抗去唾液酸糖蛋白受體抗體在慢性肝炎的分布差別研究

景博瓊，薛　冰，徐　笛

(新疆醫(yī)科大學(xué)第五附屬醫(yī)院，烏魯木齊 830011)

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抗去唾液酸糖蛋白受體抗體在慢性肝炎的分布差別研究

景博瓊，薛冰，徐笛

(新疆醫(yī)科大學(xué)第五附屬醫(yī)院，烏魯木齊 830011)

目的檢測慢性乙型肝炎(簡稱慢性乙肝)、慢性丙型肝炎(簡稱慢性丙肝)患者和健康人群血清中抗去唾液酸糖蛋白受體抗體(anti-ASGPR)水平，觀察anti-ASGPR與肝炎患者疾病發(fā)展的關(guān)系。方法選取HBV感染患者60例(慢性乙肝患者30例，慢性乙肝后肝硬化患者30例)、HCV感染患者60例(慢性丙肝患者30例，慢性丙肝后肝硬化患者30例)，60例健康體檢者為對照組，檢測所有研究對象血清中anti-ASGPR、ALT的水平。結(jié)果(1)HBV、HCV感染組血清anti-ASGPR水平均比對照組明顯增高，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。慢性乙肝后肝硬化組血清anti-ASGPR水平明顯比慢性乙肝組高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。慢性丙肝后肝硬化組血清anti-ASGPR水平明顯比慢性丙肝組高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。anti-ASGPR與ALT值無相關(guān)性。(2)丙肝組anti-ASGPR血清學(xué)水平明顯高于乙肝組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。結(jié)論檢測anti-ASGPR有助于臨床的鑒別診斷，對治療和預(yù)后具有重要的意義。

抗去唾液酸糖蛋白受體抗體；慢性乙型肝炎；慢性丙型肝炎

研究表明自身免疫是慢性肝病肝細(xì)胞損傷機制中的一條可能途徑，參與疾病的發(fā)生、發(fā)展過程。乙型肝炎(乙肝)病毒(HBV)和丙型肝炎(丙肝)病毒(HCV)感染后的肝組織損傷是機體一系列免疫反應(yīng)造成肝細(xì)胞的病理免疫損傷。慢性乙肝患者和慢性丙肝患者存在自身免疫現(xiàn)象，患者血清中可檢出多種自身免疫抗體，其中抗去唾液酸糖蛋白受體抗體(anti-ASGPR)所識別的靶抗原具有肝臟特異性，所以anti-ASGPR是反映肝細(xì)胞自身免疫性損傷的一種可靠標(biāo)志。作者對慢性乙肝、慢性丙肝患者和健康人群血清中anti-ASGPR水平進行檢測，觀察anti-ASGPR與肝炎患者疾病發(fā)展的關(guān)系。

1　資料與方法

1.1一般資料選取本院2014年1月至2015年12月就診的HBV感染患者共60例，其中男31例、女29例，年齡21～77歲、平均(48±12.4)歲，慢性乙肝患者30例、慢性乙肝后肝硬化患者30例；HCV感染患者共60例，其中男28例、女32例，年齡22～85歲、平均(56±13.5)歲，慢性丙肝患者30例、慢性丙肝后肝硬化患者30例。HBV感染、HCV感染患者的診斷標(biāo)準(zhǔn)均參照2000年9月由中華醫(yī)學(xué)會傳染病學(xué)分會、肝病學(xué)分會聯(lián)合修訂的《病毒性肝炎防治方案》制訂的肝炎肝硬化診斷標(biāo)準(zhǔn)。60例健康體檢者為對照組，其中男28 例、女32例，年齡19～78 歲、平均(46±16.3)歲。

1.2儀器與試劑anti-ASGPR采用酶聯(lián)免疫反應(yīng)測定(試劑購自武漢伊艾博科技有限公司)，抗-HBV、抗-HCV 采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)測定(試劑購自華美公司)，丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)檢測采用貝克曼DXI800分析儀及配套試劑。

