨床表現(xiàn)，即腦積水，腦內(nèi)鈣化和視網(wǎng)膜脈絡(luò)炎。本研究中TOX-IgM陽性率為0.18%，陽性率最低，可能與本市優(yōu)生優(yōu)育宣傳工作有一定關(guān)系，這也說明避免不良接觸史，改變不良的生活習慣可以明顯降低TOX在人群中的感染率。但TOX是TORCH 病原體中唯一的人畜共患傳染病，人群大多呈隱性感染，且感染后多無臨床癥狀，須通過檢測血清特異性抗體來發(fā)現(xiàn)。近年來，隨著人類飼養(yǎng)寵物的增多，感染率有上升的趨勢[7]。

RUB感染是經(jīng)呼吸道傳播，人群對該病毒普遍易感，臨床癥狀輕微，預后良好，是易被忽視的急性病毒傳染病，但孕婦早孕期感染后，病毒可通過血液、胎盤屏障、羊水等感染胎兒，引起流產(chǎn)、早產(chǎn)、先天性風疹綜合征(CRS)。CRS有三大主癥，即先天性白內(nèi)障、心臟畸形和先天性耳聾。本研究中RUB檢出率略低，為1.43%，可能是由于近些年來風疹疫苗的廣泛應用以及成年人群因RUB感染史而獲得的自然免疫力，使新生兒中RUB感染率已經(jīng)大大降低。

CMV先天感染是引起新生兒疾病和先天畸形的重要感染因素之一，發(fā)生率占全部活產(chǎn)新生兒的1%[8]。CMV先天感染可引起先天性巨結(jié)腸、肝脾腫大、持續(xù)性黃疸、皮膚淤點、小頭畸形、脈絡(luò)膜視網(wǎng)膜炎、智力低下、運動障礙、耳聾等，上述任何一項表現(xiàn)都可單獨存在，也可多器官、多系統(tǒng)病變，危害巨大。因出生時僅有小部分患兒有臨床癥狀，故多數(shù)不能確定診斷。新生兒CMV感染與母親密切相關(guān)，母嬰之間主要通過3種途徑傳播：宮內(nèi)感染、經(jīng)產(chǎn)道感染及經(jīng)母乳傳播，宮內(nèi)感染是主要因素，妊娠婦女早孕期感染CMV對胎兒影響更嚴重[9]。本研究結(jié)果顯示CMV-IgM陽性率最高，為5.41%，與文獻中認為CMV為新生兒宮內(nèi)感染最常見病原體的報道一致[10]，應加強對孕產(chǎn)婦的CMV感染篩查。

HSV感染在胚胎中比較少見，大多數(shù)新生兒為HSVⅡ型感染，是分娩時胎兒經(jīng)產(chǎn)道而受感染，經(jīng)產(chǎn)道感染的新生兒表現(xiàn)為全身播散性，肝、腦、肺、腎等多器官同時受累，也可局限于皮膚、眼部或口腔，可導致新生兒皰疹性皮疹、視網(wǎng)膜脈絡(luò)膜炎、小頭畸形、顱內(nèi)播散性鈣化、出現(xiàn)單純皰疹腦膜炎時有明顯顱內(nèi)壓升高、頻繁而不易控制的抽搐，病死率及后遺癥都較高。在本研究中，有25例新生兒HSV感染，其中大部分在分娩過程中感染，很少經(jīng)胎盤或血行感染，因此在孕后期檢測HSV抗體，可以有效避免此類疾病在新生兒的發(fā)生。

本研究中結(jié)果顯示，不同疾病在TORCH-IgM陽性的新生兒中所占構(gòu)成比不同，其中以高膽紅素血癥最多見，為48.51%，目前研究表明新生兒感染TORCH病毒后，會誘發(fā)體內(nèi)腫瘤壞死因子-α釋放和抑制葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶活性，從而損傷新生兒肝臟，造成膽汁轉(zhuǎn)運排泌受阻，引起膽汁淤積，最終導致新生兒高膽紅素血癥發(fā)生[11]。

由于TORCH后臨床癥狀不是很典型，其診斷方式仍需依靠實驗室檢查，目前診斷TORCH感染的方法主要為聚合酶鏈反應(PCR)、血清學檢測和病原體分離培養(yǎng)等方法。PCR靈敏度、特異度較高，但對實驗平臺要求較高，無法廣泛推廣；病毒分離準確率最高，但費時費力，臨床推廣較難；血清學檢測相對較簡單易行，已在臨床工作中廣泛推廣。本研究采用CLIA 技術(shù)檢測TORCH特異性抗體，此方法采用磁微粒子包被方法，提高檢測靈敏度，減少人為因素的影響，結(jié)果快速、準確[12]，是一種比較可靠、易于推廣的TORCH 感染篩查的檢測方法。

通過對本院新生兒TORCH特異性IgM抗體檢測結(jié)果和相關(guān)疾病的分析，表明TORCH感染情況不容樂觀，今后在新生兒感染性疾病的診治過程中應重視TORCH感染的血清學篩查，對出現(xiàn)上述臨床癥狀而又不明原因者，應及時采用CLIA技術(shù)檢測TORCH特異性抗體，以便早干預、早治療。因此TORCH感染的血清學篩查對新生兒保健具有重要現(xiàn)實意義，臨床上應常規(guī)開展基于CLIA技術(shù)的TORCH血清學定量檢測。

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10.3969/j.issn.1673-4130.2016.16.040

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1673-4130(2016)16-2304-03

2016-01-21

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