1.3方法采集受檢者空腹靜脈血4 mL，離心后檢測血清ALT、anti-ASGPR水平,檢測儀器均由工程師對儀器進行校準(zhǔn)且室內(nèi)質(zhì)控在控，檢測過程嚴(yán)格按照試劑說明書進行操作。

2　結(jié)　　果

2.1HBV感染組試驗結(jié)果HBV感染組患者血清anti-ASGPR水平比對照組明顯增高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。慢性乙肝后肝硬化組血清anti-ASGPR水平明顯比慢性乙肝組高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。相關(guān)分析顯示anti-ASGPR與ALT無相關(guān)性。見表1。

表1　　HBV感染組實驗結(jié)果

注：與對照組比較，*P<0.01;與慢性乙肝后肝硬化組比較，#P<0.05。

2.2HCV感染組試驗結(jié)果HCV感染組患者血清anti-ASGPR水平比對照組明顯增高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。慢性丙肝后肝硬化組血清anti-ASGPR水平明顯比慢性丙肝組高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。通過相關(guān)性分析anti-ASGPR與ALT無相關(guān)性。見表2。

表2　　HCV感染組試驗結(jié)果

注：與對照組比較，*P<0.01;與慢性丙肝后肝硬化組比較，#P<0.05。

2.3HBV感染組與HCV感染組anti-ASGPR水平比較慢性乙肝患者血清anti-ASGPR水平與慢性丙肝比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=3.832,P<0.01)；慢性乙肝后肝硬化患者血清anti-ASGPR水平與丙肝后肝硬化比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=5.478,P<0.01)。

3　討　　論

ASGPR又稱半乳糖受體。ASGPR的胞外結(jié)構(gòu)域含有糖識別結(jié)構(gòu)域(CRD)，能識別和結(jié)合半乳糖殘基和N-乙酰半乳糖胺殘基。當(dāng)CRD與特異的糖殘基結(jié)合后，即發(fā)生受體介導(dǎo)的胞吞作用。ASGPR的主要功能是清除外周血循環(huán)中失去末端唾液酸而暴露半乳糖殘基或乙酰半乳糖胺殘基的糖蛋白、脂蛋白和凋亡細(xì)胞[1]，還介導(dǎo)嗜肝病毒如HBV和HCV與肝細(xì)胞的結(jié)合及攝取。故ASGPR與嗜肝病毒感染及肝硬化、肝癌發(fā)生有一定的關(guān)聯(lián)。ASGPR目前被認(rèn)為是肝特異性脂蛋白的重要成分之一，為肝特異性跨膜糖蛋白。ASGPR有肝特異性和種屬特異性。因位于細(xì)胞膜表面，易成為細(xì)胞免疫和體液免疫反應(yīng)的靶抗原，現(xiàn)已在自身免疫性肝炎患者血清中篩選出ASGPR特異性T細(xì)胞克隆，患者的淋巴細(xì)胞對ASGPR刺激可產(chǎn)生顯著的增殖反應(yīng)，故認(rèn)為ASGPR為自身免疫反應(yīng)的靶抗原[2]。其相應(yīng)抗體為anti-ASGPR，anti-ASGPR是存在于自身免疫性肝炎患者血清中唯一的器官特異性自身抗體，其效價與肝損傷程度呈正相關(guān)，與肝臟疾病活動程度密切相關(guān)是判斷疾病活動強度及預(yù)后主要指標(biāo)。

人類感染HBV后臨床表現(xiàn)不盡相同，可以引發(fā)慢性無癥狀乙肝表面抗原攜帶、慢性乙肝、重型肝炎、肝硬化及肝細(xì)胞癌等不同結(jié)局[3]。人類感染HBV后，HBV并不能直接引起肝細(xì)胞病變，免疫反應(yīng)特別是細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)在肝細(xì)胞損害的發(fā)生中起主導(dǎo)作用[4-5]。這些證據(jù)提示:以細(xì)胞免疫反應(yīng)為主的宿主免疫反應(yīng)可能在決定HBV感染結(jié)局的臨床表型多樣性方面起著重要作用。HCV通過入侵肝細(xì)胞，同時通過多種途徑損害免疫系統(tǒng)破壞機體的免疫耐受性，誘發(fā)產(chǎn)生自身免疫反應(yīng)從而加重肝損傷[6]。丙肝患者血清中存在多種自身抗體，丙肝患者自身抗體的出現(xiàn)不僅與HCV感染有關(guān)，而且與HCV感染的嚴(yán)重程度、病程長短有關(guān)。

本研究表明慢性肝炎與肝硬化組血清anti-ASGPR水平均明顯高于健康對照組，且肝硬化組水平明顯高于慢性肝炎組，說明自身抗體通過免疫反應(yīng)參與了乙肝及丙肝的炎性反應(yīng)，并影響了疾病的發(fā)展及轉(zhuǎn)歸，這與國內(nèi)外研究結(jié)果相符合[7-8]。本研究表明丙肝組anti-ASGPR水平均明顯高于乙肝組，與趙明才等[9]報道相似，HCV感染后誘導(dǎo)的自身免疫炎性反應(yīng)高于HBV感染，這與HCV感染后慢性化程度高,且與肝硬化、肝癌等的發(fā)生及發(fā)展顯著相關(guān)。在國內(nèi)外一些研究中表明自身抗體與肝功能有一定的相關(guān)性[9]，而在本研究中anti-ASGPR與ALT相關(guān)性不顯著，這可能與患者用藥及治療情況有關(guān)，肝特異性抗體增高引起肝組織自身免疫性反應(yīng)而破壞肝細(xì)胞程度有待進步研究。

綜上所述，機體在感染HBV及HCV后，產(chǎn)生多種自身抗體以誘導(dǎo)免疫反應(yīng)，對肝細(xì)胞造成損害，引起壞死和炎性反應(yīng)。anti-ASGPR是肝臟的器官特異性自身抗體，本研究通過對anti-ASGRP測定可特異性了解肝臟的免疫反應(yīng)，其在乙肝及丙肝患者血清中的水平明顯高于健康人，且anti-ASGRP水平與疾病的發(fā)展及轉(zhuǎn)歸有一定的相關(guān)性，為臨床診療與監(jiān)測提供依據(jù)，對治療和預(yù)后具有重要的幫助。

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Study on distribution difference of anti-ASGPR antibody in chronic hepatitis

JINGBoqiong,XUEBing,XUDi

(FifthAffiliatedHospitalofXinjiangMedicalUniversity,Urumqi,Xinjiang830011,China)

ObjectiveTo detect the serum anti-sialic acid glycoprotein receptor antibody (anti-ASGPR) levels in the patients with chronic hepatitis B(CHB),chronic hepatitis C (CHC)and healthy people,and to observe the relationship between anti-ASGPR and the disease development in the patients with hepatitis.MethodsTotally 60 patients with hepatitis B virus (HBV) infection(30 cases of CHB and 30 cases of CHB cirrhosis) and 60 patients with hepatitis C virus (HCV) infection(30 cases of CHC and 30 cases of CHC cirrhosis) were selected with 60 persons undergoing the physical examination as the control group.The anti-ASGPR and ALT levels in all research subjects were detected with ELISA.Results(1)The anti-ASGPR level in the HBV and HCV infection groups was significantly higher compared with the control group,and the difference was statistically significant(P<0.01).The anti-ASGPR level in the CHB cirrhosis group was significantly higher than that in the CHB group,and the difference was statistically significant(P<0.05).The anti-ASGPR level in the CHC cirrhosis group was significantly higher than that in the CHC group,and the difference was statistically significant(P<0.05).No correlation between anti-ASGPR and ALT was found.(2) The anti-ASGPR level in the CHC group was significantly higher than that in the CHB group,and the difference was statistically significant(P<0.01).ConclusionThe detection of anti-ASGPR is helpful for clinical differential diagnosis and has an important significance for the treatment and prognosis.

anti-ASGPR;chronic hepatitis B;chronic hepatitis C

景博瓊，女，主管技師，研究方向是免疫學(xué)。

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.16.024

A

1673-4130(2016)16-2268-03

2016-03-07

2016-06-13)